HSV-2的最初鉴证者——记皮肤科领域的病毒学家黄志尚教授

单纯疱疹病毒实验室检测方法的研究进展赖迪辉【摘要】@@ 单纯疱疹病毒(HSV)感染是由HSV侵犯皮肤黏膜,引起炎症、水疱、糜烂、溃疡性病变的一种疾病,根据抗原性不同.可将HSV分为HSV1型和HSV2型,两者虽有约50%的基因同源性,但HSV1主要引起腰以上部位,如眼、口、唇的皮肤黏膜以及中枢神经系统的感染[1].【期刊名称】《中国计划生育学杂志》【年(卷),期】2010(018)006【总页数】2页(P380-381)【作者】赖迪辉【作者单位】首都医科大学宣武医院,北京,100053【正文语种】中文单纯疱疹病毒(HSV)感染是由 HSV侵犯皮肤黏膜,引起炎症、水疱、糜烂、溃疡性病变的一种疾病,根据抗原性不同,可将 HSV分为 HSV 1型和 HSV 2型,两者虽有约 50%的基因同源性,但 HSV1主要引起腰以上部位,如眼、口、唇的皮肤黏膜以及中枢神经系统的感染[1]。

HSV 2主要引起生殖器部位的皮肤黏膜及新生儿感染,并与女性外阴癌和宫颈癌的发生有关[2]。

HSV2外生殖器感染是发病率仅次于人免疫缺陷病毒(HIV)感染的性传播疾病,已引起了医学界的高度重视[3,4]。

近年来,由HSV 1型引起的生殖器疱疹及 HSV亚临床感染或隐性感染有增多趋势,并且HSV两种亚型感染的预后和处理方法不同,复发频率亦有差异[5],HSV1感染引发的生殖器疱疹症状较轻,易于治疗。

而 HSV2感染发作时的症状一般是生殖器周围出现疼痛性皮肤疱疹损害,并容易复发。

当需要与其他生殖器溃疡性疾病,如非感染性或感染性龟头炎、宫颈炎、梅毒等进行鉴别诊断时,实验室证据非常重要。

因此对 HSV 感染进行诊断和分型具有重要的临床意义和流行病学意义。

本文对HSV的病毒细胞培养、抗原检测、抗体检测及分子生物学检测等目前实验室常用诊断与分型方法及新进展作一综述。

一、病毒细胞培养病毒细胞分离培养是实验室诊断 HSV感染最为敏感的方法,并可对其分离株进行分型。

人疱疹病毒感染及抗疱疹病毒感染药物研究进展徐慧玲;陈军刚;何灿辉【期刊名称】《中国感染与化疗杂志》【年(卷),期】2017(017)006【总页数】6页(P719-724)【关键词】人疱疹病毒感染;抗疱疹病毒药物;治疗应用【作者】徐慧玲;陈军刚;何灿辉【作者单位】武汉市东湖医院供应室,武汉430073;中国科学院武汉病毒研究所,病毒学国家重点实验室;武汉市东湖医院供应室,武汉430073【正文语种】中文【中图分类】R511;R978.7疱疹病毒（herpes viruses）是一类有包膜、基因组为双链DNA的病毒。

目前发现的能感染人的疱疹病毒有8种，包括：单纯疱疹病毒1型（herpes simplex virus-1，HSV-1），单纯疱疹病毒2型（herpes simplex virus-2，HSV-2），水痘-带状疱疹病毒（varicella zoster virus，VZV），EB病毒（Epstein-Barr virus，EBV），人类巨细胞病毒（human cytomegalovirus，HCMV），人类疱疹病毒6型（HHV-6），人类疱疹病毒7型（HHV-7）和卡波济肉瘤相关病毒（Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus，KSHV） [1]。

疱疹病毒的生活周期分为典型的潜伏期复制和裂解期复制。

疱疹病毒感染能够引起多种疾病，如疱疹、神经系统感染及肿瘤等重大疾病 [2]。

疱疹病毒具有人群高携带性、易致病性及病症反复发作性等特点，严重影响人们的生命健康。

目前，依然缺乏预防及治疗疱疹病毒感染的有效疫苗。

临床治疗疱疹病毒相关疾病的药物主要为核苷类似物类抗病毒药物、免疫调节剂及抗病毒化疗药物。

这些药物在一定程度上可以缓解相关疾病的病症，减轻患者的痛苦。

然而，临床应用数据显示这些药物不能完全清除感染的病毒，并且存在极大的不良反应，对机体造成很大的伤害。

常见致病病毒分类病毒感染特性单纯疱疹herpes simplex ➢ 双链DNA 病毒， ➢ 病毒蛋白抗原性： HSV -Ⅰ 、 HSV -Ⅱ 。

➢ 两者同源性47%-50%。

➢ HSV 存在于： 疱液、 口鼻、生殖器分泌物中。

➢ 对外界抵抗力不强， 灭活： 56℃ 加热30分钟、紫外线照射5分钟➢ 人是唯一宿主➢ 初次感染5岁以内传播途径：HSV -Ⅰ：直接接触（ 抚摸/接吻）→生殖器以外的皮肤黏膜感染。

HSV -Ⅱ ： 性接触→生殖器部位;新生儿围产期和产道感染→全身原发感染： HSV 首次入体，机体产生免疫应答痊愈；复发性感染： 病毒常潜伏在感觉神经节内→活化。

50%-100%的成人血清中都含有HSV 抗体， 但不能完全防止复发和重复感染→故HSV 感染后不产生永久性免疫。

⏹ 病原体：HSV -Ⅰ ；⏹ 较常见， 多见于1-5岁儿童；⏹ 部位：口腔、 牙龈、 舌、 硬腭、 咽等；⏹ 皮疹： 迅速发生的群集性水疱；⏹ 自觉： 口咽疼痛、 发热、 局部淋巴结肿大；⏹ 病程： 1-2周。

◆ HSV -2；◆ 感染途径： 85%产道， 10-15%产后， 5%宫内；◆ 出生后5-7天发病， 也可长达3周。

◆ 分型： 皮肤-眼睛-口腔局限型、 中枢神经系统型、 播散型。

◆ 全身症状： 发热、 呼吸困难、 黄疸、 肝脾大、 意识障碍等。

◆ 死亡率： 15-50%， 存活婴儿50%发生后遗症● 继发于湿疹/特应性皮炎的婴幼儿，● HSV -Ⅰ 感染多， 也有HSV -2；● 部位： 躯干上部、 颈、 头。

● 皮疹： 原有皮疹基础上， 散在密集水疱/脓疱，疱中央有脐窝， 周围有红晕。

●全身症状： 发热， 重者1周内血行播散→脑/内脏广泛病变。

✧灼热/瘙痒/潮红→成群小水疱→干燥结痂。

✧病程：7-10天。

水痘及带状疱疹--Herpes zoster水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus，VZV)；原发感染：儿童期，表现为水痘；潜伏感染再度激活：成人，表现为带状疱疹✓人疱疹病毒Ⅲ型，HHV-3，人是唯一宿主✓内含双链DNA病毒。

水痘疫苗显威免除或减轻儿童的病程痛苦作者：来源：《科学大观园》2022年第24期水痘是一种常见、多发、有高度接触传播性的儿童疾病，以全身水疱性发疹及轻度体征为特征。

病原体——水痘-带状疱疹病毒（Varicella-zoster Virus， VZV）属于疱疹病毒科，α疱疹病毒亚科，是一种双链DNA病毒，只有一个血清型。

病毒核衣壳直径约80nm～120nm，呈二十面体，周围包绕一层内膜及一层部分来自细胞膜的包膜。

日本爱知县的两位儿科专家Takao Ozaki和 Yoshizo Asano在Vaccine发表一篇综述，让我们听听水痘疫苗的“原产国”——日本学者讲述的水痘疫苗前世今生。

20世纪50年代，得益于病毒学领域的日新月异，日本正经历着一波疫苗开发潮，麻疹、腮腺炎、风疹、脊灰等疫苗研制相继成功。

1959年，高桥理明在大阪大学微生物疾病室任助理教授。

当时科室领头人Yoshiomi Okuno教授是先后研制了麻疹、腮腺炎、风疹疫苗的负责人。

但是，水痘疫苗很难！因为VZV高温不稳定，细胞亲和力强，初次感染后即行潜伏，使得难以获得无细胞病毒。

高桥理明教授最初的选择是研究麻疹和脊灰。

直到1964年发生了一件事才影响了他的研究方向。

当时高桥理明又在美国学习，他3岁的儿子发了水痘，并且产生了严重症状，全身水疱并且持续高烧。

高桥教授夫妻日夜守护配以综合治疗，才使得孩子病情慢慢好转。

随后，高桥教授开始关注水痘减毒活疫苗的工作。

1970年，正式开始了自己的水痘疫苗研究事业。

1971年，一名Oka姓氏的儿童也许还不晓得，在他身上发生的典型水痘，日后将免除或减轻全球儿童的病程苦痛。

高桥教授从其身上水疱液中分离得到的一毒株，采用经典的减毒方案，先在人胚肺细胞中进行了11次传代（34℃），后在豚鼠胚胎细胞中进行了12次传代（37℃），然后又在WI-38细胞中传代3次，MRC-5细胞中传代2次，获得了VZV疫苗Oka 株主种子批。

2019年华医网继续教育答案-352-儿科常见病毒感染性疾病的临床和实验室诊断研究进展备注:红色选项或后方标记“[正确答案]”为正确选项(一)儿童呼吸道合胞病毒感染实验室诊断1、下列选项对hRSV的描述中，错误的是（）A、hRSV属副粘病毒科，肺炎病毒属B、因其在组织培养中能形成特殊的融合性细胞病变而命名为人呼吸道合胞病毒（hRSV）C、人呼吸道合胞病毒导致的死亡病例主要发生在发达国家[正确答案]D、1956年Morris等人首次从感冒的黑猩猩身上分离出E、1957年Chanock等人通过细胞培养的方法从患肺炎的患儿中发现了hRSV2、直接买内衣荧光检测的缺点不包括（）A、需要大量人工操作B、临床相关性差[正确答案]C、结果判定存在主观性，对技术人员要求高D、要求有足够的呼吸道柱状上皮细胞E、不能用于床旁检测3、诊断hRSV的金标准是（）A、病毒分离[正确答案]B、直接免疫荧光法C、血清抗体中和试验D、抗体检测E、抗原检测4、（）是已获批准且临床较常用的儿童急性呼吸道感染病原检测方法A、免疫荧光法抗原检测[正确答案]B、快速抗原检测C、快速免疫诊断技术D、核酸检测E、抗体检测5、快速抗原检测的优点不包括（）A、hRSV快速抗原检测方法所需平均时间约为10min（8～15min）B、方法简单，易于操作C、不需特殊仪器D、灵敏度、特异性高[正确答案]E、对于操作地点与操作者的技术均无太高要求(二)儿童流感病毒实验室诊断1、流感病毒诊断的金标准是（）A、血清学检测B、核酸检测和病毒分离[正确答案]C、抗原检测D、抗体检测E、抗原和抗体检测2、我国北方地区流感流行季节为是（）A、夏季B、冬季C、秋季D、冬春季节[正确答案]E、夏秋季节3、可用于流感病毒实验室诊断的临床标本不包括（）A、鼻拭子B、血液[正确答案]C、鼻咽洗液D、咽拭子E、痰液4、可引起世界大流行的流感病毒变异方式是（）A、点突变B、抗原性转变[正确答案]C、温度敏感性变异D、宿主范围变异E、抗原漂移5、被称为流感病毒的混合器的动物是（）A、水禽B、猪[正确答案]C、马D、鲸鱼E、鸭子6、感染人类的流感病毒主要是（）A、甲型和乙型流感病毒[正确答案]B、甲型和丙型流感病毒C、乙型和丙型流感病毒D、丙型型流感病毒E、丁型流感病毒7、流感病毒的抗原变异主要集中在（）A、M2蛋白B、核蛋白C、基质蛋白D、血凝素和神经氨酸酶[正确答案]E、多聚酶蛋白8、通常用于流感病毒实验室诊断的方法不包括（）A、核酸杂交法[正确答案]B、病毒分离C、直接免疫荧光法D、核酸检测E、免疫层析法(三)儿童轮状病毒感染1、A组轮状病毒G2基因型主要和P（）基因型组合出现A、4[正确答案]B、11C、8D、6E、72、（）是预防轮状病毒感染引起的儿童中重度腹泻的主要措施A、思密达B、补液盐C、益生菌D、疫苗接种[正确答案]E、布洛芬3、轮状病毒肠外系统感染引起的中枢神经系统症状主要是（）A、惊厥[正确答案]B、脑炎C、脑病D、瑞氏综合征E、癫痫4、下面可以称为轮状病毒诊断金标准的是（）A、聚丙烯酰胺凝胶电泳[正确答案]B、RT-PCRC、免疫层析D、ELISAE、以上都不是5、国内轮状病毒的流行时间主要是（）A、春季B、秋冬季[正确答案]C、夏季D、6-8月E、无明显季节性6、国内轮状病毒G基因型的流行呈现动态变化，2000年之前以（）流行为主A、G1[正确答案]B、G2C、G3D、G5E、G97、国内轮状病毒G基因型的流行呈现动态变化，2000年之后以（）流行为主A、G1B、G2C、G3[正确答案]D、G5E、G98、编码轮状病毒中壳蛋白的病毒基因是（）A、VP7基因B、VP4基因C、VP6基因[正确答案]D、VP9基因E、VP2基因9、轮状病毒（）蛋白是被鉴定的第一个病毒内毒素A、非结构蛋白NSP1B、结构蛋白VP4C、非结构蛋白NSP4[正确答案]D、结构蛋白VP7E、结构蛋白VP210、主要引起婴幼儿腹泻的轮状病毒是（）A、A组轮状病毒[正确答案]B、B组轮状病毒C、C组轮状病毒D、G组轮状病毒E、D组轮状病毒(四)手足口病临床表现新特点1、非典型手足口病临床特点不包括（）A、多伴有中-高热B、皮疹分布多广泛C、恢复期可出现脱甲症D、常伴有神经系统并发症且预后差[正确答案]E、皮疹疼痛、结痂2、非典型手足口病的口腔病变不包括（）A、口腔黏膜溃疡B、齿龈充血、红肿、糜烂[正确答案]C、舌黏膜溃疡D、口周皮疹E、口唇发绀3、手足口病与疱疹性咽峡炎关系的错误描述是（）A、疱疹性咽峡炎是手足口病的早期表现[正确答案]B、两者的致病病原体有重合C、两者流行季节近似D、两者均可引起聚集性疫情E、两者发病人群近似4、CV-A6手足口病和脓疱疮的鉴别要点是（）A、发病季节B、皮疹形态C、感染人群D、是否有自体接种传播[正确答案]E、是否高热5、对非典型手足口病描述正确的是（）A、皮疹多为斑丘疹和质硬的疱疹，泡壁厚B、皮疹多离心分布C、常见病原为CV-A6和CV-A10[正确答案]D、皮疹不痛、不痒、不结痂、不留疤E、以上都正确。