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荷叶提取物最佳工艺的研究摘要：荷叶提取物有较好的调节血脂功效，有药理[1]研究表明其主要活性组分为荷叶生物碱、黄酮类化合物。
并且目前荷叶生物碱[2]、黄酮的需求量不断增加，但是缺少方便有效的分离分析荷叶生物碱和黄酮的方法[3]，限制了对荷叶资源进一步的开发和利用。
本实验通过对荷叶生物碱、黄酮的提取、分离纯化，寻找荷叶提取物的最佳工艺，以期为荷叶提取物的深入研究和合理开发利用提供参考。
关键词：荷叶提取物;黄酮;生物碱;分离纯化Abstract: Better regulation of blood lipid effect of the extract from Lotus leaf, pharmacological research has shown that group into the alkaloid from Lotus leaf, its main activity of flavonoid compounds. And Lotus Leaf alkaloids, flavonoids in demand now increasing, but the lack of convenient and effective method of separation and analysis of alkaloids and flavonoids in Lotus leaf, limited the further development and utilization of resources in Lotus leaf. This experiment by alkaloids from Lotus leaves, extraction, isolation and purification of the flavonoids, finding best technology of Lotus leaf extract, for in-depth research and rational development and utilization of Lotus leaf extract of reference.Key words: Lotus leaf extract; flavonoids; alkaloids; isolation and purification1.前言荷叶属睡莲科植物(Nelumbo nuxifera Gaerth)的叶片，作为一种天然、安全有效的保健食品和药物[4]，越来越受到人们的青睐。
荷叶黄酮和生物碱的提纯及调节血脂作用比较
黄阿根;施洪飞;韦红;董瑞建;周文娟
【期刊名称】《扬州大学烹饪学报》
【年(卷),期】2006(023)003
【摘要】荷叶有较好的调节血脂功效,其主要活性组分是生物碱和黄酮类化合物,但它们各自在调节血脂中作用并不清楚,通过对荷叶黄酮和生物碱提取、分离和纯化,并用两分离组分进行大鼠动物实验,比较它们的调节血脂功效.结果表明:荷叶浸膏、荷叶生物碱对调节血脂中甘油三酯(TG)的指标有极显著作用,荷叶黄酮对调节血脂中甘油三酯的有显著作用,同样剂量生药提炼的生物碱明显优于荷叶黄酮的降血脂功效.
【总页数】3页(P23-25)
【作者】黄阿根;施洪飞;韦红;董瑞建;周文娟
【作者单位】扬州大学,食品科学与工程学院,江苏,扬州,225001;扬州大学,体育学院,江苏,扬州,225001;扬州大学,食品科学与工程学院,江苏,扬州,225001;扬州大学,食品科学与工程学院,江苏,扬州,225001;扬州大学,食品科学与工程学院,江苏,扬
州,225001
【正文语种】中文
【中图分类】R151.3
【相关文献】
1.荷叶不同饮片黄酮和生物碱类成分对兔体外凝血功能影响的比较 [J], 刘洋;张学兰;李慧芬;隋晓辉;占方玲
2.荷叶中总黄酮总生物碱及叶重变化规律的研究 [J], 李耀中;孟祥斌
3.荷叶总生物碱提取物对高血脂大鼠调节血脂作用研究 [J], 朱兰镇;李伟
4.荷叶总生物碱及其盐的提取和降脂作用的比较 [J], 赵骏;高岚;齐召朋
5.基于膜技术的荷叶黄酮提纯研究进展 [J], 王博;胡静雯;姜浩;刘俊妙;傅文军;忻王恢
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荷叶中生物碱提取及纯化工艺研究作者：薛岩来源：《科学与财富》2017年第25期摘要：目的：通过分析整理近年来国内外关于荷叶的研究成果，对荷叶中生物碱类、黄酮类成分的提取纯化工艺做以研究。
方法：从化学成分、提取分离、质量评价方法和药理活性等多个方面对荷叶的研究现状进行了论述。
结果：荷叶中有效成分的提取纯化研究、质量控制方法的研究和基于主要药理活性的相关作用靶点确定等方面的研究都有待于加强，以期对荷叶植物资源进行深入研究和合理开发利用。
关键词：荷叶；生物碱；提取；纯化荷叶为睡莲科多年生水生植物莲（Nelumbo nucifera）的新鲜或干燥叶片，夏、秋二季采收，是一种常见的药食两用药材。
荷叶广泛分布于长江、黄河和珠江三大流域，在我国有着悠久的种植和应用历史。
我国历史上有很多文人雅士写下了关于莲的诗词，可见中国人对莲的喜爱。
在《神农本草经》当中也有关于荷叶、莲子、藕节、莲子心、莲须的记载，其中荷叶的主要活性成分为黄酮类和生物碱类物质。
随着现代社会的发展，对中药材荷叶的研究也在逐渐深入，荷叶中黄酮类成分多为槲皮素、异槲皮素、山柰酚以及其他苷元的单糖或多糖苷类化合物[1]。
荷叶的药理作用广泛且毒副作用小，具有较大的研究潜力。
现代研究表明荷叶具有降脂减肥、抗氧化、抗癌和治疗心血管疾病等多种生物活性，具有较好的药用价值[2]。
本文作者通过分析整理近年来国内外关于荷叶中生物碱的提取及纯化工艺的研究成果，对荷叶中生物碱类、黄酮类成分的相关研究做以下总结。
1 化学成分研究荷叶中的生物碱研究始于公元十九世纪，日本科学家自福田真雄[3]等从荷叶中分离出荷叶碱，O-去甲基荷叶碱以及莲碱 3个成分以来，荷叶生物碱的提取分离受到越来越多人的关注。
国内外学者先后从荷叶中分离得到二十多种生物碱类成分[4]，主要分为以下几种：单苄基异喹啉类生物碱 6 种；阿朴啡类生物碱 6 种；氧化阿朴啡类 2 种；去氢阿朴啡类生物碱 4 种；原阿朴啡类生物碱以及双苄基异喹啉类生物碱3种。
荷叶炮制前后有效成分中总黄酮和总生物碱的含量比较来源：第十二届“挑战杯”省赛作品小类：生命科学大类：自然科学类学术论文简介：本项目采用乙醇回流提取生物碱，并用高效液相色谱法测定其含量；采用超声波法提取总黄酮，并用可见-紫外分光光度法测定其含量。
通过测定荷叶炮制前后其主要有效成分—生物碱及总黄酮类成分的含量，探讨这两类成分的变化与荷叶灰降脂减肥功效的相关性。
从化学成分角度来研究荷叶炮制后对降脂减肥成分总黄酮类成分和生物碱类成分的影响，并对这两类成分含量的变化进行比较。
详细介绍：近年的研究表明荷叶具有降低血脂的功效,其主要活性部位在生物碱和黄酮。
本项目采用乙醇回流提取生物碱，并用高效液相色谱法测定其含量；采用超声波法提取总黄酮，并用可见-紫外分光光度法测定其含量。
通过测定荷叶炮制前后其主要有效成分—生物碱及总黄酮类成分的含量，探讨这两类成分的变化与荷叶灰降脂减肥功效的相关性。
从化学成分角度来研究荷叶炮制后对降脂减肥成分总黄酮类成分和生物碱类成分的影响，并对这两类成分含量的变化进行比较。
本研究发现荷叶生品炒制、煅制后其总生物碱及总黄酮含量均明显减少，即荷叶降脂的主要成分——总生物碱、总黄酮炮制后含量均减少，从化学成分角度说明荷叶炮制后的降脂功效明显减弱。
明代戴元礼的《证治要诀》一书中明确记载：“荷叶灰服之，令人瘦劣，故单服可以消阳水浮肿之气，荷叶灰方”。
即荷叶烧存性，研末，有消肿降脂减肥之功。
古书记载提示荷叶灰也具有降脂减肥的功效。
人们在日常生活中也常用无毒的荷叶灰方来减肥。
就从本研究总黄酮和总生物碱的含量看，荷叶灰的降脂减肥功能似乎大大降低，这与古书记载不甚相符，因此有必要进行深入研究，从药效角度探讨荷叶灰是否仍具有降脂减肥作用，同时探讨荷叶灰中是否还有其他降脂减肥成分，为明确荷叶灰的炮制机理奠定理论基础，对古书中“荷叶灰服之，令人瘦劣” 这一理论找到根据。
(收起)撰写目的和基本思路比较荷叶炮制前后其有效成分中总黄酮和总生物碱的含量变化。
荷叶提取物降脂机理的研究近年来，由高脂造成的多种疾病困扰很多人，人们开始寻求可以缓解高脂膳食。
荷叶出现在很多具有减肥降脂功能的中药单复方制剂中，药食同源，那么荷叶能否降脂呢？材料与方法试验原料及处理。
荷叶原料，粉碎机粉碎，过80目筛子。
实验方法。
（1）胆酸盐标准曲线配制0.3mmol/L的胆酸钠、牛磺胆酸钠和甘氨胆酸钠溶液，做母液备用，取上述各溶液0、0.1、0.5、1.0、1.5、2.0和2.5mL到10mL的容量瓶中，加入磷酸缓冲溶液至2.5mL，再加入60%的硫酸溶液至10mL，在水浴锅中水浴20min后冰浴5min，在387nm处测定吸光度。
以胆酸盐的浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，绘制胆酸盐的标准曲线。
（2）荷叶中的黄酮、生物碱与胆酸盐结合能力的比较①体外模拟内环境及与胆酸盐的结合的方法取一定量的样品，加入1mL0.01mol/L的盐酸溶液，在培养箱中消化1h，用氢氧化钠溶液调节pH到6.3，然后加入4mL10mg/mL的胰酶，在培养箱中消化1h。
在各个样品中分别加入4mL胆酸盐溶液，用培养箱振荡1h。
转入离心管中，离心20min。
取上清液胆酸盐进行分析。
②PVPP去除荷叶黄酮后与胆酸盐的结合能力分别称取0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0g的PVPP，加入20mL荷叶浸提液，培养箱中振荡30min，转入离心管中，离心20min。
取上清液进行体外内环境模拟与胆酸盐的结合。
③石油醚去除荷叶生物碱后与胆酸盐的结合能力在荷叶浸提液中加入等量的石油醚，萃取1h，收集萃取后的荷叶浸提液，重复三次得到一次、两次和三次处理液。
取1mL上述处理液进行模拟与胆酸盐的结合。
结果与分析三种胆酸盐的标准曲线回归方程胆酸钠：y=11.80x+0.004R2=0.998牛磺胆酸钠：y=17.66x+0.007R2=0.997甘氨胆酸钠：y=15.62x+0.012R2=0.997荷叶中黄酮及生物碱与胆酸盐结合能力比较的结果与分析。
荷叶黄酮与生物碱类成分提取工艺比较发表时间：2016-05-06T10:25:39.197Z 来源：《医药前沿》2015年11月第32期作者：孟祥斌李耀中[导读] （常州工程职业技术学院制药与环境工程学院江苏常州 213164）本文比较研究了荷叶总黄酮和总生物碱的乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺。
孟祥斌李耀中（常州工程职业技术学院制药与环境工程学院江苏常州 213164）【摘要】本文比较研究了荷叶总黄酮和总生物碱的乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺。
根据三种工艺提取物的得率和提取物中总黄酮、总生物碱的含量，结合生产需要，确定以乙醇提取工艺为荷叶提取物制备工艺。
然后对乙醇提取工艺的醇浓度进行优化，确定70%乙醇作提取溶剂时，提取物得率为6.87%，总生物碱和黄酮的含量分别可达4.32%和5.93%。
该研究可以对荷叶提取物制备及产品开发生产提取较为行的技术支持。
【关键词】荷叶；提取工艺；优化【中图分类号】R92 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2015）32-0363-021.试验材料1.1仪器设备FW135中草药粉碎机、HZT-A200电子天平、RE-201D旋转蒸发仪、101-1A数显式电热恒温干燥箱。
1.2材料与试剂1.2.1试验材料荷叶原材料，采于常州市新北区荷园1.2.2试验试剂芦丁对照品荷叶碱对照品和（上海源叶生物科技有限公司）；C2H5OH、HCl、NaOH、NaNO2、Al(NO3)3、CHCl3、溴甲酚绿。
对照品纯度≥98%，其他试剂为分析纯。
2.试验方法2.1荷叶原材料处理将所采荷叶洗净，烘干，粉碎，过2号药筛后作为提取原料。
2.2 荷叶总黄酮与总生物碱的提取分别采用乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺对荷叶总黄酮和总生物碱成分进行提取。
2.2.1乙醇提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物称取荷叶提取原料10g，按20倍量（m:V）加入70%的C2H5OH，80℃温提2h，抽滤得滤液，将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液于65℃干燥后粉碎，得乙醇提取物。
荷叶黄酮与生物碱类成分提取工艺比较
摘要】本文比较研究了荷叶总黄酮和总生物碱的乙醇提取工艺、酸水提取工艺
和酸性乙醇提取工艺。
根据三种工艺提取物的得率和提取物中总黄酮、总生物碱
的含量，结合生产需要，确定以乙醇提取工艺为荷叶提取物制备工艺。
然后对乙
醇提取工艺的醇浓度进行优化，确定70%乙醇作提取溶剂时，提取物得率为
6.87%，总生物碱和黄酮的含量分别可达4.32%和5.93%。
该研究可以对荷叶提取
物制备及产品开发生产提取较为行的技术支持。
【关键词】荷叶；提取工艺；优化
【中图分类号】R92 【文献标识码】A 【文章编号】
2095-1752（2015）32-0363-02
1.试验材料
1.1仪器设备
FW135中草药粉碎机、HZT-A200电子天平、RE-201D旋转蒸发仪、101-1A数显式电热恒温干燥箱。
1.2材料与试剂
1.2.1试验材料荷叶原材料，采于常州市新北区荷园
1.2.2试验试剂芦丁对照品荷叶碱对照品和（上海源叶生物科技有限公司）；C2H5OH、HCl、NaOH、NaNO2、Al(NO3)3、CHCl3、溴甲酚绿。
对照品纯度≥98%，其他试剂为分析纯。
2.试验方法
2.1荷叶原材料处理
将所采荷叶洗净，烘干，粉碎，过2号药筛后作为提取原料。
2.2 荷叶总黄酮与总生物碱的提取
分别采用乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺对荷叶总黄酮和
总生物碱成分进行提取。
2.2.1乙醇提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物称取荷叶提取原料10g，按20倍量（m:V）加入70%的C2H5OH，80℃温提2h，抽滤得滤液，将滤液减压
蒸发得浓缩液，浓缩液于65℃干燥后粉碎，得乙醇提取物。
2.2.2酸水提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物称取荷叶提取原料10g，按20倍量（m:V）加入0.15%的HCl，80℃温提2h，抽滤得滤液，将滤液减压蒸
发得浓缩液，浓缩液
资助项目：常州市科技计划资助（CE20132016）
于65℃干燥后粉碎，得酸水提取物[5]。
2.2.3酸性乙醇提取工艺制备荷叶总黄酮、总生物碱提取物称取荷叶提取原
料10g，按20倍量（m:V）加入0.15% HCl的70%的C2H5OH，80℃温提2h，抽
滤得滤液，将滤液减压蒸发得浓缩液，浓缩液于65℃干燥后粉碎，得酸性乙醇提
取物[6]。
2.3 荷叶提取物得率及总黄酮、总生物碱含量检测
2.3.1荷叶提取物得率的检测三种提取工艺所得提取物精确称重，得提取物
重量（m）。
提取物得率（%）= m/10×100%
2.3.2荷叶提取物总黄酮、总生物碱含量检测
2.3.2.1芦丁标准曲线的建立称取芦丁标准品10mg，用30%乙醇溶解，定容
至50ml，制备成浓度为0.2mg/ml的标准溶液。
分别吸取上述标准溶液0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml于10ml比色管中，加入一定量的30%乙醇使最终体积为5ml；加入0.3ml浓度为5%亚硝酸钠溶液，混合均匀；静置5min，加入0.3ml
浓度为10%硝酸铝溶液混匀；静置6min，加入4ml浓度1mol/LNaOH溶液，混合
均匀；用30%乙醇标定至刻度，静置10min，于510nm处分别测定其吸光度值。
以吸光度（A）为纵坐标，标准液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程： A=4.4027C+0.0105（R²=0.9986）。
2.3.2.2荷叶碱标准曲线的建立称取荷叶碱对照品10mg，以适量氯仿溶解，
定容至50ml，制备成浓度为0.2mg/ml 的对照品标准溶液。
分别取0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0ml对照品标准溶液于10ml比色管中，加入0.2 mol/LNaOH溶
液1 ml、0.1%的溴甲酚绿溶液1ml，加氯仿定容至刻度，转移至分液漏斗并振摇
均匀，静置30min，取氯仿层，415nm测定其吸光值[6]。
以吸光度（A）为纵坐标，待测液浓度（C）为横坐标，绘制标准曲线，得回归方程：A=
8.3457C+0.0044（R²=0.9978）。
2.3.2.3提取物总黄酮和总生物碱含量的测定取适量三种提取方法所得的干燥提取物分别按2.3.2.1和2.3.2.2的方法显色并测定其吸光值，根据回归方程计算
提取物中总黄酮和总生物碱的含量。
3.结果与分析
通过检测，荷叶活性成分乙醇提取工艺、酸水提取工艺和酸性乙醇提取工艺
三种提取工艺所得提取物的提取得率和总黄酮、总生物碱含量见表1。
由表1可知：乙醇提取工艺提取物的得率最高可达6.80%，提取物总黄酮含量为6.17%，
另检测到含3.81%的总生物碱；酸水提取工艺提取物的得率最高可达8.84%，提取物总生物碱含量为4.53%；而酸性乙醇提取工艺提取物得率最高可达12.94%，提取物中总生物碱和黄酮
的含量分别可达4.17%和5.87%。
4.结论与讨论
根据三种提取工艺所得提取物的得率及其总黄酮和总生物碱含量的检测数据，结合工业
生产实际，研究认为目前针对荷叶总黄酮和总生物碱为主要目的物的提取物制备宜采用乙醇
提取工艺，该工艺既可同时获得两类主要成分实现联合提取，且两类成分的含量较高；同时，又有利于工业化生产的进行。
【参考文献】
[1] 王福刚，曹娟等．荷叶的化学成分及其药理作用研究进展[J]．时珍国医国药，2010，21（9）：2339
[2] 国家药典委员会．中国药典（2010版一部）[M]．中国医药科技出版社，2010：258-259
资助项目：常州市科技计划资助（CE20132016）。
