颁 发 部 门 缓冲液配制操作规程
质量管理部
编号ZL-C-703 新订 □ 修订 □ 版次：01 第 1 页 共 2 页
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分发部门：质量管理部 生效日期
目 的：建立缓冲液的配制操作规程,使配制操作规范化。
范 围：缓冲液的配制操作。
责 任 人：QC员 、QC主管。
内 容：
1磷酸盐缓冲液（PH6.8） ： 取0.2mol/L磷酸二氢钾液250ml，加0.2mol/l
氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
2醋酸缓冲液（PH4.0）： 冰醋酸286ml与50%氢氧化钠溶液1ml，置1000ml
量瓶中，加蒸馏水900ml振摇。用冰醋酸或50%氢氧化钠溶液调PH至4.0，再用蒸馏水稀释到刻度。
3磷酸盐缓冲液（PH5.0）： 取磷酸二氢钾13.6g，加水溶解后稀释到2000ml，
用8mol/L氢氧化钾溶液调节PH值至5.0±0.1)。
4磷酸盐缓冲液（PH7.0）： 取磷酸二氢钾3.02g与磷酸氢二钾6.2g，加水
溶解成1000ml。
5磷酸盐缓冲液（PH7.4）： 取磷酸二氢钠2.280g磷酸氢二钠11.50g,加水至1000ml，即得。
6磷酸盐缓冲液（PH7.8）：
甲液：取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解，并稀释至500ml。
乙液：取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解，并稀释至100ml。
取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。
7醋酸盐缓冲液（PH3.5） ： 取醋酸铵25g，加水25ml溶解
后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐的溶液或5mol/L氨溶液准确调节PH值至3.5（电位法指示），用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法
科研实验 2010-04-20 22:25:48 阅读935 评论0 字号：大中小 订阅
0.01M PBS
PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)
PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4
4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L
称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4℃冰箱中即可。
需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。
母液的配制：
0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水
0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水
各种浓度PB(pH=7.4)的配制：
先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L
的 Na2HPO4, 即可。
然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：
0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。
若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。
磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液:取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠
，即得。 1.7g，加水使溶解成400ml
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L
氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢 磷酸盐缓冲液
氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液
，即得。 29.1ml，用水稀释至100ml
磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧
，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。 化钠溶液35ml 磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。
磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾1.36g， 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。
PBS溶液
PBS溶液又称磷酸盐缓冲溶液，一般选择K2HPO4和KH2PO4配制，因为钠盐溶解的较慢。根据不同pH的溶液，称量不同质量的磷酸盐，也可以用pH计调溶液的pH。PBS一般用作支持电解质。
其配置方法如下：
采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步骤进行：
(1) 配制1/15mol/L KH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4；
(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O；
(3) 将18.2%（体积分数）KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合；
最终 测定PBS液的PH值约为7.4。
磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。
磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。
磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。
磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。
磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。
磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。
