脐血单个核细胞联合黄芪注射液治疗Duchenne型肌营养不良症的临床研究

Duchenne型肌营养不良伴心衰1例报告李强;唐伯儒;毕海宁;郭鑫;丛树艳【期刊名称】《临床神经病学杂志》【年(卷),期】2017(030)001【总页数】2页(P28,53)【作者】李强;唐伯儒;毕海宁;郭鑫;丛树艳【作者单位】10004沈阳,中国医科大学附属盛京医院神经内科;10004沈阳,中国医科大学附属盛京医院神经内科;10004沈阳,中国医科大学附属盛京医院神经内科;10004沈阳,中国医科大学附属盛京医院神经内科;10004沈阳,中国医科大学附属盛京医院神经内科【正文语种】中文【中图分类】R746.2Duchenne 型肌营养不良(DMD)是一种X染色体连锁的隐形遗传病，主要以缓慢进行性加重的对称性肌无力和肌萎缩为主要特点，晚期患者出现心肺系统功能衰竭，多于20岁左右死于心脏和呼吸衰竭[1]。

现报道1例DMD晚期伴心衰的患者如下。

患者，男，14岁，以“食欲不振、反酸伴心悸1周”为主诉于2016年5月24入院。

患者1周来无明显诱因出现食欲不振、反酸，进食较前明显减少，伴心悸、气短，无恶心、呕吐，无发热，无夜间阵发性呼吸困难及端坐呼吸，未在意。

渐出现食欲不振、反酸及心悸加重就诊我院，门诊以“肌营养不良”收入院。

病来睡眠欠佳，尿颜色发红，大便正常，体质量无明显变化。

患者4岁时发现患者走路异常，于我院诊断为“DMD”。

10岁时患者不能走路，13岁时行基因型检查示：Xp21基因18-47外显子缺失。

现患者卧床，日常生活不能自理。

查体：神清语明，轮椅推入病房，查体欠合作，双侧瞳孔等大等圆，直径3 mm，对光反应灵敏，双侧眼球向各方向运动充分，无眼震，无复视。

额纹对称，双侧鼻唇沟对称，示齿口角不偏，四肢腱反射正常，四肢肌张力减低，右上肢肌力Ⅲ+级，左上肢肌力Ⅱ-级，双下肢肌力0级，深浅感觉及共济运动检查不配合，双侧Babinski征阴性，颈软，胸廓畸形，双肺呼吸音清，未闻及明显干湿啰音。

心浊音界向左下扩大，心率114次/min，心律齐，心音低，三尖瓣听诊区可闻及3/6级收缩期杂音，肺动脉瓣听诊区可闻第2心音分裂。

Duchenne型肌营养不良症模型小鼠神经肌肉接头特征研究朱瑜龄;孙毅明;张惠丽;张誉;李亚勤;陈孟龙;王倞;张成【摘要】目的观察Duchenne型肌营养不良症模型小鼠骨骼肌肌膜抗肌萎缩蛋白(dystrophin)表达变化和神经肌肉接头形态,分析其可能机制.方法 C57BL/6和mdx小鼠各8只,HE染色观察肌细胞组织学形态,免疫荧光染色检测腓肠肌肌膜dystrophin蛋白表达变化和神经肌肉接头形态.结果 C57BL/6小鼠腓肠肌肌细胞大小基本一致,呈多角形,胞核位于细胞周边、极少数位于肌纤维中心;肌膜均匀表达dystrophin蛋白;神经肌肉接头形态完好.Mdx小鼠腓肠肌肌细胞大小不一致,呈圆形,部分胞核趋中心化;仅少量或个别肌细胞表达dystrophin蛋白;mdx种鼠突触后膜乙酰胆碱受体断裂成小片段,突触前膜神经末梢突起增多、变细,而mdx幼鼠神经肌肉接头形态与C57BL/6小鼠基本一致;mdx小鼠神经肌肉接头数目明显减少,突触前膜和突触后膜横截面积明显减小,肌细胞间神经轴突明显变细.结论 Mdx小鼠骨骼肌肌膜dystrophin蛋白缺失并非导致神经肌肉接头改变的直接因素,可能与病情进展有关.【期刊名称】《中国现代神经疾病杂志》【年(卷),期】2015(015)005【总页数】6页(P374-379)【关键词】肌营养不良,杜氏;肌营养不良蛋白;神经肌肉接头;疾病模型,动物【作者】朱瑜龄;孙毅明;张惠丽;张誉;李亚勤;陈孟龙;王倞;张成【作者单位】510080广州,中山大学附属第一医院神经科;510080广州,中山大学附属第一医院保健科;510080广州,中山大学附属第一医院神经科;510080广州,中山大学附属第一医院神经科;510080广州,中山大学附属第一医院神经科;510080广州,中山大学附属第一医院神经科;510080广州,中山大学附属第一医院神经科;510080广州,中山大学附属第一医院神经科【正文语种】中文Duchenne型肌营养不良症（DMD）是一种以进行性四肢近端肌萎缩和肌无力、腓肠肌假性肥大为特征，同时累及心肌和呼吸肌，部分伴智力障碍的X连锁隐性遗传性疾病。

论著黄芪甲苷促进脐带血干细胞向心肌细胞分化作用的研究福建中医药大学附属第二人民医院(福州350003) 廖联明 郑友生 江 敏 赵素萍基金项目:福建省自然科学基金资助项目(2006J0106)摘 要 目的 探讨黄芪甲苷对脐带血间充质干细胞向心肌细胞分化的作用。

方法 采用贴壁法分离人脐带血间充质干细胞,用流式细胞术对细胞表型进行鉴定。

通过免疫组化方法观察黄芪甲苷对间充质干细胞向心肌细胞分化的促进作用。

结果 流式细胞仪检测结果表明,分离的脐带血间充质干细胞表达CD29、CD44和CD105,不表达CD34和H L A -DR 。

黄芪甲苷(浓度200mg /L)作用下,间充质干细胞表达特异性心肌细胞蛋白,包括结蛋白(desm in)、 横纹肌肌动蛋白( -sar co meric actin)和肌钙蛋白T (C -T nT )。

结论 黄芪甲苷对脐带血间充质干细胞分化的促进作用,分化的心肌细胞在心肌损伤性疾病的潜在的治疗价值值得进一步研究。

关键词 黄芪甲苷;间充质干细胞;心肌细胞 中图分类号 R394 2文献标识码 A文章编号 1002-2600(2011)01-0001-04Effects of Astragaloside on differentiation of cord blood -derived mesenchymal stem cells toward cardiomyocytesLI A O Lian -ming ,ZH EN G Y ou -s heng ,J I A N G M in,ZH A O S u -p ing.T he Second p eo p le s hos p ital A f f iliated to Fuj ian Univer sity of T r aditional Chinese M ed icine,Fuz hou 350003,ChinaAbstract Objective T o ev aluate whether A strag alo side co uld pro mote the differ entiation o f cor d blood -der iv ed mesen -chymal stem cells tow ard car diomy ocytes.Methods M esenchyma l stem cells wer e iso lated fro m co rd blood by repeat ed plating.T he pheno types o f stem cells w ere assay ed by FA CS.Differentiat ion of mesenchy mal stem cells was sho wn by immuno chemistr y after stem cells w ere cultur ed in the presence of A st rag aloside.Results FA CS show ed that co rd blo od -der ived mesenchy mal stem cells expr essed hig h lev els o f CD29,CD44and CD105,but w ere neg ative for CD34and H L A -DR.Astr agaloside (200mg /L)could pr omo te the differ entiation of co rd bloo d -deriv ed mesenchymal stem cells to war d cardio myo cy tes,which was indicated by expression of desmin, -sarcomer ic actin and C -T nT after cultur e.Conclusion A st rag aloside could pro mote the differ entia -t ion of cor d bloo d -derived mesenchymal stem cells to war d cardiomy ocyt es and its therapeut ical po tent ial fo r hea rt disease dis -serv es fur ther study.key words Astr agaloside;mesenchymal stem cell;cardiomy ocytes急性心肌梗塞是严重的心血管疾病,患者部分心肌因严重而持久的缺血发生局部坏死,从而导致心脏功能的严重损害。

Duchenne型肌营养不良临床诊治的系统性研究的
开题报告
一、研究背景
Duchenne型肌营养不良是一种遗传性疾病，主要影响男性。

该疾病常常表现为肌肉无力、萎缩和进行性疲劳。

疾病在青少年时期出现，并导致逐渐进行性的肌肉衰退，生活质量和寿命受到影响。

Duchenne型肌营养不良是由于一个人体内缺乏一种名为“肌肉蛋白质”的基因导致的。

治疗选择包括康复和药物治疗，但无法根治。

二、研究目的
该研究的主要目的是探讨Duchenne型肌营养不良的临床诊断和治疗策略，并为患者提供更好的治疗和康复措施。

该研究的次要目的是研究各种药物以及康复和运动训练对病情的影响，以及确定时机和剂量，从而减缓疾病的发展。

三、研究方法
该研究将采用系统性的方法，通过文献回顾、医学记录、访谈和观察等方式收集、整理和分析数据。

研究将包括从Duchenne型肌营养不良患者的疾病发展至治疗的全过程，包括临床表现、诊断、药物治疗以及康复和运动训练等。

研究将包括对各种药物疗法的剂量、时机、无效性和副作用进行评估，并对各种康复和运动训练进行评估。

四、研究预期结果
该研究预期将得出以下结论：
1：通过探究Duchenne型肌营养不良的临床表现和诊断方法，提高对该疾病的了解和识别。

2：对药物治疗方法进行评估，为个体化治疗提供依据，从而提高临床治疗效果。

3：评估康复和运动训练的效果和副作用，提供更好的临床康复推荐措施。

Duchenne型肌营养不良的干细胞治疗研究进展
徐乾
【期刊名称】《发育医学电子杂志》
【年(卷),期】2016(4)1
【摘要】Duchenne型肌营养不良（duchenne muscular dystrophy,DMD）是我国最常见的X连锁隐性遗传性肌病,临床表现为全身骨骼肌进行性无力、萎缩和小腿腓肠肌假性肥大,随着病情逐渐加重,患者逐渐丧失行走能力,部分病例在青年时期因呼吸循环衰竭而死亡。

【总页数】6页(P52-56,60)
【作者】徐乾
【作者单位】第四军医大学学员旅十三连
【正文语种】中文
【相关文献】
1.Duchenne型肌营养不良症的干细胞治疗 [J], 孙默萱;孙文长
2.自体分选干细胞治疗15例Duchenne型肌营养不良症的临床观察 [J], 王黎明;周建军;白雯;白槟;钟占强;李建军
3.Duchenne型肌营养不良症腺相关病毒介导的微小抗肌萎缩蛋白基因治疗研究进展 [J], 郑卉;张成
4.Duchenne型肌营养不良物理治疗和运动训练方法的研究进展 [J], 李文竹;黄真
5.Duchenne型肌营养不良症治疗研究进展 [J], 史菲菲;刘红彦
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Duchenne肌营养不良的基因治疗Duchenne肌营养不良（Duchenne muscular dystrophy，DMD）是一种致死性的X性连锁隐性遗传病，该病主要影响男性，发病率约为1/3500男婴[1]。

DMD是最严重和最常见的进行性肌营养不良病，通常患者3～5岁发病,主要表现为全身骨骼肌进行性无力、萎缩和小腿腓肠肌假性肥大,血清肌酸磷酸激酶水平很高,随着病情加重,12～13岁前丧失行走能力,20岁左右死于呼吸衰竭或心力衰竭。

该病目前尚无有效的治疗方法，但对本病的探索一直在进行当中，本文主要对本病目前的基因治疗进展进行概述。

人类dystrophin基因定位于Xp21.1区域[2],是目前已知最大的基因，其长度2250kb,占全部基因组长度的0.1％，占X染色体全长的1.5％。

该基因包括79个外显子和78个内涵子（占基因全长的99.4％），其cDNA全长14kb。

Dystrophin蛋白为dystrophin基因编码的蛋白产物，分子量 427 kDa，由3685个氨基酸组成。

该蛋白与β－血影蛋白（β－spectrin）和α－辅肌动蛋白（α－actinin）等骨架蛋白在结构上相似，占细胞骨架蛋白的5％和横纹肌总蛋白的0.002％[3，4]。

Dystrophin蛋白分5个功能区域：（1）N端肌动蛋白结合区：与α-actinin蛋白同源，包含第14～240氨基酸，跨越1～8号外显子，与细胞内的肌动蛋白（F－actin）相连接。

（2）中央棒状区：包含第253～3040氨基酸，跨越9～63号外显子，由24个三螺旋状重复结构组成，每个结构由109个氨基酸组成，与血影蛋白同源。

重复结构被4个富含半胱氨酸的铰链（Hinger,H）结构分隔开。

（3）WW功能区：WW功能区是棒状区与半胱氨酸富集区的重叠部分。

（4）半胱氨酸富集区：第3080～3360氨基酸，跨越64～68号外显子，包含有两个EF手形钙结合基序，可结合钙调蛋白，该区域与抗肌萎缩蛋白聚糖复合体相连。

利用脐带血穿刺标本产前诊断杜氏肌营养不良症1例北京大学人民医院刘国莉*赵耘刘春雨黄振宇张丽江孕妇34岁，妊1产0，籍贯上海，家族中其舅舅、弟弟均患杜氏肌营养不良症（Duchenne muscular dystrophy，DMD），皆于少年期死亡。

本人非近亲结婚，孕18周，要求产前诊断，转入我院。

孕期无特殊，B超提示胎儿与孕周相符、未见异常。

入院后行B超引导下羊膜腔穿刺，诊断胎儿为男性后行胎儿脐带血穿刺，抽取胎儿血化验肌酸磷酸肌酶，并按常规方法提取DNA。

同时取孕妇外周血做DNA检测。

按照Beggs[1]和Chamberlain[2]方法设计了16对引物，包含肌营养不良蛋白（dystrophin）基因启动子（Pm）、外显子3、6、8、13、17、19、43-52（46、51除外）及60易发生基因缺失热点区（引物由北京三博远志生物技术有限公司提供）。

DNA PCR扩增均分两次在2个反应管中进行，分别用9对引物[1]和7对引物[2],前者方法同文献1，后者方法与文献2大体相同，只是将退火温度改为54℃。

取反应液10μl和DNA 大小标记物同时点样于1.4%琼脂糖凝胶中，80V电压电泳1小时。

结果：孕妇外周血和胎儿血结果见表1，显示脐血CPK 523U/L，CK-MB 32U/L，LDH 403 U/L均显著升高，AST轻度异常，孕妇相应酶学亦有轻度改变。

PCR扩增结果如图1示：胎儿外显子47、50、52、45、48、49有基因缺失，孕妇为携带者，相应条带较正常阳性对照的条带有减弱。

向家属交代病情后，要求其终止妊娠，于孕23周行药物引产，娩一男死胎，外观未见明显异常。

*刘国莉，北京大学人民医院主治医师，医学博士；主要研究方向：围产期保健及产前诊断。

通讯地址：北京大学人民医院产科，邮编：100044；E-mail: guoleeliu@.1. DNA Marker2. 阳性对照3. 孕妇 1. DNA Marker 2. 阳性对照3. 孕妇4. 胎儿5. 阴性对照 4. 胎儿 5. 阴性对照图1 多重PCR扩增电泳结果表1：孕妇及胎儿相关肌酶指标测定结果DMD是一种严重致死性X连锁隐性遗传病，发病率为1/3500活男婴，临床表现以肌肉进行性萎缩和无力为特征，患者一般在20岁前死亡。

脐带血有核细胞移植治疗肌萎缩侧索硬化的临床研究赖福生;卢少军;王一芳;焦冬生;李惠俊;江一帆;钱时德【期刊名称】《东南国防医药》【年(卷),期】2010(12)6【摘要】目的观察脐带血有核细胞治疗肌萎缩侧索硬化(ALS)的疗效并探讨机制.方法采集新生儿脐带血,获取含干细胞的有核细胞混悬液,每份平均含有核细胞4.29×108个,通过腰椎穿刺,将其移植入蛛网膜下腔.结果移植后第5天患者单手握力较移植前平均增加1.68 kg;移植后第1个月94.46%患者病情好转;第2个月5.12%持续好转,73.04%保持稳定;第3个月36.06%保持稳定;第4个月18.85%保持稳定;第5个月10.61%保持稳定.结论脐带血有核细胞蛛网膜下腔移植在一定时间内可有效缓解ALs的临床症状.【总页数】4页(P515-518)【作者】赖福生;卢少军;王一芳;焦冬生;李惠俊;江一帆;钱时德【作者单位】210002,江苏南京,解放军454医院神经科;210002,江苏南京,解放军454医院神经科;210002,江苏南京,解放军454医院神经科;210002,江苏南京,解放军454医院神经科;210002,江苏南京,解放军454医院神经科;210002,江苏南京,解放军454医院神经科;210002,江苏南京,解放军454医院神经科【正文语种】中文【中图分类】R591.44【相关文献】1.脐带血间充质干细胞移植联合中药治疗肝硬化的临床研究 [J], 吴洁琼;张伟;史英;杨薪博;唐凤英2.腹膜后自体单个有核细胞移植治疗门静脉高压症的临床研究 [J], 仝现州3.胃转流与自体有核细胞移植治疗2型糖尿病的临床研究 [J], 仝现州4.脐带血干细胞移植治疗非肝炎后肝硬化的临床研究 [J], 杨彦林;王树平;王丽华;刘艳茹;付广印;韩东亮;李华;吴国良;杨占辉5.自体骨髓有核细胞蛛网膜下腔移植治疗运动神经元病的临床研究 [J], 赖福生;易萍;朱浩;王一芳;李翠萍;宫丽莉;赵伯成;唐晓阳;王晓萍;卢少军;许爱刚因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

非典型Duchenne型肌营养不良症1例*导读：本文介绍非典型Duchenne型肌营养不良症1例的简单病历。

……1.简单病历患儿男性,3个月。

因“咳嗽伴喉中痰鸣20d,加重伴气促 3d”入院。

体格检查:T37.4℃,R65次/min,P180次/min,BP80mmHg/45mmHg。

患儿神志清楚,但烦躁不安,浅表淋巴结无肿大,前囟平软,唇周发绀,咽充血,颈无抵抗,颈静脉无怒张。

呼吸急促,轻度三凹征,双肺呼吸音粗,可闻及大量中细湿口罗音。

心率180次/min,心律齐,心音低钝,未闻及杂音及奔马律。

腹膨隆,腹肌紧张,无压痛、反跳痛,肝右肋下2.5cm,质地中等,脾脏无肿大,肠鸣音每分钟4~5次。

末梢毛细血管再充盈时间为2.5s。

左阴囊上部可见1.5cm×2.5cm包块,透光试验呈阳性。

四肢肌力、肌张力正常,双侧膝反射正常,克氏征、布氏征、巴氏征呈阴性。

入院后X射线胸片查示:肺炎;血常规:WBC16.8×109/L,N49.6%,Hb105g/L,PLT380×109/L;血沉18mm/h; 肝、肾功能,血电解质正常;心肌酶:GOT134.2U/L,LDH831.0U/L,CK3265.0U/L,CK-MB227.2U/L;心肌肌钙蛋白0.1mg/L;心电图示:①窦性心动过速;②Ⅰ度房室传导阻滞;③广泛ST-T改变(考虑心肌缺血损害);④QT间期延长。

入院诊断:①急性支气管肺炎;②心力衰竭;③心肌炎。

入院后给予镇静、吸氧、吸痰、强心、利尿、扩血管,营养心肌及积极抗感染等治疗后,无明显好转,且呼吸困难逐渐加重。

入院第2天出现明显发绀,点头呼吸,三凹征明显。

血气分析示:pH值为7.234,PCO2103.4mmHg,PO283mmHg,BE16mmol/L, HCO3-浓度为43.8mmol/L,TCO247mmHg,存在二氧化碳 (CO2)潴留和呼吸性酸中毒,改行气管插管,呼吸机辅助通气。