Ch10可见光分光光度法

/view/168b8186bceb19e8b8f6ba5b.html/view/923046.htm一、开机开机前将样品室内的干燥剂取出，确认电源是否连接。

打开仪器电源开关，等待仪器自检通过，自检过程中禁止打开样品室。

二、使用仪器自检结束后（7个自检项目均出现OK字样），按[MAIN MENU]键（主菜单），屏幕显示如下5个功能项：1. Phtometry（定量运算）；2.Wavelength Scan（波长扫描模式）；3.Time Scan（时间曲线扫描）；4.System（系统校正）；5.Data display（光度直接测量模式）。

按相应选项前的数字键，即可进入该选项的下一级子菜单。

1.目的规范Cary100紫外可见分光光度计的使用和维护。

2.适用范围本规程适用于Cary100紫外可见分光光度计的使用和维护。

3.职责研发实验室负责人负责本文件的起草，实验室仪器管理员负责Cary100紫外可见分光光度计的日常使用和维护。

4.系统组成本系统由Cary100紫外可见分光光度计主机、Cary Winuv软件、Dell计算机等组成。

5.程序5.1接通电源，打开机算计、主机电源开关，仪器进行自检。

5.2自检结束后，双击“Cary winUV”图标。

主机同时会发出吱吱的声响（表示脉冲电源正常工作）。

5.3单波长扫描5.3.1在Cary winUV 文件夹下双击“Simple Reads”快捷键，进入“Simple Reads－Online”状态。

在该程序下点击“Setup”，对所需的波长、信号平均时间（Ave time（s））、狭缝宽度（SBW(nm)）、Y－轴参数设置等参数进行设置，设好后，按“OK”返回。

5.3.2在参比池、样品池中放空白液，关上盖板，单击“Zero”图标，完成较零。

5.3.3取出样品池，用待测溶液冲洗数次后，倒入待测溶液，单击“READ”读数；继续放入样品按“READ”读数，直到全部样品读完。

第十一章 可见分光光度法一、填空题1．可见分光光度法主要应用于测定样品中的微量组分，其特点是 灵敏度高 、 准确 、 简便 、 快速 。

其测定微量组分的相对误差一般为 2~5％ 。

2．朗伯—比耳定律表达式：A ＝abC ，其中符号C 代表 有色物质溶液浓度 ，单位是 mol/L ，b 代表 光程 ，单位是 cm ，a 称为 吸光系数 ，当C 等于 1mol/L ，b 等于 1cm 时，则a 以符号 ε 表示，并称为摩尔吸光系数。

3．偏离朗伯—比耳定律的主要因素有 化学因素 和 光学因素 ，减少偏离现象的最常用措施为 使溶液稀释 和 提高单色光纯度 。

4．当光照射到物质上时，光与物质之间便产生光的 反射 、 散射 、 折射 、 吸收 等现象，分光光度法主要是利用了 吸收 现象。

5．有色物质氧络血红阮可透过450~495nm 波长范围内的光，它本身显 蓝 色，另一有色物质二苯硫腙的CCl 4溶液可吸收580~620nm 波长的光，它本身显 蓝 色。

6．物质呈色的实质是它对不同波长的光选择性吸收的结果。

CuSO 4溶液呈现蓝色，是由于它吸收了白色光中的 黄色 光。

KMnO 4溶液呈现紫红色，是由于它吸收了白色光中的 绿色 光。

如果溶液对白色光中的各种波长的光都不吸收，此溶液应为 无 色溶液。

如果溶液对白色光中的各种波长的光都吸收，此溶液应为 黑 色溶液。

7．吸收光度法对显色反应的要求是： 灵敏度高 、 选择性好 、 稳定性好 、 显色剂在测定波长无明显吸收 。

吸收光度法的显色剂用量一般都是通过 试验 来确定的。

8．摩尔吸收系数可以衡量显色反应的灵敏度。

摩尔吸收系数的单位是 L ·mol －1·cm －1 。

百分吸收系数的单位是 100ml ·g －1·cm －1 。

9．测量某有色络合物的透光度时，若比色皿厚度不变，当有色络合物的浓度为C 时，透光率为T ，当其浓度稀释5倍时，其透光率为 T 1/5 。

紫外-可见分光光度法测定1. 引言1.1 引言紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学方法，通常用于测定物质的浓度或测定物质的吸光度。

该方法利用紫外-可见光谱仪测量样品对紫外和可见光的吸收情况，从而推断样品中所含物质的浓度或结构。

在化学分析实验中，紫外-可见分光光度法具有灵敏度高、准确性高和简便易行的优点，因此被广泛应用于药物分析、环境监测、食品检测等领域。

本实验旨在通过该方法测定样品中目标物质的浓度，并探讨影响测定结果的因素。

通过对仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素的详细讨论，我们将深入了解紫外-可见分光光度法的原理和应用，并为今后在相关领域的研究提供参考和借鉴。

希望本实验能够为我们提供更多关于分光光度法的实际操作经验，提升我们的实验技能和分析能力。

1.2 背景介绍紫外-可见分光光度法是一种广泛应用于化学分析领域的分析方法，通过测定物质在紫外-可见光区域的吸收特性，从而确定物质的浓度或者进行定性分析。

紫外-可见分光光度法具有操作简单、灵敏度高、选择性强的特点，被广泛应用于环境监测、食品安全检测、药品质量控制等领域。

随着科学技术的不断发展，紫外-可见分光光度法在实验室分析中扮演着越来越重要的角色。

通过测定物质在特定波长范围内的光吸收情况，我们可以获得关于物质性质的重要信息，如浓度、溶解度、稳定性等。

掌握紫外-可见分光光度法的原理和操作方法，对于提高实验准确性和效率具有重要意义。

在本文中，我们将介绍紫外-可见分光光度法的仪器原理、操作步骤、实验结果、数据分析和影响因素，希望能够为读者提供一份系统全面的紫外-可见分光光度法测定指南。

通过总结和展望，我们也希望能够进一步探讨该方法在化学分析领域的应用前景。

1.3 研究目的紫外-可见分光光度法是一种常用的分析化学技术，可以用于测定物质的吸光度，从而推断物质的浓度。

本实验的研究目的主要分为以下几点：1. 研究紫外-可见分光光度法在测定物质浓度方面的应用。

紫外-可见分光光度法紫外分光光度：紫外光区特定波长内的吸收度，被测物质或杂质的定性和定量紫外-可见分光光度计的工作波长：190-900nm近紫外区（氘灯）200-400nm 可见光区（碘钨灯）400-850nm定量分析:①最大吸收波长处测出吸收度②对照品或百分吸收系数算出被测物或杂质的含量双光束光栅型紫外-可见分光光度计波长准确度误差±0.5nm一、样品测定：⑴吸收系数测定:①按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试液②在规定的波长测定其吸收度③计算吸收系数，应符合规定范围⑵鉴别与检查：按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定测定供试品在有关波长处的最大或最小吸收，或最大吸收峰值或最大或最小吸收的比值，应符合规定⑶含量测定：①对照品比较法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法分别配制对照品和供试品溶液注：对照品中所测成分的量应在供试品中所测成分标示量的(100±100)%以内㈡用同一溶剂，在规定的波长处测定供试品和对照品的吸收度②吸收系数法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试品溶液㈡在规定波长（±1nm）处测定其吸收度㈢按食品药品监督管理局标准的该药品在规定的条件下给出的吸收系数计算含量具体过程对照品比较法①调节波长测吸光度（吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内）②A样品的吸光度:A对照品的吸光度= C样品:C对照品(C为浓度，mg/ml)C样品=A样品的吸光度×C对照品/A对照品的吸光度C样品×A对照品的吸光度= A样品的吸光度×C对照品P﹪（所含物质占标示量的百分比）= C供试品-稀释后的对照品×A对照品的吸光度/ A 样品的吸光度×C对照品×供试品的标示含量例1奥硝唑含量（紫外分光光度计）：⑴对照品①取0.0113g奥硝唑溶于100ml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③再用蒸馏水稀释至50 ml在319nm处测得对照品A（吸光度）=0.465⑵供试品①取5ml供试品于100lml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③用蒸馏水稀释至25ml319nm处供试品A1=0.413 供试品A2=0.417⑶①P﹪（所含物质占标示量的百分比）=0.413供试品的吸光度ⅹ(0.0113g/100ml)对照品浓度ⅹ(5/50) / 0.465对照品的吸光度ⅹ(5ml/100ml) ⅹ(1/25ml)ⅹ0.5g﹪ml标示含量供试品浓度ⅹ 100﹪=100.36﹪注：0.5﹪（供试品的标示含量）表示100ml 0.5g②P﹪= P1﹪+ P2﹪ /2。

丙酮碘化反应思考题答案【篇一：丙酮碘化反应】3-29t=286.15k p=85.02kpa一、实验目的1.根据实验原理由同学设计实验方案，包括仪器、药品、实验步骤等 2.测定反应常数k、反应级数n、活化能ea 3.通过实验加深对复杂反应的理解二、实验原理丙酮碘化反应是一个复杂反应，其反应式为：实验测定表明，反应速率在酸性溶液中随氢离子浓度的增大而增大。

反应式中包含产物，故本反应是自催化反应，其动力学方程式为：22式中c为各物质浓度（mol/l）,k为反应速率常数或反应比速，指数为反应级数n。

丙酮碘化反应的反应机理可分为两步：第一步为丙酮烯醇化反应，其速率常数较小，第二部是烯醇碘化反应，它是一个快速的且能进行到底的反应。

用稳态近似法处理，可以推导证明，当k2ch+k3ci时，反应机理与实验证明的反应级数相符。

2丙酮碘化反应对碘的反应级数是零级，级碘的浓度对反应速率没有影响，原来的速率方程可写成22++似视为常数，积分上式的：2ci以对t作图应为直线。

与直线的斜率可求得反应速率常数k及反应级数n。

2在某一指定的温度下，进行两次实验，固定氢离子的浓度不变，改变丙酮的浓度，使其为ca=mca，根据212若测得两次反应的反应速率，即求得反应级数p。

用同样的方法，改变氢离子的浓度，固定丙酮的浓度不变，也可以得到对氢离子的反应级数r。

若已经证明：p=r=1，q=0，反应速率方程可写为：-dci/dt=kcach+在大量外加酸存在下及反应进程不大的条件2下，反应过程的氢离子可视为不变，因此，反应表现为准一级反应或假一级反应：-dci/dt=kca式中k=k ch+，2k为与氢离子浓度有关的准反应比速。

设丙酮及碘的初始浓度为ca0、ci0.侧有：ca= ci0-（ci0- ci）由数学推导最终可得：2222ci= - ca0 kt+ ca0c+ ci022若在不同的时刻t，测得一系列ci，将其对t作图，得一直线,斜率为- ca0 k，即可求得k的值。

执业药师《药物分析学》备考：分光光度法2017年执业药师《药物分析学》备考：分光光度法不放过每一个知识点，尤其对容易混淆的东西要下更大工夫搞清楚，基础要牢固，店铺为大家整理了2017年执业药师《药物分析学》备考：分光光度法，希望对你有所帮助!第一节可见—紫外分光光度法掌握可见--紫外分光光度法的基本原理和测定方法。

掌握可见—紫外分光光度法在药物鉴别、检查和含量测定中的应用。

熟悉仪器的校正和检定方法;紫外吸收光谱与物质结构的关系。

了解紫外分光光度计的基本结构。

一、基本原理波长200～400nm范围称为紫外光区，400～760nm称为可见光区。

物质吸收紫外和可见光区电磁波而产生的吸收光谱称为紫外-可见吸收光谱。

1.光源：紫外光区通常采用氢灯或氘灯，可见光区采用钨灯。

2.吸收池：玻璃池适用于370nm以上的可见光区，石英池适用于紫外、可见光区，通常仅在紫外光区使用。

三、紫外吸收光谱与物质结构的关系：紫外—可见吸收光谱属分子吸收光谱，是由分子的外层价电子跃迁产生的，也称电子光谱。

它与原子光谱的窄吸收带不同。

每种电子能级的跃迁会伴随若干振动和转动能级的跃迁，使分子光谱呈现比原子光谱复杂得多的宽带吸收。

当分子吸收紫外—可见区的辐射后，产生价电子跃迁。

这种跃迁有三种形式：(1)形成单键的σ电子跃迁。

(2)形成双键的π电子跃迁。

(3)未成键的n电子跃迁。

通常，未成键的孤对电子较易激发，成键电子中π电子较相应的σ电子具有较高的.能量，反键电子则相反。

故简单分子中n→π* 跃迁需能量最小，吸收带出现在长波方向;n→σ*及n→π* 跃迁的吸收带出现在较短波段;σ→σ*跃迁吸收带则出现在远紫外区。

例题：物质分子吸收紫外光后，电子跃迁的类型为：A. n→σ* B. n→π* C. π→π* D. σ→σ* E .σ→π* 答案ABCD四、吸收度的测定方法1.对溶剂的要求：能充分溶解样品，与样品无相互作用，挥发性小，在测定波长处的吸收要符合要求。

ch10可见光分光光度法p274－1 ,4，6，7，8，9[10－1] 0.088mgFe 3+，用硫氰酸盐显色后，在容量瓶中用水稀释到50mL ，用1cm 比色皿，在波长480nm 处测得A=0.740，求ε。

解：∵ A=ε·b ·c =a ·M∴()cm mol L bc A ⋅⨯=⨯⨯==41035.200.5650088.01740.0ε[10－4] 为配制锰的标准溶液，将15mL 0.043mol ·L －1的KMnO 4溶液稀释到500mL 。

取此标准溶液1，2，3，……，10mL ，放入10支比色管中，加水稀释至100mL ，制成一组标准色阶。

称取钢样0.200g ，溶于酸，经适当处理将锰氧化成MnO 4－后稀释到250mL 。

取此试样100mL 放入比色管中，溶液颜色介于第四和第五个标准溶液之间，求钢中锰的百分含量。

解：法一：设钢样含锰量为 %%100200.0%100%Mn m W MV C x x =⨯=⨯⋅⋅=测样∵ L mol mLLmol ml C 301029.15000430.015-⨯=⨯=C 1=1mL×C 0/100mL=1.29×10-5mol/LC 2=2×C 1 C 3=3×C 1 …… C 10=10×C 1∵ C x =C 4～5=（4～5）×C 1 =（4～5）×10-3×1.29×10－5=5.16×10－5～6.45×10－5mol/L ∴m 测=C 4～5×V Mn ×M Mn=(5.16×10－5～6.45×10－5)×250×10－3×54.938049=7.0870083×10－4～8.85876×10－4（g ） ∴%100%⨯=样测W m Mn =[（7.0870083×10－4～8.85876×10－4）/0.2000]×100%=0.35%～0.44%法二：根据m 标=m 测关系：)(250100200.0500/0430.01015543g mLmLg w mL M mL V L mol mL Mn Mn ⨯⨯=⨯⋅⨯⨯--w Mn =mL V mLL mol mL mL g mL 543500938.54/0430.010********.0250--⋅⨯⨯⨯⨯⨯⨯=0.0008858752×V 4～5 =0.0035～0.0044[10－6] 某含铁约为0.2%的试样，用邻二氮杂菲亚铁光度法（ε=1.1×104L ·mol -1·cm -1）测定。

紫外-可见分光光度法测定全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：紫外-可见分光光度法是一种广泛应用于化学分析领域的光谱分析技术。

该技术通过测量物质在紫外-可见光谱范围内吸收或发射的光线强度，来确定样品的化学成分和浓度。

它具有灵敏度高、选择性好、操作简便等优点，因而被广泛用于药物分析、环境监测、食品安全等领域。

在紫外-可见光谱中，紫外光谱通常指波长范围为200-400纳米（nm），可见光谱通常指波长范围为400-700nm。

物质在紫外-可见光谱范围内的吸收光谱是由电子跃迁引起的，不同种类的物质对不同波长的光线有不同的吸收特性，因而可以通过测量样品在不同波长下吸收光强度的变化来推断样品中的化学物质所含有的共轭结构和它的质量浓度。

紫外-可见分光光度法的主要仪器是紫外-可见分光光度计，它由光源、样品室、分光器、检测器和数据处理系统等部分组成。

在实验中，首先要选择合适的波长范围进行分析，然后将样品溶解于适当的溶剂中，放入样品室中进行测量。

当光线穿过样品之后，被检测器捕捉到，根据检测到的光强度差异来推断样品中的化合物。

紫外-可见分光光度法在化学分析中有着广泛的应用。

比如在制药行业中，可以用于药物的含量测定、纯度检验等；在环境监测领域中，可以用于监测水体中有机和无机物质的含量；在食品安全领域中，可用于检测食品中的添加剂是否合格等。

紫外-可见分光光度法是一种准确、快速、简便的化学分析方法，具有广泛的应用前景。

随着科学技术的不断发展，它将在更多的领域中得到应用，为人们的生活和工作带来更多的便利。

第二篇示例：紫外-可见分光光度法是一种常用的分析技术，广泛应用于化学、生物、环境、药物等领域。

本文将通过介绍紫外-可见分光光度法的原理、仪器和应用，来深入了解该技术的特点和优势。

紫外-可见分光光度法是一种基于分子吸收特性的分析方法。

在紫外-可见光谱区域，分子会吸收特定波长的光线，被激发到高能级状态，并发生颜色变化。

通过检测吸收光强度的变化，可以确定样品中目标物质的浓度。