复方中三七的薄层鉴别

2 定性鉴别取本品2 g,研细,加甲醇20 mL,超声处理30 min,滤过,滤液蒸干,残渣加甲醇2 mL使溶解,作为供试品溶液。

另取缺三七的阴性对照品 2 g,同法制成阴性对照品溶液。

再取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对照品,分别加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。

照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验,吸取供试品溶液、对照品溶液及阴性对照液各2 μL,分别点于同一硅胶G薄层板上,以正丁醇-乙酸乙酯-水(4∶1∶5)的上层溶液为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,105 ℃加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中,在与人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1和三七皂苷R1对照品相应的位置上,显红色的斑点,而阴性对照液无相应斑点。

3 含量测定3.1 色谱条件Agilent Eclipse XDB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相：乙腈-0.05%磷酸溶液(18∶82)；流速：1.0 mL/min；检测波长：203 nm；柱温：30 ℃；进样量：10 μL。

理论塔板数按三七皂苷R1计算应不低于3 000。

3.2 对照品溶液的制备分别精密称取人参皂苷Rg1和三七皂苷R1对照品适量,加甲醇制成每1 mL含人参皂苷Rg1 0.396 mg和三七皂苷R1 0.092 mg的混合溶液,摇匀,即得。

3.3 供试品溶液的制备取本品适量,研细,取约1.2 g,精密称定,加水适量使溶解并转移至分液漏斗中,用水饱和的正丁醇萃取3次,每次20 mL,合并正丁醇萃取液,加氨试液洗涤2次,每次20 mL,弃去氨试液,正丁醇层蒸干,残渣加甲醇溶解并移入10 mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,用0.45 μm滤膜滤过,作为供试品溶液。

3.4 空白试验按处方及制备工艺制备不含三七药材的阴性样品,再按供试品溶液的制备方法制备并测定。

按照上述色谱条件,吸取对照品溶液、供试品溶液、阴性对照溶液各10 μL,分别注入色谱仪,进行测定。

三七活血片质量标准研究目的建立三七活血片的质量标准。

方法采用薄层色谱法对制剂中的三七、血竭进行鉴别。

采用高效液相色谱法测定赤芍中芍药苷的含量，色谱柱为Shim-pack（岛津）C18（150 mm×4.6 mm，5 μm），流动相为乙腈-0.3%磷酸水溶液（15.2∶84.8，V/V），检测波长为230 nm，柱温为30 ℃，流速为1.0 mL/min。

结果三七、血竭的薄层色谱特征斑点分离清晰，阴性无干扰。

芍药苷在0.269 6～1.348 μg范围内线性关系良好（r=0.999 8）；供试品溶液在24 h内稳定，平均加样回收率为98.68%，RSD=0.78%（n=6）。

结论本研究所建立的方法简单、准确可靠、重复性好，可用于控制三七活血片的质量。

Abstract：Objective To establish the quality standard for Sanqi Huoxue Tablets. Methods Notoginseng Radix et Rhizoma and Draconis Sanguis in Sanqi Huoxue Tablets were identified by TLC qualitatively；The content of paeoniflorin in Paeoniae Radix Rubra was determined by HPLC. The separation was performed on Shim-pack-C18 column （150 mm×4.6 mm，5 μm）with mobile phase consisted of acetonitrile-0.3% phosphoric acid （15.2：84.8，V/V）at the flow rate of 1.0 mL/min. The detection wavelength was set at 230 nm，and the column temperature was 30 ℃. Results Notoginseng Radix et Rhizoma and Draconis Sanguis in Sanqi Huoxue Tablets could be identified by TLC and separated well. Paeoniflorin was in a good linear relationship between 0.269 6–1.348 μg，with a correlation coefficient of 0.999 8. Solution was stable within 24 h，and the average recovery of paeoniflorin was 98.68%，RSD=0.78%. Conclusion The established method is simple，accurate and sensitive，and can be applied to the quality control of Sanqi Huoxue Tablets.Key words：Sanqi Huoxue Tablets；quality standard；Notoginseng Radix et Rhizoma；Draconis Sanguis；TLC；HPLC；paeoniflorin三七活血片是在吉林省中医院院内制剂三七活血胶囊基础上确定的实验方剂，由三七、赤芍、血竭、骨碎补等7味中药组成，具有活血止血、散瘀止痛等作用，用于急性软组织损伤等症临床疗效显著，药理实验表明该制剂在减轻损伤组织，促进血肿吸收和瘀斑消散等方面作用确切[1]。

中药三七的真伪鉴别方法分析黄东智【摘要】中药的真伪及优劣是指中药的品种相关真伪情况以及质量情况.一些伪劣的中药会引发中药相关生产及实验研究的失败,对患者的临床疾病治疗也具有一定的不良影响.中药三七属于一种名贵的中药材,具有相对比较昂贵的价格,而且具有独特性的临床治疗效果.然而,近年来,一些和中药三七的味道及性状存在相似性的药物,比如竹节参、莪术等中药材对中药三七进行冒充而入市,另外,还有采取某某三七对各种三七伪品进行命名,比如藤三七、菊三七等,混淆人们认知,引发一定的危害.所以,进一步加强对中药三七的相关管理,促使中药三七的用药安全得到保证,并对中药三七的真伪及优劣进行准确的鉴别,存在十分重要的意义.【期刊名称】《中国继续医学教育》【年(卷),期】2017(009)035【总页数】2页(P113-114)【关键词】三七;真伪;鉴别方法【作者】黄东智【作者单位】江苏省徐州市中医院药剂科,江苏徐州 221000【正文语种】中文【中图分类】R285近年来，中药药材以及饮片存在相对比较严重的真伪问题，尤其是中药三七，因为中药三七的疗效相对比较明显，其价格又相对比较昂贵，所以，中药药材市场中存在藤三七、菊三七、竹节参、莪术等三七伪品代替中药三七进行销售的现象[1]。

所以，依据多年的中药临床经验，对中药三七的性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别和伪品鉴别情况进行以下总结，希望为中药三七的真伪鉴别提供一定的依据。

1 中药三七的性状鉴别中药三七是指五加科植物三七的根和根茎（干燥）。

其根是类圆锥形状或是圆柱形状[2]。

颜色是灰黄色或是棕黑色。

其顶存在根茎之断痕，其周围存在瘤状的突起现象。

其体为重，其质是坚且实，其气较微，其味较苦。

将其击碎之后则皮部和木部得以分离区分；其侧面存在断断续续的纵皱现象[3]。

其断口存在不规则的皱缩块状或是条状的情况，其表面上面存在多个茎痕现象和环纹现象，其横断面是灰绿、灰白或是黄绿颜色，其边缘呈现灰或是深绿颜色。

药材名称批号检验日期检验依据检验：一、性状：主根呈，长cm，直径cm。

表面，有断续的纵皱纹及支根痕。

顶端有茎痕，周围有瘤状突起。

体，质，断面，木部微呈排列。

气，味。

结论：二、鉴别：1. 显微鉴别本品粉末色。

淀粉粒，单粒，直径μm；复粒由余分粒组成。

树脂道碎片含分泌物。

导管直径μm。

草酸钙簇晶少见，直径μm。

结论：检验者复核者日期日期药材名称批号检验日期检验依据2. 薄层鉴别2.1 供试品溶液的制备取本品粉末g，加水滴，搅匀，再加以水饱和的正丁醇溶液ml，密塞，振摇分钟，放置小时，离心，取上清液，加倍量以正丁醇饱和的水，摇匀，放置使分层（必要时离心），取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇ml 使溶解，作为供试品溶液。

2.2 对照品溶液的制备对照品溶液编号：，浓度：含人参皂苷Rb1mg/ml、人参皂苷Re mg/ml、人参皂苷Rg1mg/ml、三七皂苷R1 mg/ml的混合溶液。

2.3 试验照薄层色谱法（附录ⅥB）试验，吸取上述两种溶液各μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，用三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－水（）10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以硫酸溶液（1→10），于℃加热至斑点显色清晰。

2.4 结果供试品色谱中，在与对照品色谱的位置上，显颜色的斑点；置紫外光灯下检视，显的荧光斑点。

色谱示意图：结论：检验者复核者日期日期药材名称批号检验日期检验依据三、检查：1.总灰分：照灰分测定法（附录Ⅸ K）测定，不得过6.0%。

仪器型号：电子天平------梅特勒AL104箱式电阻炉------SX-4-10型结论：2.酸不溶性灰分：照灰分测定法（附录Ⅸ K）测定，不得过3.0%。

仪器型号：电子天平------梅特勒AL104箱式电阻炉------SX-4-10型结论：检验者复核者日期日期药材名称批号检验日期检验依据3.水分：照水分测定法（附录Ⅸ H第一法）测定，不得过14.0%。

仪器型号：电子天平------梅特勒AL104真空干燥箱------ DZ-1BC型结论：四、浸出物：照醇溶性浸出物测定法(附录X A)项下的热浸法测定，用甲醇作溶剂，不得少于16.0%。

三七来源、性状、显微、薄层色谱鉴别三七来源五加科植物三七Parmx notoginseng ( B u r k . )F . H . C h e n的干燥根和根茎。

秋季花开前采挖，洗净，分开主根、支根及根茎，干燥。

支根习称“筋条”，根茎习称“剪口”三七性状主根呈类圆锥形或圆柱形，长1〜6cm，直径1〜4cm。

表面灰褐色或灰黄色，有断续的纵皱纹和支根痕。

顶端有茎痕，周围有瘤状突起。

体重，质坚实，断面灰绿色、黄绿色或灰白色，木部微呈放射状排列。

气微，味苦回甜。

筋条呈圆柱形或圆锥形，长2〜6cm ,上端直径约0.8cm,下端直径约0.3cm。

剪口呈不规则的皱缩块状或条状，表面有数个明显的茎痕及环纹，断面中心灰绿色或白色，边缘深绿色或灰色。

见下图三七主根三七剪口三七筋条粉末显微鉴别三七粉末灰黄色。

淀粉粒甚多，单粒圆形、半圆形或圆多角形，直径4〜30µm ；复粒由2〜10余分粒组成。

树脂道碎片含黄色分泌物。

梯纹导管、网纹导管及螺纹导管直径15〜55µm 。

草酸钙簇晶少见，直径50〜80µm 。

见下图1.淀粉粒2.树脂道3.导管4.草酸钙簇晶三七薄层色谱鉴别取三七粉末1g ,加水饱和的正丁醇20ml ,超声处理20分钟，滤过，滤液用正丁醇饱和的水40ml摇匀，放置使分层，取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

另取三七对照药材1g，同法制成对照药材溶液。

再取人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品,加甲醇制成每lml各含0.5mg的混合溶液，取三七皂苷R1对照品，加甲醇制成每lml含0.5mg的溶液,照薄层色谱法试验。

吸取上述四种溶液各5µl，分别点于同一硅胶G 薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-水（15:40:22:10)10℃以下放置的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液,105℃加热至斑点显色淸晰。

供试品色谱中，在与对照药材色谱及对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；置紫外光灯(365nm)下检视，显相同的荧光斑点。

4.1 复方中三七的薄层鉴别参考《中国药典》2010版三七鉴别项下方法。

4.1.1 供试溶液的制备称取20100112，20100118；两个批次本品颗粒各2.0g，置25ml具塞试管中，加水25滴，搅匀，再加以水饱和的正丁醇15ml，密塞，振摇10min，放置于冰箱中使分层，取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。

4.1.2 对照品溶液的制备精密取三七皂苷R1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、人参皂苷Rg1对照品加甲醇制成每1ml各含0.5mg的溶液，并将这些对照品溶液混合制成对照品混合溶液，作为对照品溶液。

4.1.3 阴性供试品溶液的制备取缺三七阴性复方颗粒2.0g，按供试品溶液的备方法，制得阴性供试品溶液。

4.1.4 对照药材溶液的制备称取三七对照药材0.5g，用滴管加水5滴，搅匀，再加以水饱和的正丁醇5ml，密塞，振摇10min，放置于冰箱中使分层，取正丁醇层，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为对照药材溶液。

4.1.5 TLC色谱条件薄层板：自制硅胶G板（硅胶：0.7%CMC-Na为1：3）展开剂系统：氯仿-甲醇-水-冰乙酸（14：11：2：0.5）于冰箱放置的下层溶液。

显色剂：10%的硫酸乙醇溶液。

按照薄层色谱法(《中国药典》2010版一部附录VIB)试验，吸取上述几种溶液适量，分别点于同一硅胶G板上，饱和30min，上行展开，取出，晾干，喷以10%硫酸溶液，在烘箱中105℃加热至斑点显色清晰，见图3-1。

图3-1 复方中三七的薄层鉴定色谱图1复方颗粒样品 6 人参皂苷Rg1对照品2复方颗粒样品7 三七皂苷R1对照品3三七对照药材8 人参皂苷Re对照品4三种对照品混合溶液9 三七阴性样品5人参皂苷Rb1对照品在颗粒样品色谱中，在与对照品及对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，特征斑点清晰、圆整、分离效果较好、Rf值适中。

缺三七的阴性样品无干扰。