微生物检验重点知识

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微生物知识要点:

一、葡萄球菌:

1 致病因素:血浆凝固酶;溶血素;杀白细胞素;肠毒素;表皮剥脱毒素;

TSST-1;

耐热核酸酶;葡激酶;透明质酸酶;脂酶。

2 临床意义:疖痈等;内脏感染肺炎、脓胸、中耳炎、脑膜炎、心包炎、心

内膜炎;

全身感染败血症、脓毒血症;(毒素相关)食物中毒;

烫伤样皮肤综合症;毒性休克综合症;假膜性肠炎。

3 鉴定:细菌和菌落形态;生化实验:触+微阳性;链+肠阴性

葡:杆菌肽R,呋喃唑酮S

金黄色葡萄球菌特征:普通平板-脂溶性黄色色素;血琼脂-β溶血;

血浆凝固酶+ ;耐热核酸酶+

甘露醇发酵+

2).如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌?并确定其有无致病性。

答:①直接镜检,经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌,可初步报告疑为葡萄球菌,需进一步分离培养鉴定。②分离培养:血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定,若无细菌生长,需连续观察7天,并以血平板确定有无细菌的生长。脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板,37℃过夜,可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。金葡菌菌落周围有透明溶血环。③试验鉴定:血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,耐热核酸酶试验,肠毒素测定,SPA检测。致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,耐热核酸酶试验阳性,SPA检测有A蛋白的存在。

二、链球菌:

1致病因素:M蛋白;脂磷壁酸;透明质酸酶;链激酶;链道酶;链球菌溶血素;致热外毒素。

2 临床意义:A群:化脓性炎症;猩红热;风湿热;急性肾小球肾炎;II III

肺炎链球菌:大叶性肺炎;中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎、

心内膜炎。

3 鉴定:形态。。培养+血清等,血琼脂-灰白色,半透明或不透明表面光滑

小菌落;肺炎链球菌48h呈脐窝状。

几中链球菌特征:

A群:血平板β溶血; 杆菌肽-敏感

B群:血平板β溶血; 杆菌肽-耐药;CAMP+;胆汗七叶苷(—);马尿酸水解试验(+)

草绿色链球菌:血平板α溶血;optochin耐药;胆汗七叶苷(—);

肺炎链球菌:血平板α溶血;optochin敏感,菊糠分解(+),胆汗溶菌(+),荚膜肿胀实验(+)

三、大肠埃希菌

1致病因素:侵袭力(K抗原和菌毛);内毒素;肠毒素(LT,ST)

2临床意义:肠道外感染(泌尿系统感染为主,腹膜炎,胆道感染,肺炎等;

肠道感染:EHEC、ETEC、EPEC、EIEC、EaggEC 3鉴定:普通平板(湿润、光滑、灰白中等大小菌落)有便毛,有动力,葡萄糖发酵(+),硝酸盐还原(+),氧化酶(—),触酶(+)

中国兰平板(蓝色),伊红美蓝(紫黑色),麦康凯和SS(红色)

四、志贺菌属

1 致病因素:侵袭力(菌毛);内毒素;外毒素(志贺毒素ST,也称Vero)

2 临床意义:1 )急性细菌性痢疾:腹痛腹泻脓血粘液便,里急后重,发

热,便中带血,粘液和WBC;中毒性菌痢多见于小儿,2)慢性细菌性痢疾;3)携带者

3 鉴定:葡萄糖发酵(+),硝酸盐还原(+),氧化酶(—),触酶(--)

接种SS和麦康凯平板,分离出无色、透明的小菌落为可疑志贺菌。血清学鉴定。

5.简述对疑似痢疾患者进行病原学诊断的常规及快速方法。

答:常规鉴定:①初步鉴定②最后鉴别③鉴别试验④血清学鉴定⑤非典型菌株可用传代法及毒力试验进行鉴定。

快速诊断:①直接凝集②免疫荧光菌球法③协同凝集试验④乳胶凝集试验

⑤分子生物学方法

五、沙门菌属

1 致病因素侵袭力(Vi抗原),内毒素,肠毒素。

2 临床意义胃肠炎(食物中毒);菌血症和败血症;肠热症(伤寒副伤寒)

3 鉴定:接种SS和麦康凯平板,分离出无色、透明的小菌落为可疑沙门氏

菌,需进一步生化反应鉴定,

3).如何根据O抗体和H抗体的变化特点判断肥达试验的结果?

答:若O、H凝集效价均超过正常值,则肠热症的可能性大,若两者均低,肠热症的可能性小,若O不高H高,可能预防接种或非特异性回忆反应,若O高H 不高,则可能感染早期或与伤寒沙门菌O抗原有交叉反应的其他沙门菌感染。

4).对肠热症患者进行微生物学检查时标本采集应注意什么?

答:根据不同的疾病、不同的病程取不同的标本。肠热症第1、2周取外周血,第2、3周取粪便、尿液,全程可取骨髓分离培养细菌。

六、铜绿假单胞菌

其生物学特性主要有4℃不生长,而42℃生长。在血琼脂、麦康凯培养基上均可形成5种不同形态的菌落,在普通培养基上可产生多种色素。

鉴定:革兰阴性杆菌,葡萄糖氧化发酵(氧化型),动力阳性,氧化酶(+),

触酶(+),专性需氧,营养要求不高,麦康凯上生物良好,

初始分离培养基特征性菌落(扩展性,平坦,具有锯齿边缘,金属性光泽,产生蓝绿色色素,玉米面气味)42度长,4度不长。

七、嗜血杆菌

简述流感嗜血杆菌的生物学特点.

答:革兰阴性短小球杆菌,无芽胞、无鞭毛、不能运动,多数菌有荚膜。需氧或兼性厌氧最适生长温度35℃,最佳培养基是巧克力琼脂。

临床意义:脑膜炎、鼻咽炎、关节炎、心包炎,鼻窦炎,中耳炎

鉴定:培养特性,5-10% CO2 ,X因子,V因子;血琼脂:卫星现象;巧克力平板,露滴状菌落。

八、霍乱弧菌

霍乱患者为什么会出现剧烈腹泻及严重脱水的症状?

答:霍乱弧菌可产生致泻性极强的霍乱肠毒素,该毒素由1个A亚单位和5个相同的B亚单位组成,B亚单位使毒素分子与真核细胞上的受体结合,A亚单位具有酶活性功能。A亚单位进入细胞后,激活腺苷环化酶,令胞内cAMP水平增高,导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔,同时钠的吸收减少,导致严重的腹泻和呕吐

.

九白喉棒状杆菌

简述白喉棒状杆菌的致病过程。

答:白喉棒状杆菌存在于白喉患者的喉头气管及鼻腔粘膜,有时皮肤、结膜等部位也可见到。传染源为患者及带菌者,细菌多随飞沫或污染的物品传播,感染后白喉棒状杆菌在鼻咽部粘膜处繁殖并产生外毒素,引起局部炎症和全身中毒症状。白喉杆菌在侵犯局部增殖,产生外毒素致病

2.简述白喉杆菌体外毒力试验的原理、方法及结果判断。

答:①琼脂平板毒力试验。将含有20%牛血清肉汤琼脂分注与平皿中,每只平皿10ml,50℃冷却,在凝固之前,将浸有白喉抗毒素血清稀释液的滤纸条沉于琼脂内,制成平板(Elek平板)。在与滤纸条相垂直的方向将待检菌画直线接种,划线宽度约6-7mm,两端与皿壁连接。同时,与之相距10mm处平行划线接种一标准产毒菌株,作为阳性对照。37℃培养24-48小时,若菌苔两侧出现斜向外延伸的乳白色沉淀线,并与其邻近的标准产毒株的沉淀线相吻合,则为产毒株。②SPA 协同凝集试验:将白喉抗毒素IgG先吸附在SPA上,再加入待检菌培养物上清液。若有白喉外毒素,则与SPA-IgG结合出现可见的凝集反应。③对流电泳:将已知的白喉抗毒素和待检菌培养液分置琼脂板两孔之中,电泳30min后,若两孔之间出现白色沉淀线,表明待检菌为产毒株。