分光光度法测定蔬菜中维生素C的含量

紫外分光光度计法测定果蔬中维生素C的含量 紫外分光光度计法

测定几种常见果蔬中维生素C的含量

摘要：利用维生素Ｃ对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，用紫外分光光度法测定５种常见果蔬中维生素Ｃ的含量。最大吸收波长为243nm，标准曲线方程为A=0.00537c，相关系数为R^2＝0.99539。9种果蔬中维生素Ｃ含量［ｍｇ·（１００ｇ）－１］分别为：青尖椒111.8、上海青104.2、韭菜82.5、小白菜78.9、西芹59.70、胡萝卜49.8、西兰花28、茄子26.4、山药14.9。该方法简单、快速，结果令人满意。

1.前言

维生素Ｃ又称抗坏血酸，是一种水溶性维生素。能预防牙龈出血及萎缩、提高人体免疫力，对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效。天然存在的抗坏血酸有L型和D型2种，后者无生物活性。维生素C是呈无色无臭的片状晶体，易溶于水，不溶于有机溶剂。在酸性环境中稳定，遇空气中氧、热、光、碱性物质，特别是由氧化酶及痕量铜、铁等金属离子存在时，可促进其氧化破坏。氧化酶一般在蔬菜中含量较多，故蔬菜储存过程中都有不同程度流失。但在某些果实中含有的生物类黄酮，能保护其稳定性。

维生素Ｃ的测定方法主要有紫外分光光度法、红外光谱法、2,6－二氯靛酚滴定法、高效液相色谱法、钼蓝比色法、原子吸收法、碘量法、电位滴定法、荧光光度法、毛细管电泳法、流动注射化学发光法[2-12]等。其中原子吸收法、高效液相色谱法和荧光光度法仪器相对昂贵；碘量法和电位滴定法操作步骤较繁琐，而且受其它还原性物质、样品色素颜色和测定时间的影响；紫外分光光度法是根据维生素Ｃ对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，于243nm处测定样品液与碱处理样品液两者吸光度之差，通过标准曲线方程，即可计算样品中维生素Ｃ的含量。

本实验采用市售的西芹为研究材料，用紫外分光光度法测定韭菜中维生素C的含量。

2.实验

2.1 材料、试剂和仪器

市售西芹

实验 果蔬中维生素C含量的测定

学院/专业/班级：______________________________ 姓名：

合作者：________________ 实验日期______年__月__日 教师评定：______________

【实验目的】

【实验原理】

【仪器及试剂】

【简单实验步骤】

【数据记录及处理】

Vc质量： g ； 西红柿质量： g ； 橙子质量： g

实验中你与合作者配制的公用试液有（详细记录称取量及配制过程）：

（1）分光光度法：标准曲线及待测样品吸光度的测定

表1. 标准系列及待测果蔬吸光度的测定

标准系列 待测西红柿 待测橙子

比色管号 1 2 3 4 5 6 7

Vc标液/mL 0.20 0.40 0.60 0.80 1.00 待测1.00 待测1.00

Vc含量/ug

吸光度A

以Vc含量为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线：

图1. 标准曲线（图打印成适当大小，贴在此处）

计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量（利用拟合方程求算，注意稀释倍数，以mg/100g表示）

（2）荧光法：标准曲线及待测样品荧光光度的测定

表2. 标准系列及待测果蔬荧光强度的测定

标准系列 待测西红柿 待测橙子

比色管号 1 2 3 4 5 6 7 8

Vc标液/mL 0.30 0.60 0.90 1.20 1.50 1.80 待测2.00 待测2.00

Vc含量/ug

荧光强度F

图2. 标准曲线（图打印成适当大小，贴在此处）

计算原待测试样西红柿及橙子中Vc的含量（利用拟合方程求算，注意稀释倍数，以mg/100g表示）

【实验评价及问题讨论】

生命科学与实验研究

1BIOTECHWORLD 生物技术世界生物技术 世界

野生蔬菜即未经人工栽培、自然生长,其根、茎、叶、花、果等器官可供食用的植物[1]。它们中有的营养丰富,有的药食同源,具有保健功效。维生素C别名抗坏血酸,是具有抗坏血酸生物活性的化合物的总称。野菜的营养成分丰富,特别是Vc的含量极高,可以提高机体免疫力,预防流行性感冒、上呼吸道感染等疾病,还可以将胆固醇分解为硫化物排出体外,有利于营养物质的运输和大脑的发育[2]。如果缺乏Vc会得坏血病、容易疲倦、引起炎症、口腔溃疡、骨骼易损伤、不易治愈[3]。我国北方地区野菜种类繁多,人们在广泛的选择和食用野菜中,常常对野菜的真正价值缺乏一定的了解,更不清楚其营养价值有何差异。由于野菜中Vc含量最高,是最主要的营养物质之一,也是衡量野菜价值的重要指标,所以测定和比较各种野菜中的Vc的含量,了解各种野菜营养价值的差异,对人们更好的的选择和利用野生蔬菜有重要意义。1 材料和方法1.1 实验材料1.1.1 材料蒲公英、刺五加、刺嫩芽、黄檗叶、香椿、蕨菜、山芹、大耳毛。1.1.2 仪器和试剂电子天平,电热恒温水浴锅,高速冷冻离心机,紫外可见分光光度计;Vc标准溶液,盐酸溶液,试剂均为分析纯。1.2 实验方法1.2.1 绘制标准曲线分别吸取Vc标准溶液0.2,0.5,1.0,3.0,5.0 mL倒入50mL的容量瓶中,定容,蒸馏水作空白,用紫外分光光度计在243.8 nm下测定吸光值,以吸光值为纵坐标,Vc的量为横坐标,作标准曲线[4]。1.2.2 样品Vc含量的测定将样品洗净、切碎,称取5.00g放入研钵中,移取0.1%盐酸10mL加入研钵中,研磨成匀浆。用离心机以10000 r/min 离心10min,移取上清液2mL,倒入容量瓶中。然后加入0.01盐酸2mL,定容至刻度,摇匀备用。取50mL的容量瓶,加入样液2mL,再加入1mL 0.1%的盐酸,摇匀,在水浴锅中加热13min,加热温度为70℃,取出后用冷水冷却。蒸馏水作空白,在波长243.8nm下测定吸光值。1.2.3 计算Vc的含量=(C×V2×1000)/(V1×M×1000)C-标准曲线上查得维生素C的含量(μg/g);M-野菜重(g);V1-测定用样品溶液的体积(mL);V2-样液稀释定容后的体积(mL) 。2 结果与分析2.1 Vc标准曲线的绘制见表1和图1。2.2 8种野菜样品中维生素C的含量见表2。从以上结果可以看出,蕨菜、山芹中Vc含量较高,蒲公英、大耳毛等Vc含量偏低。8种野菜中Vc的含量由多到少排列为:蕨菜 > 山芹 > 刺嫩芽 > 刺五加 > 香椿 > 黄檗叶 > 大耳毛 > 蒲公英。普通的种植蔬菜的Vc含量大多在20-60mg/100g范围内,而经过测定可知野菜的Vc含量大多在80-140mg/100g之间,其中山芹的Vc含量达到189mg/100g,蕨菜的Vc含量最高,达到298mg/100g。除此之外,大量文献中均有报道,新鲜野菜中不仅含有大量的Vc,其他营养物质如黄酮、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维及各种矿物质也十分丰富。3 结语目前,市售的山野菜主要来自纯天然,部分有栽培品种,有季节性限制。本研究可以为北方地区野生蔬菜的合理食用和人工栽培提供理论依据。参考文献[1]许良政,廖富林.赖万年野生蔬菜研究与开发的科学价值[J].有机农业与食品科学(2005) 01-0051-04.[2]李元亭,黄永红,张君田.6种野菜Vc含量的测定及开发利用讨论[J].中国园艺文摘(2010)-3-23-45.[3]阎树刚,韩涛.果蔬及其制品中Vc测定方法的评价[J].中国农学通报,2002,18 (4):102-112.[4]李军.紫外分光光度法测定果蔬中的维生素C[J].河北职业技术师范学院学报.(2000) 01-0041-04.北方常见8种野菜中维生素C含量比较来庆捷 瑀路珂 吕建洲*(辽宁师范大学生命科学学院 辽宁大连 116081)摘要:利用紫外分光光度法,对北方8种常见野菜的Vc含量进行了测定和含量的差异比较,介绍了野菜的营养价值。测定结果表明,不同种野菜Vc含量具有一定的差异,其中山芹、刺嫩芽、蕨菜Vc含量较高,刺五加、香椿、黄檗叶、大耳毛、蒲公英Vc含量依次减少,为合理的开发利用北方地区野生蔬菜资源提供理论依据。关键词: 北方地区 野生蔬菜 维生素C 紫外分光光度法中图分类号:S63文献标识码:A文章编号:1674-2060(2015)06-0001-01

紫外分光光度法测定猕猴桃中维C含量实验报告书

摘 要

利用维生素C对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，用紫外分光光度法测定猕猴桃中Vc含量，最大吸收波长为245nm，标准曲线方程为y=19.132x，相关系数R2=0.9968，一个猕猴桃中维生素C含量约为87毫克。

关键词：紫外分光光度法、猕猴桃、维C、含量

1 前言

维生素C又称抗坏血酸，是一种水溶性维生素。能预防牙龈出血及萎缩，提高人体免疫力；对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效[1]。

维生素C的主要作用是提高免疫力，预防癌症、心脏病、中风，保护牙齿和牙龈等。另外，坚持按时服用维生素C还可以使皮肤黑色素沉着减少，从而减少黑斑和雀斑，使皮肤白皙。富含维生素C的食物有猕猴桃、青辣椒、橙子、葡萄汁、西红柿等，可以说，在所有的蔬菜、水果中，维生素c含量都不少。美国专家认为，每人每天维生素C的最佳摄入量应为200-300毫克，最低不少于60毫克[2]。

2 实验目的

猕猴桃是一种营养价值极高的水果,其可溶性固形物质含量为20%，含亮氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸、酪氨酸、缬氨酸、丙氨酸等十多种氨基酸，含有丰富的矿物质。每100克果肉含钙27毫克,磷26毫克，铁1.2毫克，还含有胡萝卜素和多种维生素，其中维生素C的含量达100毫克，有的品种高达300毫克以上,是柑桔的5--10倍，苹果等水果的15--30倍，因而在世界上被誉为“水果之王”[3]。

常见的Vc的测定方法有2，6一二氯靛酚法、2，4一二硝基苯肼法、铅硫化氢法、碘量法以及荧光光度法„，近来也有报道利用分光光度法测定Vc含量。本实验采用紫外分光光度法测定猕猴桃中Vc含量。

3 实验原理

1.紫外吸收光谱是基于物质的生色团和助色团的特性对紫外光谱的吸收，可用于物质的鉴定和结构分析。

2.维C在紫外光区（200-400nm）显示特征的吸收谱带，最大光吸收（λmax）为245nm。因此可以用标准曲线法在245nm测样品吸光度，测得维C含量。