ph7.5的磷酸盐缓冲液的配制

各种PH值的磷酸盐缓冲液配制

2014-06-27 10:33:48 来源：生物秀知道 浏览次数：24342

磷酸盐

取磷酸二氢钠38.0g，与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐(pH2.0)

甲液:取磷酸16.6ml，加水至1000ml，摇匀。乙液：取磷酸氢二钠71.63g，加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5)

取磷酸二氢钾100g，加水800ml，用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

磷酸盐缓冲液(pH5.0)

取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0，即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8)

取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5)

取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液15.2ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6)

取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g，加水使溶解成400ml，即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8)

取磷酸二氢钾6.8g,加水500ml使溶解,用0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8；另取胰酶10g，加水适量使溶解，将两液混合后,加水稀释至1000ml，即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8)

取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml，加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml，用水稀释至1000ml，摇匀，即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.0)

取磷酸二氢钾0.68g，加0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml，用水稀释至100ml，即得。

磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法

0.01M PBS

PBS (135 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 1.5 mM KH2PO4, and 8 mM K2HPO4，pH 7.2)

PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4

1.4mmol/L

称7.9g NaCl，0.2g KCl，0.24g KH2PO4(or 1.44g Na2HPO4)和1.8g K2HPO4，溶于800 ml 蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1 L。保存于4℃冰箱中即可。

需要注意的是，通常所说的浓度0.01 M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na 离子或K 离子的浓度，Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。

母液的配制：

0.2M Na2HPO4：称取 71.6g Na2HPO4-12H2O，溶于 1000ml 水

0.2M NaH2PO4：称取 31.2g NaH2PO4-2H2O，溶于1000ml 水

各种浓度PB(pH=7.4)的配制：

先配 0.2M PB (pH=7.4，100ml)：取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4， 81ml 0.2mol/L 的

Na2HPO4, 即可。

然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可，如：

0.1M PB（PH=7.4） ：取 500ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

0.01M PB （PH=7.4）：取50ml 0.2M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

0.02M PB （PH=7.4）：取100ml 0.2 M PB，加水稀释至 1000ml 即可。

若需要 NaCl的话，加入 NaCl 至0.9%（g/100ml）即可。

另：其它各种另 PH值的 0.2M PB（100ml)配方 ：

1 缓冲液杜氏磷酸盐安全操作及保养规程

缓冲液是生物实验中常用的试剂，其中杜氏磷酸盐缓冲液常用于蛋白质电泳和其他生物化学实验中。但是，杜氏磷酸盐缓冲液也存在一定的安全风险。本文将介绍杜氏磷酸盐缓冲液的安全操作及保养规程，以确保实验室的安全。

1. 基本介绍

杜氏磷酸盐缓冲液分为三种型号：pH6.8、pH7.5、pH8.3。其成分如下：

• pH6.8缓冲液：

– 0.05 M Tris-HCl，含有0.15 M NaCl

• pH7.5缓冲液：

– 0.025 M Tris-HCl，含有0.19 M NaCl

– 0.0025 M EDTA，pH为7.5

• pH8.3缓冲液：

– 0.025 M Tris-HCl，含有0.19 M NaCl

– 0.00125 M EDTA，pH为8.3

杜氏磷酸盐缓冲液在控制蛋白质电泳中重要的作用，尤其是对谷氨酰胺酰转移酶（Gln-Amido-Tranferase）和丙酮酸激酶（Pyruvate

Kinase）的影响。 2 2. 安全操作规程

在使用杜氏磷酸盐缓冲液时，需要注意以下事项：

2.1 穿戴个人防护用品

在操作前应穿戴好规定的个人防护用品，这包括实验服、口罩、手套等，确保自身和实验室的安全。

2.2 严格遵守实验室规定

在实验室内进行实验时，需要遵守实验室的规定和标准操作流程。当需要使用杜氏磷酸盐缓冲液时，应事先了解缓冲液的成分和特性，保证操作正确。

2.3 避免接触皮肤和眼睛

杜氏磷酸盐缓冲液具有一定的腐蚀性，因此在操作时需要避免直接接触到皮肤和眼睛。如不小心接触到皮肤，应立即用盐水清洗，并及时就医处理。

2.4 避免吸入和误食

在操作时，杜氏磷酸盐缓冲液可能溅出，应避免吸入液体和蒸气。若误食，应停止操作并及时就医处理。

2.5 避免混合使用

杜氏磷酸盐缓冲液不应与其他化学品混合使用。如需混合使用，应先进行试验以确保安全性。 3 2.6 存储在安全地方

磷酸缓冲液的配制

0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液

1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1?000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1?000ml）。

2．1/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O?11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1?000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1?000ml）。

3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。

附表1?磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升）

pH 1/15Mol/L?

Na2HPO4 1/15Mol/L

?KH2PO4 pH 1/15Mol/L?

Na2HPO4 1/15Mol/L?

KH2PO4

5.8 8.0 92.0 7.1 66.6 23.4

5.9 9.9 90.1 7.2 72.0 28.0

6.0 12.2 87.8 7.3 76.8 23.2

6.1 15.3 84.7 7.4 80.8 19.2

6.2 18.6 81.4 7.5 84.1 15.9

6.3 22.4 77.6 7.6 87.0 13.0

6.4 ?26.7 73.3 7.7 89.4 10.6

6.5 31.8 68.2 7.8 91.5 8.5

6.6 37.5 62.5 7.9 93.2 6.8

6.7 43.5 56.5 8.0 94.7 5.3

6.8 49.6 50.4 8.1 95.8 4.2

6.9 55.4 44.6 8.2 97.0 3.0

7.0 61.1 38.9 8.4 98.0 2.0