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各种PH值磷酸盐缓冲液配制

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1 各种PH值的磷酸盐缓冲液配制

2014-06-27 10:33:48 来源：生物秀知道 浏览次数：24342

磷酸盐

取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐(pH2.0)

甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5)

取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

磷酸盐缓冲液(pH5.0)

取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8)

取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5)

取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6)

取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)

取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8)

取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.0)

取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.2)

取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。 磷酸盐缓冲液(pH7.3)

取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.4)

取磷酸二氢钾1.36g， 加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml，用水稀释至200ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.6)

取磷酸二氢钾27.22g，加水使溶解成1000ml，取50ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml，再加水稀释至200ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.8)

甲液：取磷酸氢二钠35.9g，加水溶解，并稀释至500ml。

乙液：取磷酸二氢钠2.76g，加水溶解，并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml与乙液8.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.8～8.0)

取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g，加水使溶解成1000ml，即得。

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2 液体配制法制备磷酸盐缓冲溶液

一、（phosphate buffer，PB）

试剂： NaH2PO4·2H2O Na2HPO4·12H2O

方法：

时，常先配制0.2mol/L的 NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4，两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐（PB），根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

（1）0.2mol/L的 NaH2PO4：称取NaH2PO4.2H2O 31.21g(或 NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

（2）0.2mol/L的 Na2HPO4：称取NaHPO4·12H2O 71.64g（或 Na2HPO4·7H2O 53.6g或 Na2HPO4·2H2O 35.61g）加重蒸水至1000ml溶解。

（3）0.2mol/L pH7.4的PB的配制：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4和81 ml 0.2mol/L的 Na2HPO4，充分混合即为0.2mol/L的PB（pH约为7.4～7.5）。若pH偏高或偏低，可通过改变二者的比例来加以调整，室温保存即可。

25℃下0.2mol/L的配制

pH值 0.2mol/LNa2HPO4(ml) 0.2mol/LNaH2PO4(ml)

5.8 8.0 92.0

5.9 10.0 90.0

6.0 12.3 87.7

6.1 15.0 85.0

6.2 18.5 81.5

6.3 22.5 77.5

6.4 26.5 73.5

6.5 31.5 68.5

6.6 37.5 62.5

6.7 43.5 56.5

6.8 49.0 51.0

6.9 55.0 45.0

7.0 61.0 39.0

7.1 67.0 33.0

7.2 72.0 28.0

7.3 77.0 23.0

7.4 81.0 19.0

7.5 84.0 16.0

7.6 87.0 13.0

7.7 89.5 10.5

7.8 91.5 8.5

7.9 93.5 6.50

8.0 94.7 5.3

Na2HPO4·2H2O分子量 = 178.05，0.2 mol/L溶液为35.61克/升。

Na2HPO4·12H2O分子量 = 358.22，0.2 mol/L溶液为71.64克/升。 百度文库 - 让每个人平等地提升自我

3 NaH2PO4·H2O分子量 = 138.01，0.2 mol/L溶液为27.60克/升。

NaH2PO4·2H2O分子量 = 156.03，0.2 mol/L溶液为31.21克/升。

25℃下0.1mol/l的配制

pH值 1mol/LK2HPO4(ml) 1mol/LKH2PO4(ml)

5.8 8.5 91.5

6.0 13.2 86.8

6.2 19.2 80.8

6.4 27.8 72.2

6.6 38.1 61.9

6.8 49.7 50.3

7.0 61.5 38.5

7.2 71.7 28.3

7.4 80.2 19.8

7.6 86.6 13.4

7.8 90.8 9.2

8.0 94.0 6.0

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乙醇－醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml，加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7，用水稀释至1000ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解，并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解，用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1，加水稀释至100ml，即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g，再加水溶解使成1000ml，调节pH值至9.0，即得。

乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g，加水溶解后，加浓氨溶液4.2ml，再用水稀释至250ml,即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4) 取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml，用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4，滤过，即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6) 取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml，即得。

巴比妥－氯化钠缓冲液(pH7.8) 取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量，加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L百度文库 - 让每个人平等地提升自我

4 盐酸溶液调节pH值至7.8，再用水稀释至500ml，即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml，加酚酞指示液1滴，用2mol/L氢氧化钠溶液中和，再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25～3.30,即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g，加水900ml,搅拌使溶解，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml，混匀，即得。

枸橼酸盐缓冲液 取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20％乙醇稀释至100ml，即得。

枸橼酸盐缓冲液(pH6.2) 取2.1％枸橼酸水溶液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6.2，即得。

枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0) 甲液：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml，置冰箱内保存。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。 取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合，摇匀，即得。

氨－氯化铵缓冲液(pH8.0) 取氯化铵1.07g，加水使溶解成100ml，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0，即得。

氨－氯化铵缓冲液(pH10.0) 取氯化铵5.4g，加水20ml溶解后，加浓氯溶液35ml，再加水稀释至100ml，即得。

硼砂－氯化钙缓冲液(pH8.0) 取硼砂0.572g与氯化钙2.94g，加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0，加水稀释至1000ml，即得。

硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10.8～11.2) 取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml；另取硼砂1.91g，加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml 与硼砂溶液27ml，混匀，即得。

硼酸－氯化钾缓冲液(pH9.0) 取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解，再加0.1mol/L氢氧化钠溶液210ml，即得。

醋酸盐缓冲液(pH3.5) 取醋酸铵25g，加水25ml溶解后，加7mol/L盐酸溶液38ml，用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml,即得。

醋酸－锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50ml，加水800ml混合后，用氢氧化锂调节pH值至3.0，再加水稀释至1000ml，即得。

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pbs缓冲液各种PH值得配制方法

pbs缓冲液各种PH值得配制方法

配置方法编辑

采用去离子水、KH2PO4和Na2HPO4·2H2O配制PBS溶液，按以下步骤进行：

(1) 配制1/15mol/L KH2PO4，即每升水中溶解9.078克KH2PO4；

(2) 配制1/15mol/LNa2HPO4·2H2O，即每升水中溶解11.876克Na2HPO4·2H2O；

(3) 将18.2%（体积分数）KH2PO4溶液和81.8%Na2HPO4·2H2O混合；

最终 测定PBS液的PH值约为7.4。

磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

不同pH值磷酸缓冲液的配置之欧阳地创编

不同pH值磷酸缓冲液的配置之欧阳地创编

欧阳地创编

欧阳地创编 不同PH值磷酸缓冲液得配置

时间：2021.03.04 创作：欧阳地

酸盐缓冲液(pH2.0)

甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。

乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。

取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5)

取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml，记得。

磷酸盐缓冲液(pH5.0)

取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8)

取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5)

取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6)

取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠欧阳地创编

欧阳地创编 1.7g，加水溶解成400ml，即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)

取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L

氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8)

取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.0)

取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.2)

取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml，加新沸过的冷水稀释至200ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.3)

取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml，调节pH值至7.3，即得。

磷酸盐缓冲液的配制

磷酸盐缓冲液的配制

磷酸盐缓冲液的配制

磷酸盐缓冲液是一种常用的实验室试剂，用于调节溶液的酸碱度。它在生物化学、分子生物学和细胞生物学等领域中广泛应用。本文将介绍磷酸盐缓冲液的配制方法及其在实验中的应用。

一、磷酸盐缓冲液的配制方法

磷酸盐缓冲液的配制需要以下几个关键成分：磷酸盐、盐酸或氢氧化钠、水。具体的配制方法如下：

1. 准备所需的试剂和器材，包括磷酸盐、盐酸或氢氧化钠、蒸馏水、容量瓶、移液管等。

2. 根据实验需要确定所需的缓冲液pH值。不同的实验需要不同pH值的缓冲液，可以根据实验要求选择合适的磷酸盐和酸碱调节剂。

3. 根据所选的磷酸盐和酸碱调节剂，计算所需的配比。可以参考相关文献或使用在线缓冲液配制计算器进行计算。

4. 使用容量瓶和移液管等器材，按照计算得到的配比将磷酸盐和酸碱调节剂加入蒸馏水中。

5. 搅拌溶液，直到所有试剂充分溶解。

6. 使用pH计检测溶液的pH值，如果需要，可以通过添加更多的酸碱调节剂来调节pH值，直到达到所需的目标pH值。

7. 最后，将配制好的磷酸盐缓冲液过滤或灭菌处理，以确保溶液的纯净度。

二、磷酸盐缓冲液的应用

磷酸盐缓冲液在实验中有多种应用，以下是其中几个常见的应用领域：

1. DNA/RNA电泳：磷酸盐缓冲液常用于DNA/RNA电泳实验中，用于提供适当的pH条件和离子强度，以保持DNA/RNA的稳定性和迁移性。

2. 蛋白质研究：磷酸盐缓冲液可用于蛋白质的提取、纯化和储存。它可以提供适当的pH条件，维持蛋白质的稳定性和活性。

3. 细胞培养：磷酸盐缓冲液可用于细胞培养基的配制，提供适当的pH和离子强度，维持细胞的正常生长和代谢。

4. 酶反应：磷酸盐缓冲液可用于酶反应的调节，提供适当的pH条件，以确保酶的最佳活性。

总结：

磷酸盐缓冲液是一种常用的实验室试剂，用于调节溶液的酸碱度。它的配制方法相对简单，但需要根据实验要求选择合适的磷酸盐和酸碱调节剂，并通过pH计调节溶液的pH值。磷酸盐缓冲液在DNA/RNA电泳、蛋白质研究、细胞培养和酶反应等实验中有广泛的应用。正确使用磷酸盐缓冲液可以提高实验结果的准确性和可重复性，对于科学研究和实验室工作具有重要意义。

各种浓度的PBS配置

各种浓度的PBS配置

1、磷酸盐缓冲液PB 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（PBS）

A液（0.2mol/L NaH2PO4）：称取NaH2PO4•H2O 27.6g（或NaH2PO4•2H2O31.2g），溶于蒸馏水中，最后补加蒸馏水至1000ml。

B液（0.2mol/L Na2HPO4）：称取Na2HPO4•7H2O53.6g（或Na2HPO4•12H2O 71.6g，或Na2HPO4•2H2O35.6g），加蒸馏水溶解，最后加水至1000ml。 0.2mol/L缓冲液配制：A液X

ml中加入B液Y ml，为0.2mol/L PB（见下表）。若再加蒸馏水至200ml则成为0.1mol/L

PB。 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（PB）的配制

pH值 A液（ml） B液（ml） pH值 A液（ml） B液（ml） 5.7 93.5 6.5 6.9 45.0 55.0

5.8 92.0 8.0 7.0 39.0 61.0

5.9 90.0 10.0 7.1 33.0 67.0 6.0 87.7 12.3 7.2 28.0 72.0

6.1 85.0 15.0 7.3 23.0 77.0 6.2 81.5 18.5 7.4 19.0 81.0

6.3 77.5 22.5 7.5 16.0 84.0

6.4 73.5 26.5 7.6 13.0 87.0 6.5 68.5 31.5 7.7 10.0 90.0

6.6 62.5 37.5 7.8 8.5 91.5 6.7 56.5 43.5 7.9 7.0 93.0

6.8 51.0 49.0 8.0 5.3 96.7

2、磷酸盐缓冲生理盐水（PBS）（注意：在PB缓冲液的基础上往往还加入NaCl、KCl等无机盐）

（1）0.01mol/L PBS（pH7.0） 0.2mol/L A液 16.5ml

0.2mol/L B液 33.5ml

加NaCl 8.5g 用蒸馏水稀释至1000ml。