呼吸道九联检

呼吸道九联检操作程序呼吸道感染概述一、气管和支气管等咽喉呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、、上呼吸道感染常见的分为上呼吸道感染和下呼吸道感染呼吸系统，。

指鼻腔是急性上呼吸道感染、），tract infectionupper（acute respir 常见病因是呼吸道最常见的一种传染病咽或喉部急性炎症的概称。

，不仅性别职业和地区为病毒少数由细菌引起患者不分年龄。

、，、。

下呼吸道感染是最常见具有较强的传染性而且可引起严重并发症。

，肺炎支气管炎慢性支气管炎的感染性疾患包括急性气管——、，、、军团菌等微生物引衣原体由病毒支气管扩张等细菌支原体、、、，、治疗时必及时治疗的原则起其防治应遵循预防为主准确诊断，，、、须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。

免疫荧光法介绍一、又称荧光抗体免疫荧光技术）technique（Immunofluorescence生物化学是标记免疫技术中发展最早的一种它是在免疫学技术、。

，很早以来就有一些学者和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。

利用抗原抗体反应进行组织或试图将抗体分子与一些示踪物质结合，年首次采用荧光素进行标等于细胞内抗原物质的定位1941。

Coons 这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为记而获得成功。

用荧光抗体示踪荧光抗体技术technique）。

fluorescent（antibody 用已或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；这两知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。

因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合种方法总称免疫荧光技术，，用于检测或定也可以与其他蛋白质结合用于检测或定位各种抗原，，位抗体但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用所以人们习惯称，，为荧光抗体技术或称为免疫荧光技术用免疫荧光技术显示和检查。

，细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞或组织）（化学技术。

荧光免疫法按反应体系及定量方法不同还可进一步分做若干种。

，与放射免疫法相比荧光免疫法无放射性污染并且大多操作简便，，，便于推广该技术的主要特点是特异性强敏感性高速度快主。

呼吸道九联检简要操作规程一采血要求1. 静脉血，指尖血（儿童）2. 拒收溶血标本。

脂血标本不影响检测。

二所需实验仪器和设备1. 荧光显微镜2. 洗盒，湿盒3. 摇床4. 15微升和150微升量程的移液器5. 1000毫升量筒，1000毫升玻璃容器三准备工作：提前30分钟取出试剂盒恢复至室温，同时将试剂②中的成分加入1L蒸馏水，摇匀直至完全融化。

四试验步骤：25ul血清+25 ul PBS溶液↓混匀取混合后的液体30ul↓加150ul吸附剂[⑦]↓混匀，静置1分钟离心4000转10-15分钟↓在载玻片上每孔加15ul上清液↓放入湿盒37度温育60分钟↓用PBS洗液冲洗载玻片后，浸泡在PBS洗液中并放在摇床上摇动10分钟，再用蒸馏水冲洗↓自然晾干或吹干，每孔加入15ul结合物[⑤]↓放入湿盒37度温育30分钟↓用PBS洗液冲洗载玻片，浸泡在PBS洗液中并放在摇床上摇动10分钟，再用蒸馏水冲洗自然晾干或吹干↓加封闭介质盖上盖玻片观察结果注意事项：1，加样时，移液器不要触碰离心管底部的沉淀和九联检包被孔2，实验结束后，九联检片子最好在2-3小时内观察，第二天观察不影响结果判断。

若需保存，需冷冻避光。

3，结果判断第2,5,6,7,8,9包被孔的阳性细胞为荧光均匀分布在包被细胞上，并且为明显的绿色；阳性细胞数占3%以上时，报阳性，其余阴性。

4，PBS常温放置一星期不影响实验结果，但要保证在此期间不被污染5.若实验室没有摇床，洗涤过程中中间换一次PBS，同样能达到洗涤效果，而不需要震摇郑州安图绿科生物有限公司。

一、呼吸道感染概述呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。

分为上呼吸道感染和下呼吸道感染，上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染（acute upper respir tract infection），指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称，是呼吸道最常见的一种传染病。

常见病因为病毒，少数由细菌引起。

患者不分年龄、性别、职业和地区。

不仅具有较强的传染性，而且可引起严重并发症。

下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等，由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。

二、非典型呼吸道病原体已报道的非典型呼吸道病原体有很多，最常见的有嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、Q热立克次体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒等。

嗜肺军团菌嗜肺军团菌(Legionella pneumophila,LP)是一种兼性细胞内致病菌，有鞭毛，革兰氏阴性，军团菌科军团菌属多形态性的短小球杆菌。

其不抗酸，无孢子，无荚膜，类似于杆菌。

不能分解明胶、糖类或是尿素，同时，不可参加酵解反应。

嗜肺军团菌无色，也非自身荧光，氧化酶与过氧化氢酶测试阳性，β-内酰胺酶阳性。

专性需氧，在自然界可长期存活，如在蒸馏水中可存活100d以上，污水中可存活一年，对热和一般消毒剂敏感。

菌落特征为灰白色，有光泽，湿润，圆形，凸起，并有特殊臭味，革兰氏染色不明显，多用镀银法或Giemsa法染色。

广泛分布于天然淡水环境或人工水域中，在阿米巴体内寄生，亦可感染人巨噬细胞，在其胞内繁殖和杀死人巨噬细胞，是引起军团菌病（军团菌肺炎）的重要病原体。

军团菌病在国内外时有爆发流行，中央空调冷凝塔水系统是引起军团菌病的主要传染源，病死率较高。

目前已知军团菌有48个种70多个血清型，其中嗜肺军团菌有15个血清型，血清型-1是引起社区获得性肺炎和院内感染性肺炎的重要病原体。

呼吸道感染病原体IgM九联检非典型肺炎是一组由非典型病原体：如嗜肺军团菌、肺炎支原体、肺炎衣原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒、流感病毒、副流感病毒等引起的肺部炎症，临床表现不一，临床中很难针对特定病原体进行治疗，容易造成患者治疗不当以及抗生素滥用。

呼吸道感染病原体IgM九联检采用间接免疫荧光法检测血清中相关病原体IgM型抗体，对疾病的早期诊断和指导治疗具有重要的意义一、检测内容、方法及检测人群1、检测内容：包括①嗜肺军团菌血清1型②肺炎支原体③Q热立克次体④肺炎衣原体⑤腺病毒⑥呼吸道合胞病毒⑦甲型流感病毒⑧乙型流感病毒⑨副流感病毒1、2和3型3、适用人群：儿童及成人呼吸道感染患者，尤其是呼吸道症状不典型，或长期发热抗生素治疗无效者二、临床意义1、呼吸道感染性疾病的早期快速诊断;2、对病原体的鉴别诊断提供导向性依据3、指导临床合理用药三、标本采集1、空腹静脉采血3ml（普通不抗凝管）2、严格无菌操作四、结果报告及意义1、结果报告：以阴性（—）/ 阳性（+）表示2、结果意义①嗜肺军团菌血清1型：是社区获得性肺炎的重要致病菌，最常见的是嗜肺军团菌血清1型，感染者常伴随有全身症状。

在血清学诊断中，间接免疫荧光法（IFA）是唯一的标准技术。

军团菌肺炎潜伏期为2~10天，IgM抗体在感染后1周左右出现，并可持续存在3~6个月。

②肺炎支原体：肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮内潜伏，部分患者无明显症状；但大部分患者为显性感染。

在3岁以下儿童以上呼吸道感染多见，成人以肺炎表现为主。

肺炎支原体肺炎潜伏期14~21天，起病缓慢，IgM抗体一般在感染后1周出现, 3～4周达高峰, 可持续存在3~6个月。

③Q热立克次体：Q热是由Q热立克次体引起的全身疾病，会造成发热、非典型性肺炎、肝炎或心内膜炎。

IFA检测是最灵敏和最具指示性的血清学诊断方法。

急性感染Q热立克次体的潜伏期为2～38天，通常为12～19天，IgM抗体一般在感染后2周左右出现，4～8周达高峰, 可持续存在3~4个月。

呼吸道感染时你做了呼吸九联检吗？呼吸道感染又称呼吸系统感染，是我们普通人最常遇到的一种疾病，其主要临床表现为：如发热、咳嗽、咳痰、呼吸困难等。

其实在很久以前的欧洲，大家也并不知道真实原因，主流医学都以为是瘴气所致，直到1856年法国微生物学家路易斯·巴斯德(1821—1895)才初窥了微生物的秘密，从此逐渐发现了诸如呼吸道感染的根本原因。

呼吸道感染的罪魁祸首就是病原体入侵了我们人体的鼻腔到咽喉部（上呼吸道感染）、气管和支气管等呼吸系统（下呼吸道感染）。

上呼吸道感染（普通感冒）,在呼吸道感染中比例最大，具有较强的传染病，多数病因是由病毒引起,少数则是细菌引起。

不管患者的年龄、性别、所从事的工作和所在的地区，都有极强的传染能力,而患者个体免疫能力的不同还可能引起严重的并发症，当然患者可以自愈的，一般5-7天就可以康复。

下呼吸道感染指急性气管到支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等,由支原体、衣原体、细菌、病毒、军团菌、立克次体等微生物所引起,防治原则为预防为主、正确诊断、及时治疗。

为了对抗这些引起呼吸道感染的小小微生物，我们就需要找出凶手究竟是哪种病原体，这样我们才能更好地选择合适的抗生素对症下药。

就需要做检测，做什么检测--呼吸九联检。

呼吸九联检检测的是什么？以下我们来依次介绍下它们。

1、嗜肺军团菌中的嗜肺军团菌血清1型是感染率最高的,可以导致非典型性肺炎，概率是10%，全身症状较重。

嗜肺军团菌入侵人体到有症状时间一般是2-10天,lgM抗体的产生是嗜肺军团菌入侵后1周后出现的，在3-6个月时依然存在。

2、肺炎支原体在儿童和青少年中最为常见是肺炎支原体所导致的肺炎,呼吸道黏膜上皮是肺炎支原体的埋伏,有些人感染无明显症状，部分人全身症状较重，肺炎支原体在入侵人体到有症状的时间为4-21天,发病较慢,1gM抗体的产生在1周的时候出现，在3-4周浓度最高, 在3-6个月时依然存在。

3、立克次体侵入我们人体后可能会引起全身症状，会导致头疼、高热、非典型性肺炎、心肌炎。

呼吸道九联检结果判断标准
观察结果时，先在10倍镜下对载玻片进行观察，找到视野后再换至40倍镜下观察结果。

建议先观察第十孔（质控孔），这样有利于判断本底（减少杂质荧光的干扰或者病人自身抗体的干扰），其余各孔的观察顺序可以根据自己的习惯进行调整。

400倍镜下，九联检各孔的阳性判断标准如下：
第1、3、4孔：形态符合标准；亮度明亮；数量上均匀布满整个视野，400倍镜下每个视野内荧光个数超过70个
附注：1孔：形态为典型的杆状，3孔：形态为典型的球杆状，4孔位典型的球状。

详见下图：
图表1嗜肺军团菌（1孔）图表2立克次体（3孔）
图表3肺炎衣原体（4孔）
第2孔：国外显微镜下：荧光形态符合标准，亮度明亮，荧光细胞比例超过50%；国内显微镜：荧光形态符合标准，亮度可以，荧光细胞比例超过10% 附注：荧光形态为胞围荧光模式
图表4肺炎支原体（2孔）
第5、6、7、8、9孔：国外荧光显微镜：荧光形态符合标准，亮度明亮，荧光细胞比例超过3%即400倍镜下，每个视野中约5个阳性细胞；国内荧光显微镜下：荧光形态符合标准，亮度较亮，荧光比例超过1%，即400倍镜下，每个视野中约2-3个阳性细胞
附注：荧光形态为胞核、胞浆或胞膜混合荧光模式
图表5腺病毒（5孔）图表6呼吸道合胞病毒（6孔）
图表7甲型流感病毒（7孔）图表8乙型流感病毒（8孔）
图表9副流感病毒（9孔）
第10孔、质控孔：正常情况下为一些红色的细胞
图表10质控（第十孔）。

关于开展呼吸道病原体九联检的通知为满足临床要求，给临床和病患提供更好的检验服务，检验科开展了呼吸道九项病原体的检测，在免疫项目中开呼吸道九联检（收费375元）即可，医保项目，抽血当日即可出报告。

抽血：血清2-3ml（红盖试管）。

呼吸道九项病原体的临床意义采用西班牙VIRCELL公司生产的间接免疫荧光法检测试剂，同时检测人血清中呼吸道感染主要病原体的IgM抗体，可检测的病原体包含：1、嗜肺军团菌 2、肺炎支原体 3、Q热立克次体 4、肺炎衣原体 5、腺病毒 6、呼吸道合包病毒 7、甲型流感病毒 8、乙型流感病毒 9、副流感病毒1、2、3型。

1、嗜肺军团菌人最易感染的是嗜肺军团菌血清I型，非典型性肺炎常伴随有全身症状，10%的肺炎是由嗜肺军团菌血清I型引起的。

在血清学诊断中，间接免疫荧光法是唯一的标准技术。

临床上军团菌感染主要有两种表现形：肺炎型和庞蒂亚克热型。

前驱症状：乏力、头痛、全身肌肉酸痛，于1～2日内突然发热，可达40℃以上，多呈稽留热。

病程早期即可出现多系统受累症状，为本病的突出特点。

绝大多数患者有咳嗽，起初为干咳，半数患者转成非脓性粘稠痰或略带脓性痰，痰中常含少量血丝，个别可咯血。

少数患者有胸痛，呼吸困难较为多见。

肺部可闻及细湿罗音。

继之可出现明显肺实变体征。

约25%有恶心、呕吐及腹泻等消化道症状，有的腹泻为唯一首发症状。

神经症状多见于极期，有时非常突出，包括不同程度意识障碍、肌张力增强或阵颤、步态不稳等，可有暂时性肢体软瘫; 个别可有腹泻、清水样便。

或者失眠、眩晕、记忆力减退、意识朦胧、项强、震颤等神经系统表现.2、肺炎支原体肺炎支原体引起的肺炎在儿童和青少年中最为常见，肺炎支原体可在呼吸道黏膜上皮潜伏，部分患者无明显症状；但大部分患者为显性感染。

3岁以下儿童以上呼吸道感染多见，成人以肺炎表现为主。

发病初期有咽痛、头痛、发热、乏力、肌肉酸痛、食欲减退、恶心、呕吐等症状。

发热一般为中等热度，2~3天后出现明显的呼吸道症状，突出表现为阵发性刺激性咳嗽，以夜间为重，咳少量黏痰或黏液脓性痰，有时痰中带血，也可有呼吸困难、胸痛。

重 庆 医 科 大 学本科生毕业论文论文题目 呼吸道感染病原体IgM 九联检作者姓名论文答辩年月 2015年6月2015 年 6 月指导教师姓名（职称、单位名称）副主任检验师新疆乌鲁木齐自治区人民医院目录中文摘要 (2)Abstract (3)论文正文 (4)前言 (4)1 材料与方法 (5)1.1 实验对象 (5)1.2 实验原理 (5)1.3 实验过程 (6)1.3.1 实验用品 (6)1.3.2 操作过程 (6)2 结果判断 (7)2.1 有效性判断 (7)2.2 样本结果判断 (8)3 实验统计 (8)4 结论 (10)讨论 (10)参考文献 (11)开题报告 (13)致谢 (14)呼吸道感染病原体IgM九联检摘要目的了解呼吸道感染病原体IgM九联检对疑似呼吸道患者的确诊意义，及联检这种检测方式对临床产生的筛查与指导意义。

方法收集所处医院2014年7月到2015年5月在医院门诊、病房诊断为呼吸道感染的患者标本，采用间接免疫荧光法，测定患者血清中上述九种病原特异性IgM抗体。

采用EXECL2003和SPSS13.0软件，分析九种病原体感染在小儿呼吸道感染者中的年龄分布情况以及感染发生的季节特点。

并简单的对其成人与儿童的感染情况做个对比，以观察儿童与成人之间的感染是否有关联或是相似。

结果呼吸道感染患儿中，九种病原特异性IgM抗体总阳性率为26.97%（328/1216），肺炎支原体为18.26%（222/1216），沙眼衣原体为0.16%（2/1216），呼吸道合胞病毒为1.40%（17/1216），腺病毒为0.33%（4/1216），甲型流感病毒为0.25%（3/1216），乙型流感病毒为4.28%（52/1216），副流感病毒1型、2型和3型为0.66%（8/1216），Q热立克次体为0.33%（4/1216），嗜肺军团菌为1.32%（16/1216）。

肺炎支原体IgM 抗体阳性率明显高于其它病原体（2x=1527.967, P<0.01）。

呼吸道九联检操作程序一、呼吸道感染概述呼吸道感染是指病原体感染人体的鼻腔、咽喉、气管和支气管等呼吸系统。

分为上呼吸道感染和下呼吸道感染，上呼吸道感染常见的是急性上呼吸道感染〔acute upper respir tract infection〕，指鼻腔、咽或喉部急性炎症的概称，是呼吸道最常见的一种传染病。

常见病因为病毒，少数由细菌引起。

患者不分年龄、性别、职业和地区。

不仅具有较强的传染性，而且可引起严重并发症。

下呼吸道感染是最常见的感染性疾患，包括急性气管——支气管炎、慢性支气管炎、肺炎、支气管扩张等，由病毒、细菌、支原体、衣原体、军团菌等微生物引起，其防治应遵循预防为主、准确诊断、及时治疗的原则，治疗时必须明确引起感染的病原体以选择有效的抗生素。

二、免疫荧光法介绍免疫荧光技术〔Immunofluorescence technique 〕又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。

它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。

很早以来就有一些学者试图将抗体分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。

Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。

这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术〔fluorescent antibody technique〕。

用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法；用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。

这两种方法总称免疫荧光技术，因为荧光色素不但能与抗体球蛋白结合，用于检测或定位各种抗原，也可以与其他蛋白质结合，用于检测或定位抗体，但是在实际工作中荧光抗原技术很少应用，所以人们习惯称为荧光抗体技术，或称为免疫荧光技术。

用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞〔或组织〕化学技术。

荧光免疫法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做假设干种。

呼吸道九联检对多种呼吸道疾病的临床检测意义及分析【摘要】目的：本论文旨在通过深入研究呼吸道九联检在多种呼吸道疾病的临床检测中的应用，总结其在早期诊断和治疗方面的重要意义。

以促进呼吸道疾病的精确诊断和个体化治疗，为临床医疗提供科学依据。

方法：选取我院于2023年8月至2023年9月收治的40例不通呼吸道疾病患者，随机将其分为两组，其中20个病例作为实验组，20个病例作为对照组。

实验组采用九联检包括多种生化标志物和分子检测，以评估呼吸道疾病的特异性指标，对照组采用传统检测方法，包括CT扫描、支气管镜检查等。

记录患者的基本特征和临床资料，收集并比较两组患者的早期诊断率、诊断准确性、治疗效果等。

并进行统计学分析。

结果：统计分析结果显示实验组在早期诊断率、诊断准确性、治疗效果等方面优于对照组（P<0.05）。

结论：呼吸道九联检在多种呼吸道疾病的诊断中表现出显著的潜力。

与传统检测方法相比，九联检能够提供更早期的诊断信息，并具有更高的准确性。

不同呼吸道疾病中的检测结果差异显著，有助于精确分类和分级，从而为个体化治疗提供了有力支持。

【关键词】呼吸道九联检；多种呼吸道疾病；临床检测；早期诊断；治疗。

呼吸道九联检是一种综合性的呼吸道检测方法，包括九个不同的检测项目，用于评估呼吸系统的健康状态和检测与呼吸道相关的多种疾病。

这些项目包括检测各种呼吸道感染的抗体水平，如腺病毒、A型和B型流感病毒、肺炎衣原体、柯萨奇B组病毒、埃博拉病毒、人副流感病毒、肺炎支原体以及人呼吸道合胞病毒[3]。

这种综合性的检测方法旨在提供更全面的诊断信息，有助于医生更好地了解呼吸道感染的种类和程度，从而更精确地制定治疗方案和提供临床建议。

呼吸道九联检有望在早期诊断和流行病调查等领域发挥重要作用，提高呼吸道疾病的管理水平和治疗效果[1]。

多种呼吸道疾病在全球范围内广泛流行，对个体和社会产生深远影响。

流感每年引发大规模的季节性流行，导致医疗资源的集中使用、工作缺勤和生产力损失。