血红蛋白和转铁蛋白联合检测试剂盒(胶体金免疫层析法)产品技术要求jinhuake

便潜血检测试剂盒（化学法＋胶体金免疫层析法）适用范围：本品适用于人体粪便样本中血红蛋白的半定量检测。

1.产品型号/规格及其划分说明1.1型号根据有无卡体及试纸条宽度分类如下：宽度2.5㎜3.3㎜4㎜5㎜长度卡体名称型号试剂盒U系列U2 U3 U4 U5 83±0.5mm 有试剂条G系列G2 G3 G4 G5 70±0.5 mm 无1.2包装规格卡型：100人份/盒；50人份/盒；25人份/盒；10人份/盒；5人份/盒；1人份/盒；条形：100人份/筒；50人份/筒；25人份/筒；1人份/条。

2. 性能指标2.1 正常工作条件a) 环境温度：15℃～35℃；b) 相对湿度：≤ 80%。

2.2 外观2.2.1 试剂盒外观应平整、边缘无毛刺；2.2.2 测试块与基底片固定应紧密、不能有缺损或脱落；2.2.3 测试块外观整齐、色泽均匀、不能有色斑或污渍。

2.3装量卡型：100人份/盒；50人份/盒；25人份/盒；10人份/盒；5人份/盒；1人份/盒；条形：100人份/筒；50人份/筒；25人份/筒；1人份/条。

2.4灵敏度2.4.1化学法：试剂条的灵敏度为（8-10）µg/ml。

2.4.2胶体金免疫层析法：试剂条的灵敏度为（80-100）ng/ml。

2.5准确度对参考溶液（具体配置方法见附录A）进行重复测试，试剂盒所有检测项目各浓度的检测结果与相应参考溶液标示值同向相差不超过一个量级。

2.6批内与批间精密度2.6.1批内精密度（筒间差）取同一批试剂盒对适当浓度标本进行重复测定，检测结果同向相差不超过一个量级。

2.6.2 批间精密度（批间差）取不同批次的试剂盒对适当浓度标本进行重复测定，检测结果同向相差不超过一个量级。

2.7分析特异性试剂条胶体金免疫层析法对于抗体与抗原反应存在特异性，即使用试剂条分别与牛血红蛋白标准液（Hb的浓度500µg/ml）、自来水、大便稀释液（阴性参考液，具体配制方法见附录A）进行检测，不得出现阳性结果。

胶体金免疫层析法检测试剂盒1 范围本标准规定了胶体金免疫层析法检测试剂盒的相关术语和定义、要求、试验方法、标签和使用说明书、包装、运输和贮存。

本标准适用于以胶体金免疫层析法为原理对人体样本（血液、尿液、粪便、唾液等）进行定量、半定量、定性检测的试剂盒。

2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。

凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。

GB/T 21415 体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品和控制物质赋值的计量学溯源性GB/T 29791.2 体外诊断医疗器械制造商提供的信息（标示）第2部分：专业用体外诊断试剂3 术语和定义下列术语和定义适用于本标准。

3.1定性检测 qualitative examination基于物质的化学或物理等特性将其识别或分类的一组操作。

注1：一般只报告两类检测结果（阳性/阴性、是/否、有/无等）。

注2：其显著特征是仅在临界值上有一个可能的医学决策点。

注3：改自GB/T 29791.1-2013，定义A.3.43。

3.2半定量检测semiquantitative examination本质上是一种增加了反应程度选项（阳性程度、获得阳性结果的稀释度或与色卡的比较）的定性检测，可使用序数量表等呈现反应结果。

示例：检测结果可报告为“－”、“±”、“＋”、“＋＋”。

注：改自EP19（2nd ed），1.4.2。

3.3定量检测quantitative examination测量分析物的量或浓度并以适当测量单位的数字量值表达的一组操作。

[GB/T 29791.1-2013，定义A.3.45]3.4临界值 cutoff用于鉴别样品，作为判断特定疾病、状态或被测量存在或不存在的界限的量值。

注1：测量结果高于临界值被认为是阳性而低于临界值被认为是阴性。

注2：测量结果接近临界值可被认为是非确定性。

便潜血检测试剂盒（胶体金免疫层析法）产品技术要求xiandaigaoda便潜血检测试剂盒（胶体金免疫层析法）适用范围：用于体外定性检测人粪便样本中的人血红蛋白。

1.1型号/规格：条型： 100人份/筒；50人份/筒； 25人份/筒；1人份/袋；板型： 100人份/盒；50人份/盒； 25人份/盒；1人份/袋。

1.2 主要组成成分1.2.1检测条/板：硝酸纤维素膜（NC膜），包被鼠抗人血红蛋白单克隆抗体（T线），包被驴抗羊多克隆抗体（C线）；金标垫（固定胶体金标记的羊抗人血红蛋白多克隆抗体）。

1.2.2样本缓冲液（规格：2mL/瓶）：50 mM PBS pH为7.30～7.50。

2.1 外观物理性状2.1.1 外观外观平整，材料附着牢固，内容齐全。

2.1.2 膜条宽度试纸条宽度(4±0.2)mm。

2.1.3 液体移行速度上样缓冲液在反应膜上的移行速度应不低于10mm/min。

2.2 阳性企业参考品符合率检测人血红蛋白3份阳性企业参考品，检测结果应均为阳性。

2.3 阴性企业参考品符合率检测人血红蛋白3份阴性企业参考品，检测结果应均为阴性。

2.4 临界值检测人血红蛋白浓度为120ng/mL的企业参考品，20次重复，检测结果阳性率应≥95%；检测人血红蛋白浓度为80ng/mL的企业参考品，20次重复，检测结果阴性率应≥95%。

2.5 批间差取三个批号的便潜血检测试剂盒各40人份同时检测人血红蛋白浓度为120ng/mL 的企业参考品和人血红蛋白浓度为80ng/mL的企业参考品，各浓度的临界值企业参考品反应结果应一致。

2.6 稳定性在4℃~30℃下储存，有效期为24个月。

取过效期一个月内的试剂盒进行检测，检测结果应符合2.2~2.4的要求。

胶体金免疫层析分析仪适用范围：与本公司生产的胶体金检测试剂盒配套使用，用于人体样本的体外定性检测。

1.1包装规格分析仪型号为“FAG-Zh0001C”型。

其中“FA”为factory前两个字母大写，代表工厂自动化；G为gold首字母，代表胶体金；Zh为表中国汉语拼音前两字母，代表中国；0001为城市代号，代表北京；“C”代表二代仪器。

2.技术指标2.1 正常工作条件2.1.1 环境温度：10℃～30℃；2.1.2 相对湿度：20％～80％；2.1.3 电源电压：220V,50Hz；2.1.4大气压力：86.0kPa～106.0kPa；2.1.5远离强电磁场干扰源；2.1.6避免强光直接照射。

2.2 外观外观应满足如下要求：（1）外观整洁，无裂纹或划痕，无毛刺等缺陷，文字和标识清晰；（2）分析系统运动部件运行平稳，无卡住突跳；（3）紧固件连接牢固可靠，不得有松动；（4）信息显示应完整、清晰。

2.3 分辨率测试质控条重复测定10次，应能区分B3、B4反射率不大于0.01的一对质控条。

转化为计算公式，具体应满足：0＜A1-A2≤0.01，每次都满足S1-S2＜0其中：A1——质控条1反射率；S1——质控条1响应值；A2——质控条2反射率；S2——质控条2响应值。

2.4准确度分别检测含被测物相应阳性检测浓度（见表1）的样本各20次，用仪器判读检测结果，其结果阳性率≥95%。

分别检测含被测物相应阴性检测浓度（见表1）的样本20次，用仪器判读检测结果，其结果阴性率≥95%。

表1 检出限检测浓度点2.5重复性分别测试A1、A2、A3的三条质控条，每条重复测试10次，A1测量结果全部为阴性，A2测试结果全部为阳性，A3测试结果全部为阳性。

2.6通道一致性测试仪器测量范围内的质控条A2，每个通道测定同一质控条3次，各通道测试结果均为阳性。

2.7稳定性测试在仪器测量范围内的质控条A2，每次测试时质控条需进/出舱，连续测试10次，两次测试之间的间隔时间不小于3 min，各时间段测量结果均为阳性。

2.性能指标
2.1外观
a)试剂盒各组分应齐全、完整；液体无渗漏；包装标签应清晰、准确、牢固。

b)试剂瓶内的试剂应为清澈透明液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。

2.2装量
试剂装量应符合表 2 的要求。

表 2 装量要求
试剂组分数量（瓶）每瓶装量R1 3 ≥ 60 mL
R2 3 ≥ 20 mL
R1 1 ≥ 60 mL
R2 1 ≥ 20 mL 校准品 1 ≥3mL
2.3空白限
空白限≤0.05 g/L。

2.4线性区间
试剂盒线性在[0.00，4.00] g/L 区间内，应符合如下要求：
a)线性相关系数r≥0.990；
b) [0.00，1.00] g/L 区间内，线性绝对偏差在±0.10g/L 范围内；(1.00，
4.00] g/L 区间内，线性相对偏差在±10%范围内。

2.5精密度
2.5.1重复性
试剂盒测试浓度在（2.70±0.70）g/L 范围内的样本时，变异系数CV≤5.0%。

2.5.2批间差
试剂盒测试浓度在（2.70±0.70）g/L 范围内的样本时，相对极差R≤6.0%。

2.6准确度
回收率在 90%～110%范围内。

转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）注册指导原则转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）是一种用于检测人体血液中转铁蛋白含量的试剂盒。

转铁蛋白是一种铁载体蛋白，它在人体内的主要作用是将铁从肝脏转运到骨髓中的红细胞中，以供红细胞合成血红蛋白。

转铁蛋白含量的测定可以用于诊断贫血、铁代谢障碍等疾病，也可以用于评估铁剂治疗的疗效。

转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）的注册指导原则如下：一、试剂盒的组成转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）由试剂盒、标准品、样品处理液、质控品和说明书等组成。

试剂盒应包括胶体金试剂、反应板、吸头、洗涤缓冲液、稀释液等。

二、试剂盒的性能指标转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）的性能指标应符合国家相关标准和规定。

其中，灵敏度、特异性、准确性、重复性和稳定性等是重要的性能指标。

三、试剂盒的使用方法转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）的使用方法应详细说明，包括样品的采集、处理、稀释、反应条件、结果判读等。

同时，应提供标准品和质控品的使用方法和参考值。

四、试剂盒的质量控制转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）的质量控制应包括质控品的制备、使用和评价。

质控品应具有稳定的性质和可重复的结果，用于检验试剂盒的准确性和重复性。

五、试剂盒的注册申请转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）的注册申请应符合国家相关法规和规定，包括试剂盒的组成、性能指标、使用方法、质量控制、临床试验结果等。

同时，应提供完整的说明书和标签，以便用户正确使用试剂盒。

总之，转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）的注册指导原则是保证试剂盒的质量和安全，提高试剂盒的准确性和可靠性，为临床诊断和治疗提供有力的支持。

××检测试剂盒（胶体金法）产品技术要求模板定性产品医疗器械产品技术要求编号：XXXX检测试剂盒（xxx法）1产品型号/规格及其划分说明1.1产品规格卡型：1人份/盒、5人份/盒、25人份/盒、50人份/盒。

1.2主要组成成分1.3划分说明本产品用于体外定性检测人全血/血清/血浆样本中×××，临床上主要用于××××的辅助诊断。

本产品采用单人份铝箔袋密封包装，以不同的单人份装盒量来划分产品规格。

2性能指标2.1物理检查2.1.1外观检查外观应平整，标识应清晰，各组份应牢固附着，内容应齐全，液体无渗漏。

2.1.2液体移行速度液体移行速度应不低于10mm/min。

2.1.3膜条宽度膜条宽度应不小于2.5mm。

2.2阴性参考品符合率采用国家阴性参考品或经标化的企业阴性参考品进行检测。

阴性参考品符合率应为10/10。

2.3阳性参考品符合率采用国家阳性参考品或经标化的企业阳性参考品进行检测。

阳性参考品符合率应为10/10。

2.4最低检测限采用国家最低检测限参考品或经标化的企业最低检测限参考品进行检测。

DL1、DL2应均为阳性，DL3为阴性。

2.5重复性采用国家重复性参考品或经标化的企业重复性参考品进行检测，平行检测10次，C1结果应均为阳性，且显色度均一，C2结果应均为阳性，且显色度均一。

2.6批间差采用不同生产批号试剂对同一重复性参考品各重复检测10次，C1结果应均为阳性，且显色度均一，C2结果应均为阳性，且显色度均一。

2.7稳定性将检测试剂在37℃的条件下放置7天，取出平衡至室温后，分别检测2.2~2.5项，检测结果应符合相应要求。

3检验方法3.1物理检查3.1.1外观检查：取本产品1人份，在自然光下目视检查，结果应符合2.1.1要求。

3.1.2液体移行速度：取本产品2人份，按说明书操作，加2滴稀释液至加样孔，以秒表计时，计算液体移行速度，结果应符合2.1.2的要求。

血红蛋白和转铁蛋白联合检测法对新生儿应激性消化道出血的
筛查作用
石祖亮;王维鹏
【期刊名称】《微循环学杂志》
【年(卷),期】2011(21)2
【摘要】@@ 应激性新生儿消化道出血是临床常见病症,临床实验室对其粪便隐血试验常单独采用血红蛋白(Hb)单克隆抗体胶体金免疫试纸法进行筛查,虽然该方法简单快速,但时有漏检现象发生.有文献[1]报道,检测标本时将转铁蛋白(Tf)或者将Tf 与Hb同时检测可有效减少漏检,提高阳性检出率.本文选取窒息儿、早产儿及正常足月新生儿标本126例,使用Hb、Tf胶体金试纸单检和联检粪便隐血收到了较好效果,报道如下.
【总页数】2页(P55-56)
【作者】石祖亮;王维鹏
【作者单位】湖北省妇幼保健院,武汉,430070;湖北省妇幼保健院,武汉,430070【正文语种】中文
【中图分类】R446.13
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究4.脐血血红蛋白电泳在新生儿地中海贫血筛查中的作用5.粪便血红蛋白、转铁蛋白联合检测在恶性肿瘤患者并发消化道出血筛查中的意义
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血红蛋白/转铁蛋白联合检测试剂盒（胶体金免疫层析法）适用范围：该产品用于体外定性检测人粪便样本中的血红蛋白和转铁蛋白的含量。

1.1 规格和型号板型：1人份/袋；25人份/盒1.2 主要组成成分产品由卡塞，血红蛋白检测试纸条和转铁蛋白检测试纸条组成。

血红蛋白检测试纸条主要由塑料板，吸水板，硝酸纤维素膜，胶体金，吸水纸组成；硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线（C线）和包被有鼠抗人血红蛋白单克隆抗体1的反应线（T线）组成；胶体金由鼠抗人血红蛋白单克隆抗体2标记制成。

转铁蛋白检测试纸条主要由塑料板，吸水板，硝酸纤维素膜，胶体金，吸水纸组成；硝酸纤维素膜由包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线（C线）和包被有鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体1的反应线（T线）组成；胶体金由鼠抗人转铁蛋白单克隆抗体2标记制成。

2.1外观外观整洁完整、无破损、无污染；材料附着牢固、内容物齐全。

包装完整、标签清晰。

2.2物理检查膜条应宽于2.5mm，液体移行速度应不低于10mm/min。

2.3临界值及重复性血红蛋白检测试纸部分：临界值为0.1μg/mL。

检测浓度为0.2μg/mL的血红蛋白质控品（配制方法见附录A），平行检测20次，检测结果应一致，显色度均一，结果的阳性率应≥95%。

检测浓度为0.05μg/mL的血红蛋白质控品（配制方法见附录A），平行检测20次，检测结果应一致，显色度均一，结果的阴性率应≥95%。

转铁蛋白检测试纸部分：临界值为10ng/mL。

检测浓度为40ng/mL的转铁蛋白质控品（配制方法见附录A），平行检测20次，检测结果应一致，显色度均一，结果的阳性率应≥95%。

检测浓度为5ng/mL的转铁蛋白质控品（配制方法见附录A），平行检测20次，检测结果应一致，显色度均一，结果的阴性率应≥95%。

2.4 特异性血红蛋白检测试纸部分：检测浓度为500μg/mL的牛、猪血红蛋白质控品（配制方法见附录A）以及检测水，检测结果均应为阴性。

转铁蛋白测定试剂盒（免疫比浊法）适用范围：用于体外定量检测人血清中转铁蛋白的浓度。

1.1包装规格a) 试剂1：2×45ml，试剂2：2×15ml；b) 试剂1：2×60ml，试剂2：2×20ml；c) 试剂1：2×16.8ml，试剂2：2×5.6ml；d) 试剂1：1×15ml，试剂2：1×5ml。

1.2试剂主要组成成分试剂1主要组成成分Tris缓冲液50mmol/l试剂2主要组成成分转铁蛋白抗体适量2.1 外观和性状2.1.1 试剂盒各组分应齐全、完整、液体无渗漏；外包装完好、无破损，标签完好、字迹清晰。

2.1.2 试剂1应为无色或淡黄色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。

2.1.3 试剂2应为淡黄色或乳白色液体，无沉淀、无悬浮物、无絮状物。

2.2 净含量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度试剂空白吸光度，应≤0.5。

2.4 分析灵敏度测试7.5g/L的被测物时，吸光度变化（ΔA）应不低于0.8。

2.5 准确性回收率在85%-115%之间。

2.6 重复性变异系数（CV）应不超过5%。

2.7 线性2.7.1在(0.5,7.8)g/L范围内，线性相关系数r应不低于0.990；2.7.2 在(0.5,3.0]g/L范围内绝对偏差不超过±0.3g/L；(3.0,7.8)g/L范围内相对偏差不超过±10%。

2.8 批间差批间相对极差不超过10%。

2.9 稳定性该产品在2℃～8℃条件下贮存有效期为18个月，取效期末的产品进行检测，应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.7之规定。

医疗器械产品技术要求编号：铁蛋白（FER）检测试剂盒（胶体金免疫层析法）1.产品型号/规格及划分说明1.1型号/规格：检测条1人份/袋，检测卡1人份/袋。

1.2主要组成成分：1.检测试剂：由胶体金垫（胶体金标记羊抗鼠FER单克隆抗体）、硝酸纤维素膜（C 线包被羊抗鼠多克隆抗体，T线包被羊抗鼠FER单克隆抗体）、纤维膜、吸水纸、PVC 板、纤维膜、吸水纸、PVC板；2.干燥剂1个；3.铝箔袋1个；4.滴管1个（选配）；5.稀释液1瓶；6.比色卡1张。

1.3适用范围用于体外半定量检测人血清、血浆、全血（静脉全血、末梢血)中的铁蛋白。

1.4产品储存条件及有效期(体外诊断试剂适用)4℃～30℃，密封避光保存，有效期24个月。

2.性能指标2.1物理性状2.1.1外观:检测试纸整洁完整、无毛刺、无破损、无污染。

2.1.2宽度:检测试纸宽度≥2.5mm。

2.1.3移行速度：液体移行速度应不低于10mm/min。

2.2阳性参考品符合率用铁蛋白企业内部阳性参考品进行检测，结果符合以下标准：80ng/ml显色强度强于50ng/ml参考线；30ng/ml显色强度强于20ng/ml参考线，弱于50ng/ml参考线；15ng/ml显色强度强于10ng/ml，弱于20ng/ml参考线。

2.3阴性参考品符合率分别检测参考溶液、胆红素250ng/ml、胆固醇2.5ug/ml、血红蛋白1.5ug/ml，结果均为阴性。

2.4最低检出量最低检出量为10ng/ml。

2.5批内精密性取一批的检测试剂盒10人份，用铁蛋白企业内部精密性参考品CV（10ng/ml）平行检测（n=10），显色强度与10ng/ml参考线相当，反应结果一致。

2.6批间精密性连续三批的检测试剂盒各取10人份，用铁蛋白企业内部精密性参考品CV（10ng/ml）平行检测（n=10），显色强度与10ng/ml参考线相当，反应结果一致。

2.7稳定性4℃～30℃，密封避光保存，放置24个月，分别检测2.1-2.5项，结果应符合各项目的要求。

胶体金免疫层析法在检测粪便血红蛋白中的应用Application of Colloid G old Immunochromatographic T echnique forDetecting Fecal Occult B lood Summarized byΞ徐韫健,江洁华,廖伟娇(广州医学院第一附属医院检验科　广州　510120)【提　要】　胶体金免疫层析技术是把免疫层析技术与胶体金标记技术结合而建立的一种新的免疫学方法,具有灵敏度高,特异性强,简便、快速等特点,有广阔的应用前景.本文就胶体金免疫层析技术的基本原理及其在检测粪便血红蛋白中的应用进行综述.【关键词】　免疫层析;胶体金;粪便潜血试验[文章编号]　1008-634X(2005)06-0531-03 胃肠道出血可由多种疾病引起,美国癌病协会估计早期诊断和及时治疗的情况下,每年死于此类疾病的人三分之二可挽救.临床研究证实,粪便中带有癌肿的微量出血是早期肠癌唯一可以查出的异常现象,因此潜血试验成为人们不断深入研究的热点.过去一直沿用化学法来检测粪便潜血,近年研发了胶体金免疫层析法,血红蛋白单克隆抗体检测的免疫法与传统的化学法相比,灵敏度、特异性都有了很大的提高,且不受饮食或相关药物的影响[1],对早期肠癌的诊断和治疗发挥了重要的作用.1　胶体金免疫层析法的检测原理胶体金免疫层析法融合了免疫层析技术和胶体金显色原理,为特异地快速检测粪便潜血建立了一种新的免疫学方法.该法是利用纤维膜的毛细作用,使待测物抗原或抗体沿表面向前运动,与待测区标记的捕获物特异结合而聚集显色[2].胶体金免疫层析法检测粪便潜血的试验所用试剂全部为干试剂,多个试剂被组合在一个约6mm×70mm的塑料板条上,成为一单一试剂条(图1),试剂条上端(A)和端(B)分别粘贴吸水材料,胶体金标记的抗人血红蛋白单克隆抗体和胶体金标记鼠IgG干片粘贴在近下端(C)处,紧贴其上为硝酸纤维素膜条.硝酸纤维素膜条上有两个反应区域,测试区(T)包被有抗人血红蛋白多克隆抗体,参照区(R)包被有羊抗鼠IgG.测定时将试纸条下端(B)浸入粪便悬液中,下端的吸水材料即吸取液体向上端移动,流经(C)处时使干片上的胶体金复合物复溶,并带动其向膜条渗移.若悬液中含有人血红蛋白,即与(C)处的胶体金标记的抗人血红蛋白单克隆抗体结合形成抗原-抗体复合物,随液体向前层析流动至测试区(T),即与测试区载有的抗人血红蛋白多克隆抗体结合形成夹心复合物,呈现红色阳性反应线.过剩的胶体金复合物继续前行,至参照区(R)与固相羊抗鼠IgG结合,而显出红色质控线条.反之,阴性标本则无反应线条,而仅显示质控线条.图1　胶体金免疫层析试验原理示意图 免疫层析一步法所用的抗体有两种:抗人血红蛋白抗体和抗人红细胞基质抗体,前者可检出消化道任何部位的出血,而后者只能检出下消化道的出血[3].目前一般是用抗人血红蛋白抗体来特异性结合人血红蛋白抗原.此法简便、快速,只特异地针对人血红蛋白抗原表位,基本排除了饮食及药物等因素的干扰,被世界卫生组织胃肠镜检查协会推荐作为粪便潜血试验的一种较为确认的方法[4].2　胶体金免疫层析法的存在问题2.1　前后带现象胶体金免疫层析法具有高度的敏感性,但血红蛋白浓度过高时反而会出现假阴性结果,这是由于单克隆抗原抗体反应中,过量的血红蛋白会导致反应体系135现代临床医学生物工程学杂志　2005年第11卷第6期Ξ基金项目:广医一院科研基金(y200412).作者简介:徐韫健,女,检验师,本科,从事临床检验工作.中抗原的过剩,出现前带现象而导致假阴性结果.此时,需要将已稀释的标本再稀释50～100倍重做.据试验证明,当样本中血红蛋白含量过高(>30000μg/ ml)或过低(<0.03μg/ml)时,试验结果均为阴性,只有血红蛋白含量在3～300μg/ml时才为强阳性反应[5].2.2　结果不能定量胶体金免疫层析法不容易对消化道出血病人进行疗效观察[6],它是一种免疫法,很难确定定量反应关系,只有抗原抗体比例合适时才出现阳性反应,结果报告只能报阳性或阴性,不能报告强阳性、弱阳性或加号(++++、+++、++、+),因此观察止血程度欠佳.而化学法可根据反应时间和颜色深浅大致估计出血量的多少(半定量).避免对临床造成错误引导,有建议金标法和化学法同时检测[7],既可避免化学法的假阳性,又可弥补金标法只能定性的不足,使其检测的准确性提高.国外做大量肠癌普查时,都同时应用化学法和免疫法两种方法,进一步提高胃肠道出血的检出率[8].213　抗原决定簇会被降解或屏蔽有些患者的血红蛋白在胃部时,珠蛋白链被酸迅速地水解,在小肠被蛋白酶降解,血红蛋白可能被充分降解或消化殆尽而失去单克隆抗体所特异结合的抗原决定簇,同时体外或胃肠道内细菌的作用也可使粪便中血红蛋白免疫活性丧失,导致假阴性结果.有些患者血红蛋白的抗原与单克隆抗体不匹配,或抗原决定簇被糖化血红蛋白[9]、触珠蛋白[10]等屏蔽引起假阴性.2.4　抗原纯化的效果影响试剂的质量由于制备单克隆抗体或多克隆抗体,国内外大都用红细胞裂解液作抗原,杂质很难去除[11],血红蛋白抗原的不纯会降低抗体的特异性,引起假阳性或假阴性结果.215　抗原抗体反应受温度影响较大当冬天气温较低时,有些阴性标本会延长时间出现阳性结果[12],所以,在试验温度较低时应适当延长观察时间或做保温处理,以免人为出现假阴性结果. 216　持续监测由于免疫学方法的高度敏感性,又由于有正常的生理性出血,在某些正常人特别是服用刺激胃肠道的药物后可造成假阳性,停药后可恢复正常.另外不是所有肠癌都每天出血,只有溃疡性癌肿才会持续出血[13],单次送检粪便标本会影响粪便潜血的阳性率.故对疑有大肠癌或隐匿性消化道出血的病人应连续取粪便标本三次[14]追踪做潜血试验,结果才会更加可靠.可见,一切改变血红蛋白的量和质的因素均可能干扰胶体金免疫层析法的准确性,此法并非粪便潜血的“金标准”,其方法学有待进一步探讨[15].3　方法学优化311　优化稀释液有报道蒸馏水不是最佳的胶体金免疫层析法检测粪便潜血的标本稀释液,一种弱碱性的增强液代替蒸馏水作稀释,可提高消化道出血的检出率[16].由于抗原和抗体具有胶体性质,在弱碱性条件下有较高的亲水性,抗原与抗体特异性结合后,其亲水性减弱,易受某些电解质影响而失去部分负电荷,从而使在第一阶段已形成的抗原—抗体复合物彼此进一步连接,出现明显的凝集或沉淀现象.因此,采用增强液做抗原抗体反应介质检测粪便潜血优于用蒸馏水做介质.3.2　血红蛋白与转铁蛋白的联合检测转铁蛋白在肠道自身的稳定性及抗菌能力都强于血红蛋白,克服了由于血红蛋白易被胃酸、细菌降解消化的弊病,从方法学上有很好的互补性[17].313　抗原抗体的改进可通过基因工程技术获取高纯度的抗原与抗体,或构建多表位抗原抗体[18],或采用信号放大系统[19],提高反应的特异性与灵敏度.4　展望目前胶体金免疫层析技术只是定性检测,仅给出阳性或阴性结果,不能对消化道出血病人进行疗效观察[20].随着胶体金免疫层析技术的发展,在定量检测上将得到突破,在精确控制加样量和抗体包被量的条件下,用显色时间的长短来定量,通过用光电比色技术来确定被检测样本含量的多少[21].另外,多元检测也是胶体金免疫层析技术发展的方向,即在一条膜上可同时检测多种物质,对有联检意义的多个指标的检测有很大的应用价值.胶体金免疫层析技术将继续提高其灵敏度和准确性,使其成为更简便、快速和准确,更高效、价廉且适用于大规模临床应用的检测方法.胶体金免疫层析法必将长期作为潜血试验的首选方法,普及应用于基层医疗机构,并将取代传统的化学法,具有广阔的应用前景.参　考　文　献[1]杨明,丛玉隆,章子其,等.转铁蛋白与血红蛋白同时检测消化道出血[J].临床检验杂志,2003,21(2):83.[2]王中民,李君文.免疫层析技术研究进展[J].国外医学临床生物化235Journal 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血红蛋白/转铁蛋白联合检测试纸（胶体金免疫层析法）适用范围：体外定性检测人粪便中的血红蛋白（Hb）和转铁蛋白（Tf）。

1.1 包装规格1.1.1条型：1人份/袋，10人份/袋，25人份/袋；25人份/筒；1人份/盒，10人份/盒，25人份/盒，50人份/盒，100人份/盒。

1.1.2 板型：1人份/袋，10人份/袋，25人份/袋；1人份/盒，10人份/盒，20人份/盒，50人份/盒。

1.2 主要组成成分检测试剂盒由相应人份的检测试剂、干燥剂和取样器（选配）组成，其中检测试剂主要由固相于硝酸纤维素膜的抗鼠IgG多克隆抗体（质控线C）、抗人血红蛋白单克隆抗体1（检测线T1）和抗人转铁蛋白单克隆抗体1（检测线T2）、以及胶体金标记的抗人血红蛋白单克隆抗体2和抗人转铁蛋白单克隆抗体2组成。

2.1 物理性状2.1.1 外观试纸应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；材料附着牢固。

2.1.2 膜条宽度试纸膜条宽度应≥2.5 mm。

2.1.3 液体移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min。

2.2 最低检测限2.2.1 人血红蛋白（T1）最低检测限应不高于200 ng/mL。

2.2.2 人转铁蛋白（T2）最低检测限不高于40 ng/mL。

2.3 特异性2.3.1 检测浓度为500 µg/mL的羊、鸡、牛、猪、兔、狗血红蛋白，检测结果均应为阴性。

2.3.2 检测浓度为200 μg/mL牛转铁蛋白样本和200 μg/mL狗转铁蛋白样本，检测结果均应为阴性。

2.3.3 检测浓度为2000 µg/mL的辣根过氧化物酶，检测结果均应为阴性。

2.3.4 检测纯化水及正常大便稀释液，检测结果均应为阴性。

2.3.5 检测浓度为5 μg/mL人血红蛋白样本，T2检测结果应为阴性。

2.3.6 检测浓度5 mg/mL人转铁蛋白样本，T1检测结果应为阴性。

2.4 重复性用重复性参考品平行检测10人份，其反应结果均应为阳性，且显色度均一。

便隐血检测试纸（胶体金免疫层析法+化学法）适用范围：该产品用于体外定性检测人体粪便样本中血红蛋白的含量。

1.1包装规格条型包装规格：1人份/袋，30人份/盒；1人份/袋，40人份/盒；1人份/袋，50人份/盒；1人份/袋，100人份/盒。

板型包装规格：1人份/袋，2人份/盒；1人份/袋，25人份/盒；1人份/袋，50人份/盒；1人份/袋，100人份/盒。

1.2型号划分说明1.3主要组成成分胶体金免疫层析法检测试纸主要由塑料板，吸水纸，硝酸纤维素膜，胶体金组成。

硝酸纤维素膜包被有抗人血红蛋白单克隆抗体血红蛋白1的反应线（T线）和包被有羊抗鼠多克隆抗体的控制线（C线），胶体金标记有抗人血红蛋白单克隆抗体血红蛋白2；化学法检测试纸条主要由四甲基联苯胺、过氧化氢二异丙苯制作的试剂纸组成。

2.1 外观外观整洁完整、无破损、无污染；材料附着牢固、内容物齐全；包装完整、标签清晰；硝酸纤维素膜应白色，无可见瑕疵；化学法试纸颜色为橙黄色，无杂物。

2.2 物理检查胶体金法：试纸条应宽于2.5mm，液体移行速度应不低于10mm/min，板型试纸条C、T线应与卡塞上一致。

2.3 临界值及重复性胶体金法：临界值为0.1μg/mL。

检测浓度为0.2μg/mL的血红蛋白质控品，平行检测20次，5分钟内观察结果，检测结果应一致，显色度均一，结果的阳性符合率应≥95%。

检测浓度为0.05μg/mL的血红蛋白质控品，平行检测20次，5分钟内观察结果，检测结果应一致，结果的阴性符合率应≥95%。

化学法：临界值为1μg/mL。

检测浓度为2μg/mL的血红蛋白质控品，平行检测20次，1分钟内观察结果，检测结果应一致，显色度均一，结果的阳性符合率应≥95%。

检测浓度为0.5μg/mL的血红蛋白质控品，平行检测20次，1分钟内观察结果，检测结果应一致，结果的阴性符合率应≥95%。

2.4 特异性胶体金法：测定浓度为500μg/mL的牛、猪血红蛋白质控品以及自来水和大便稀释液，5分钟内观察结果，检测结果应为阴性。

转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）注册指导原则一、背景介绍铁蛋白是一种重要的蛋白质，它与铁元素的转运和储存密切相关。

转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）作为一种检测铁蛋白水平的关键工具，具有快速、准确、便捷等优点。

本文将介绍如何进行该检测试剂盒的注册指导原则。

二、目的转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）的注册指导原则旨在确保该试剂盒的安全性、有效性和准确性。

通过一系列的严密的测试和评估，为用户提供可靠的检测结果，并且充分保护使用者和患者的权益。

三、注册指导原则1. 技术要求•转铁蛋白检测试剂盒（胶体金法）应基于现有的科学知识和技术，并按照国际标准进行设计和研发。

•试剂盒的组成和配方应明确，能够稳定、准确并可重复地检测转铁蛋白的水平。

•试剂盒应具有良好的抗干扰性，能够在常见干扰物存在的情况下仍能准确测量转铁蛋白。

•试剂盒的操作简单易行，能够在标准化实验室条件下完成。

•试剂盒应有较长的保存期限，并能在不同温度和湿度条件下保持稳定。

2. 临床验证和评价•转铁蛋白检测试剂盒应经过临床实验证明，具有较高的敏感性和特异性。

•基于大样本量的实验数据，应进行性能验证和临床验证，与已有的金标准方法进行比较。

•采用多中心临床试验，确保试剂盒在不同实验室和不同人群中的性能稳定性和一致性。

3. 产品标签和说明书•试剂盒的标签应清晰、准确地标示试剂的名称、规格、用途、批号、保质期等信息。

•说明书应提供详细的试剂盒使用方法、操作步骤和注意事项。

•说明书中还应包含必要的质控和质量保证信息，以确保试剂盒在正常使用情况下的准确性和可靠性。

4. 临床应用•试剂盒应明确适用的临床样本类型和使用范围，以及相关临床指南和标准。

•试剂盒的性能应与相关的临床病理特征和诊断结果有关联。

•试剂盒的应用前景和临床意义应得到充分评估和论证。

5. 监管和控制•转铁蛋白检测试剂盒的注册申请应符合国家食品药品监督管理局（或类似机构）的相关法规和指导文件要求。

•注册过程中，需要提交一系列的产品技术资料、临床验证数据、质控方案、生产工艺流程等相关文件和信息。

铁蛋白(Fer)测定试剂盒（荧光免疫层析法）适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清、血浆或全血中铁蛋白的含量。

1.1 包装规格10人份/盒、20人份/盒、50人份/盒。

1.2 主要组成成分每盒含10/20/50人份检测卡(每人份包装中含1袋干燥剂）、1个校准信息卡。

主要组成成分见表1：表12.1 物理性能2.1.1 外观检测卡应整洁完整、无毛刺、无破损、无污染；材料附着牢固。

2.1.2 膜条宽度膜条的宽度≥3mm。

2.1.3 移行速度液体移行速度应不低于10 mm/min。

2.2 空白检测限空白检测限应不高于10 ng/mL。

2.3 准确度用世界卫生组织提供的标准品(NIBSC code:94/572)作为样本进行检测，其测量结果的相对偏差应在±15%范围内。

2.4 线性在企业线性范围内［10，500］ng/mL，相关系数（r）应不低于0.99。

2.5 重复性用浓度为（40±4） ng/mL、（100±10） ng/mL和（450±45）ng/mL的样本各重复检测10次，其变异系数（CV%）应不高于15.0%。

2.6 批间差用3个批号的检测卡检测浓度为（100±10）ng/mL和（450±45） ng/mL的样本，则批间相对极差（R%）应不高于15.0%。

2.7 特异性表22.8 溯源性根据GB/T 21415-2008的有关规定，校准信息卡溯源至世界卫生组织提供的标准品（NIBSC code:94/572）。

2.9 稳定性10℃～30℃保存，有效期12个月，效期后2个月内分别检测2.1～2.5、2.7项，其结果应符合各项要求。

1.性能指标1.1物理检查1.1.1外观检查外观应平整，标识应清晰，各组分应牢固附着、内容应齐全。

1.1.2移行速度液体移行速度应不低于10mm/min。

1.1.3膜条宽度膜条宽度应不小于 2.5mm。

1.2阳性参考品符合率大便隐血：对10 份人血红蛋白阳性参考品（P1～P10）进行检测，结果假阴性样本应不大于1 份，符合率应≥90%。

转铁蛋白：对 6 份转铁蛋白阳性参考品（P1′～P6′）进行检测，结果应均为阳性。

1.3阴性参考品符合率大便隐血：对10 份人血红蛋白阴性参考品（N1～N10）进行检测，结果假阳性判断结果不多于1 份，符合率应≥90%。

转铁蛋白：对10 份转铁蛋白阴性参考品（N1′～N10′）进行检测，结果应均为阴性。

1.4灵敏度大便隐血：对 3 份人血红蛋白灵敏度参考品（L1～L3）进行检测，灵敏度应不高于200ng/mL。

转铁蛋白：对 3 份转铁蛋白灵敏度参考品（L1′～L3′）进行检测，灵敏度应不高于10ng/mL。

1.5重复性大便隐血：分别检测人血红蛋白阳性精密度参考品(J1)和人血红蛋白阴性精密度参考品(J2)各10 次，同一份参考品的阴阳性判定结果基本一致，假阴性及假阳性判定结果分别不多于 1 份，重复率≥90%。

转铁蛋白：对1 份转铁蛋白精密度参考品（J′），重复检测10 次，结果应均为阳性，显色均一。

1.6精密性大便隐血：每批随即抽取10 个检测卡样品，测定人血红蛋白阳性精密度参考品(J1)，检测线显色应均匀一致，对照线显色应均匀一致。

转铁蛋白：每批随即抽取10 个检测卡样品，测定转铁蛋白精密度参考品（J′），检测线显色应均匀一致，对照线显色应均匀一致。

1.7批间差大便隐血：取三个批次试剂测定同1 份大便隐血精密度参考品（J），重复检测10 次，反应结果一致，显色度基本一致。

转铁蛋白：取三个批次试剂测定同1 份转铁蛋白精密度参考品（J′），重复检测10 次，反应结果一致，显色度基本一致。