第九版诊断学配套课件 9 临床常见病原体检测

方法：免疫荧光、酶免、化学发光等。 排除交叉抗原的影响，病原体抗原检测可明确感染的病原体
HIV抗原检测实验原理示意图
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（三）血清学实验
特异性 IgM可作为感染性疾病 早期诊断指标，且可区分原 发与复发感染。
特异性 IgG，尤其双份血清的 滴度呈4倍或4倍以上升高，考 虑病原体感染。
无菌部位标本 存在正常菌群标本
致病菌 结合细菌的量考虑
培养阴性
临床表现支持感染 镜检找到病原体
标本不合格 培养不恰当 ……等
L细菌 厌氧菌 苛养菌
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第二节 病原体耐药性检测
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抗生素耐受的起点：盘尼西林
１９２８年
弗莱明 Fleming
１９４０年
弗洛里 Florey
&
钱恩 Chain
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耐药性的历史
了解本地区或本医院内常见病原菌的种类及耐药性， 有助于临床经验性治疗时合理选药。
定期对病原菌种类和耐药谱分析，有助于发现医院感 染暴发或流行。
管镜下采集法；（3）气管 穿刺法。
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要求：≤10个鳞状上皮细胞/低倍 ≥25个WBC /低倍
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（五）脑脊液与其他无菌体液标本
无菌注射器穿刺采集，置于无菌容器中立即送检。 脑脊液标本应立即保温送检，不能暂时保存于冰箱中。 第一管用于微生物学检查。 胸腹水等体液标本应抽取2-5ml送检。
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（六）泌尿生殖道标本的采集
常取生殖道分泌物 男性：无菌采集尿道口分泌物或前列腺液。 女性：用无菌棉签采集阴道或宫颈分泌物。 生殖道疱疹常穿刺取疱疹液
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（七）脓液及创伤感染分泌物标本
开放性脓肿及脓性分泌物 封闭性脓肿 大面积烧伤的创面分泌物

血液标本的采集
• 适应症：疑似菌血症、败血症或脓毒血症 的病人。
• 一般在抗生素使用前，于发热初期或高峰 期采血。
• 24小时内采血2~3次可提高阳性率。 • 血液与培养基的比例为1：10，一般成人血
量10~20ml，婴儿1~5ml。
呼吸道标本采集
• 类型：鼻咽拭子、痰和经气管采集的标本 。
• 上呼吸道存在正常菌群，在采集标本与结 果分析时应予考虑。
• 标本必须贴上标签，与检验申请单同时送检。
拒收标本
• 1.样本上无病患标签或病患标签与检验申请单不 符合。
• 2.样本以不适当的温度、运送培养基及容器运送 。
• 3.样本的量不足、已被防腐剂固定和运送时间过 长。
• 4.样本外漏、容器破损及明显受污染的样本。 • 5.样本的检验项目申请不适合进行。 • 6.当日重复送样本（除血液培养外）。 • 7.已接触空气的厌养菌检测标本。 • 8.被正常厌养菌污染的标本,要求检测。
检查方法
• 直接显微镜检查 • 病原体抗原与抗体的检测 • 病原体核酸的检测 • 病原体的分离培养与鉴定
显微镜直接涂片检测
• 不染色标本： • 染色标本：革兰氏染色
抗酸染色 墨汁染色
病原体分离培养与鉴定
• 目的： 明确感染病原体。 为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结果
。
• 结果评价： 正常人群的无菌体液中检测到细菌，应考虑细菌为
• 疑似梅毒螺旋体感染，直接从外生殖器硬 下疳蘸取渗出液，置于盖玻片上，立即送 检。
脑脊液
• 由临床医生采用腰椎穿刺，抽取2-3ml，置 于无菌容器中立即送检，不能暂时保存于 冰箱中。
胸腹水等穿刺液标本
• 标本采集应在用药前或停止用药后1~2天进 行。

第三节 临床感染常见病原体检查
二、检查项目和临床应用 （一）细菌感染：⑴检测细菌或其抗原---直接涂
片镜检、培养、抗原检测⑵检测抗体⑶检测细 菌遗传物质---基因探针技术、PCR技术
细菌培养是最重要的确诊方法 （二）病毒感染：病毒分离与鉴定、病毒核酸与
抗原检测、特异性抗体 细胞培养是最常用的病毒分离方法
第三节 临床感染常见病原体检查
（三）真菌感染：直接显微镜检查、分离 培养、免疫学试验和动物试验、核酸杂 交和PCR技术 形态学检查是真菌检测的重要手段
第三节 临床感染常见病原体检查
（四）寄生虫病： 直接显微镜检查 是寄生虫感染的 主要诊断依据
第三节 临床感染常见病原体检查
（五）其它病原体感染 1.支原体：分离培养是支原体感染的确诊依据。 目前临床多检测支原体抗原与核酸，用于早期快速诊断。 2.螺旋体：血清学 3.立克次体：血清学、分离培养、核酸检测 4.衣原体：直接显微镜检查、分离培养、DNA探针技术
一、标本采集和运送 标本采集的基本原则
1.无菌、及时、按照要求、标注清晰
2.根据病史与临床表现确定标本采集的类型与部位， 尽量采集病变明显部位标本。
3. 在发病的早期或急性期采集标本，最好在抗生素 使用前（如使用过抗生素应在申请单上注明）。
4.采集标本防止污染，并置于无菌容器，加盖密封、 立即送检。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（五）脑脊液与其它无菌体液 1.脑脊液由临床医生采用腰椎穿刺，抽取
2-3ml，置于无菌容器中立即保温送检 或床边接种。 2.胸水、腹水和心包液等标本宜采集较大 量标本送检，标本接种于血培养瓶。
第一节 标本的采集运送、 实验室评价和检查方法
（六）眼、耳部标本 用拭子采样，也可在局部麻醉后取角膜刮 屑。

第九章 临床病原体 检测
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提纲
第一节：标本的采集运送、实验室评价和检查
方法
药敏检测
第二节：病原体耐药性检测
第三节：临床感染常见病原体检测 病原体检测
第四节：病毒性肝炎检测
第五节：性传播疾病病原体检测
第六节：医院感染常见病原体检测
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教学目的与要求：
了解掌握临床病原体检查的主要内容（标本采集、 标本验收、药敏检查、耐药性检测、临床常见病 原体、病毒性肝炎、性传播疾病、医院感染） 、检测原理以及临床实际应用的重要意义。
三、检查方法
（一）直接显微镜检查 （二）病原体特异性抗原检查 （三）病原体核酸检查 （四）病原体的分离培养和鉴定 （五）血清学试验
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（一）直接显微镜检查——不染色 标本
• 不染色标本：适用于检
查生活状态下病原体的 动力及运动状况。
• 方法：压滴法、悬滴法。
• 意义：在不染色状态下
借助暗视野显微镜或相 差显微镜观察病原菌的 动力、活动方式。部分 病原体可借此初步诊断， 如梅毒螺旋体。
4.荧光显微镜用于标本经荧光染色后直接检 出某些病原微生物
5.电镜检查不常规用于临床，对某些病毒感 染却有确诊的价值。
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(二)病原体特异性抗原检查
• 利用抗原抗体之间的特异性反应，用已知抗体检
测患者血清及其他体液中的待测抗原，借助免疫 荧光技术、酶联免疫技术、化学发光技术、胶乳 凝集试验、对流免疫电泳等技术检测标本中未知 的病原体抗原，其诊断价值常以标本不同而各异。
• 酒精棉球消毒，防止污染。
静脉采血后，将血液注入培 养瓶内 。
• 采集时间：一般在抗生素使