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多糖酶菌种的初步选育研究

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ｓｒ ｒ １０ ｍ ｄ ｎＵ 水 浴 两 用 振 荡 器 ｓ － Ｂ ｔｒ ４ ａｅｉ Ｋ； ｉｅＳ Ｈｚ － ： 上 海 悦 丰仪 器 仪 表 有 限公 司 ；５ Ｃ型 紫 外 可 见 分 ７２ 光光 度计 ： 海 第 三 分 析 仪 器 厂 ； 分 之 一 电 子 天 上 万 平 ： 国进 口 ； 心机 ２ Ｒ ： 国进 口 ； Ｓ ０ － ２ 德 离 ８ ｓ德 Ｃ １ １ ＡＢ
影 响 ， 已 引起 制 糖 专 家 和有 关 科 研 人 员 的关 注 ， 早 但 是对 多糖 的 生物 酶法 降解 及 其有 效 利用 的研究 ，
精制 幼砂糖 ： 南海市联 和凉果 厂 ； 硫酸镁 亚铁
Ｃ 广 东 达 濠化 工 厂 ； 酸 钠 Ｃ 广 州 化 学 试 剂 工 Ｒ： 硝 Ｒ：
摇 瓶 培养 。
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Ｍ￣Ｏ ‘Ｈ Ｏ ． ｇ ＦＳ ￣ ． １ ， 理 过 的废 蜜 或 多 Ｓ ， ７ ２ ０ ５ ， ｅＯ ０ ０ ｇ 处
作者筒介 ： 黄祥斌 （ ７ 一）男 ． 理工大学 ． １ ５ ． 华南 ９ 硕士研究生 。
ห้องสมุดไป่ตู้
糖 ， １０ｍ ，Ｈ 自然 ，２ ℃３ 水 ００ ｌｐ １１ ０分 钟 灭 菌 ， 液 体 供
杂 质沉 淀 和 糖 汁澄 清 ， 污染 滤 器 ， 降低 过滤 速 度 ， 影 响蒸 发速 度 ， 是增 加 操 作 困难 和加 工 成 本 。 （ ） 于 ２ 产 品 的 品质 ［ ］ ４ 由于 多 糖 被 蔗 糖 结 晶 包 裹 和 吸 附 ， 而 干 扰糖 结 晶生 长 导致 产 生伪 晶 ， 同时又 由于多 糖 的造 蜜效 应 而导 致 糖分 损 失增 加 ， 且有 研究 表 明 并
厂； 无水 乙醇 Ａ 广 州化 学 试剂 厂 ； 性滤 纸 ： 州 Ｒ： 定 杭 新化 纸业 有 限 公 司 ； 水 葡 萄 糖 Ａ ： 京 旭 东 化 无 Ｐ北
工； 橡胶 医用 手 套 ： 桂林 乳 胶 厂 ， 称量 瓶 及镊 子 等 。
２ ２ 方 法 ．
尤其是系统的深入 的研究很少。多糖的生物酶法
（ 华南理工大学食 品与生物工程学院 ， 广州 ，１６ １ ５０４ ）
摘 要 ： 用 查 氏培 养基 的 改进 配方 ， 采 筛选 了 ８种微 生物 ， 描 绘 了其 茵 落特 征 。利 用接 种 针 接 种 液 体 摇 并
瓶 培 养 ３天 。通过 对 多糖 的 测 定（ 时也测 定 了色值 ）找 到 了对 多糖 和 色素都 有 显著 降解 效 果 的 菌种 ， 同 ， 为 进 一 步通过 酶 法研 究 困扰 着制 糖 业的 多糖 和 色素 问题 ， 以及 对 菌种 的优 化提 供 了可 靠 的资料 。
收 稿 日期 ：∞ １一 一２ ２ ∞ ８
７ ２ ０５ ，ｅＯ ００ ｇ处 理 过 的废 蜜 或 多 糖 ， 脂 Ｈ Ｏ ．ｇＦＳ ４ ．１ ， 琼 １ ０ ， １０ ｍ ，Ｈ 自然 ，２ ℃３ 钟 灭 菌 ， ５—２ｇ水 ００ ｌｐ ｌｌ ０分 供
倒 平 板及 斜 面 。
（） ２ 液体 培养 基 ： Ａ ０２ ， ２Ｉ０ ｌ， ＣＤ．ｇ ＮＮ ３ｇ ＫＩ ４ Ｋ Ｉ ５ ， － ｇ Ｐ
关键 词 ： 菌种 ； 生物 ； 微 茵落 特征 ； 多糖 ； 色素 ； 多糖 酶 中图分 类 号 ：Ｓ ４ Ｔ２ １ 文 献标 识 码 ： Ａ 文章 编 号 ：０ ２ ５ ｌ ２ ０ ） ３ ０ ３—０ １０ 一ｏ ５ （ｏ ２ ｏ —０ ０ ４
０ 前言
多糖 对 制糖 业 所产 生 的影 响 ， 中表 现 在下 述 集
择 菌 种 ） Ｎ Ｎ ３ ｇ Ｋ Ｉ ０ ｌ ， Ｃ ０ ５ ， Ｓ ４・ ： ａ Ｏ ２ ， ２Ｉ ４ ｇ Ｋ Ｌ ． ｇ Ｍｇ ０ － Ｐ
手段来大 幅度提 高其产 酶能 力、 酶活力 和酶适 应
性 ， 降解 并 利用 多糖从 而 改进 产 品 品质 增加 糖 的 来 利用 率 并 降低 成 本 。初 步研 究 发现 ， 些 菌种 既 能 某 降解 多糖 又能 降 解 色素 。
电热 鼓 风 干燥 箱 ： 重庆 试 验设 备 厂 制造 。
２ 材料与方法
２ １ 材料 ．
色素可与多糖形成复合物增加产 品色值 。从 而降 低 了产 品的商业 价值。（ ） ３ 糖产 品应用［ 由于糖 ６ 果食品中多糖的存在 ， 可以使一些食品产生严重品 质问题。如使硬糖变形 ， 酒精饮料和碳酸饮料产生 雾 状 物或 雾 状 沉 淀 。 多糖 对 制 糖业 所 产 生 的不 良
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２ ０ ｏ ２ Ｎｏ． ３
２０ ０ ２年第 ３期 ２００２年 ９月
中 国 甜
．
菜
糖
业
ＣＨｌ ＮＡ ８ＥＥＴ ＆ ＳＵＧＡＲ
３ Ｄ ．２００２ ｅ
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多 糖 酶 菌 种 的初 步 选 育 研 究
黄祥斌 ， 淑娟 于
降 解课 题 承 美 国 制 糖 专 家 、 糖 业 研 究 所 所 长 、 前 华 南 理工 大 学 客座 教 授 周 重 吉 博 士 和 广 西 贵 糖 集 团 股份 联 合资 助 ， 旨在 寻 找 产 多 糖 菌 种 ， 过诱 变 等 通
（） １固体 培 养基 （ 照 查 氏培 养 基 随组 成 ， 改 参 但 变 了碳 源 以便 更好 地 满 足实 验需 要 ， 有 目的地 选 更
１ 仪器设备
Ｌ Ｈ ５ Ａ生 化 培养 箱 ： 东 省 医 疗 器 械 厂 ； Ｒ —２ｏ 广
三个方面 ：１制糖工艺［ 。 由于制备方法 、 （） Ｊ ０ 生产时
问 和气 候 等原 因 ， 大部 分 多糖 在 工艺 中没有 被 彻 绝
底 清 除 。在工 艺 中多糖 可 导致 糖 汁粘 度增 加 ， 响 影

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高产胞外多糖乳酸菌的筛选及培养条件优化

高产胞外多糖乳酸菌的筛选及培养条件优化

高产胞外多糖乳酸菌的筛选及培养条件优化孙军德;刘先【摘要】从酸菜汁和生鲜奶中筛选出一株高产胞外多糖的乳酸菌L3,应用苯酚一硫酸法测定其胞外多糖的产量.分别改变基础培养基的碳源、氮源、发酵温度、时间、pH等条件,探索其对乳酸菌L3胞外多糖生物合成能力的影响.结果表明:葡萄糖和蛋白胨分别是乳酸菌产生多糖的良好碳源和氮源.该菌株胞外多糖的最佳生物合成条件为:初始pH值6.5,发酵温度37℃,发酵时间24h,此条件下胞外多糖的生物合成量为108.49mg·L-1.【期刊名称】《沈阳农业大学学报》【年(卷),期】2010(041)001【总页数】4页(P90-93)【关键词】乳酸菌;胞外多糖;筛选;培养条件优化【作者】孙军德;刘先【作者单位】沈阳农业大学,土地与环境学院,沈阳,110866;沈阳农业大学,土地与环境学院,沈阳,110866【正文语种】中文【中图分类】Q939.11.7乳酸菌是能从葡萄糖（或可利用的碳水化合物）发酵产生大量乳酸的一群细菌。

它们无处不在，广泛分布在人体、动物、植物和整个自然界。

乳酸菌用途广泛，在食品中的应用有着悠久的历史，很多乳酸菌菌株被认为是没有致病可能的。

因为其的安全性，乳酸菌广泛应用于食品和药品领域。

作为保健食品和药品，可以改善和提高人的健康水平，延年益寿；还可以作为微生物学和微生态学领域研究的模式生物。

大量的乳酸菌被人们给予“安全”或“通常是安全的”（GRAS）的地位[1-3]。

多糖是指由20个以上单糖组成的糖类化合物，根据来源不同分为植物多糖、动物多糖和微生物多糖。

根据糖类组成不同，又可分为同多糖和杂多糖。

乳酸菌胞外多糖（lactic acid bacterium expolysaccharides，LAB EPS）是由乳酸菌在生长代谢过程中发酵产生并分泌到细胞外的黏液或荚膜多糖，是常渗入培养基中的一种糖类化合物[4-5]。

乳酸菌EPS可以改善发酵乳的组织状态和菌株对肠道黏膜的吸附。

多糖与肠道菌群的相互作用研究进展

多糖与肠道菌群的相互作用研究进展

多糖与肠道菌群的相互作用研究进展一、多糖对肠道菌群的影响多糖是一类碳水化合物，在人类的饮食中占据着重要地位。

多糖主要存在于食物中，如大米、小麦、红薯、果蔬等，而人体无法直接消化吸收多糖，需要通过肠道菌群的代谢来发挥其营养功能。

研究表明，多糖的摄入可以在一定程度上影响肠道菌群的组成和功能。

多糖可以被肠道菌群中的一些菌种发酵代谢，产生短链脂肪酸（SCFAs），如丙酸、乙酸和丁酸等。

这些SCFAs对肠道黏膜细胞具有保护作用，有助于降低肠黏膜的PH值，促进有益菌群的生长。

SCFAs还有抗炎、抗氧化和调节免疫功能等作用，有利于维持肠道菌群的平衡和人体的健康。

多糖的摄入还能够影响肠道菌群的结构和丰度。

一些研究表明，高纤维饮食（富含多糖）有利于提高菌群的多样性，并且对一些有益菌群，如双歧杆菌和乳酸杆菌有着促进作用。

多糖对肠道菌群的影响不仅体现在代谢产物的生成上，更体现在对菌群结构和丰度的影响。

肠道菌群是一种能够协助人体消化、吸收和代谢多糖的微生物群落。

在肠道菌群中，有些菌种具有多糖水解酶的活性，能够分解各种多糖，如纤维素、半乳聚糖、果聚糖等，释放出对人体有益的营养物质。

肠道菌群还参与了多糖的降解和吸收过程。

研究表明，肠道菌群在多糖的降解和吸收过程中发挥着重要作用，尤其是一些不能被人体自身酶解的多糖，在肠道菌群的作用下才能够被有效的分解和吸收。

肠道菌群对多糖的代谢和利用具有重要的意义。

通过调节肠道菌群的结构和功能，可以有效地提高多糖的利用效率，从而更好地维护人体的健康。

三、多糖与肠道健康的关系多糖作为人体必需的营养物质，对肠道健康有着重要的影响。

研究表明，适当摄入多糖有利于维持肠道菌群的平衡，减少有害菌的生长，提高有益菌的丰度，从而对肠道健康有益。

在肠道菌群失衡的情况下，常常会导致肠道屏障功能受损、炎症反应增加，并进一步影响人体的免疫功能和代谢状态。

而适量摄入多糖能够促进有益菌的生长，增加SCFAs的产生，从而有助于维持肠道免疫和营养状态。

发酵工程(菌种选育)重点

发酵工程(菌种选育)重点

1.能使分散状态细胞均匀地接触诱变剂；
2.它尽可能地避免出现表型延迟现象
表型延迟(Phenotypic lag)是指某一突变在
DNA复制和细胞分裂后, 才在细胞表型上显示
出来, 造成不纯的菌落的现象。出现这种现象
的原因是诱变对象处于多核时期造成的。
霉菌和放线菌对数期细胞往往是多核的, 很可能一个
核发生突变, 而另一个核未突变, 若突变性状是隐性的, 在
第一章 微生物菌种选育
菌种选育：利用微生物的遗传变异的特性， 采用各种手段，改变菌种的遗传性状。 ◇自然选育：根据菌种自然变异的特点进行选 育的过程。 ◇人工选育：人为方式改变微生物菌株遗传物 质选育过程，包括诱变育种、杂交育种、原 生质体融合、基因工程育种等高新技术。

第一节 菌种的来源
一、工业发酵常见微生物种类 细菌

从自然界筛选
采样季节：以温度适中，雨量不多的秋初 为好。 采土方式：在选好适当地点后，用小萨子 除去表土，取离地面 5-15cm处的土约 10g， 盛入清洁的牛皮纸袋或塑料袋中，扎好， 标记，记录采样时间、地点、环境条件等， 以备查考。为了使土样中微生物的数量和 类型尽少变化，宜将样品逐步分批寄回， 以便及时分离。

2.富集培养

富集培养可增加待分离菌的数量，增加分离的成功 率。

为了容易分离到所需的菌种，可以通过配制选择性 培养基，选择一定的培养条件来控制。
例如碳源利用的控制，可选定糖、淀粉、纤维素， 或者石油等，以其中的一种为唯一碳源，那么只有 利用这一碳源的微生物才能大量正常生长，而其它 微生物就可能死亡或淘汰。这样对下阶段的纯种分 离就会顺利得多。
续诱变处理很可能导致产量下降甚至死亡。
因此，在实际生产中，一般可选择①或②类菌
香菇多糖的研究报告

香菇多糖的研究报告

香菇多糖的研究报告摘要利用果胶酶、纤维素酶和漆酶对香菇进行酶解，固定料水比( 1∶15) 和反应温度( 40℃) ，以酶解后多糖提取率为指标，考察不同浓度的3 种酶对香菇多糖提取的影响。

在单因素试验的基础上，采用响应面法建立香菇多糖酶法提取的二次多项数学模型，并验证了该模型的有效性; 探讨了果胶酶、纤维素酶、漆酶3 个因子的交互作用及其最佳水平。

响应面分析结果表明: 果胶酶、纤维素酶、漆酶显著影响香菇多糖的提取效果，在果胶酶浓度为7.11%，纤维素酶浓度为6.82%，漆酶浓度为3.69%的优化条件下，香菇多糖的提取率达到37.07%。

关键词:香菇多糖，果胶酶，纤维素酶，漆酶，响应面2.前言糖类的研究已有百余年的历史, 近20 多年来, 随着膜的化学功能, 免疫物质的化学研究的进展以及探寻新药物资源的不断拓展和研究的深入, 发现糖类在生物体中的作用不仅是作为能量资源或结构材料, 更重要的是还参与了生命现象中细胞的各种活动, 具有多种多样的生物学功能。

多糖一般由十个分子以上的单糖通过糖苷键连接而成的高分子多聚物。

多糖按来源大致可分为植物多糖、动物多糖、海藻多糖、微生物多糖即细菌多糖和真菌多糖等。

其中, 具有很强生物活性的真菌多糖的研究日益受到重视, 真菌多糖从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离, 是一类可以控制细胞分裂分化、调节细胞生长和衰老的活性多糖。

真菌多糖作为药物研究始于20 世纪50 年代, 在60 年代以后成为免疫促进剂受到广泛关注, 其中香菇多糖( lent inan, LNT) 是研究得较透彻的多糖之一。

香菇[ Lentinus edodes ( Berk. ) Sing] 为担子菌纲伞形科真菌, 是世界名贵食用菌兼药用菌之一。

1968 年日本千原吴郎首先利用热水从香菇子实体中浸提出6 种胞外多糖, 1970 年Chihard和Sasaki 用热水浸提结合有机溶剂沉淀从香菇中提取到另外4 种多糖, 20 世纪80 年代以来, LNT的研究受到广泛的重视, 取得了一系列进展[ 1] 。