gpc分子排阻色谱法

GPC测定PET的分子量及其分布

分子条件、参考文献

1) 柱子：Spheron Gel 长60cm，内径7.5mm，1根；淋洗液：氯仿＝1.6 mL/min；样品浓度：1mg/mL，20uL；紫外检测器。溶剂：间甲酚－氯仿（1:25）混合溶剂溶剂PET。书中附有K α值。

---GPC快速测定涤纶树脂分子量分布 虞光志 高聚物分子量及其分布的测定 上海科技出版社 1984 （出处可能有误，请知道的老师给予指正。） P 374-381

2) 柱子：ULTRA Styragel 105、104、103 300×8.9mm，3根；淋洗液：氯仿＝1.0 mL/min。

---简易法测定涤纶树脂分子量及其分布 周慕君 张晴 史悠琴 色谱 1989年 第七卷 第一期 38-41

3) 柱子：聚苯乙烯凝胶 200×8mm玻璃柱，1根；淋洗液：邻氯苯酚－氯仿混合液；紫外检测器。

---PET分子量分布的测定及对其性能影响的研究 张美琳 姜行知 魏晓波 等 聚酯工业

1992 第三期 7-11

4) 柱子：u－Styragel 300×7.8mm，3根104、103、102；淋洗液：邻氯苯酚－氯仿氯仿（1/3）样品浓度：2.0 mg/mL；示差折光检测器。溶剂：邻氯苯酚－氯仿（1:3）混合溶剂溶剂PET。

---用（GPC）在室温下测定。。。（PBT）分子量和分子量分布的研究 桑明敏 闫冬梅 高分子学报 1993年 第六期 311-315

凝胶渗透色谱测定涤纶分子量分布--《高分子学报》1980年01期

凝胶渗透色谱(GPC)是测定高聚物分子量分布的一种重要工具.GPC用于涤纶(PET)分子量分布的测定,所见报导不多,例如Sham以135—110℃,用间甲酚为淋洗液进行涤纶分子量分布测定.由于PET在高温的极性溶剂中易产生水解和酯交换反应,因此在样品的溶解和GPC的分析过程中必须采用氮气保护等措施,否则不能反映其真实分子量分布.Paschke等发展的溶剂体系,在室温,以硝基苯-四氯乙烷混合溶剂为淋洗液,此法虽可避免PET的降解,但在样品的配制过程中需用高温过滤设备和示差折射计操作比较麻烦.国内以苯酚-四氯乙烷为淋洗液,检测浊度.本文采用常温,新溶剂体系,以单一氯仿为淋洗液,测定涤纶的分子量分布.

中圈药师‘２０１１年第１４卷第１期ＣｈｉｎａＰＩｌ舳ｎ∞ｉ８ｔ２０１１．Ｖ０１．１４Ｎｏ．１

分子排阻色谱法测定头孢克肟聚合物

赵晓冬傅蓉陆军齐晓飞（辽宁省食品药品检验所沈阳１１００２３）

摘要目的：建立用分子排阻色谱法分析头孢克肟高分子聚合物的方法。方法：采用ＳｅｐｈａｄｅｘＧｌＯ色谱柱（３００咖×１６舢，４０—１２０ｇｍ），流动相Ａ为０．１ｍｏｌ·Ｌ“磷酸盐缓冲液（ｐＨ７．Ｏ），流动相Ｂ为超纯水。流速１．５ｍｌ·ｍｉｎ～。检测波长：２５４咖。结果：头孢克肟在５—８０ｍｇ·ＩＩｌｌ。范围内与头孢克肟高分子聚合物的峰面积呈良好的线形关系（ｒ＝Ｏ．９９９３）。头孢克肟在５－４００懈·ｍｌ。的范围内与头孢克肟缔合物的峰面积也呈良好的线性关系（ｒ＝０．９９９７）。结论：谈方法能较好地分离夹孢克肟与其聚合物，且精密度、准确度均能满足质量控制的要求。关键词头孢克肟；聚合物：分子排阻色谱法中圈分类号：Ｒ９１７文献标识码：Ａ文章编号：１００８－０４９Ｘ（２０１１）０１－００６１－０３

ＤｅｔｅｒｍｉｎａＵｏｎｏｆＰｏｌｙｍｅｒｓｉｎＣｅｆｉｘｉｍｅｂｙＭｏｌｅｃｕｌａｒ－ｅｘｃｌｕｓｉｏｎＣｈｒｏｍｔｏｇｒａｐｈｙＭｅｔｈｏｄＺｈａｏＸｉａｏｄｏｎｇ，ＦｕＲｏｎｇ，ＬｕＪｕｎ，ＱｉＸｉａｏｆｅｉ（ＬｉａｏｎｉｎｇＩｎｓｔｉｔｕｔｅｆｏｒＦｏｏｄａｎｄＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌ，Ｓｈｅｎｙａｎｇｌ１００２３，Ｃｈｉｎａ）ＡＢＳＴＲＡＣＴＯｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｅｓｔａｂｌｉｓｈｍｏｌｅｃｕｌａｒ－ｅｘｃｌｕｓｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｍｅｔｈｏｄｆｏｒｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｍｅｒｓｉｎｃｅｆｉｘｉＩｎｅ．Ｍｅｔｈ．ｏｄ：‰ｎｌｙｔｉｃａｌｃｏｌｕｍｎＷａＳＳｅｐｈａｄｅｘＧＩｏ（３００ｍｉｌｌ×１６肿，４０－１２０ｔｕｎ）ｗｉｔｈｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅＡｏｆ０．１ｍｏｌ·Ｌ－Ｉｐｈｏｓｐｈａｔｅｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ７．０），ｍｏｂｉｌｅｐｈａｓｅＢｏｆｐｕｒｅｗａｔｅｒ，ｔｈｅｆｌｏｗｒａｔｅｏｆ１．５ｍｌ·ｍｉｎ．１ａｎｄｔｈｅｄｅｔｅｃｔｉｏｎｗａｖｅｌｅｎｇｔｈｗａ６２５４ｎｍ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｔｈｅｃａｌｉｂｍ－ｔｉｏｎｏｆｔｈｅｐｏｌｙｍｅｒｓ啪ｌｉｎｅａｒｗｉｔｈｉｎｃｅｆｉｘｉｍｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅｏｆ５－８０ｒａｇ·ｍｌ“（ｒ＝０．９９９３）ａｎｄａｎｏｔｈｅｒｃａｌｉｂｒａｔｉｏｎｗ８８ｌｉｎｅａｒｗｉｔｈｉｎｃｅｉｌｘｉｍｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｒａｎｇｅｏｆ５－４００ｔｔｇ·ＩＩｌｌ“（ｒ＝０．９９９７）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：ｎ屺ｍｅｔｈｏｄｉｓｐｒｏｍｉｓｉｎｇＩ．ｏｒｔｈｅｓｅｐａｒａ－ｔｉｏｎｏｆｐｏｌｙｍｅｒｓ．ａｎｄｔｈｅａｃｃｕｒａｃｙａｎｄｐｒｅｃｉｓｉｏｎａ地ｓｕｉｔａｂｌｅｆｏｒｔｈｅｄｎｌ丘ｑｕａｌｉｔｙｃｏｎｔ０１．ＫＥＹＷｏＲＤＳＣｅｆｍｉｍｅ：Ｐｏｌｙｍｅｒ；Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ－ｅｘｃｌｕｓｉｏｎｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ

202 分子排阻色谱法标准操作规程

共2页第1页

文件编号：

09—C—083—03

替代号：

09—C—083—02

变更内容：

2010年版《中国药典》的执行，标准发生变更。

起草人：

日期： 年 月 日 审核人：

日期： 年 月 日 批准人：

日期： 年 月 日

颁发部门： 印制份数： 生效日期： 年 月 日

分发至：总经理（ ） 生产副总经理（ ） 质量副总经理（ ）

行政副总经理（ ） 行政部（ ） 生产部（ ） 设备动力维修车间（ ）

质管部（ ） 物资储备科（ ）

1 目的：建立分子排阻色谱法标标准操作规程，使操作规范、准确。

2 范围：适用于药品蛋白质多肽的分子量测定。

3 职责：质检员按此规程进行操作。。

4引用标准：《中国药典》2010年版。

5工作原理：分子排阻色谱法是根据待测组分的分子大小进行分离的一种液相色谱技术。分子排阻色谱法的分离原理为凝胶色谱柱的分子筛机制。色谱柱多以亲水硅胶、凝胶或经修饰凝胶如葡聚糖凝胶（Sephadex）和聚丙烯酰胺凝胶（Sepharose）等为填充剂，这些填充剂表面分布着不同尺寸

203 文件编号：09—C—083—03 共2页第2页

的孔径，药物分子进入色谱柱后，它们中的不同组分按其分子大小进入相应的孔径内，大于所有孔径的分子不能进入填充剂颗粒内部，在色谱过程中不被保留，最早被流动相洗脱至柱外，表现为保留时间较短；小于所有孔径的分子能自由进入填充剂表面的所有孔径，在色谱柱中滞留时间较长，表现为保留时间较长；其余分子则按分子大小依次被洗脱。

分子排阻色谱法的分离原理

分子排阻色谱法的分离原理：

① 分子排阻色谱SEC亦称凝胶渗透色谱GPC是一种基于分子尺寸差异进行分离的液相色谱技术广泛应用于聚合物小分子蛋白质等大分子物质的分析；

② SEC的核心部件为填充有微孔凝胶的色谱柱这些凝胶珠内部含有不同孔径大小的通道；

③ 当样品溶液被泵入柱中后随流动相一起流经凝胶珠大分子由于尺寸限制无法进入较小孔径只能在珠外间隙中流动；

④ 较小分子则可以进入较大孔径内部路径较长因此在柱中停留时间增加；

⑤ 由于路径长度不同各组分在柱中滞留时间存在差异从而实现按分子量从大到小依次流出；

⑥ 检测器通常采用示差折射率RID检测器或紫外UV检测器根据流出物浓度变化记录洗脱曲线；

⑦ 通过与标准样品比较可以计算出未知样品的分子量分布重均分子量数均分子量等参数；

⑧ 在聚合物分析中SEC能够提供关于分子量分布支化程度等重要信息帮助研究人员优化合成工艺；

⑨ 对于蛋白质多糖等生物大分子SEC可用于纯化鉴定分子量测定等研究工作中；

⑩ 实验过程中需注意选择合适孔径的凝胶以及流动相比例以确

保分离效果；

⑪ 完成一次分析后还需对色谱柱进行再生处理去除残留样品恢复初始分离能力；

⑫ 总结SEC作为一种高效简便的分离手段在高分子科学生物医药等领域发挥着重要作用。