土壤脲酶检测试剂盒说明书

土壤纤维素酶（S-CL）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC0150规格：50T/24S产品说明：S-CL主要来源于土壤微生物，S-CL催化农作物秸秆产生的葡萄糖是主要的碳源营养物质。

本产品采用3.5－二硝基水杨酸法测定S-CL催化纤维素降解产生的还原糖的含量。

产品内容：试剂一：甲苯10mL×1瓶，4℃保存；（自备）试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存；试剂三：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂四：液体15mL×1瓶，4℃保存；标准品：粉剂×1支，4℃保存，含10mg无水葡萄糖（干燥失重<0.2%），临用前加入1mL蒸馏水溶解，配制成10mg/mL葡萄糖溶液备用，4℃可保存1周，或者用饱和苯甲酸溶液溶解，可保存更长时间。

标准品准备：将标准品用蒸馏水稀释至1、0.8、0.6、0.4、0.2、0.1mg/mL。

自备的仪器和用品:可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。

2、加样表和测定步骤：对照管测定管标准管空白管风干土样（g）0.250.25-试剂一(μL)125125-煮沸15min（盖紧）振荡混匀，室温放置15min-第1页，共2页试剂二（μL）250250-试剂三（μL）10001000-蒸馏水（μL）250250-振荡混匀，40℃水浴糖化1h后，煮沸15min（盖紧，防止水分散失）,得糖化液糖化液(μL)5050-标准液(μL)--50蒸馏水(μL)50试剂四(μL)150150150150混匀，沸水浴中煮沸显色15min（盖紧，防止水分散失），冷却蒸馏水（μL）1050105010501050混匀，540nm处蒸馏水调零，测定吸光值A，样品管计算ΔA=A测定管-A对照管标准曲线的建立：540nm处蒸馏水调零，读标准管吸光值ΔA=A标准管-A空白管。

土壤中性蛋白酶活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC0270规格：50T/24S产品内容：试剂一：液体20mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL试剂一，沸水浴搅拌溶解后待用；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；临用前加入10mL蒸馏水充分溶解待用；试剂四：液体40mL×1瓶，4℃保存；试剂五：液体10mL×1瓶，4℃保存；标准品：液体2mL×1支，0.2μmol/mL酪氨酸溶液，4℃保存。

产品说明：土壤蛋白酶参与土壤中存在的氨基酸、蛋白质以及其他含蛋白质氮的有机化合物的转化，其水解产物是高等植物的氮源之一。

土壤中性蛋白酶在中性环境下催化蛋白质水解，与土壤有机质含量、氮素及其他土壤性质有关。

中性条件下，土壤中性蛋白酶可将酪蛋白水解产生酪氨酸；在碱性条件下，酪氨酸还原磷钼酸化合物生成钨蓝，在680nm有特征吸收峰。

实验中所需仪器及设备：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL比色皿、蒸馏水、50目筛（或更小）。

样品处理：新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

操作步驟：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至680nm，蒸馏水调零。

2、样本测定：第1页，共2页试剂名称测定管对照管标准管空白管风干土样（g）0.10.1--试剂一（μL）100100--试剂二（μL）200----混匀后，37℃反应24h，期间振荡5-6次，使土样与反应液充分接触。

试剂三（μL）200200--试剂二（μL）-200--混匀，10000rpm室温离心10min，取上清液--上清液（μL）220220--标准液（μL）--220-蒸馏水（μL）---220试剂四（μL）650650650650试剂五（μL）130130130130混匀，40℃水浴10min，10000rpm室温离心10min，取上清液于680nm下读取各管吸光值A，分别记为A测定管、A对照管、A标准管、A空白管，计算ΔA测定=A测定管-A对照管，ΔA标准=A标准管-A空白管。

货号：MS2929 规格：100管/48样土壤淀粉酶（Soil Amylase，S-AL）试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：淀粉酶（EC3.2.1.1）是催化淀粉水解的一类酶的总称。

土壤中的淀粉酶主要来自于微生物，是一种重要的酶制剂，广泛应用于粮食加工、食品、酿造、发酵、纺织品工业和医药行业。

测定原理：淀粉酶水解淀粉产生还原糖，可与3,5-二硝基水杨酸反应生成红棕色物质，在508nm处有特征吸收峰，颜色深浅在一定范围内与还原糖量成正比。

自备实验用品及仪器：天平、水浴锅、低温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、甲苯。

试剂的组成和配制：试剂一：液体8mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：液体3mL×1瓶，4℃保存。

试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。

计算公式：a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准曲线：y = 0.2525x - 0.034，R² = 0.9917酶活单位定义：每g土样每天催化生成1mg还原糖为一个酶活力单位。

S-AL（mg/d /g 鲜重）=（△A +0.034）÷ 0.2525×V反总÷W÷T= 10.464×（△A +0.034）÷WV反总：反应体系总体积，0.11mL；T：反应时间，1/24d；W：样本质量，g。

b．用96孔板测定的计算公式如下标准曲线：y = 0.1263x - 0.034，R² = 0.9917第1页，共2页酶活单位定义：每g土样每天催化生成1mg还原糖为一个酶活力单位。

S-AL（mg/d/g）=（△A +0.034）÷ 0.1263×V反总÷W÷T=20.928×（△A +0.034）÷WV反总：反应体系总体积，0.11mL；T：反应时间，1/24d； W：样本质量，g。

微量法土壤脲酶（S-UE）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：UPLC-MS-4045规格：100T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体2mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二粉剂×2瓶2-8℃保存试剂三液体20mL×1瓶2-8℃保存试剂四A液液体1mL×1支2-8℃保存试剂四B液液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂五液体0.3mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯；2、试剂二：临用前取1瓶加入2.7mL蒸馏水，充分溶解待用，用不完的试剂2-8℃保存4周；3、试剂四：临用前将A液和B液按体积比1：4混合待用；用多少配多少；4、试剂五：液体置于试剂瓶内EP管中，使用前需先离心。

临用前加入5.7mL蒸馏水，混匀，待用；用不完的试剂2-8℃保存两周；5、标准品：1mg/mL氮标准液。

产品说明：S-UE能够水解尿素，产生氨和碳酸。

土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。

土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。

利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的NH3-N。

Urea S-U E NH4++H2CO3NH4++ClO-+Phenol Alkaline solution Indophenol Blue(630nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。