白术质量标准研究Ⅰ—HPLC法测定2种白术内酯的含量

HPLC法测定白术及其炮制品中苍术酮等四种有效成分含量孟永海;孟祥瑛;张振朋;刘晓冰;翟春梅【摘要】目的:使用高效液相色谱法对白术及其炮制品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮进行含量测定,并比较炮制对白术指标性成分的含量影响,阐明炮制机制.方法:使用Kromasil C18-5μm(Φ4.6×150mm)色谱柱,水-乙腈为流动相梯度洗脱,柱温30℃,流速1.0mL·min-1,由峰面积求得白术及几种炮制品中有效成分的含量.结果:白术生品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.375、0.334、0.578、1.36mg·g-1,白术炒黄品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.409、0.297、0.675、0.694mg·g-1,白术炒焦品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.315、0.134、0.177、0.283mg·g-1,白术麸炒品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和苍术酮含量分别为0.434、0.300、0.344、0.337mg·g-1.结论:经过炒黄和麸炒白术内酯Ⅰ、Ⅲ含量略升高,苍术酮含量降低;炒焦白术各成分含量均降低,苍术酮的变化幅度最大,提示与苍术酮结构不稳定易分解有关.【期刊名称】《化学工程师》【年(卷),期】2019(033)008【总页数】3页(P24-26)【关键词】白术;炮制;白术;内酯;苍术酮【作者】孟永海;孟祥瑛;张振朋;刘晓冰;翟春梅【作者单位】黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040;黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨 150040【正文语种】中文【中图分类】R917白术（Atractylodes macrocephala Koidz.）为菊科苍术属植物白术的根茎。

近年来文献报道白术具有调节肠胃功能[1]、提高机体免疫力[2]、治疗和改善某些精神系统疾病[3]、治疗脾虚气虚不思饮食[4]、抗肿瘤[5]、抗炎[6]、抗氧化[7]等作用。

不同产地白术药材中白术内酯I和II的含量测定吴梓春;何兆锦【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2016(013)009【摘要】目的：探讨不同产地白术药材中白术内酯I和白术内酯II的高效液相测定方法。

方法：选择浙江、安徽、甘肃、江西四个产地的白术药材，色谱柱采用Hypersil ODS（4.6mm×250mm，2.5μm），流动相为乙腈∶水=55∶45，流速为1.0ml/min，柱温为30℃，检测波长223nm。

结果：白术内酯I的线性关系方程为：Y=3.546×104+0.524×104（r=0.9998），在0.5～500μg范围内线性关系良好；白术内酯II的线性关系方程为：Y=4.746×104+0.949×104（r=0.9997），在0.5～500μg范围内线性关系良好。

白术内酯I的平均加样回收率为99.74%，RSD1.32%，白术内酯II平均加样回收率为99.68%，RSD为2.01%。

浙江产白术药材中两种有效成分含量最高，江西产白术药材的两种有效成分含量较低。

结论：高效液相色谱法测定不同产地白术中的有效成分，方法简单易操作，灵敏度高，准确性好，重复性强，可以作为白术质量控制的定量指标。

【总页数】2页(P10-10,11)【作者】吴梓春;何兆锦【作者单位】广东省佛山市第一人民医院中山大学附属佛山医院药学部佛山528000;广东省佛山市第一人民医院中山大学附属佛山医院药学部佛山 528000【正文语种】中文【中图分类】R284.1【相关文献】1.HPLC法测定白术药材中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量 [J], 张东;周其2.不同产地白术药材中白术内酯Ⅱ和Ⅲ的含量测定 [J], 田颖;刘志刚;孟庆莉3.白术药材中白术内酯Ⅰ和白术内酯Ⅲ含量的测定 [J], 李红英;龙澜;程新华;李亚杰;黄建民;帅超群4.高效液相色谱法测定不同产地麸炒白术中苍术酮、白术内酯Ⅰ、白术内酯Ⅱ和白术内酯Ⅲ的含量 [J], 高红宁;潘雨柔;殷奕;严国俊5.不同产地不同炮制白术中白术内酯I、Ⅱ、Ⅲ的提取及含量测定 [J], 赖新;谢海峰因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

目的：通过比较不同断面颜色白术中白术内酯的含量，从而确定不同颜色的白术的质量，建立白术的质量标准。

方法：采用外标法，HPLC法测量其中一个含量。

Dikma Kromasil C。

(250 mm×4．6 miD．，5 pro)色谱柱，以乙腈(A)一水(B)为流动相梯度洗脱；体积流量为1．0 mL／min，柱温为35℃，检测波长为220 nm(白术内酯I、III)、276 nm(白术内酯I)，进样量10uL。

结果：白术内酯I.II.III分别在1．14～114、0．776"-'77．6、3．21～321 ug／mL与峰面积呈良好的线性关系。

结论：白术颜色白者与颜色棕者，其中白术内酯I.II.III含量差异较大，尤其白术内酯I.III含量白者多于棕者，故而白术白者质量优于棕者。

关键词：白术，I白术内酯I，断面颜色，白术内酯II，白术内酯III，高效液相色谱，含量测定摘要 (I)1 引言 (1)1.1白术简介 (1)1.2化学研究 (1)1.3.1、利尿作用 (2)1.3.2调节免疫 (2)1.3.3抗凝血作用 (2)1.3.4抗肿瘤作用 (3)1.3.5对胃肠运动的影响 (3)1.3.6抗菌作用 (3)1.4总结 (3)2实验部分 (4)2.1仪器与药品 (4)2.2方法与结果 (4)2.2.1色谱条件 (4)2.2.2对照品溶液的制备 (4)2.2.7稳定性试验 (5)2.2.8加样回收率试验 (6)3分析与讨论 (7)3.1检测器的选择 (7)3.2吸收波长的确定 (7)3.3流动相的选择 (7)3.4提取方式的选择 (7)3.5 白术药材的来源与选取 (8)3.6 测量指标的选择 (8)4结论 (9)参考文献： (10)1 引言1.1白术简介白术为菊科植物白术Atractylodes macrocephalaKoidz．的干燥根，主产地为浙江，安徽、此外河北，湖北、湖南及西南地区等省。

HPLC法同时测定白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的含量邝俊维;卿萍;周子虬;邹辉【摘要】In this work,a HPLC method has been established to simultaneously determine atractylenolideⅠ,Ⅱ,and Ⅲ in Atractylodes macrocephala Koidz. Our method has generated good linearity in the range of 76~760 ng,87~870 ng,and 75~750 ng for atractylenolideⅠ,Ⅱ, and Ⅲ,respectively. The average recoveries for these three compounds were 100.20%(RSD=1.8%),100.10%(RSD=1.2%),and 99.68%(RSD=0.84%)by ul-trasonic extraction,and 100.67%(RSD=0.88%),100.06%(RSD=0.67%), and 100.67%(RSD=1.7%) by heating reflux extraction, respectively. The proposed method is simple, fast, accurate and reproducible, and can be used to control the quality of Atractylodes macrocephala Koidz. The ultrasonic extraction method shows high-er extraction efficiency than the heating reflux extraction method.%本研究建立了同时测定中药白术中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ含量的高效液相色谱法,结果表明白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ进样量分别在76~760 ng,87~870 ng,75~750 ng范围内线性关系良好,白术甲醇超声提取液中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ平均加样回收率分别为100.20%(RSD=1.8%),100.10%(RSD=1.2%),99.68%(RSD=0.84%),白术甲醇回流提取液中白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ平均加样回收率分别为100.67%(RSD=0.88%),100.06%(RSD =0.67%),100.67%(RSD=1.7%).该含量测定方法简单、快速、准确、灵敏度高、重复性好,可用于白术药材的质量控制.超声提取法对白术内酯Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ的提取效率均高于加热回流提取法.【期刊名称】《湖南师范大学自然科学学报》【年(卷),期】2017(040)006【总页数】6页(P55-60)【关键词】白术;高效液相色谱法;白术内酯Ⅰ;白术内酯Ⅱ;白术内酯Ⅲ;含量测定【作者】邝俊维;卿萍;周子虬;邹辉【作者单位】湖南师范大学化学化工学院,中国长沙 410081;湖南师范大学医学院,中国长沙 410081;湖南师范大学树达学院,中国长沙 410081;湖南师范大学医学院,中国长沙 410081【正文语种】中文【中图分类】R917白术为菊科植物白术(Atractylodes macrocephala Koidz)的干燥根茎，为2015年版《中国药典》收录的国标药材，其性味苦、甘，温，归脾、胃经，主治脾虚、胎动不安等[1].主产于浙江、安徽、淮北、皖南等地，为地道药材“浙八味”之一，是药用处方中的常用药材，其主要活性成分为白术内酯类成分[2-3]，此外还有苷类[4]和多糖类成分[5]；近年来，研究者从白术中发现了系列多炔类成分[6]，并证实其具有显著的抗炎作用[7].研究显示白术具有抗衰老[8]、抗肿瘤[9-10]、镇痛[11]等药理作用.白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ是白术中含量较高的化学成分，亦是白术的特征性成分，并且药理研究表明白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ是白术的主要药效成分[12-15]，这3种成分的含量可作为白术质量控制的指标成分.本文建立了可同时测定白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量的HPLC方法，并考察了不同提取方法对这3种成分含量的影响，为完善白术的质量控制提供科学依据.岛津高效液相色谱仪(日本岛津公司，配备低压四元泵、自动进样器、柱温箱、紫外检测器、色谱工作站)；FB224自动内校电子分析天平(0.000 01 g，上海舜宇恒平科学仪器有限公司)；KQ5200DE型数控超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；RH-800型高速多功能粉碎机(浙江荣浩工贸有限公司)；不锈钢冲框标准筛(孔径250 μm,即60目，长沙市思科仪器沙筛厂).白术药材饮片(批号16012009，购自湖南衡岳中药饮片有限公司)；白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ对照品(自制，经HPLC检测，归一法计算纯度>99.0%)；甲醇(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)，乙腈(色谱纯，国药集团化学试剂有限公司)；纯水(经0.45 μm水系滤膜过滤)，其余试剂为分析纯.分别精密称取白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ对照品于10 mL容量瓶中，加适量甲醇溶解，定容至10 mL，制成浓度分别为1.869，1.912，2.178 g/L的单一对照品储备溶液；精密吸取各单一对照品储备液2 mL定容至25 mL，得白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ浓度分别为0.149 5，0.153 0，0.174 2 g/L的混合对照品储备液，备用.白术饮片粉碎后过筛，取白术药材细粉2份，各约1.0 g，精密称定，分别置于50 mL具塞锥形瓶中，精密量取2份甲醇各50 mL，分别加入上述锥形瓶中，微微振摇，称定质量.一份超声60 min，另一份水浴回流60 min，待冷却后，加甲醇补足溶剂挥发的量，摇匀.将提取的2份供试品溶液先用普通漏斗过滤，取续滤液分别置于50 mL锥形瓶中备用，在进样前用0.45 μm微孔滤膜滤过.色谱柱：Agilent C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)；流动相：乙腈-水，梯度洗脱；洗脱程序：0～15 min，乙腈55%，15～30 min，乙腈55%～80%；检测波长：220 nm(白术内酯Ⅰ，Ⅲ)，276 nm(白术内酯Ⅱ)；进样量：20 μL；流速：1.0 mL/min；柱温：30 ℃.取白术对照品溶液及供试品溶液进行分析，按“2.3”项下色谱条件进样，得色谱图(见图1～3)，白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ对照品的保留时间分别为9.3，16.0，23.1 min，各成分均达到基线分离，具有较好的对称性，分离度均大于1.5，白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的理论塔板数均大于5 000.精密吸取“2.1”项下混合对照储备液0.5 mL加适量甲醇溶解后定容至10 mL，配制成白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ分别为7.475，7.65，8.71 mg/L的混合溶液.按既定方法在色谱系统中分别进样10，20，40，60，80，100 μL测定.以峰面积A对进样量X (ng)进行线性回归，求得各自的线性回归方程为：白术内酯Ⅰ,Y=3 346.2X-27 657(r=0.998 7)，线性范围为76～760 ng；白术内酯Ⅱ,Y=3 616 X-48 059(r=0.999 4)，线性范围为87～870 ng；白术内酯Ⅲ,Y=3 242X+1548(r=0.999 9)，线性范围75～750 ng.在“2.3”项的色谱条件下，对供试品溶液重复进样6次，进样量每次20 μL，分别测定白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的峰面积，计算RSD分别为0.28%，0.26%，0.16%，表明仪器精密度良好.取同一批次的白术饮片细粉12份，每份约1.0 g，精密称定，其中6份按超声提取方法制成供试品溶液，6份按回流提取方法制成供试品溶液，按“2.3”项的色谱条件色谱条件进样，测得超声提取供试品溶液中白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量的RSD分别为2.5%，2.0%，2.8%，回流提取白术供试品溶液中白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量的RSD分别为0.74%，2.2%，2.0%，表示该方法重复性良好.结果见表1，2.分别取“2.2”项下制备得到的两种供试品溶液，在0，2，4，6，8，12和24 h进样，测定峰面积，计算得到超声提取白术供试品溶液的白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ峰面积的RSD分别为1.4%，2.1%，2.4%，回流提取白术供试品溶液的白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ峰面积的RSD分别为0.76%，2.7%，2.4%，结果表明两种供试品溶液在24 h内稳定性良好.结果见表3，4.取已按既定方法测定含量的白术细粉12份，每份约1.0 g，精密称定，其中6份置于50 mL具塞锥形瓶中，分别精密加入混合对照储备液2.0，2.5，3.0 mL，加甲醇至50 mL，按超声提取方法制成供试品溶液；另6份置于250 mL圆底烧瓶中，分别精密加入混合对照储备液2.0，2.5，3.0 mL，加甲醇至50 mL，按回流提取方法制成供试品溶液；按“2.3”项的色谱条件下进样，分别测定两种提取方法下3种成分的含量，计算回收率.结果超声提取白术供试品溶液白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的平均加样回收率分别为100.20%(RSD=1.8%)，100.10% (RSD=1.2%)，99.68% (RSD=0.84%)；回流提取白术供试品溶液白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ平均加样回收率分别为100.06(RSD=0.88%)，100.30(RSD=0.67%)，100.67(RSD=1.7%)，结果见表5，6.取同一批次的白术细粉6份，其中3份按超声提取方法制成供试品溶液，另3份按回流提取方法制成供试品溶液，按“2.3”项的色谱条件下进样，用峰面积外标法计算白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ含量，测定结果见表7，8.对白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ对照品在190～800 nm进行紫外可见光谱扫描，结果显示白术内酯Ⅰ和Ⅲ在220 nm波长有最大吸收，而白术内酯Ⅱ在276 nm有最大吸收波长，故确定220 nm为白术内酯Ⅰ和Ⅲ的检测波长，276 nm为白术内酯Ⅱ的检测波长.本文建立了同时测定中药白术中3种主要活性成分的HPLC方法，为白术质量控制提供了实验依据.在该方法下，分别检测了超声提取与加热回流2 种提取方法下白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的含量.结果表明，超声提取中白术内酯Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ的含量均高于加热回流提取，而且超声提取较加热回流提取具有操作简单、方便、无需特殊装置，相对高效等优势，因此，本研究为选择白术有效成分的提取方法提供了科学依据.【相关文献】[1] 国家药典委员会. 中华人民共和国药典: 一部[M]. 北京: 中国医药科技出版社, 2015:103-104．[2] TSAI C J, LIANG J W, LIN H R. Sesquiterpenoids from Atractylodes macrocephala act as farnesoid X receptor and progesterone receptor modulators[J]. Bioorg Med Chem Lett, 2012,22(6):2326-2329.[3] SONG H P, LI R L, CHEN X, et al. Atractylodes macrocephala Koidz promotes intestinal epithelial restitution via the polyamine-Voltage-gated K+channel pathway[J]. J Ethnopharmacol, 2014,152(2):163-172.[4] JUNICHI K, AKANE K, TORU I, et al. Glycosides of Atractylodes ovata[J]. Chem Pharm Bull, 2003,51(9):1106-1108.[5] 池玉梅,李伟,文红梅,等. 白术多糖的分离纯化和化学结构研究[J].中药材, 2001,24(9):26-27.[6] 邹辉，杨郴，易美玲，等. 白术化学成分分离鉴定[J]. 中国实验方剂学杂志, 2016,22(17):43-48.[7] YAO C M, YANG X W. Bioactivity-guided isolation of polyacetylenes with inhibitory activity against NO production in LPS-activated RAW264.7 macrophages from the rhizomes of Atractylodes macrocephala[J]. J Ethnopharmacol, 2014,151(2):791-799. [8] 宋丽艳,谷建梅. 不同炮制方法对白术抗衰老作用影响的实验研究[J]. 中国现代医药杂志, 2007,9(11):15-17.[9] 张彩霞,张亚杰,江滨. 白术内酯Ⅱ促进大肠癌Lovo细胞凋亡及对PARP1和Caspase-3表达的影响[J]. 2017,23(5):157-161.[10] 张宗,张鸿翔,史天良,等. 白术挥发油抗肿瘤作用的研究[J]. 肿瘤研究与临床, 2006,18(12):799-801.[11] 赵桂芝,浦锦宝,周洁,等. 白术醇提物的抗炎镇痛活性研究[J]. 中国现代应用药学,2016,33(12):1507-1512.[12] LIU H Y, ZHU Y J, ZHANG T, et al. Anti-tumor effects of atractylenolide I isolated from Atractylodes macrocephala in human lung carcinoma cell lines[J]. Molecules,2013,18(11):13357-13368.[13] DONG H, HE L, DONG Y, et al. Anti-inflammatory components isolated from Atractylodes macrocephala Koidz[J]. Nat Prod Res, 2008,22(16):1418-1437.[14] WANG C, DUAN H, HE L. Inhibitory effect of atractylenolide I on angiogenesis in chronic inflammation in vivo and in vitro[J]. Eur J Pharmacol, 2009,612(1-3):143-152. [15] LI C Q, HE L C, JIN J Q. Atractylenolide I and atractylenolide III inhibit Lipopolysaccharide-induced TNF-alpha and NO production in macrophages[J]. Phytother Res, 2007,21(4):347-353.。

引用格式：谢　进，陈阳峰，何　爽，等. 不同白术样品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量的比较[J]. 湖南农业科学，2023（7）：93-96.　DOI:DOI:10.16498/ki.hnnykx.2023.007.018中药白术为菊科（Composetae）苍术属（Atractylodes）植物白术（Atractylodes macrocephala Koidz）的干燥根茎[1]，原产于浙江宁波（为道地产区），现分布于我国的浙江、安徽、甘肃、湖南及江西等地[2]。

白术内酯（Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ）是一类从白术中提取的内酯化合物。

近20 a来对白术内酯的研究表明，白术内酯具有抗癌、抗炎、抗血小板、抗骨质疏松、抗菌活性、保护神经系统的功能并有调节血糖和血酯的作用。

由于结构上的差异，白术醇Ⅰ和白术醇Ⅱ都具有显著的抗癌活性，而白术醇Ⅲ和白术酮Ⅰ具有显著的抗炎和神经保护活性[3-5]。

不同不同白术样品中白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ含量的比较谢　进1，陈阳峰2，何　爽2，朱校奇1，宋　荣1（1. 湖南省农业科学院，湖南省农业环境生态研究所，湖南长沙 410125；2. 湖南农业大学园艺学院，湖南长沙 410125）摘　要：研究以岛津Column Shim-pack GIST C18（250 nm×4.6 nm）为色谱柱，甲醇-水为流动相，流速1 mL/min，柱温40℃，检测样品中的白术内酯。

白术内酯Ⅰ和Ⅱ、Ⅲ的检测波长分别为275和220 nm，进样量为10 μL，白术内酯Ⅰ的线性关系方程为Y=1.049×107X－4.090×105（r=0.999 8）,在4~1 023 μg范围内线性关系良好；白术内酯Ⅱ的线性关系方程为Y=6.872×106X＋1.194×106（r=0.999 0）,在3.7~933 μg范围内线性关系良好；白术内酯Ⅲ的线性关系方程为Y=4.819×106X－3.969×105（r=0.999 0），在3.7~933 μg范围内线性关系良好。