草莓‘托特母’的组培快繁技术研究

1草莓组织培养脱毒快繁与应用技术研究项目总结报告主持完成单位：商丘市农林科学研究所二0一0年十二月2目录一、项目来源……………………………………………………………………1 二、项目实施的意义和依据 (1)（一）品种来源 (1)1、丰香—草莓 (1)2、特征特性 (1)3、脱毒丰香草莓 (2)（二）项目实施的目的..................................................................3 1、总体目标 (3)2、研究组织培养脱毒快繁，加速示范推广，促进农村经济发展 (3)（三）项目实施的意义 (3)1、提高果品产量和质量，增强市场竞争能力 (4)2、生产无公害果品，促农民致富................................................4 3、发挥增产增收效益潜力，促进产业结构调整 (4)（四）项目实施依据 (4)1、研究与实施的理论依据.........................................................4 2、“丰香草莓”组织培养技术路线................................................5 3、草莓组织培养的优点............................................................5 三、丰香-草莓的组织培养技术研究 (6)（一）草莓-“丰香”脱毒技术研究……………………………………………61、研究目的…………………………………………………………………62、供试材料…………………………………………………………………63、组织培养环境条件……………………………………………………6 4、材料的选择与处理……………………………………………………6 5、生长点的剥取……………………………………………………………7 6、诱导方法…………………………………………………………………7 7、病毒的检测……………………………………………………………8 8、无病毒原种的保存和繁殖………………………………………………8 （二）“草莓-丰香”脱毒与快繁培养基筛选研究………………………………8 1、研究目的 (8)2、试验材料...........................................................................8 3、试验方法...........................................................................9 4、验结果分析........................................................................9 5、结论与讨论 (13)（三）组培草莓驯苗基质的研究 (14)1、材料与方法........................................................................14 2、试验结果分析.....................................................................15 3、综合评述...........................................................................16 4、结论 (17)（四）抗菌素减少组培草莓苗污染的研究 (17)31、污染来源与防治措施…………………………………………………172、草莓组织培养过程中造成污染的原因……………………………173、试验方法…………………………………………………………………204、结果分析…………………………………………………………………21 （五）草莓高产栽培试验研究……………………………………………………21 1、温棚种植试验目的………………………………………………………21 2、参试品种…………………………………………………………………21 3、试验时间与地点…………………………………………………………21 4、试验概况及田间管理……………………………………………………215、试验结果与分析…………………………………………………………23 6、综合评定…………………………………………………………………25 7、结论 (25)四、脱毒草莓高产技术规程与规范……………………………………………26 （一）组织培养基本设施技术规程 (26)1、实验室建立 (26)2、仪器与器材配备 (26)3、化学药品、试剂购置…………………………………………………284、其他物品的配制………………………………………………………28 （二）草莓组织培养技术操作规程与规范 (28)1、培养条件…………………………………………………………………282、培养基配制……………………………………………………………293、无菌材料的获得………………………………………………………31 4、接种………………………………………………………………………31 5、室内组织培养…………………………………………………………32 6、瓶苗驯化与移栽…………………………………………………………33 （三）脱毒草莓栽培技术规程与规范 (34)1、组织培养瓶苗的栽培技术规程…………………………………………342、脱毒丰香草莓苗圃繁殖栽培技术规程………………………………353、脱毒“丰香-草莓”的特征特性与栽培技术规程……………………36 4、脱毒草莓大棚无公害高产栽培技术规程 (39)5、脱毒草莓“丰香”大田高产栽培技术规程 (42)五、脱毒草莓无公害高产技术的推广应用 (44)（一）发展脱毒丰香草莓的意义 (44)1、发挥品种优势，保持种质资源.............................................44 2、生产绿色果品，提高农民就业率..........................................44 3、促进农民增收农业增效，利国利民.......................................44 （二）推广方法与措施 (44)1、建立组织，联合攻关............................................................44 2、建立基地，示范带动............................................................45 3、宣传培训，普及推广............................................................45 （三）组培红香椿一号示范推广概况 (46)1、推广应用情况..................................................................46 2、示范种植情况.....................................................................46 六、科学技术创新 (48)4（一）、脱毒、快繁技术体系研究的创新 (48)1、组织培养条件 (48)2、选材与处理 (48)3、接种与诱导培养………………………………………………………494、检测与继代增值培养…………………………………………………495、生根培养........................................................................49 6、炼苗与移栽 (49)（二）、运用抗菌素降低污染研究的创新………………………………………50 （三）、扦插基质的研究创新……………………………………………………51 （四）、脱毒草莓高产机制研究创新……………………………………………52 （五）、栽培技术体系研究创新………………………………………………53 （六）、品种示范、推广体系研究创新………………………………………54 七、经济效益和社会效益分析 (56)（一）经济效益分析 (56)1、脱毒草莓温棚..................................................................56 2、脱毒草莓大田..................................................................57 3、脱毒草莓每亩新增效益......................................................57 （二）社会效益 (58)1、生态效益...........................................................................58 2、社会效益...........................................................................58 八、脱毒草莓的推广前景 (60)5草莓组织培养脱毒快繁与应用技术研究一、项目来源“草莓脱毒快繁与应用技术研究”是2004—2008年商丘市农林科学研究所自选项目，2007年申报商丘市科技攻关计划项目，项目编号为NO:2008 。

草莓组培快繁技术作者：庞传明李忠来源：《山西果树》2015年第02期摘要：简要介绍了草莓组培快繁技术流程及每个环节的技术要点，采用该技术草莓试管移栽成活率可达90%以上。

关键词：草莓；组织培养；移栽文章编号：1005345X（2015）02005402中图分类号：S668.4文献标识码：B草莓是结果快、成熟早、植株小、周期短、管理方便、病虫较少、加工容易、便于调控的一种果树。

在世界浆果类水果生产中，其栽培面积和产量仅次于葡萄。

草莓繁殖主要通过匍匐茎分株。

在长期无性繁殖中，易导致种苗退化，影响产量和品质。

应用离体培养技术可有效解决这一难题，现将草莓组培快繁技术简介如下。

1外植体的植入春季当草莓匍匐茎长到10 cm以上时，于晴天早上10时以前，采取无病虫害、生长健壮的茎尖（2～3 cm），迅速拿到实验室在流水下处理2～3 h，再用洁尔灭浸泡1 h，后用流水冲洗干净。

然后在超净台内用75%的酒精浸泡15～20 s，用无菌水洗3～5遍，再用0.1%的升汞浸泡8 min（升汞液中加1～2滴吐温），浸泡过程中要不断搅拌，最后再用无菌水清洗3～5遍后放在无菌滤纸上吸干水分。

在显微镜下剥取约0.2～0.5 mm的茎尖，接种到诱导培养基内（培养基配方为改良MS+6-BA 0.5 mg/L），放入培养室培养。

培养室光照14～16 h/d，光照强度1 800～2 000 lx，温度20～26 ℃（光照时段26 ℃左右，暗培时段20 ℃左右）。

2继代扩繁及生根培养当外植体培养50～60 d后，茎尖长到1.5～2.0 cm时，开始转接于继代培养基（MS+BA 0.2 mg/L+NAA 0.05 mg/L）上培养，培养条件同前，继代培养周期为30～35 d。

连续扩繁几个周期，瓶苗增殖到一定数量后，开始进行生根培养。

生根选用苗高2 cm以上、具庞传明等：草莓组培快繁技术3～4片大叶的健壮株，接种到（1/2MS+NAA 0.2 mg/L）的生根培养基中，20 d后，根系长到1～2 cm时开始炼苗移栽。

草莓组培快繁技术及其示范推广作者：钱雯婕张静王建春吴婷张黎凤魏红英来源：《现代农业科技》2019年第24期摘要; ; 从脱毒苗培育、原原种培育、生产种苗扩繁等3个方面详细总结了草莓组培快繁技术，并介绍了该技术的示范推广情况，以期为草莓无病毒化生产提供借鉴。

关键词; ; 草莓;组培快繁技术;示范推广中图分类号; ; S668.4; ; ; ; 文献标识码; ; B文章编号; ;1007-5739（2019）24-0065-01; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ; ;开放科学（资源服务）标识码（OSID）草莓是一种营养价值和经济价值均较高的多年生草本植物，富含蛋白质、无机盐、VC等营养物质，在国内外市场备受青睐，被誉为“水果皇后”。

草莓栽培多采用无性繁殖种苗，繁殖效率低，种苗易退化，果实渐小，且使病毒积累逐年加重，限制了草莓产业的发展。

因此，利用组织培养获得大量脱毒苗是解决这一问题的有效途径[1-2]。

笔者针对昼夜温差大、干旱少雨的新疆哈密地区草莓生长发育特性、生产特点以及所处的自然生态条件，采用茎尖脱毒、瓶内增殖、温室扩繁相结合的方法，使草莓栽培向无病毒草莓迈进，推动无毒种苗向专业化、生产化的方向发展，从而逐渐带动十三师乃至哈密地区的草莓生产向无病毒化迈进。

本文选用草莓优质品种妙香7号，它是由山东农业大学用红颜、甜查理杂交选育的暖地草莓品种，具有产量高、抗病性强、口感好等优点。

通过确定最优培养基配方和培养条件，利用显微镜逐层剥离生长点接种后置于培养室中培养，经过培育，产生小芽丛苗再进行继代培养。

草莓组培苗经历外植体接入瓶内增殖培养、生根培养、培养健壮的瓶内苗以及从瓶内移栽到营养钵中，从而初步建立草莓脱毒苗组培快繁技術体系。

将营养钵中的组培苗进行病毒检测从而筛选出无病毒原种苗，之后便可大量繁育，初步建立草莓脱毒种苗三级繁育术体系。

草莓组织培养与快速繁殖技术作者：于超，孙秀霞，薛琳来源：《新疆农垦科技》 2017年第2期摘要：以“红颜”草莓的匍匐茎尖为外植体，选择附加不同激素组合的MS培养基为诱芽培养基和继代培养基，以1/2MS为生根培养的基本培养基，对“红颜”草莓的组织培养及快繁进行研究。

结果表明：草莓茎尖在MS+6-BA2.0mg/L+NAA0.2mg/L培养基上能很好地诱导不定芽形成，其诱导率高达80％；继代增殖培养基为MS+6-BA2.0mg/L+IBA0.5mg/L+IAA0.5mg/L+GA1.0mg/L时增殖系数较高；生根培养基为1/2MS+IAA0.5mg/L时生根率可达99％，移栽至田间后，成活率高且匍匐茎繁殖能力强。

关键词：“红颜”草莓；组织培养；激素；快繁技术草莓是蔷薇科多年生草本植物，营养丰富、果实鲜艳、柔软多汁，且富含糖、蛋白质、磷、钙、铁及大量维生素和有机酸，被誉为“水果皇后”，是一种具有医疗价值的高档水果佳品，深受人民喜爱[1]。

草莓繁殖主要靠匍匐茎分株提供种苗，效率低，速度慢，不能满足大规模生产的需求；而且在长期无性繁殖中，容易导致病毒感染严重，表现为植株矮化、畸形果比例增加，多伴随有花叶、黄边、斑驳等多种症状，产量低下，种苗退化，产量和品质下降。

利用组织培养对草莓进行快速繁殖获得大量脱毒苗是解决这一问题的有效途径，它不仅可以快速繁殖大量优质草莓种苗，更有利于品种提纯和更新，减少病毒感染，提高产量和品质，是促进草莓产业化的有效途径[2]。

目前，有关草莓组培的报道很多，但不同品种草莓的特性不同，培养方法也有差异[3-5]。

“红颜”草莓因其具有耐低温能力强、连续结果性强、抗病性强、产量高、果型大、口味佳、外观漂亮、商品性好等优点，普遍被认为是一个很有发展前途的优良品种。

本文以“红颜”草莓的茎尖为外植体，进行组织培养，观察了草莓组织培养各个阶段的最佳生长条件，以期为“红颜”草莓试管苗的工厂化生产奠定基础。

草莓组织培养及快繁【摘要】草莓蔷薇科草莓属，属多年生草本植物。

草莓的外观呈心形，鲜美红嫩，果肉多汁，含有特殊的浓郁水果芳香。

草莓营养价值高，含丰富维生素c ，有帮助消化的功效，与此同时，草莓还可以巩固齿龈，清新口气，润泽喉部。

【关键词】草莓组织培养试验方法草莓在多年的无性繁殖过程中,由于病毒病的不断传播、蔓延,危害愈加严重,我国草莓主要栽培区草莓病毒病的发生株率达80.2％,致使草莓品种种性退化,表现为产量降低、品质变劣和抗病性减弱。

用传统方法繁殖培育小苗，速度慢，占地多，易遭受病毒侵害，引起退化，影响产量和果实品质。

草莓脱毒组培技术是目前国际上普遍应用的高新实用技术，即通过微茎尖组织培养技术脱去病毒病原，使草莓种苗恢复品种原种优良种性，以达到优质、高产之目的。

用组织培养法繁殖培育壮苗无病毒，生长健壮，叶片浓绿，可改善果实品质，提高产量；繁殖快，一年内一个分生组织可获得几千到几十万株苗，发展潜力大对新品种的推广有利，解决了新品种材料少、在生产中推广速度慢的问题，可迅速更新市场品种根据市场需要，2~3年内可以更新一次品种，常规生产则需要4~5年。

快速繁殖。

在人工控制的条件下，可工厂化育苗，不受季节影响，一年四季均可进行根据生产需要为生产提供种苗。

无病虫危害健康植株比例大，增产效果明显，茎尖组织中的分生组织本身不带毒，，苗具有5~6片正常叶，叶色不浓也不淡，呈鲜绿色，叶柄粗而不徒长，苗重30以上，根茎粗1.0~1.5厘米，株型矮壮，侧芽少，根须多粗而白。

生长快，坐果率高，结果期延长，果重明显提高，平均可增产30~50%。

一、试验材料与方法1.外植体选取田间健壮株匍匐茎尖或单株。

2.灭菌剂与灭菌方法将外植体表面用洗衣粉洗净，自来水冲洗30min， 75%酒精浸泡30s,0.1%升汞浸泡5min,无菌水冲洗5次，作灭菌处理。

3.茎尖剥离去掉茎段外面的叶子，在双目解剖镜下切0.2~0.6mm的生长点放入盛有培养基的瓶中。

组培中心草莓繁苗技术方案目录1、草莓脱毒种苗简述 (2)2、草莓组培技术流程： (3)3、草莓组培苗的驯化： (5)4、秋季9月下旬定植日光温室草莓种苗操作流程及注意事项： (8)5、春季3月中下旬定植露地草莓的注意事项： (10)1、草莓脱毒种苗简述草莓是多年生草本宿根植物，植物矮小呈丛装生长，植株高约20-30cm，短缩的茎上密集的着生叶片，并抽生花絮和匍匐茎，下部生根。

草莓的营养器官有根、缩短茎、叶、花、果实、种子和匍匐茎等。

传统方法繁殖草莓种苗经多代营养繁殖的植株中的毒素就会逐年增加，表现为植株变矮、果实变小、口感变差、畸形果实比例增加等，引起果实品质下降，草莓品种种性退化，从而降低了果实的商品价值和经济价值。

组织培养的方法具有繁殖速度快、无毒等特点，且组织培养苗生长性状优于常规繁殖方式，降低了染病率，提高了产量和品质。

草莓通过组织培养技术创造的的经济效益大幅度提高，能调动广大种植户的积极性，为果农增收，新农村建设做出更大的贡献。

以上为草莓组培脱毒种苗三级育苗流程图，经查阅文献和询问专业技术人员，草莓脱毒种苗继代培养一般不能超过4代，否则可能会导致后代的变异，并且出瓶驯化的第一代种苗为原原种，不能直接当做生产种用，需要经过一次试种，并观察原原种是否长势正常，取长势正常的原原种上生长的原种作为母本进行栽培种的扩繁。

2、草莓组培技术流程：2.1 外植体选择选取6月份刚扎根的匍匐茎苗，并在无菌条件下剥取茎尖生长点0.3-0.5毫米作为外植体。

2.2外植体预处理及灭菌将材料用洗洁精清洗后用吐温清洗之后在流动自来水中冲洗20-30分钟，在超净工作台上用75%酒精消毒30秒左右，用无菌水冲洗3次，吸干水后在0.1%升汞中消毒5分钟，用无菌水冲洗3次，吸干水分，剥取茎尖生长点0.3-0.5毫米作为外植体。

2.3培养条件诱导培养基：MS + 6-BA 0.2mg/L + IBA0.04mg/L增殖培养基：MS + 6-BA 0.3mg/L +IBA 0.06mg/L生根培养基：1/2MS + IBA 0.1mg/L以上培养基均加蔗糖3% ，琼脂0.65%，pH值5.8-6.0。