实验一 凝集反应

实验1 细胞凝集反应（赵海泉主编基础生物学实验指导细胞生物学分册中国农业大学出版社2008.8.）一、实验目的与原理1．目的学习植物凝集素的提取方法，观察红细胞凝集现象。

2．原理细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。

目前认为细胞间的联系和识别、细胞的生长和分化、免疫反应和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素（1ectin）是一类含糖并能与糖专一结合的蛋白质（少数例外），它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

二、实验用品1．材料土豆块茎，兔血。

2．试剂0.9 % NaCl溶液，PBS缓冲液（称取7.2 g NaCl、1.48 g Na2HPO4、0.43 g KH2PO4。

加蒸馏水定容至1 000 mI，pH 7.2）。

3．器材离心机，显微镜，天平，注射器，6号针头，载玻片，容量瓶，滴管，离心管等。

三、实验内容与操作（一）提取凝集素称取土豆去皮块茎20 g，加100 ml PBS缓液，浸泡2 h，将浸出的粗提液过滤，即为可溶性土豆凝集素提取液。

（二）制备2%的红细胞悬液以无菌方法抽取兔静脉血液（加抗凝剂）2 mI。

加8 mL 0.9 % NaCl溶液，以2 000 r/min离心5 min，去掉上清液，再加0.9 % NaCl溶液至10 ml，反复洗涤5次。

最后按沉淀压积的红细胞体积用生理盐水配成2%红细胞悬液。

（三）凝集反应用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各1滴，置载玻片上，充分混匀，静置20 min后于低倍显微镜下观察血细胞凝集现象。

四、注意事项1．若沉淀压积的红细胞暂时不用，应将其4℃保存。

下次使用前，先洗涤再用生理盐水配成2%红细胞悬液。

2．以PBS液加2%血细胞液作对照实验。

五、作业与思考题1记录血细胞凝集情况。

2实验课程感想或感受。

实验一细胞凝集反应1.实验目的1.1了解细胞膜的表面结构。

1.2掌握凝集素促使细胞凝集的原理。

1.3学习研究细胞凝集反应的方法。

1.4掌握耳缘静脉兔子取血的方法。

2．实验原理凝集素是一类含糖（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

目前已发现近千种植物中含有凝集素，在各种真菌、无脊椎动物、脊椎动物，特能提的各种组织和器官中及某些病毒体内也含有凝集素。

常用的为植物凝集素，通常以其被提取的植物命名，如伴刀豆凝集素A、麦胚凝集素、花生凝集素和大豆凝集素等，凝集素是他们的总称。

在细胞表面，组成细胞膜的糖脂和糖蛋白伸出寡糖链，形成细胞外被（又称为糖萼）。

凝集素能与细胞外被中的糖分子连接，在细胞膜结构间形成“桥”，从而引起细胞凝集。

凝集素引起的血细胞凝集，其细胞膜结构没有发生变化，与血液凝固中发生的复杂生物化学过程完全不同；另外，凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合，加入域凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素能与不同的糖蛋白特异性结合，加入与凝集素互补的的糖可以抑制细胞的凝集，但是凝集素不是来源或参与免疫反应的产物，因此，Ponder(1983)提出应称“凝集素组织化学”而不能称为“凝集素免疫组织化学”。

凝集素使细胞凝集与血小板凝血的原理不同。

当人体受伤流血时，血小板就迅速向血管破裂处大量聚集。

它们首先释放肾上腺素、5－羟色胺等具有收缩血管作用的物质，使受损血管不同程度地紧闭，减少血流量。

然后血小板一旦与非血管内膜表面接触，便会迅速扩展，颗粒向中央集中，并伸出多个伪足，转变成树突型血小板，大部分颗粒随即释放，血小板之间融合，成为粘性变形血小板。

粘性变形血小板在伤口大量堆积粘附形成血栓，堵住伤口，制止流血。

如果伤口很大那还要与纤维蛋白一起封堵。

血小板凝血是一个生理反应，要注意与凝集素使细胞凝集相区分。

3.实验用品3.1材料家兔3.2试剂 PBS缓冲液土豆凝集素4.实验步骤4.1取土豆去皮块茎2克，加10mlPBS缓冲液，浸泡24小时，浸出的粗体液中即含有可溶性土豆凝集素。

凝集反应实验报告一、实验目的。

本实验旨在通过观察凝集反应的过程和结果，了解凝集反应的基本原理和特点，掌握凝集反应的实验方法和技巧。

二、实验原理。

凝集反应是指在特定条件下，抗原与抗体结合形成凝集物质的现象。

凝集反应的原理是抗原与抗体结合后形成免疫复合物，使得溶液中的颗粒物质凝聚成大颗粒，从而导致溶液浑浊或沉淀。

凝集反应是免疫学中常用的实验方法，也是许多免疫学检测方法的基础。

三、实验材料和方法。

1. 实验材料，抗原溶液、抗体溶液、生理盐水、试管、移液器、离心管等。

2. 实验方法：（1）取一定量的抗原溶液和抗体溶液分别加入不同的试管中；（2）将试管摇匀，使抗原和抗体充分混合；（3）观察试管中是否出现凝集物质，并记录下实验结果。

四、实验结果与分析。

经过实验观察，我们发现在抗原与抗体混合后，部分试管中出现了凝集物质，而另一部分试管中则未出现凝集物质。

这说明凝集反应的产生是由于抗原与抗体之间的特异性结合所致。

当抗原与抗体结合后，免疫复合物的形成导致了溶液中颗粒物质的凝聚，从而产生了凝集反应。

五、实验总结。

通过本次实验，我们对凝集反应的原理和特点有了更深入的了解。

凝集反应是一种重要的免疫学现象，它在许多免疫学检测方法中起着关键作用。

掌握凝集反应的实验方法和技巧，对于进一步开展免疫学研究具有重要意义。

六、实验注意事项。

1. 实验操作时要注意实验材料的保存和使用方法，避免污染和损坏；2. 实验过程中要严格按照实验方法进行操作，避免实验结果的偏差；3. 实验后要及时清洗和消毒实验器具，保持实验环境的整洁和卫生。

七、参考文献。

1. 张三，李四. 免疫学实验技术. 北京，科学出版社，2005.2. 王五，赵六. 免疫学实验指南. 上海，上海科学技术出版社，2008.以上就是本次凝集反应实验的实验报告，希望能对大家有所帮助。

凝集反应实验报告概述：本实验对凝集反应进行了研究，并通过实验观察、数据测量和数据分析，对凝集反应的机理和影响因素进行了探讨。

凝集反应是一种常见的物理和化学现象，通过深入研究其规律，有助于我们对颗粒间相互作用、凝聚力和粘附性的理解。

实验目的：1. 研究不同溶液浓度和温度对凝集反应的影响；2. 探索凝集反应的机理，并分析实验数据确定趋势。

实验装置和材料：1. 反应皿；2. 铁离子溶液；3. 溴离子溶液；4. 过滤纸；5. 热水浴。

实验步骤：1. 使用取样棒在反应皿中加入适量的铁离子溶液；2. 向其中滴加一定量的溴离子溶液，记录颜色变化和观察是否发生凝集；3. 将实验装置置于热水浴中，调整水温后重复步骤2；4. 分别使用不同浓度的溴离子溶液，重复步骤2；5. 记录实验数据。

实验结果：1. 浓度变化实验：随着溴离子溶液浓度的增加，凝集反应发生速度加快，并且凝结颗粒数量增多；2. 温度变化实验：加热反应体系后，凝集反应速度明显加快，凝结颗粒更大。

数据分析：通过实验观察，可以得出以下结论：1. 凝集反应的速度与溶液浓度呈正相关关系，浓度越高，反应速度越快；2. 温度对凝集反应的影响较大，加热可以提高反应速度；3. 凝集反应的机理可能与颗粒间的相互吸引力和碰撞速度有关。

结论：凝集反应是一种涉及颗粒间相互作用和吸附现象的物理和化学过程。

本实验中通过观察实验现象、测量数据并进行分析，得出了浓度和温度对凝集反应速度的影响。

实验结果表明，提高溶液浓度和加热反应能够加快凝集反应的速度。

这些发现对于进一步探索凝聚力和粘附性的研究具有重要意义。

进一步展望：本实验只是对凝集反应进行了初步的研究，我们可以进一步探索其他影响凝集反应的因素，如pH值、溶液表面张力等。

同时，可以使用不同颗粒和溶液组合进行进一步的实验，以深入了解凝聚力和粘附性的机制。

此外，将实验结果与理论模型进行比较和验证也是未来的研究方向之一。

总结：凝集反应是一种常见的物理和化学现象，通过深入研究其机理和影响因素，有助于我们对颗粒间相互作用、凝聚力和粘附性的理解。

实验一细胞凝集反应实验目的通过对红细胞凝集现象的观察，加深理解细胞外被的结构及其功能。

实验原理细胞膜是双层脂镶嵌蛋白质结构，脂和蛋白质又能与糖分子结合为细胞表面的分枝状糖外被。

目前认为：细胞间的联系，细胞的生长和分化，免疫反应和肿瘤发生都和肿瘤发生都和细胞表面的分枝状糖分子有关。

凝集素（lectin）是一类含糖的（少数例外）并能与糖专一结合的蛋白质，它具有凝集细胞和刺激细胞分裂的作用。

凝集素使细胞凝集是由于它与细胞表面的糖分子连接，在细胞间形成“桥”的结果，加入与凝集素互补的糖可以抑制细胞的凝集。

实验用品1. 土豆块茎。

2. 显微镜、粗天平、载玻片、滴管2支、离心管2支。

3. PBS缓冲液称取NaCl 7.2g、Na2HPO4 1.48g、KH2PO4 0.43g、加蒸馏水，定容至1000ml，调pH值到7.24. Alsever溶液：葡萄糖 2.05g柠檬酸钠0.89g柠檬酸0.05g氯化钠0.42g蒸馏水100ml调节pH到7.2，高压灭菌10min，置4℃冰箱保存。

5. 1%的红细胞悬液的制备从集市杀鸡处取血，按1ml血加4ml Alsever溶液的比例迅速混匀，置于4℃冰箱保存备用（一周内使用）。

使用前加入0.85%生理盐水离心（2000r/min，5min）洗涤二次，最后按红细胞压积体积用生理盐水配成1%红细胞液。

实验方法1. 称取土豆去皮块茎2g,加10ml PBS缓冲液，浸泡2h，浸出的粗提液中含有可溶性土豆凝集素。

2. 用滴管吸取土豆凝集素和2%红细胞液各一滴，置载玻片上，充分混匀，静置20min后于低倍显微镜下观察血球凝集现象。

3.以PBS液加2%红细胞液作对照实验。

实验作业1.绘制鸡红细胞凝集图2.用简图表示凝集素使红细胞凝集的原理实验二巨噬细胞吞噬现象观察实验目的一、通过对小白鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞活动的观察，加深理解细胞吞噬作用的过程及其意义。

二、掌握小鼠腹腔注射给药和脊椎脱臼处死方法。

实验一凝集反应凝集反应是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）的颗粒性载体与相应抗体（或抗原）发生特异性结合后，在适当电解质存在下，出现肉眼可见的凝集现象。

凝集反应分为两类：直接凝集反应和间接凝集反应。

直接凝集反应是颗粒性抗原直接与抗体结合，在电解质的作用下，出现肉眼可见凝集现象。

间接凝集反应是小分子可溶性抗原吸附到颗粒载体（红细胞、药用炭和乳胶等）表面，再与相应抗体结合，出现肉眼可见的凝集现象。

凝集反应常用的实验方法：玻片法和试管法。

（一）试管凝集试验－血清抗体效价测定实验目的：了解试管凝集反应方法；掌握凝集效价的判定及其意义。

实验原理：试管凝集试验为半定量试验方法，常用已知红细胞（微生物中常用细菌）作为抗原液与一系列稀释的受检血清混合，保温后观察每管内抗原凝集程度，通常以产生明显凝集现象的最高稀释度作为血清中抗体的效价，亦称为滴度。

在试验中，由于电解质浓度和pH不适当等原因，可引起抗原的非特异性凝集，出现假阳性反应，因此必须设不加抗体的稀释液作对照组。

临床上常用的直接试管凝集试验为肥达试验（Widal test）和外斐试验（Weil-Felix test）。

在输血时也常用于受体和供体两者的红细胞和血清的交互配血试验。

实验材料：试管、吸管、试管架、记号笔；生理盐水、鸡红细胞、待检血清、温箱等。

37℃恒温培养箱等。

实验方法：①取洁净试管七支，依次编号；②用玻璃吸管在每管内都加NS0.5ml；③将第1试管内加入1:10待检血清0.5ml，液体吸注混匀3次以上，从中取出0.5ml加入第2个试管内，然后再吸注混匀3次取出0.5ml加入第3个试管内，依此类推，直到第6个试管取出0.5ml弃掉，不加入第7个试管，将第7个试管设为阴性对照管；④每管内都加鸡红细胞0.5ml；⑤混匀后放入37°C恒温箱内1.5h，观察结果表1-1 试管凝集实验方法试管号 1 2 3 4 5 6 7 （对照）生理盐水（ml）0.9 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5待检血清（ml）0.1 0.5 0.5 0.5 0.5 （弃0.5） -红细胞（ml）0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5 0.5血清稀释度1:20 1:40 1:80 1:160 1:320 1:640 -37℃30 分钟结果判定++++ ++++ +++ ++ + - -实验结果：先观察生理盐水对照管（第7管），应不发生凝集，液体混浊，管底沉淀呈圆形，边缘整齐。