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苏州市立医院本部关于荧光定量PCR等询价采购公告(2020)

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上海市松江区中心医院_企业报告(业主版)

上海市松江区中心医院_企业报告(业主版)
1.3 项目规模
1.3.1 规模结构 近 1 年上海市松江区中心医院的项目规模主要分布于 10-100 万区间，占项目总数的 46.4%。500 万 以上大额项目 3 个。 近 1 年(2022-03~2023-02)：
本报告于 2023 年 02 月 07 日 生成
2/20
1.4 行业分布
近 1 年上海市松江区中心医院的招标采购项目较为主要分布于医疗设备 机械设备 运行维护服务行业， 项目数量分别达到 8 个、7 个、4 个。其中餐饮业 医疗设备 专用设备修理项目金额较高，分别达到 1724.00 万元、1391.80 万元、905.50 万元。 近 1 年(2022-03~2023-02)：
目录
企业基本信息 .................................................................................................................................1 一、采购需求 .................................................................................................................................1
1.1 总体指标 ...........................................................................................................................1 1.2 需求趋势 ...........................................................................................................................1 1.3 项目规模 ...........................................................................................................................2 1.4 行业分布 ...........................................................................................................................3 二、采购效率 .................................................................................................................................7 2.1 节支率分析 .......................................................................................................................7 2.2 项目节支率列表 ................................................................................................................7 三、采购供应商 .............................................................................................................................9 3.1 主要供应商分析 ................................................................................................................9 3.2 主要供应商项目 ..............................................................................................................10 四、采购代理机构........................................................................................................................11 4.1 主要代理机构分析 ..........................................................................................................11 4.2 主要代理机构项目 ..........................................................................................................12 五、信用风险 ...............................................................................................................................14 附录 .............................................................................................................................................14

泰兴市城东高新技术产业园区管理委员会_企业报告(业主版)

泰兴市城东高新技术产业园区管理委员会_企业报告(业主版)

TOP2
高新区科新中路项目高新区科新 泰州市市政工程有
中路项目施工中标结果公告
限公司
252.8
2022-04-25
TOP3
【泰兴市】中浦项目临时围墙工 泰州市环诚建设有
程结果公告
限公司
44.6
2022-12-15
TOP4
【泰兴市】十里甸公墓改造工程 江苏鼎豪建设工程
结果公告
有限公司
6.3
2023-01-06
目录
企业基本信息 .................................................................................................................................1 一、采购需求 .................................................................................................................................1
（4）架线和管道工程建筑（1）
重点项目
项目名称
中标单位
中标金额（万元） 公告时间
TOP1
【泰兴市】文昌东路污水管网抢 泰州市环诚建设有
修工程结果公告
限公司
38.1
2023-01-12
*按近 1 年项目金额排序，最多展示前 10 记录。
（5）其他专业咨询与调查（1）
本报告于 2023 年 02 月 14 日 生成
工程结果公告
限公司
4.6
2023-01-12
*按近 1 年项目金额排序，最多展示前 10 记录。

成都建工集团有限公司_企业报告(业主版)

成都建工集团有限公司_企业报告(业主版)

本报告于 2023 年 08 月 09 日 生成
2/30
1.4 行业分布
近 1 年成都建工集团有限公司的招标采购项目较为主要分布于其他建筑建材 非金属矿物材料 黑色 金属冶炼及压延产品行业，项目数量分别达到 162 个、96 个、71 个。其中工程技术与设计服务 其 他建筑建材 住宅、商业用房项目金额较高，分别达到 69563.54 万元、7147.47 万元、6897.49 万元。 近 1 年(2022-09~2023-08)：
1.1 总体指标 ........................................................................................................................................1 1.2 需求趋势 ........................................................................................................................................1 1.3 项目规模 ........................................................................................................................................2 1.4 行业分布 ........................................................................................................................................3 二、采购效率 ............................................................................................................................................11 2.1 节支率分析 ..................................................................................................................................11 2.2 项目节支率列表 ..........................................................................................................................12 三、采购供应商 ........................................................................................................................................13 3.1 主要供应商分析 ..........................................................................................................................13 3.2 主要供应商项目 ..........................................................................................................................14 四、采购代理机构 ....................................................................................................................................17 4.1 主要代理机构分析 ......................................................................................................................17 4.2 主要代理机构项目 ......................................................................................................................18 五、信用风险 ............................................................................................................................................20 附录 ............................................................................................................................................................24

实时荧光定量PCR (2)

实时荧光定量PCR (2)

PCR方法：
每管加入DDW 8.5ul反转录产物2ul，引物各1ul，2XTaq Mix 12.5ul，每管中加入10ul石蜡油，放入PCR仪。运行 程序94℃变性3分钟，然后进入循环；94℃ 30秒，50℃ 30 秒；72℃ 1分钟，共30个循环。
植物病毒的RT-PCR试验 四、注意事项：
反转录： 1.操作者要戴口罩； 2. 尽量避免空气流动； 3.快速操作，避免造成RNA降解。 PCR： 1.加样要准确，不同试剂要换枪头，避免污染； 2.退火温度要根据引物的退火温度设定，变性以 及延伸时间，要根据片段大小确定； 3.反应结束时，最后一步设置10℃ forever；
植物病毒RNA的提取试验 四、注意事项：
1．前两步中不要剧烈震荡：氯仿对蛋白有变性作用，剧烈的 震荡，很容易使得DNA的亲水基团，与水相接触，从而使 DNA污染RNA； 2．RNA提取的操作过程要在冰上进行； 3. 操作者要戴口罩； 4. 尽量避免空气流动。 5. 提取用所有枪头与离心管都要进行无RNA酶处理。
时即可用于蚜虫繁殖。 b.无毒蚜虫繁殖：将无毒蚜虫用毛笔转接到已准备好的生长 旺盛的健康小麦上，平均每株小麦转接5-15头。转接后将小麦 置于20℃饲毒72h，使其充分带毒。
大麦黄矮病毒的蚜虫传毒试验
三、实验方法：
3.传毒 将带毒蚜虫用毛笔转接到长至两叶期的健康小麦上取食，然
植物病毒的RT-PCR试验 三、仪器和试剂：
水浴锅或金属浴、PCR仪、小型低速离心机等。 反转录酶、dNTPs、引物、DEPC处理水等。
植物病毒的RT-PCR试验 四、实验方法：
反转录方法：
1. 取2 µ L 病毒RNA溶液，分别加入0.5 µ L 下游引物，2.5 µ L DEPC处理水，充分混匀。 2. 70℃处理5min，冰置5min。 3. 加入2 .5µ L 5X M-MLV buffer，1.75 µ L DEPC处理水，2 .5µ L 10 mM dNTPs ，加入0.25 µ L RNase，0.5µ L M-MLV 酶。 4. 42℃反应1h，70℃ 5min，即得cDNA。

实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测NG、UU和CT及MG结果分析

实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测NG、UU和CT及MG结果分析

实用妇科内分泌杂志Journal Of Practical Gynecologic Endocrinology1102017 年8月C 第4卷/第24期Aug.C 2017 V ol.4 No.24实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测NG、UU和CT及MG结果分析李美珠，杨洁飞，李启欣（佛山市第一人民医院，广东佛山 528000）【摘要】目的 RNA恒温扩增实时荧光定量PCR（RT-PCR）检测淋病奈瑟菌（NG）、解脲脲原体（UU）、沙眼衣原体（CT）及生殖支原体（MG）结果。

方法选择我院2016年6月至2017年7月拟诊为泌尿生殖道感染患者的宫颈或者尿道分泌物标本426例，选择培养法对UU、MG及NG病原体进行检测，选择胶体金免疫层析法来对CT抗原进行检测，同时选择RT-PCR来对NG、UU、 MG和CT的核酸进行检测。

结果在病原体检出阳性率方面，RT-PCR检测显著高于金标法或者培养法检测，差异有统计学意义（P＜0.05）。

结论在对NG、UU、 MG和CT感染进行检查诊断，采用RT-PCR检测NG、UU、MG和CT具有非常重要的作用，能对常规方法进行有效补充，值得临床推广和应用。

【关键词】荧光定量PCR；淋病奈瑟菌；解脲脲原体；沙眼衣原体；生殖支原体【中图分类号】R695 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8803.2017.24.110.02非淋菌性尿道炎和淋病是临床中发生率较高的性传播疾病，会引起女性盆腔炎、宫体炎、不孕、宫颈炎、输卵管炎和男性前列腺炎、附睾炎、尿道炎等，除此之外还可能引起女性早产、流产和宫颈癌等，会严重危害患者的生命健康和安全[1]。

泌尿生殖道感染的病原体主要为淋病奈瑟菌（NG）、解脲脲原体（UU）、沙眼衣原体（CT），生殖支原体（MG），而病原体常常表现为共同感染状态。

在临床表现方面，非淋菌性尿道炎和慢性淋病比较类似，临床中常常不能有效明确诊断。

在实际的临床诊断中，传统实验室检测方法存在一定的不足之处，在现代医学技术快速发展和进步的过程中，RT-PCR在临床中的应用也越来越广泛，该方法具有自动化、定量、快速、特异、敏感等特点[2]。

QRT-PCR(荧光定量PCR)

QRT-PCR(荧光定量PCR)
内参的选择：普通PCR内参的大小没有多大要求， 但real time一般选择300bp以下。
它的作用在于你提取的RNA逆转录成cDNA时， 加入的浓度可能会不一致，即使用分光广度计测其 浓度，也会有仪器误差，跑出的条带要进行灰度分 析。用目的基因的积分光密度比上内参的光密度就 是你这个基因实际表达的量。
加入体积 (μL)
2.5 2.5 4 -6 0.5 - 1 0.3 – 0.5 0.3 5 μL 补足 25 μL
为了定量和比较的方便，在实时荧光定量 PCR 技 术中引入了几个重要的概念：
• 基线（Baseline）：是指在PCR扩增反应的最初 数个循环里，荧光信号变化不大。接近一条直线， 这样的直线即是基线。
实时定量PCR (real-time quantitative PCR)
报告人：杨霞 时间：2012-5-11
目录
一、实验原理 二、实验优点 三、实验缺点 四、实验应用 五、实验简介
一、实验原理
• 实时定量PCR (real-time quantitative PCR)是指在PCR指 数扩增期间通过连续监测荧光信号强弱的变化来即时测定 特异性产物的量，并据此推断目的基因的初始量，不需要 取出PCR产物进行分离。
• 反应要求：荧光定量对扩增片段有较高的要求，一般为 100-300bp；普通定量可以扩增长的片段。如果不需要检 测产物分子量大小，荧光定量可以不进行电泳就对产物进 行定量分析，普通pcr必须电泳。
• 结果：荧光定量可以实现精确定量，普通pcr则不行。荧 光定量体现可以看到整个扩增过程，可以看到扩增效率， 溶解温度，直接得到的标准曲线等，这些是普通pcr无法 实现的。
一个循环，收集一个荧光强度信号，这样我们就
可以通过荧光强度变化监测产物量的变化，从而 得到一条荧光扩增曲线图 ( 如下图) 。

《中国药典》2020版—禽源性病毒荧光定量 PCR(Q-PCR)检查法

禽源性病毒荧光定量PCR（Q-PCR）检查法本法适用于禽源性生物制品的检测，包括流感全病毒灭活疫苗、流感病毒裂解疫苗种子批毒种的外源性禽病毒检测。

本法用提取的供试品RNA，反转录成cDNA后，或用提取的供试品DNA，针对3种外源性禽病毒设计特异性引物探针，进行荧光定量PCR 检测特异性扩增信号，从而测定供试品中外源性禽源病毒核酸序列，以检查供试品的外源性禽病毒污染。

要求检测的 3 种禽源性病毒：（1）禽腺病毒I 型（DNA 病毒）（2）禽腺病毒III 型（DNA 病毒）（3）外源性禽白血病病毒（逆转录病毒）试剂（1）RNA/DNA 提取试剂：RNA/DNA 的提取可使用酚-氯仿法、磁珠法、离心柱法等。

提取试剂中应含裂解液、洗涤液、洗脱液等，按试剂说明书要求配制。

（2）反转录试剂：含逆转录酶、RNA 酶抑制剂、dNTP 混合液、随机引物、逆转录反应缓冲液等，按试剂说明书要求配制。

（3）引物序列、探针序列见表1。

表 1 引物序列及探针序列（4）扩增缓冲液每20µl 反应体系中，含有上下游引物各5µmol，探针2.5µmol及适量荧光定量PCR混合液（Mix）。

（5）质粒标准品稀释液为DNA 稀释缓冲液或无RNA 酶水稀释。

（6）对照溶液以失活后无感染性的禽源性病毒为阳性对照。

以无RNA 酶水作为阴性对照。

提取核酸和逆转录步骤同（1），置-70℃保存备用。

（7）质粒标准品溶液及灵敏度供试品的制备选择病毒目的核酸序列，人工合成DNA，目的序列转入pMD19-T 质粒中，作为质粒标准品。

测定质粒标准品的DNA 核酸浓度后，对其进行10 倍稀释，从109Copies/µl 稀释至100Copies/µl。

取107Copies/µl～103Copies/µl 质粒标准品溶液作标准曲线各点。

101Copies/µl 稀释度作为灵敏度对照。

2023年全国临床检验质量指标初步质量规范。

2023年全国临床检验质量指标初步质量规范备注：2023年全国临床检验质量指标初步质量规范的建立是基于2022年全国多省临床检验中心同步开展临床检验质量指标室间质评结果，其中最低质量规范基于第25百分位数（或第75百分位数），适当质量规范基于第50百分位数，最佳质量规范基于第75百分位数（或第25百分位数）质量指标初步质量规范三级医院二级医院最低适当最佳最低适当最佳率(%)σ率(%)σ率(%)σ率(%)σ率(%)σ率(%)σ血标本类型错误率0.0187 5.10.0052 5.40.0009 5.80.0236 5.00.0031 5.50 6.0体液标本类型错误率0.0385 4.90.0055 5.40 6.00.0207 5.00 6.00 6.0其他标本类型错误率0.0283 4.90 6.00 6.00 6.00 6.00 6.0标本类型错误率0.0236 5.00.0078 5.30.0017 5.60.0268 5.00.0046 5.40 6.0血标本容器错误率0.0152 5.10.0057 5.40.0013 5.70.0168 5.10.0034 5.50 6.0体液标本容器错误率0.0287 4.90.0049 5.40 6.00.0229 5.00 6.00 6.0其他标本容器错误率0.0120 5.20 6.00 6.00 6.00 6.00 6.0标本容器错误率0.0177 5.10.0068 5.30.0019 5.60.0210 5.00.0043 5.40 6.0血标本采集量错误率0.0319 4.90.0128 5.20.0038 5.50.0369 4.90.0096 5.20 6.0体液标本采集量错误率0.0506 4.80.0079 5.30 6.00.0379 4.90 6.00 6.0其他标本采集量错误率0.0075 5.30 6.00 6.00 6.00 6.00 6.0标本采集量错误率0.0367 4.90.0147 5.10.0046 5.40.0414 4.80.0107 5.20 6.0抗凝血标本凝集率0.1344 4.50.0584 4.70.0192 5.10.0970 4.60.0317 4.90.0049 5.4抗凝体液标本凝集率0.5526 4.00 6.00 6.00.8230 3.90 6.00 6.0抗凝其他标本凝集率 1.7808 3.60 6.00 6.00.8262 3.90 6.00 6.0抗凝标本凝集率0.1356 4.50.0582 4.70.0191 5.10.0972 4.60.0314 4.90.0043 5.4标本溶血率0.0315 4.90.0104 5.20.0023 5.60.0482 4.80.0121 5.20.0002 6.0标本溶血率’0.0404 4.80.0139 5.10.0031 5.50.0613 4.70.0158 5.10.0007 5.8血标本丢失率0 6.00 6.00 6.00 6.00 6.00 6.0体液标本丢失率0 6.00 6.00 6.00 6.00 6.00 6.0其他标本丢失率0 6.00 6.00 6.00 6.00 6.00 6.0标本丢失率0 6.00 6.00 6.00 6.00 6.00 6.0检验报告不正确率0.0142 5.10.0004 6.00 6.00.0144 5.10 6.00 6.0危急值通报率100 6.0100 6.0100 6.0100 6.0100 6.0100 6.0危急值通报及时率99.8673 4.5100 6.0100 6.0100 6.0100 6.0100 6.0血培养污染率 1.1980 3.80.5348 4.10.0846 4.60.8333 3.90.1389 4.50 6.0室内质控项目开展率50.8065 1.571.4286 2.188.9610 2.738.9408 1.257.4803 1.779.5082 2.3室内质控项目CV不合格率 4.2254 3.20.4695 4.10 6.07.6923 2.9 1.1205 3.80 6.0室间质评项目参加率87.6404 2.798.6301 3.7100 6.078.1250 2.3100 6.0100 6.0室间质评项目不合格率 2.5641 3.40.6135 4.00 6.0 4.2373 3.20.7092 4.00 6.0实验室间比对率 1.8692010.60610.333.3333 1.100 3.7594020.00000.7国家级室间质评项目参加率86.1789 2.698.6755 3.7100 6.0 5.00000100 6.0100 6.0国家级室间质评项目不合格率 3.0303 3.4 1.0363 3.80 6.0 1.2821 3.70 6.00 6.0省级室间质评项目参加率94.1520 3.1100 6.0100 6.092.3077 2.9100 6.0100 6.0省级室间质评项目不合格率 1.9608 3.60 6.00 6.0 4.6875 3.2 1.2658 3.70 6.0质量指标初步质量规范（周转时间（分钟））三级医院二级医院最低适当最佳最低适当最佳急诊检验前周转时间中位数生化312315301810自动化免疫342515302010三大常规302011261510凝血302215301510常规（住院）检验前周转时间中位数生化906041604830自动化免疫926041605030三大常规815733603830凝血805735604030急诊实验室内周转时间中位数生化604734604730自动化免疫896045706035三大常规261813302015凝血463529403028常规（住院）实验室内周转时间中位数生化1241007312011560自动化免疫1891319818012081三大常规593627603030凝血906045816039。

实时荧光定量PCR

实时荧光定量PCR目前实时荧光定量PCR已得到广泛应用，如：扩增特异性分析、基因定量分析、基因分型、SNP分析等......荧光定量PCR最常用的方法是DNA结合染料SYBR Green I 的非特异性方法和Taqman水解探针的特异性方法SYBR Green I 的非特异性方法(试剂盒：LightCycler 480 SYBR Green I Master）SYBR Green I是一种结合于所有dsDNA双螺旋小沟区域的具有绿色激发波长的染料。

在游离状态下，SYBR Green I发出微弱的荧光，但一旦与双链DNA结合后，荧光大大增强。

因此，SYBR Green I的荧光信号强度与双链DNA的数量相关，可以根据荧光信号检测出PCR 体系存在的双链DNA数量。

一、实验前准备：实验试剂及耗材：试剂：特异性PCR引物，新鲜提取备用的总RNA试剂盒:Transcriptor First Strand cDNA Synthesis Kit、LightCycler 480 SYBR Green I Master1号管包含：热启动Taq DNA Polymerase、反应缓冲液、dNTP mix、SYBR Green I染料、MgCI2仪器及耗材：罗氏LightCycler 480全自动实时定量PCR仪以及配套使用的48或96孔板；Thermo Scientific Arktik PCR仪、F1单道移液器、冰盒、QSP盒装吸头等正式实验开始前，冰上解冻各个试剂【注意：SYBR Green I Master 需要避光放置】二、反转录实验操作时注意：所有RNA相关的操作均需要佩戴手套，防止RNase污染。

严格按照试剂盒使用说明进行相关操作。

按照体系配方在冰上的Rnasefree的灭菌PCR管中配置Templateprimer mix，总体系13ul。

本实验是联合使用anchored oligo dT引物和随机六聚体引物进行的反转录。

荧光定量PCR技术(李金明)


扩增效率的计算
扩增效率的计算(2)


如果取的样本不连续，则可使用下述将公 式（2）重排后得到的更为通用的公式，用 参数j（取样中间隔的周期数）替代n，Yj （在较高循环周期数取样的产物量）替代 Yn，Yi-j（在较低循环周期数取样的产物量） 替代X： E＝－1＋（Yi/Yi-j）1/j (3)
为什么要做定量测定？
定性和定量测定结果报告上的混淆。
为什么要做定量测定？

用于已知病毒感染患者抗病毒治疗效 果的动态观察及抗病毒药物的临床研 究；

用于基因表达方面的研究，如特定的 mRNA的定量测定。
定量测定的结果报告


定量测定测定的是量的“多”或“少”； 定性测定则是测定某种物质的“有”或 “无”，用于未知病人的确认诊断。 定量测定结果报告：根据所使用的测定方 法的测定范围报告结果，如样本测定结果 高出此范围，则可报告>多少，也可对样本 稀释后再检测；如低于此范围，则报告<多 少，如<103拷贝数/ml，而不能报告为0拷贝 数/ml或阴性。

用外标准的定量PCR方法
使用外标的定量PCR方法的优缺点



优点：（1）方法简便，容易建立；（2）使用双 孔重复测定，这种方法可得到非常准确的结果， 甚至可排除管间的差异，但不能排除样本间的差 异； 缺点：（1）PCR反应体系中小的区别也会对测定 造成较大的影响。由于最后在扩增效率上的差异， 从而使得定量测定精密度和重复性不佳。 因此，如果建立一个使用外标准的PCR定量方法， 则必须进行方法的精密度（批内变异）和重复性 （批间变异）分析，以确定其应用的局限性。
定量聚合酶链反应(Q-PCR)测定技术 及其临床应用
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苏州市立医院本部关于荧光定量PCR等询价采购公告（2020）
2、交付使用时间：合同签订后7天内交货并安装调试完成。

3、免费质保期：提供至少3年的质保。

4、交货地点：苏州市立医院（本部）指定地点。

5、验收标准：产品安装后，采购单位按国际或国家标准及厂方标准进行质量验收。

二、供应商资格条件：
1、具有独立承担民事责任的能力；
2、具有良好的商业信誉和健全的财务会计制度；
3、具有履行合同所必需的人员和专业技术能力；
4、有依法缴纳税收和社会保障资金的良好记录；
5、参加政府采购活动前三年内，在经营活动中没有重大违法记录；
6、法律、行政法规规定的其他条件；
7、具有所投产品合法的经营许可资格；
8、非生产厂家投标的，须具有产品的合法代理商资格证明。

三、采购文件获取信息：
1、获取时间：自本次采购公告发布之日起至递交询价响应文件截止时间前。

2、获取方式：供应商自行至苏州政府采购网上下载询价采购文件。

四、递交询价响应文件时间、地点：
1、递交时间：2020年5月11日8:3010:30（北京时间）
2、递交截止时间：2020年5月11日10:30（北京时间）
3、递交地点：苏州市干将西路120号3号楼四楼苏州市卫康招投标咨询服务有限公司前台
4、本项目将于2020年5月11日下午13：30在苏州市姑苏区平泷路251号城市生活广
场西楼五楼，苏州市公共资源交易中心进行评审。

五、联系及监督
1、采购单位：苏州市立医院（本部）
电话（略）
地址：苏州市道前街26号
2、采购代理机构：
苏州市卫康招投标咨询服务有限公司联系人：吕兆莉、张田。

电话（略）电话（略）。

地址：苏州市干将西路120号3号楼四楼邮编：215005
3、政府采购监督电话（略）
六、信息发布媒体：
1、该信息刊登在江苏政府采购网、苏州市政府采购网，成交公告亦是刊登在此媒体，敬请各供应商注意。

七、公告期：自公告发布之日起三个工作日。

苏州市卫康招投标咨询服务有限公司
2020年5月6日
（非正式文本，仅供参考。

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