设计实验 茶皂素的提取和测定
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实验二天然表面活性剂茶皂素的提取及性能研究一、实验目的1.掌握溶剂浸提和索氏提取的方法及原理。
2.了解用不同条件及溶剂提取茶皂素对其产量和性能的影响。
3.掌握天然表面活性剂茶皂素的表面张力及起泡性的研究。
二、实验原理茶油饼是由油茶籽、山茶籽压榨制油之后的副产物。
茶油饼中富含茶皂素、维生素、蛋白质、脂肪、多糖、黄酮、单宁、咖啡碱、各种色素等多种有益物质。
茶油饼中成分含量大概为:粗蛋白15%,粗脂肪5%,糖类40%,粗纤维6%,皂素10-14%,单宁2%,咖啡碱0.95%。
我国油茶是世界上分布最广,品种最多的国家。
茶皂素又名茶皂甙,是由茶树种子中提取出来的一类醣甙化合物,是一种性能良好的天然表面活性剂,茶皂素具有较高的经济价值,它可广泛应用于轻工、化工、农药、饲料、养殖、纺织、采油、采矿、建材与高速公路建设等领域,制造乳化剂、洗洁剂、农药助剂、饲料添加剂、蟹虾养殖保护剂、纺织助剂、油田泡沫剂、采矿浮选剂以及加气混凝土稳泡剂与混凝土外加剂——防冻剂等。
茶皂素味苦辛辣,刺激鼻粘膜易引起喷嚏,纯品为白色微细柱状晶体,吸湿性强,对甲基红呈明显酸性,难溶于无水甲醇、无水乙醇,不溶于丙酮、苯、石油醚等有机溶剂,易溶于水、含水甲醇、含水乙醇以及冰醋酸、醋酐、吡啶等。
茶皂素溶液中加入盐酸时,皂甙易沉淀。
熔点:224℃。
三、仪器试剂试剂:油茶饼粕,乙醇,等。
仪器:研钵,电加热套,电动搅拌,三口烧瓶,冷凝管,索氏提取,移液管,天平,滴管,玻璃棒,烧杯,容量瓶,熔点仪,最大泡压法测量表面张力装置,具塞量筒。
四、实验步骤1. 溶剂浸提法。
(分三组)第一组:称量10g油茶饼粕粉末放入三口烧瓶中加入80ml无水乙醇,采用加热搅拌回流装置,反应1小时和1.5小时。
抽滤,取清液蒸发浓缩。
干燥,称其质量。
配制浓度为:1×10-6,5×10-6,1×10-5,5×10-5,1×10-4,5×10-4,1×10-3,1×10-2 kg/L溶液。
茶皂素的提取纯化及在洗发液中的应用研究茶皂素是从茶叶中提取出的一种天然植物提取物,具有较强的抗氧化、抗菌和清洁功效,在化妆品和洗发液等产品中广泛应用。
为了提高茶皂素的纯度和提取效果,需要进行提取、纯化和应用研究。
茶皂素的提取方法有很多种,常见的有水提法、有机溶剂提法和超临界流体提法等。
其中,水提法是最常用的一种方法,流程主要包括茶叶研磨、浸泡、过滤和浓缩等步骤。
水提法简单易行,不会引起环境污染,且提取效果较好。
有机溶剂提法则是将茶叶与有机溶剂(如醇类溶剂)进行浸提,再通过蒸馏或冷冻浓缩得到茶皂素。
超临界流体提法是将茶叶与超临界流体(如二氧化碳)进行接触和提取,提取效果较好,但设备和操作要求较高。
提取后的茶皂素需要进行纯化。
常用的纯化方法有结晶法、直接冷冻脱水法和吸附剂法等。
结晶法通过调节物料的溶解度、温度和浓度等条件,使茶皂素溶解和结晶,从而得到纯化的产物。
直接冷冻脱水法通过将茶皂素溶液冷冻并脱水,使茶皂素和其他杂质分离。
吸附剂法是通过将茶皂素溶液通过吸附剂柱,去除杂质,再通过洗脱得到纯化的产物。
茶皂素在洗发液中的应用主要体现在其清洁和抗菌功效上。
茶皂素可有效去除头皮上的污垢和油脂,保持头皮清洁,并具有一定的去屑效果。
茶皂素还具有抗菌作用,可以有效抑制头皮上的细菌和真菌生长,减少头皮屑和痒症。
此外,茶皂素还具有抗氧化作用,可以保护头皮和头发免受自由基和其他有害物质的损伤,保持头发的健康。
在洗发液中添加茶皂素需要考虑其稳定性和溶解度。
茶皂素在水中的溶解度较低,因此常需要使用一些增溶剂或乳化剂来增加其溶解度。
同时,茶皂素易受光照和温度的影响,容易分解和氧化,因此需要进行适当的添加剂保护和包装。
此外,茶皂素的添加量也需要根据产品的需求和使用效果进行调整。
综上所述,茶皂素的提取、纯化和应用研究是一项具有重要意义的工作。
通过选择适当的提取方法和纯化方法,可以得到高纯度的茶皂素产品。
同时,在洗发液等化妆品产品中的应用研究,有助于发挥茶皂素的抗氧化、抗菌和清洁功效,提高产品的质量和效果。
茶皂素的提取工艺研究茶皂素是从茶叶中提取的一种天然物质,具有很高的药用和保健功能。
茶皂素的提取工艺对于提高茶皂素的提取率和纯度至关重要。
本文将对茶皂素的提取工艺进行研究,并提出一种简便、高效的提取方法。
1.茶皂素的提取方法2.提取工艺参数的选择在茶皂素的提取过程中,工艺参数的选择对提取效果有着重要的影响。
工艺参数包括提取温度、提取时间、溶剂种类及浓度、茶叶粉末颗粒度等。
我们需要通过实验确定最佳的工艺参数。
3.茶皂素提取工艺的研究进展我们需要对茶皂素提取工艺的研究进展进行综述,包括各种提取方法的优缺点,提取工艺参数对茶皂素提取率和纯度的影响等。
这将有助于我们确定最佳的提取工艺。
4.实验设计与结果分析我们需要设计实验来验证提取工艺的可行性,并对实验结果进行分析。
实验可以通过正交设计或单因素实验进行,以确定最佳的提取工艺参数。
实验结果分析可以采用统计学方法,如方差分析等。
5.研究中的挑战与解决方案6.提取工艺的优化在实验结果的基础上,我们需要对提取工艺进行进一步优化。
优化可以包括工艺参数的进一步调整、反复实验确定最佳工艺参数,或者引入新的辅助技术来提高提取效果。
7.提取工艺的应用前景茶皂素具有很高的药用和保健功能,提取工艺的研究应用前景广阔。
我们需要对提取工艺的应用前景进行展望,并提出相应的应用建议,如茶皂素的制剂开发、茶皂素的应用领域拓展等。
茶皂素的提取工艺研究对于茶叶的综合利用和茶叶产品的开发具有重要意义。
通过优化提取工艺,我们可以提高茶皂素的提取率和纯度,为茶叶的加工利用提供有力支持。
同时,茶皂素的应用前景广阔,有望成为茶叶产业的新的增长点。
茶皂素的分离纯化方法的初步研究【摘要】茶皂素是茶叶中一种重要的生物活性成分,具有多种药用价值。
本文旨在探讨茶皂素的分离纯化方法,以期为其进一步研究及应用提供参考。
首先介绍了萃取茶叶中的茶皂素的方法,然后详细讨论了初步分离纯化方法,包括柱层析技术、色谱技术和质谱技术的应用。
通过这些方法的探讨,我们取得了一些初步的研究成果,为未来的研究工作提供了基础。
我们希望通过这些研究,深入了解茶皂素的性质和功能,为其在医药和保健品领域的应用开拓新的可能性。
这项研究具有重要的理论和实践意义,对促进茶叶产业的发展和拓展茶叶的应用领域都具有积极的推动作用。
【关键词】茶皂素、分离、纯化、萃取、柱层析、色谱技术、质谱技术、研究成果、展望、意义1. 引言1.1 研究背景茶皂素是茶叶中一种重要的生物活性成分,具有抗氧化、抗炎和抗菌等多种生物活性。
随着人们对健康的关注日益增强,茶皂素在保健食品和药物领域的应用受到广泛关注。
茶叶中的茶皂素存在于复杂的混合物中,其提取和分离纯化具有一定的难度。
寻求快速、高效的分离纯化方法成为当前研究的重点之一。
过去,常用的茶皂素提取方法主要包括溶剂萃取和超声波提取等,但存在提取效率低、操作繁琐等问题。
开发一种简便、高效的茶皂素提取方法至关重要。
为了对茶皂素进行有效的分离纯化,柱层析、色谱和质谱等分析技术也被广泛应用。
这些技术的综合应用能够提高茶皂素的分离效率,帮助研究人员更好地解析其结构和活性。
在这样的背景下,对茶皂素的分离纯化方法进行初步研究具有积极的意义。
本研究旨在探索更高效、更简便的茶皂素分离纯化方法,为进一步揭示茶皂素的生物活性和应用提供有力支持。
1.2 研究目的研究目的是为了探究茶皂素的分离纯化方法,以提高茶叶中茶皂素的纯度和提取效率。
茶皂素作为茶叶中一种重要的生物活性成分,具有多种生物活性,包括抗氧化、抗菌、抗炎等作用,对人体健康具有重要的保护作用。
茶叶中的其他杂质和成分会影响茶皂素的提取和纯化,因此寻找一种高效、简便的分离纯化方法对茶皂素研究具有重要意义。
茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是一种天然的生物活性物质,具有抗氧化、抗菌和抗炎的作用。
它被广泛应用于医药、保健品和化妆品等领域,因此对茶皂素的提取纯化方法进行研究具有重要意义。
本文将对茶皂素的分离纯化方法进行初步研究,以期能够为茶皂素的产业化生产提供参考。
茶叶中的茶皂素主要存在于茶叶的表面和内部的表皮细胞中,因此要想提取茶皂素,首先需要将茶叶中的茶皂素与其他组分进行有效分离。
目前,常用的茶叶提取方法包括水提取、有机溶剂提取和超临界流体提取。
本文将采用有机溶剂提取的方法进行茶叶中茶皂素的提取。
有机溶剂提取是通过有机溶剂与茶叶中的茶皂素进行物理或化学作用,使茶皂素从茶叶中转移到有机溶剂中,从而实现茶皂素的提取。
在选择有机溶剂的时候,需要考虑其对环境的影响和提取效果。
一般来说,乙醇是一种常用的有机溶剂,它既具有较高的提取效果,又对环境影响较小,因此本文将选择乙醇作为有机溶剂进行茶叶的提取。
在实验中,首先将茶叶粉末与乙醇进行浸泡,使茶叶中的茶皂素充分溶解到乙醇中。
然后通过离心等手段,将茶叶渣和乙醇进行分离,得到含有茶皂素的乙醇提取液。
接下来,通过蒸发乙醇,得到茶皂素的粗提取物。
得到茶皂素的粗提取物后,接下来就需要对其进行纯化。
目前,茶皂素的纯化方法主要包括硅胶柱层析法、凝胶层析法和高效液相色谱法。
本文将采用硅胶柱层析法对茶皂素的粗提取物进行纯化。
硅胶柱层析法是一种通过硅胶对混合物进行分离的方法,其原理是通过混合物中各成分与硅胶的亲和性差异来实现分离。
在进行硅胶柱层析时,首先将硅胶填充到玻璃柱中,并采用合适的流动相来实现混合物中各成分的分离。
通过不同成分对硅胶的亲和性差异,从而实现对目标物质的纯化。
通过上述实验方法,我们将得到纯化后的茶皂素样品。
接下来,可以通过质谱、红外光谱等手段对其进行分析,确认其纯度和结构。
通过对茶皂素的分离纯化方法的初步研究,我们可以为茶皂素的产业化生产提供参考,为其在医药、保健品和化妆品等领域的应用打下基础。
茶皂素含量测定标准
茶皂素含量测定的标准可以参考以下几项:
1. 样品准备:将茶叶样品经过粉碎、筛选等处理后,得到均匀细碎的样品。
2. 反应物准备:准备适量的提取液、溶剂等。
3. 茶皂素提取:将样品与提取液一起在适当的温度下振荡提取一段时间。
4. 过滤处理:用滤纸或其他适当的方法进行过滤,去除杂质。
5. 基质清除:如有需要可以采用液相萃取、固相萃取等方法进行基质的清除。
6. 茶皂素含量测定:可以采用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱法(GC)等方法来进行茶皂素含量的测定。
7. 标准曲线绘制:选取一系列浓度已知的标准溶液,按照相同的提取和测定方法进行处理,并绘制出茶皂素的浓度与响应值的标准曲线。
8. 茶皂素含量计算:根据标准曲线,计算样品中茶皂素的含量。
以上是一般茶皂素含量测定的一般流程,具体标准和方法可以参考相关行业标准、国家标准或组织的指导文件。
同时,实验过程中也要注意实验条件的一致性和标准操作规程的遵守,以保证测定结果的准确性和可靠性。
茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是从茶叶中分离出来的一种具有抗氧化和抗肿瘤活性的化合物,具有广泛的研究价值。
本文主要介绍了茶皂素的分离纯化方法的初步研究。
茶皂素的分离纯化方法有很多种,常见的包括溶剂萃取、薄层色谱、柱层析、高效液相色谱、气相色谱等。
本次研究中选择了柱层析法作为初步的分离纯化方法。
选择适合的柱层析填料。
在本次研究中,选择了聚苯乙烯高分子树脂作为填料。
这种填料具有很高的亲和力和吸附能力,对茶皂素有良好的吸附效果。
然后,制备茶叶提取物。
将新鲜的茶叶经过粉碎后加入适量的溶剂,如乙醇或甲醇,进行浸泡提取。
提取物中包含了茶皂素以及其他的化合物。
接下来,进样进行柱层析。
将提取物溶解于适量的溶剂中,然后利用注射器将样品注入柱层析柱中。
通过柱层析,不同的化合物在填料中有不同的相互作用力,因此会在填料中以不同的速度迁移。
通过调整柱层析的条件,如填料的粒径、填料的长度、样品溶剂的组成等,可以使得茶皂素与其他化合物分离出来。
收集茶皂素的纯化产物。
经过柱层析后,茶皂素会逐渐从柱子上迁移到柱底。
根据不同的组分在柱子中的保留时间进行分离,可以将茶皂素集中到某一小管中,完成分离纯化的过程。
收集的纯化产物可以进行进一步的结构鉴定和活性测试。
除了柱层析法,我们还可以使用其他分离方法进行初步的分离纯化。
茶皂素可以通过溶剂萃取和薄层色谱等方法进行初步的分离,然后再进行进一步的纯化。
茶皂素的分离纯化方法研究需要选择合适的柱层析填料,制备茶叶提取物,进行柱层析分离,并收集纯化产物。
这是茶皂素初步分离纯化的一种研究方法,需要进一步优化和改进。
希望本次研究可以为茶皂素的分离纯化提供一定的参考。
茶皂素的分离纯化方法的初步研究茶皂素是茶叶中所含的一种重要成分,具有抗氧化、抗菌和抗炎等多种生物活性,因此受到了广泛的关注。
茶皂素的分离纯化对于深入研究其生物活性及应用具有重要意义。
本文通过初步的实验研究,总结了关于茶皂素分离纯化的方法,以期为茶皂素的应用提供参考。
一、茶皂素的提取茶叶中含有丰富的茶皂素,为了提取茶皂素,首先需要对茶叶进行初步的处理。
一般来说,茶叶经过粉碎、加热等步骤,将茶叶中的茶皂素释放出来。
然后采用有机溶剂如乙醚、丙酮等进行提取,将茶叶中的茶皂素与其他成分分离。
提取操作一般会重复多次,以确保茶皂素的完全提取。
提取得到的混合物中含有大量的杂质和其他成分,因此需要进行进一步的分离。
在此过程中,可以采用硅胶柱层析、凝胶色谱层析或高效液相色谱等技术,通过选择合适的分离柱和溶剂,将茶皂素与其他成分进行有效分离。
这一步需要根据实际情况进行优化,以获得高纯度的茶皂素。
分离得到的茶皂素通常还会包含一定量的杂质,因此需要进行进一步的纯化。
可以采用结晶、再结晶或凝胶电泳等方法,将茶皂素与杂质进行进一步的分离。
通过对纯化条件的优化,可以获得高纯度的茶皂素。
经过分离纯化的茶皂素可以进行进一步的鉴定和分析。
可以采用紫外-可见光谱、质谱、核磁共振等技术,对其结构和性质进行深入的研究。
通过鉴定可以确定茶皂素的纯度和结构,为后续的研究和应用提供参考。
总结:通过以上实验研究,我们初步探讨了茶皂素的分离纯化方法。
通过对茶叶的提取、茶皂素的分离、茶皂素的纯化和茶皂素的鉴定等步骤的研究,可以获得高纯度的茶皂素。
这对于深入研究茶皂素的生物活性及其应用具有重要的意义。
在实际操作中还需要根据具体情况进行进一步的优化,以获得更好的分离纯化效果。
希望我们的研究能够为茶皂素的应用提供一定的参考价值。
【2000字】。
设计实验茶皂素的提取和测定设计性实验探究茶皂素的提取和测定实验⼩组成员:袁国明王蓉⼀、实验⽬的1、掌握⽔提---醇萃法提取茶皂素的原理、⽅法和⼀般步骤。
2、探究不同液料⽐对⽔提---醇萃法提取茶皂素的影响。
3、探究提取茶皂素的最佳溶剂热⽔、含⽔⼄醇、正丁醇及冰醋酸。
4、掌握⽤紫外分光光度法测定茶饼中茶皂素的含量。
⼆、实验原理茶皂素难溶于冷⽔、⽆⽔甲醇、⽆⽔⼄醇,不溶于⼄醚、丙酮、苯、⽯油醚等有机溶剂,稍溶于温⽔,易溶于热⽔、含⽔甲醇、含⽔⼄醇、正丁醇及冰醋酸,根据以上特性,本次实验来探究提取茶皂素的最佳溶剂。
⽔提---醇萃法⼜是在以上基础上,根据茶皂素易溶于热⽔和95%的⼄醇,不溶于冷⽔性质,⽤热⽔浸提茶饼,然后于浸提液中加⼊絮凝剂 Al 2(SO4 )3,沉降除杂冷却后,再⽤95%的⼄醇转萃提纯⼀种⽅法。
茶皂素与⾹草醛在浓硫酸作⽤下表现呈⾊反应,茶皂素的含量和吸光度值成线性关系,本⽂利⽤此性质对茶皂素的分析⽅法进⾏研究。
三、实验材料1、实验试剂:95%⼄醇;Al 2(SO4 )3;活性炭;NaOH;蒸馏⽔;⾹草醛;硫酸;含⽔⼄醇、正丁醇及冰醋酸2、实验材料:油茶饼粕3、实验仪器:电⼦天平、⾼速万能粉碎机、电热恒温⽔浴锅、蒸发器、电热恒温⿎风⼲燥箱、紫外可见分光光度计、三⾓锥形瓶、纱布、抽滤瓶、滤纸、分液漏⽃、烧杯、表⾯容器、容量瓶、具塞刻度试管四、实验步骤1、茶皂素的提取操作(1) 油茶饼粕的处理取⼀定量的油茶饼粕放⼊⾼速万能粉碎机中粉碎成油茶饼粕粉末,但不可过细(不利于下⼀步的过滤),⼀般粉碎粒度在 l~3 mm为宜。
(2) 探究提取茶皂素的最佳溶剂称取1g的油茶饼粕粉末4份分别加⼊到三⾓锥形瓶中,分别加⼊热⽔、含⽔⼄醇、正丁醇及冰醋酸按1:7⽐例,标记,置⼊温度为90℃的恒温⽔浴锅中处理1.5h,得到茶皂素浸取液。
浸取液要趁热⽤纱布过滤。
(2) 探究⼀定固液⽐下恒温热⽔浴浸提称取1g的油茶饼粕粉末3份分别加⼊到三⾓锥形瓶中,分别加⼊蒸馏⽔和固体的⽐例为1:6、1:7、1:8,置⼊温度为90℃的恒温⽔浴锅中处理1.5h,得到茶皂素浸取液。
茶皂素液相检测方法
茶皂素的液相检测方法通常采用高效液相色谱法进行定量和定性分析。
以下是大致步骤:
1.样品处理:
取适量茶叶样品,通过热水浸提、乙醇萃取等方法提取茶皂素。
提取液经过滤、浓缩,并用适当溶剂(如甲醇或乙腈)溶解,制备成待测溶液。
2.高效液相色谱条件设定:
色谱柱:选择适宜的反相色谱柱,如C18填料的色谱柱。
流动相:一般采用梯度洗脱的方式,流动相可能包括水和有机溶剂(如甲醇、乙腈等)以及一定比例的酸(如磷酸或醋酸)。
检测器:常用紫外检测器(UV)在特定波长下检测茶皂素,因为茶皂素具有一定的紫外吸收特性。
3.标准曲线制作:
准确配置一系列浓度的标准溶液,利用同样的HPLC条件进行测定,根据标准物质在色谱图上的峰面积或峰高与浓度的关系绘制标准曲线。
4.样品检测:
将待测样品溶液注入高效液相色谱仪,记录并分析得到的色谱图。
根据样品中茶皂素出峰位置及峰面积或峰高,在标准曲线上找
到对应的浓度值,从而实现茶皂素的定量分析。
以上为常规的茶皂素液相检测方法概述,具体操作需参照相关文献或国家标准方法,确保实验条件和参数设置的准确性和重现性。
设计性实验
探究茶皂素的提取和测定实验
小组成员:袁国明王蓉
一、实验目的
1、掌握水提---醇萃法提取茶皂素的原理、方法和一般步骤。
2、探究不同液料比对水提---醇萃法提取茶皂素的影响。
3、探究提取茶皂素的最佳溶剂热水、含水乙醇、正丁醇及冰醋酸。
4、掌握用紫外分光光度法测定茶饼中茶皂素的含量。
二、实验原理
茶皂素难溶于冷水、无水甲醇、无水乙醇,不溶于乙醚、丙酮、苯、石油醚等有机溶剂,稍溶于温水,易溶于热水、含水甲醇、含水乙醇、正丁醇及冰醋酸,根据以上特性,本次实验来探究提取茶皂素的最佳溶剂。
水提---醇萃法又是在以上基础上,根据茶皂素易溶于热水和95%的乙醇,不溶于冷水性质,用热水浸提茶饼,然后于浸提液中加入絮凝剂 Al 2(SO4 )3,沉降除杂冷却后,再用95%的乙醇转萃提纯一种方法。
茶皂素与香草醛在浓硫酸作用下表现呈色反应,茶皂素的含量和吸光度值成线性关系,本文利用此性质对茶皂素的分析方法进行研究。
三、实验材料
1、实验试剂:95%乙醇;Al 2(SO4 )3;活性炭;NaOH;蒸馏水;香草醛;硫酸;含水乙醇、正丁醇及冰醋酸
2、实验材料:油茶饼粕
3、实验仪器:电子天平、高速万能粉碎机、电热恒温水浴锅、蒸发器、电热恒温鼓风干燥箱、紫外可见分光光度计、三角锥形瓶、纱布、抽滤瓶、滤纸、分液漏斗、烧杯、表面容器、容量瓶、具塞刻度试管
四、实验步骤
1、茶皂素的提取操作
(1) 油茶饼粕的处理
取一定量的油茶饼粕放入高速万能粉碎机中粉碎成油茶饼粕粉末,但不可过细(不利于下一步的过滤),一般粉碎粒度在 l~3 mm为宜。
(2) 探究提取茶皂素的最佳溶剂
称取1g的油茶饼粕粉末4份分别加入到三角锥形瓶中,分别加入热水、含水乙醇、正丁醇及冰醋酸按1:7比例,标记,置入温度为90℃的恒温水浴锅中处理1.5h,得到茶皂素浸取液。
浸取液要趁热用纱布过滤。
(2) 探究一定固液比下恒温热水浴浸提
称取1g的油茶饼粕粉末3份分别加入到三角锥形瓶中,分别加入蒸馏水和固体的比例为1:6、1:7、1:8,置入温度为90℃的恒温水浴锅中处理1.5h,得到茶皂素浸取液。
浸取液要趁热用纱布过滤(茶皂素难溶于冷水,放置冷却后将导致产率下降),将滤渣继续加蒸馏水再次进行恒温水浴浸提,然后趁热用纱布过滤,反复操作三次,将得到的滤液合并。
(3) 加絮凝剂(Al 2(SO4 )3)除杂
絮凝剂可以将浸提液中鞣质、蛋白质、蜡质等不稳定杂质除去,而对于茶皂素的溶解则不会产生影响。
(4) 抽滤(抽滤可以将上述的杂质与茶皂素滤液迅速分离)。
(5) 减压恒温蒸发浓缩
将抽滤除杂后的滤液置于RE 52-99 旋转蒸发其中进行减压恒温蒸发浓缩至稠状,温度80~90 ℃(减压恒温蒸发,既可以使滤液快速浓缩,又使得茶皂素不会遭到高温破坏)。
(6) 乙醇转萃
将上述稠状液体置于分液漏斗中,加适量的95%乙醇(PH=5)萃取三次,取上层萃取液,合并三次的萃取液。
(茶皂素在95%乙醇中的溶解度很高,而在冷水中的溶解度较低,所以茶皂素转入乙醇中。
而其它杂质在乙醇中溶解度较低,就留在下层液中)。
(7) 脱色
将转萃后的液体置于烧杯中,加入少量活性炭进行脱色处理。
为了增强脱色效果,可将烧杯中液体加热煮沸,并不断搅拌两三分钟,然后用过滤的方法除去活性炭。
(8) 蒸发乙醇
将脱色后的滤液置于RE 52-99 旋转蒸发其中进行减压恒温蒸发乙醇,温度55℃,蒸发至稠状时停止。
(9) 恒温干燥
将上述稠状物置于表面容器中,放入电热恒温鼓风干燥箱进行干燥,温度50~60 ℃。
(10) 称重,得到粗茶皂素
2、茶皂素含量的测定方法
(1)标准溶液的配置
称取0.1 g 茶皂素标准品,用95%乙醇溶解后置入100 mL容量瓶,并用95%乙醇定容。
分别吸取0.9,1.8,2.7,3.6,4.5mL于10 mL容量瓶中,用蒸馏水定容,则得含茶皂素 0.09、0.18、0.27、0.36、0.45 mg/mL五种不同浓度的标准溶液。
(2)标准曲线的制作
在最大吸收波长545 nm 处测定不同浓度的茶皂素标准液的吸光度,以茶皂素含量为横坐标,吸光度为纵坐标,作标准曲线
3、茶皂素含量的测定
准确称取1g茶皂素粗产品,用95%乙醇完全溶解,定容至100 ml,得1 mg/ml的茶皂素粗产品溶液。
吸取供试液5mL,置50 mL容量瓶中,加香草醛一硫酸显色,充分混匀,用95%乙醇定容,以定容空白液作对比,于545nm处测定吸光度(A)。
根据茶皂素标准工作曲线,计算出茶皂素含量。
五、结果分析和计算
1、粗产品的含量
2、茶皂素含量的百分含量计算
3、提取率的计算
茶皂素的提取率=提取含量/茶皂素的实际含量
4、结果析
用水提—醇萃法提取茶皂素的浸提温度为 90 ℃,浸提时间为1.5 h,液料比为,此时茶皂素的提取率将达到 %。