紫外分光光度法测定水果或蔬菜中的维生素C含量
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紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量
【摘要】本实验利用紫外分光光度法测定由维生素C和维生素E组成的混合物中各组分的浓度。在这两种组分组成的混合物中,彼此都不影响另一种物质的光吸收性质,根据相互间光谱的重叠的程度采用相对的方法进行定量测定。
【关键词】紫外分光光度法;维生素C;维生素E;浓度
1、 引言
维生素C(抗坏血酸)和维生素E(α-生育酚)在食品中能起抗氧化剂作用,即它们在一定时间内防止油脂变性。两者结合在一起比单独使用的效果更佳,因为它们在抗氧化性能方面是“协同的”。因此,它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。维生素C是水溶性的,维生素E是酯溶性的,它们都能溶于无水乙醇,因此能在同一溶液中,能够利用紫外可见分光光度法测定双组分相同的原理,在紫外光区测定它们。
2、实验原理
根据朗伯—比尔定律,用紫外—可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分。由两种组分组成的混合物中,若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质,可根据相互间光谱重叠的程度,采用相对的方法来进行定量测定。例如,当两组分吸收峰部分重叠时,选择适当的波长,仍可按测定单一组分的方法处理;但当两组分吸收峰大部分重叠时,则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定。 混合组分中在λ1处的吸收等于组分A和组分B分别在λ1处的吸光度之和Aλ1A+B,即:
Aλ1A+B=κλ1AbcA+κλ1BbcB
同理,混合组分在λ2处吸光度之和Aλ2A+B应为:
Aλ2A+B=κλ2AbcA+κλ2BbcB
若先用A、B组分的标样,分别测的A、B两组分在λ1和λ2处的摩尔吸收系数κλ1A、κλ2A、κλ1B、κλ2B;当测的未知试样在λ1和λ1处的吸光度Aλ1A+B和Aλ2A+B后,解下列二元一次方程组:
Aλ1A+B=κλ1AbcA+κλ1BbcB
Aλ2A+B=κλ2AbcA+κλ2BbcB
即可求得A、B两组分各自的浓度cA和cB。
紫外分光光度计法测定果蔬中维生素c的含量
紫外分光光度计法是一种常用的测定果蔬中维生素C含量的方法。维生素C具有强的紫外吸收性质,在265nm处有最大吸收峰。通过测定样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度,可以比较它们的维生素C含量。以下是该方法的详细步骤:
一、目的
本实验的目的是通过紫外分光光度计法测定果蔬中维生素C的含量,了解其含量变化情况,为科学饮食提供参考。
二、原理
维生素C具有强的紫外吸收性质,在265nm处有最大吸收峰。在实验条件下,一定浓度的维生素C溶液与其吸光度呈线性关系。通过比较样品溶液与标准溶液在相同条件下的吸光度,可以求出样品中维生素C的含量。
三、实验步骤
1. 标准曲线的制作
(1)配制不同浓度的维生素C标准溶液。分别称取0.05g、0.1g、0.2g、0.3g、0.4g的维生素C,用蒸馏水定容至100mL,得到浓度分别为5mg/mL、10mg/mL、20mg/mL、30mg/mL、40mg/mL的溶液。
(2)用1cm石英比色皿分别在紫外分光光度计上测定各标准溶液在265nm处的吸光度。
(3)以维生素C浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2. 样品处理
(1)将果蔬样品洗净,晾干表面水分。
(2)将样品切成小块,放入榨汁机中榨汁,收集榨出的汁液。
(3)用纱布过滤,去除汁液中的杂质和果肉颗粒。 (4)将滤液倒入50mL容量瓶中,用蒸馏水定容至刻度线。
3. 测定样品吸光度
(1)用移液管准确移取5mL样品溶液于1cm石英比色皿中。
(2)在紫外分光光度计上测定样品溶液在265nm处的吸光度。
4. 计算样品中维生素C的含量
(1)从标准曲线上查得相应的维生素C浓度(mg/mL)。
(2)计算样品中维生素C的含量(mg/100g),公式如下:
维生素C含量 = 查得浓度 × 溶液体积 × 稀释倍数 / 样品质量
其中,溶液体积为50mL,稀释倍数为100(即5mL样品溶液稀释成50mL),样品质量为榨出的果蔬质量。
紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量
【摘要】本实验利用紫外分光光度法测定由维生素C和维生素E组成的混合物中各组分的浓度。在这两种组分组成的混合物中,彼此都不影响另一种物质的光吸收性质,根据相互间光谱的重叠的程度采用相对的方法进行定量测定。
【关键词】紫外分光光度法;维生素C;维生素E;浓度
1、 引言
维生素C(抗坏血酸)和维生素E(α-生育酚)在食品中能起抗氧化剂作用,即它们在一定时间内防止油脂变性。两者结合在一起比单独使用的效果更佳,因为它们在抗氧化性能方面是“协同的”。因此,它们作为一种有用的组合试剂用于各种食品中。维生素C是水溶性的,维生素E是酯溶性的,它们都能溶于无水乙醇,因此能在同一溶液中,能够利用紫外可见分光光度法测定双组分相同的原理,在紫外光区测定它们。
2、实验原理
根据朗伯—比尔定律,用紫外—可见分光光度法很容易定量测定在此光谱区内有吸收的单一成分。由两种组分组成的混合物中,若彼此都不影响另一种物质的光吸收性质,可根据相互间光谱重叠的程度,采用相对的方法来进行定量测定。例如,当两组分吸收峰部分重叠时,选择适当的波长,仍可按测定单一组分的方法处理;但当两组分吸收峰大部分重叠时,则宜采用解联立方程组或双波长法等方法进行测定。
混合组分中在λ1处的吸收等于组分A和组分B分别在λ1处的吸光度之和,即:
同理,混合组分在λ2处吸光度之和应为:
若先用A、B组分的标样,分别测的A、B两组分在和处的摩尔吸收系数、、、;当测的未知试样在λ1和λ1处的吸光度和后,解下列二元一次方程组:
即可求得A、B两组分各自的浓度和。
一般来说,为了提高检测的灵敏度,λ1和λ2宜分别选择在A、B两组分最大吸收峰处或其附近。
3、紫外分光光度法测定维生素C和维生素E含量
3.1、仪器试剂
仪器:紫外-可见分光光度计(天津港东UV-4501S),石英吸收池一对
试剂:维生素C(抗坏血酸),维生素E(α-生育酚),无水乙醇
紫外分光光度法测定常见水果维生素C的含量
1 序言
1.1 研究的目的和意义
维生素是必须得从食物中获取并且在物质代谢过程中起到了极其重要的作用的一种物质[1]。这类物质在生物体内不能合成或者合成量特别少,不足以维持生物体的正常的生理功能,虽然生物体对维生素的需要量很少,但所需量必须经常从食物中获得,所以我们研究维生素具有重要的意义[2]。维生素C是维生素的一种,维生素C在医学上被称作抗坏血酸,具有防治坏血病的功效,它是显示抗坏血酸生物活性的一类有机化合物的总称[3]。维生素C广泛的存在于我们常见的水果和蔬菜中,所以我们能够准确地测定出水果中地维生素C的含量,对我们的日常饮食和健康的生活具有重要的指导意义。
1.2维生素C含量的研究史
中国是人口众多的国家,人口密度相对较大,病毒发病率较高,我国在对抗病毒的战争中起到一个关键作用。SARS病毒首先出现在我们中国,死于SARS病毒的90%是我们中国人。国内对于维生素C的生产水平已经处于领先地位,可以彻底解决病毒的问题,只是生产的维生素C大部分都外销,我们中国人服用维生素C的平均剂量,远远低于一些欧美国家和日本。目前,围绕着维生素C含量的测定产生了一系列的研究课题和任务,因为它对人们日常饮食具有重要指导意义,成为了现今国内外研究的热点,现在主要有2,4-二硝基苯肼比色法、碘量法、高效液相色谱法、紫外分光光度法等来测定维生素C的含量。
1.2.1碘量法
武文等 [4]利用I₂的氧化性,用淀粉作指示剂,采用I₂作标准溶液进行直接滴定,这叫做直接碘量法。直接碘量法的滴定原理:维生素C分子中的二烯醇基可被I₂氧化成二酮基,当维生素C分子中的二烯醇基被I₂完全氧化后,过量的I₂与淀粉指示剂发生显色作用,使溶液变蓝,所以当滴定到溶液中有蓝色出现时,即为滴定终点。直接碘量法测定水果和蔬菜中维生素C的含量时,要求所测的果蔬溶液为无色和浅色的是样溶液或者提取液,该方法测维生素C不需要特殊的测定仪器,操作非常简便、准确。