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NOD／SCID雌性小鼠动情周期的观察甄玉花;宋阳;关永格;李坤寅;胡光云;廖慧慧【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2016(024)005【摘要】目的：观察NOD／SCID小鼠动情周期及卵巢切除术后阴道涂片的变化。
方法连续观察9 d NOD／SCID鼠，每日进行两次阴道涂片，计算动情周期时间及发生率。
卵巢切除后，阴道涂片并观察阴道涂片变化。
结果NOD／SCID小鼠动情周期为4～6 d。
有规律动情的小鼠占80％。
阴道口状态与动情周期无明显相关。
卵巢切除术后，阴道涂片呈动情后期或动情间期改变。
结论采用阴道脱落细胞涂片法可判断NOD／SCID雌性小鼠的动情周期及特点，NOD／SCID雌性小鼠卵巢切除手术有效。
%Objective To observe the changes in estrous cycle and vaginal smears in ovarectomized NOD/SCID mice.Methods To continuously observe the estrous cycle time by vaginal smears ofNOD/SCID mice in consecutive nine days, twice daily.After ovariectomy,the changes of estrous cycle were observed by vaginal smears for 7 days.Results The estrous cycle in NOD/SCID mice was 4-6 days.Regular estrous mice accounted for 80%.There was no significant correlation between vaginal opening and estrous cycle status.After ovariectomy, the vaginal smears showed characteristics of metestrus or diestrus.Conclusions Vaginal smear cytology can be used to determine the estrous cycle and characteris-tics of NOD/SCID female mice.The ovariectomized operation of NOD/SCID female mice is effective.【总页数】4页(P526-528,545)【作者】甄玉花;宋阳;关永格;李坤寅;胡光云;廖慧慧【作者单位】广州中医药大学，广州 510405;广州中医药大学，广州 510405;广州中医药大学第一附属医院，广州 510405;广州中医药大学，广州 510405;广州中医药大学，广州 510405;广州中医药大学第一附属医院，广州 510405【正文语种】中文【中图分类】Q95-33【相关文献】1.去卵巢和性成熟期 ICR 雌性小鼠动情周期的观察 [J], 杜纳纳;许丹丹;黄莉莉2.MC-LR对雌性小鼠动情周期和血清性激素水平的影响 [J], 韩知峡;陈羿;崔琰;张春莲;张青碧3.芹菜对雌性小鼠动情周期的影响 [J], 安婧;马瑞兰;蒲育栋;党瑜慧;李芝兰4.社会隔离对雌性小鼠动情周期及中枢ERα和TH免疫活性表达的影响 [J], 程广超; 杨萍; 赫晨; 杨斌; 王建礼5.慢性束缚对雌性小鼠动情周期及可卡因效应的影响 [J], 杨萍;谢梅平;张志硕;王建礼因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
动情期和动情间期雌性小鼠GR和TH的免疫活性及血清CORT水平的比较程广超;杨斌;王建礼;桂长莉【摘要】受到卵巢雌激素和孕激素波动的影响,动情周期会影响雌性动物的行为和情绪.然而,关于引起这些行为改变的神经内分泌机制还需要进一步研究.通过阴道脱落细胞染色法确定小鼠动情周期的各个阶段.用酶联免疫吸附法检测动情期和动情间期血清雌二醇(E2)和皮质酮(CORT)水平,用免疫组织化学方法检测脑区糖皮质激素受体(GR)和酪氨酸羟化酶(TH)阳性神经元的表达.结果发现,与动情间期雌鼠相比,动情期雌鼠血清E2浓度升高(P<0.05),但CORT水平没有变化;海马CA1区和齿状回(DG)GR-IR神经元表达增加(P<0.05),下丘脑室旁核(PVN)和中脑腹侧被盖区(VTA)的TH-IR神经元表达增加(P<0.05).结果说明,雌性小鼠在动情期和动情间期GR和儿茶酚胺能神经元活动不同,这些差异可能是动情周期引起行为变化的一个重要因素.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2018(039)008【总页数】5页(P50-54)【关键词】动情周期;应激;海马;儿茶酚胺;雌性小鼠【作者】程广超;杨斌;王建礼;桂长莉【作者单位】北方民族大学生物科学与工程学院 ,宁夏银川750021;北方民族大学生物科学与工程学院 ,宁夏银川750021;北方民族大学生物科学与工程学院 ,宁夏银川750021;北方民族大学生物科学与工程学院 ,宁夏银川750021【正文语种】中文【中图分类】S853.1雌性动物的动情周期分为动情前期(proestrus)、动情期(estrus)、动情后期(metestrus) 和动情间期(diestrus)，相应地外周血雌激素和孕激素水平也有一个周期的变化，二者在动情前期处于高峰水平[1]。
受到卵巢雌激素和孕激素波动的影响，动情周期会影响雌性动物的行为和情绪。
例如，雌性动物的性行为会随动情周期变化，处于动情前期雌性大鼠的气味对雄性最具吸引力，在动情间期最缺乏吸引力；小家鼠(Mus musculus)的配偶选择也依赖于动情状态[2]。
山医群体中国地鼠近交E家系RAPD分析
宋国华;刘田福;张建红;赵佳慧
【期刊名称】《中国实验动物学报》
【年(卷),期】2004(012)001
【摘要】目的分析山医群体中国地鼠E家系的遗传纯度.方法应用经过筛选的31条随机引物对中国地鼠E家系12只个体基因组DNA 进行RAPD 扩增,计算近交个体间的相似系数.结果所有样品的相似系数0.9431 到0.9978之间变动,平均相似系数为 0.9749, 聚类分析得到了这些个体的同源树资料.结论山医群体E家系有较高的遗传纯度.
【总页数】6页(P29-34)
【作者】宋国华;刘田福;张建红;赵佳慧
【作者单位】山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学医学实验中心
【正文语种】中文
【中图分类】Q321
【相关文献】
1.山医群体近交系中国地鼠主要生物学指标的建立 [J], 陈朝阳;张锐虎;景志杰;庞文彪;王志平;寇冰;薛莹;刘田福
2.山医群体近交系中国地鼠动情周期的观察及染色法比较 [J], 郭民;张锐虎;李曙芳;
王志平
3.近交系中国地鼠山医群体遗传结构的随机扩增多态分析 [J], 宋国华;刘田福;赵嘉慧;陈朝阳
4.山医群体近交系中国地鼠血液生理生化指标的测定分析 [J], 陈朝阳;张锐虎;景志杰;庞文彪;王志平;刘田福
5.中国地鼠山医群体近交系E繁殖性状的遗传力估计 [J], 张引红;刘田福;陈朝阳;张锐虎;寇冰
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第２４卷第３期２００７年６月实验动物科学ＬＡＢＯＲＡＴＯＲＹＡＮＩＭＡＬＳＣＩＥＮＣＥＶ０１．２４Ｎｏ．３Ｊｕｎｅ２００７确定小鼠动情周期的三种方法李靖１李炫诚２吴云霞２。
（１．武警湖北总队医院急诊科，武汉４３００６０）（２．华中科技大学同济医学院药学院，武汉４３００３０）摘要：目的为选择确定小鼠动情期的最准确和方便的方法，取成熟雌性昆明小鼠，每日晨取阴道脱落细胞及宫颈黏液做涂片，置显微镜下观察，分别用宫颈黏液结晶法、阴道脱落细胞学检查法、阴道脱落角化细胞计数法三种不同方法来确定小鼠动情期。
结果显示：三种方法均可以确定小鼠动情期，但三种方法比较，宫颈黏液结晶法特异性差；阴道脱落细胞学方法较为准确，但有假阴性现象；角化细胞计数法直观方便，结果最为客观准确。
关键词：动情周期；宫颈黏液；阴道脱落细胞中图分类号：Ｑ９５．３３文献标识码：Ｂ文章编号：１００６—６１７９｛２００７）０３．００６３．０２雌性小鼠性成熟后，生殖器官发生增生、退化的周期性变化为动情周期。
一般分为四期：动情前期、动情期、动情后期和动情间期。
动情期是性欲冲动和接受交配的时间，本期末雌鼠排卵，此期间卵泡迅速生长，雌激素分泌达高峰，阴道涂片表现多数的多角形无核角化上皮细胞，宫颈黏液结晶可见典型羊齿状。
妇科、产科和计划生育等很多医学科学研究中，常需要准确确定实验动物的动情期以决定是否合笼，在动物体外受精中需要准确确定动情期以确保获得成熟卵子以利于受精。
据文献记录，动情期的确定方法有多种，主要有宫颈黏液结晶观察法和阴道脱落细胞学检查方法¨ｑ。
能否准确确定动情期直接影响到实验进程和实验结果的精确度和可靠性。
本文对确定动情周期的三种方法做了比较研究，旨在建立准确、简单而可靠的方法以供推广应用。
消毒棉签、注射器、９５％乙醇、医用生理盐水、苦味酸、苏木素一伊红（Ｈａｅｍａｔｏｘｙｌｉｎｅｏｓｉｎ，ＨＥ）染色试剂购自北京中山公司。
１．３主要仪器显微镜（ＯＬＹＭＰＵＳＣＨＫ，Ｊａｐａｎ），数码相机（ＬＥＩＣＡ，Ｇｅｒｍａｎｙ）。
小鼠动情各期子宫内膜的显微结构及动情期凋亡因子在生殖器官的表达宋碗玲;任亚萍;陶旋;陆亚琪【期刊名称】《解剖学杂志》【年(卷),期】2016(039)002【摘要】目的:探讨动情期小鼠卵巢、输卵管、子宫中Bcl-2、Bax、caspase-9的表达及定位.方法:取各期小鼠卵巢、输卵管和子宫,石蜡切片、H-E染色,显微镜观察;免疫组织化学法检测Bcl-2、Bax、caspase-9在动情期小鼠的卵巢、输卵管、子宫中的表达.结果:动情各期子宫内膜结构各有特点,动情期及前后的子宫内膜厚度较厚,与动情间期比较差异有统计学意义;Bcl-2、Bax、caspase-9在动情期小鼠生殖器官均有强弱不等的表达.结论:本研究提供了小鼠动情各期子宫内膜的结构变化,明确了Bcl-2、Bax和caspase-9在动情期卵巢、输卵管、子宫中的定位和表达.【总页数】4页(P142-144,封2)【作者】宋碗玲;任亚萍;陶旋;陆亚琪【作者单位】桂林医学院临床医学系,桂林541004;桂林医学院组织学与胚胎学教研室,桂林541004;桂林医学院临床医学系,桂林541004;桂林医学院临床医学系,桂林541004【正文语种】中文【相关文献】1.TACE蛋白在动情周期和围着床期小鼠子宫内膜的表达规律 [J], 杨洁玉;杨戎;张谭;郗强2.ATF4基因在小鼠动情周期中子宫内膜的表达 [J], 凌康;柴路维;何晓茜;姜蓉3.Maspin在动情周期及早孕小鼠子宫内膜的表达规律 [J], 黄燕;姜蓉;崔文慧;杨戎4.小鼠不同动情周期子宫内膜组织中 Bcl-2、Bax 和 Caspase-9蛋白的表达 [J], 左俐俊;任亚萍5.动情期和动情间期小鼠输卵管中氧化应激和抗氧化基因表达差异 [J], 谢美容;史河秀;林翠英;吕俊杰;张卫玉;王章敬;王建新;王世鄂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
山医群体近交系中国地鼠血液生理生化指标的测定分析陈朝阳;张锐虎;景志杰;庞文彪;王志平;刘田福【摘要】目的对山医群体中国地鼠近交A、E家系主要血液生理、生化和血清电解质指标进行检测分析.方法对山医群体中国地鼠近交A、E家系成年动物进行空腹采血,常规方法测定13项血液生理、12项生化以及4项电解质指标,分别对相同性别不同家系间和同一家系不同性别间指标进行统计分析.结果相同性别A、E家系间动物血小板(PLT)、中间细胞数(MID)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆固醇(TC)、总胆红素(TBiL)、肌酐(Cr)和血钾(K)差异有显著性;相同家系雌、雄动物间PLT、TBiL 和尿酸(UA)差异有显著性.结论 A、E家系动物间产生了一定的血液生理、生化性状的分离.【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】2010(018)003【总页数】3页(P262-264)【关键词】中国地鼠;生理指标;生化指标【作者】陈朝阳;张锐虎;景志杰;庞文彪;王志平;刘田福【作者单位】山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学实验动物中心,太原,030001;山西医科大学实验动物中心,太原,030001【正文语种】中文【中图分类】R-332中国地鼠(Chinese hamster)是黑线仓鼠(Cricetulus barabensis Pallas)的俗称。
1980年春山西医科大学薄家璐教授等从北京郊区购回捕获的60只野生中国地鼠，进行近交培育，称为A家系;1981年4月又从北京购回74只中国地鼠进行近交培育，称为E家系。
近交繁育至20代已建成近交系，定名为SYBI，并于1992年公布于Bred Strain of Mice杂志［1］。
陈朝阳等［2］曾对该群体动物的生长曲线、脏器系数及部分生理学指标等生物学性状进行报道。
第一章绪论二、是非题（下列试题中正确的用（√）错误的用（X）号）l、实验动物医学：研究实验动物微生物的检测及其对实验的干扰；研究实验动物疾病的病因、症状、病理特征，疾病的发生、发展规律、防治措施；研究风险性动物实验与人畜共患病的防治措施。
（√）2、比较医学：以实验动物为替身研究人类。
通过建立人类疾病的动物模型，做人与动物的类比研究，探讨人类疾病的病因、发生发展规律，最终战胜人类的疾病。
（√）3、按遗传控制分类，实验动物可分成近交系、封闭群、清洁动物和SPF动物四大类动物。
（X）4、按遗传控制分类，实验动物可分成近交系、突变系、杂交一代动物和封闭群动物四大类动物。
（√）5、按微生物控制分类，实验动物可分成普通级、清洁级、无特定病原体级、无菌级四个等级的动物。
（√）6、按微生物控制分类，实验动物可分成近交系、封闭群、清洁动物和SPF动物四大类动物。
（X）7、实验动物科学是研究实验动物培育和应用的科学，它涉及实验动物、动物实验、实验动物医学、比较医学四个方面的内容。
（√）8、2001年国家科技部批准发布了四个强制性的实验动物质量国家标准，于2002年5月1日正式实施。
这四个标准是GB 14922－2001实验动物微生物学和寄生虫学监测等级、GB 14923?2001实验动物哺乳类动物的遗传质量控制、GB14924?2001实验动物全价营养饲料、GB 14925?2001实验动物环境及设施。
（X）9、2001年国家技术监督局批准发布了四个强制性的实验动物质量国家标准，于2002年5月1日正式实施。
这四个标准是GB14922?2001实验动物微生物学和寄生虫学监测等级、GB14923－2001实验动物哺乳类动物的遗传质量控制、GB14924?2001实验动物全价营养饲料、GB14925?2001实验动物环境及设施。
（√）10、湖北省实验动物质量检测站挂靠在湖北省疾病预防控制中心，负责全省实验动物微生物、寄生虫、遗传、病理、环境设施、笼器具和饲料营养质量检测工作（√）11、湖北省实验动物质量检测站挂靠在湖北省预防医学科学院，负责全省实验动物微生物、寄生虫、遗传、病理、环境设施、笼器具和饲料营养质量检测工作（√）12、湖北省实验动物管委会的成员单位包括省科技厅、省卫生厅、省教育厅、省计生委、省经贸委、省药品监督管理局、省技术监督局、省畜牧局、市科委、省预防医学科学院（√）13、湖北省实验动物管委会办公室挂靠在湖北省预防医学科学院、湖北省疾病预防控制中心，负责全省实验动物日常管理工作（√）14、湖北省实验动物学会办公室挂靠在湖北省预防医学科学院、湖北省疾病预防控制中心，负责全省实验动物学术活动日常工作（√）15、湖北省医学实验动物管委会办公室挂靠在湖北省实验动物研究中心，负责全省医学实验动物日常管理工作（√）16、我国国家实验动物质量管理办法规定，全国实行统一的实验动物质量监督和质量合格认证制度。
实验动物品种介绍：中国地鼠生理特点：中国地鼠，又称黑线仓鼠、背纹仓鼠。
已有群、系20个。
我国已育成的有山西医科大学的山医群体近交系中国地鼠，军事医学科学院的A：CHA白化黑线仓鼠突变群。
1．地鼠属哺乳纲、啮齿目、鼠科、帛鼠亚科动物。
它是由野生动物训养后进入实验室的动物。
2．地鼠是昼伏夜行动物，一般在夜晚8～11点最为活跃，运动时腹部着地，行动不敏捷，巧手营巢，牙齿十分坚硬，可咬断细铁丝，有很强的贮食习性，兴奋时发出强烈的金属性音响。
雌鼠比雄鼠强壮，除发情期外，雌鼠不易与雄鼠同居，且雄鼠易被雌鼠咬伤。
3．尾短，有颊囊。
地鼠颊囊是缺少组织相容性抗原的免疫学特殊区，是进行组织培养，人类肿瘤移植和观察微循环改变的良好区域。
4．生殖周期短。
妊娠为16（14～17）天，为啮齿类动物中妊娠期最短者。
地鼠成熟期快。
雌鼠一个月已性成熟，之后即可进行繁殖，雄鼠2.5月可交配。
哺乳期20～25天，离乳后雄鼠2月龄，雌鼠1.5月龄可配种。
雄鼠成熟时体重为100克左右，雌鼠120克左右。
成熟期时除发情期以外雌鼠不许雄鼠靠近。
5．生产能力旺盛，生长发育快。
每年每只雌鼠可产7～8胎，每胎产仔5～10只，平均7只左右。
幼仔出生后生长发育很快，出生时全身裸露。
3～4日耳壳开始突出体外，以后张开，4日长毛，12日可爬出窝外觅食，14日眼睁开，一边觅食一边靠母鼠汁哺育，生长很快。
6．有嗜睡习惯，睡眠很深时，全身肌肉松弛，且不易弄醒，有时误认为死亡。
室温低时出现冬眠，一般于8～9℃时可出现冬眠，此时体温、心跳、呼吸频率、基础代谢率均降低。
室温低于13℃则幼仔易于冻死，室温最好保持20～25℃，相对湿度40～70%。
7．好斗为其行为特征，难于成群饲养。
8．中国地鼠易产生真性糖尿病，血糖可比正常高出2～8倍，胰岛退化，β细胞呈退行性变，易培育成糖尿病株。
9．具有贮藏食物习性。
其颊囊可充分扩张，贮藏能力极大，便于冬眠时食用。
地鼠口腔内两侧各有一个很深的颊囊，一般深度为3.5～4.5厘米，直径为2～3厘米，一直延续到耳后颈部。
文章编号: 1007-6611(2008)08-0682-03山医群体近交系中国地鼠动情周期的观察及染色法比较郭 民, 张锐虎, 李曙芳, 王志平 (山西医科大学实验动物中心, 太原 030001)摘要: 目的 完善山医群体近交系中国地鼠动情周期的繁殖生理数据。
方法 通过阴道脱落细胞检查法,连续15d 对15只雌性地鼠的阴道脱落细胞经直接观察法、HE 染色法、美蓝和伊红染色法染色后进行比较观察选定较好的方法,然后测定其动情周期。
结果 经比较HE 染色法较好,观察雌性山医群体近交系中国地鼠的动情周期平均为(91.2±23.02)h ,可区分为4个时相,即动情前期(16.82±6.71)h 、动情期(20.97±12.41)h 、动情后期(25.52±17.12)h 和间期(28.55±16.99)h 。
结论 经比较HE 染色法能较好地反应细胞及细胞核的形态,能准确地判定地鼠的动情周期,可为完善中国地鼠动情周期的繁殖生理数据提供可靠的理论依据。
关键词: 山医群体近交系中国地鼠; 动情周期; 阴道脱落细胞中图分类号: Q492 文献标识码: AEstrus cycle observation of an inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony and comparison of dying methodsGUO Min ,ZHAN G Rui 2hu ,L I Shu 2fang ,WAN G Zhi 2ping (L aboratory A nim al Center ,S hanxi Medical U niversity ,Taiyuan 030001,China )Abstract : Objective To consummate the data of estrus cycle in inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony. Methods Methylene blue staining ,E osine staining and HE staining were used to observe the vaginal exfoliate cells in 15female hamsters for 15d.Then estrus cycle was determined by the better method. Results By comparison ,HE staining was a better method.The average estrus cycle of inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony was (91.2±23.02)h ,and it was distinguished into 4phases by HE :preoestrus (16.82±6.71)h ,oestrus (20.97±12.41)h ,metoestrus (25.52±17.12)h ,intermediate stage (28.55±16.99)h. Con 2clusion The results indicate that HE staining could be a better method to show the appearance of the vaginal exfoliate cell and its nu 2cleus and exactly distinguish the four phases of estrus cycle of inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony ,which provide a de 2pendable theory basis for consummating the data of estrus cycle in inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony.K ey w ords : inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony ; estrus cycle ; vaginal exfoliate cell 使用标准化的实验动物可以使对实验结果的生物学数据进行衡量或评价有统一的标准尺度。
山医群体近交系中国地鼠是我中心从1980年开始由野生地鼠驯化,后经连续20代的近亲繁殖于1991年培育成功的高糖尿病发病的近交系中国地鼠。
本实验系统地观察了山医群体近交系中国地鼠动情周期,旨在完善其繁殖生理数据,为生物学性状标准化的实施提供可靠的理论依据。
1 材料与方法1.1 实验材料1.1.1 实验动物 选用10-12月龄山医群体近交系中国地鼠,普通级,健康、雌性山医群体近交系中国地鼠15只,平均体重20g (15-25g ),由山西医科大学实验动物中心提供。
将雄、雌鼠用铁丝网隔开,同笼喂养,利用魏顿氏效应(Whitten effect )[1]使雌性小鼠保持稳定的动情周期。
1.1.2 试剂及仪器 0.9%生理盐水、75%酒精、p H 试纸、12号灌胃针、200μl 加样器、显微镜(OL YMPUS 2BX51,Japan )、Image 2Pro Plus5.1图像分析软件。
1.2 观察方法 每日清晨将山医群体近交系中国地鼠放于笼架上,将其头部扣于左手掌心内,拇指、食指捏紧背皮,使阴道充分暴露,用带有12号灌胃针头的微量加样器吸200μl 生理盐水,轻轻冲洗其阴道,然后吸取冲洗液,平涂于载玻片上,对其阴道脱落细胞染色观察:①直接观察:将阴道冲洗液平涂于载玻片上,直接置于显微镜下观察(未结晶)。
②染色观察:将阴道冲洗液平涂于载玻片上,常温晾干,分别用碱性美蓝、伊红、苏木素和伊红(HE )染色,镜下观察,连续观察15d 。
2 实验结果2.1 阴道脱落细胞学检查 通过阴道脱落细胞检查法,经不同染色后观察表明HE 染色法能较好的反应细胞及细胞核的形态。
阴道脱落细胞主要有三种:有核上皮细胞、无核角化细胞、白细胞。
有核上皮细胞中以表层细胞和中层细胞多见:表层细胞大呈多边形,胞质薄而透明,着色浅,核固缩,圆形,着色深;中层细胞较表层细胞小,为圆形、椭圆形、舟形,核为圆形或卵圆形;白细胞以中性粒细胞多见,核呈深染的分叶形或马蹄形。
而地鼠的动情前期:以有核细胞为主,无核角化细胞次之,白细胞极少;动情期:以无核角化细胞为主,偶见有核细胞,无白细胞;动情后期:三者均有但以白细胞为主;间期:以白细胞为主,并有少量有核细胞及黏液存在(见图1-4)。
图1 山医群体近交系中国地鼠各期阴道脱落细胞(直接观察法,×200)Fig 1 The vaginal exfoliate cells in estrus cycle of inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony (direct observa 2tion method ,×200)图2 美蓝染色法观察山医群体近交系中国地鼠各期阴道脱落细胞(×200)Fig 2 The vaginal exfoliate cell in estrus cycle of inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony by Methyleneblue staining (×200)图3 伊红染色法观察山医群体近交系中国地鼠各期阴道脱落细胞(×200)Fig 3 The vaginal exfoliate cell in estrus cycle of inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony by E osine stain 2ing (×200)图4 HE 染色观察山医群体近交系中国地鼠各期阴道脱落细胞(×200)Fig 4 The vaginal exfoliate cell in estrus cycle of inbred line of Chinese hamster of Shanyi colony by HE staining(×200)2.2 山医群体近交系中国地鼠雌鼠的动情周期 通过HE染色法连续15d对15只雌性山医群体近交系中国地鼠的阴道脱落细胞进行观察比较,结果表明雌性山医群体近交系中国地鼠的动情周期平均为(91.2±23.02)h,可区分为4个时相,即动情前期(16.83±6.71)h、动情期(20.97±12.41)h、动情后期(25.52±17.12)h、间期(28.55±16.99)h。
3 讨论3.1 地鼠雌鼠的动情周期 本实验观察比较山医群体近交系中国地鼠的动情周期为2.9-4.8d,平均为3.8d。
这与一些学者报道结论基本一致[2,3]。
Chang观察了部分野鼠和少量在实验室长大的雌鼠,认为一个完整的动情周期为4.5d。
薄家璐等认为是4d[2]。
3.2 不同染色法比较及方法改进 检测动情周期的方法有多种,阴道脱落细胞检查法较常用[3-5]。
本实验虽仍采用阴道脱落细胞检查法,但对所用材料加以改进,基于地鼠阴道口较其他鼠类狭小的特点,为减少对阴道刺激而诱发感染,本实验用小号圆头灌胃针代替棉棒或滴管采集阴道脱落细胞。
另外通过使用200μl加样器固定每次冲洗和抽取时冲洗液的剂量,以确保溶液量恒定,使实验结果更为可靠。
同时,本实验比较了不同染色剂的显色效果。
虽然都是通过观察细胞的形态来判断染色剂的效果,但HE染色法能较好的反应细胞及细胞核的形态,有利于判断细胞的归属及分类。
直接观察法、美蓝和伊红染色法虽能反应出细胞的形态,但对细胞核形态的反应效果较差,不利于判断。
而直接观察法与其他染色法相比,染色后的片子细胞数量明显减少,基本没有白细胞及杂质,但未染色的片子上却有疑似白细胞的颗粒和杂质的存在,而其他细胞也存在量的减少,这可能与染色过程中细胞固定不好及冲洗次数较多有关。
这些疑似白细胞的颗粒是否为白细胞对判断在动情前期和动情期是否存在白细胞,将有很大影响,有待于进一步研究。
参考文献:[1] 高立云,高建明,穆祥,等.小鼠动情周期中卵巢内卵泡和黄体的动态组织学观察[J].北京农学院学报,1997,12(3):59-62.[2] 薄家璐,张炜芳,王济.山医群体近交系中国地鼠的研究[J].中国实验动物学报,1993,1(2):75-80.[3] 李娟.BALB/C系小鼠动情周期的观察[J].甘肃科技情报,1996,12(3):31.[4] 孙敬方.动物实验方法学[M].北京:人民卫生出版社,2001:422-426.[5] 李靖,李炫诚,吴云霞.确定小鼠动情周期的三种方法[J].实验动物科学,2007,24(3):63-64.作者简介: 郭民,男,1970-03生,硕士,实验师.[收稿日期: 2008-04-21]。
