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微生物学实验课目的及意义
摘要：
一、微生物学实验课的目的
二、微生物学实验课的意义
正文：
微生物学是一门研究微生物种类、结构、生理功能、生态分布、应用技术等方面的学科。
微生物学实验课作为理论教学的补充，具有重要的实践意义。
一、微生物学实验课的目的
1.巩固理论知识：通过实验操作，使学生对微生物学的基本概念、原理和方法有更深入的理解，为今后学习打下坚实基础。
2.培养实际操作能力：实验课让学生亲自动手操作显微镜、染色、制片等，掌握微生物学的基本实验技能。
3.提高观察和分析问题的能力：实验过程中，学生可以观察微生物的形态、结构、生理特性等，培养观察和分析问题的能力。
4.培养科研兴趣：实验课让学生了解微生物学研究的最新动态，激发对科学研究的兴趣和热情。
二、微生物学实验课的意义
1.促进理论联系实际：实验课将课堂所学理论知识与实际操作相结合，有助于提高学生的学习兴趣和效果。
2.培养创新能力：实验过程中，学生可以学会设计实验、分析数据、解决问题，为创新能力的培养奠定基础。
3.增强团队协作能力：实验课通常以小组形式进行，学生需要在团队中分工合作，共同完成实验任务，从而培养团队协作能力。
4.提高综合素质：微生物学实验课有助于培养学生严谨的科学态度、独立的思考能力和良好的实验习惯，提高综合素质。
微生物常用实验第一篇：细菌涂片染色实验细菌涂片染色实验是微生物学中最基本的实验之一。
通过染色方法，使细菌变得可见，便于观察形态、结构、数量等特征，有利于研究其生长、代谢、致病性等方面。
下面，我们来介绍细菌涂片染色实验的具体步骤：一、制备细菌涂片1.取出培养基上生长良好的细菌菌落，用不锈钢嵌片环沿中心点轻压一下。
2.将嵌片环中的菌落涂匀于无菌载玻片上，制备成直径约1厘米的薄片。
3.待载玻片上的细菌涂片晾干，并用火焰消毒。
二、涂片染色1.用火焰将铺有细菌涂片的玻片烤干。
2.将烤干的玻片浸入甲醇中，固定一分钟，再用水漱洗。
3.将玻片浸入碘酒中，固定一分钟，再用水漱洗。
4.将玻片浸入乙醇中，使背景颜色褪去，再用水漱洗。
5.将玻片浸入洋红染色液中，染色时间不超过1分钟。
6.用水冲洗干净，晾干后可以在显微镜下观察。
通过细菌涂片染色实验，我们可以直观地观察到细菌的形态、大小、聚集情况、颜色等，有助于鉴定细菌种类，并进一步深入研究其生物学特性。
第二篇：厌氧培养实验厌氧菌是一类生长需要在完全无氧条件下进行的微生物。
在许多疾病的发病机制中，厌氧菌都发挥着重要作用，因此，研究厌氧菌对于认识疾病的发病机制具有极其重要的意义。
下面，我们来介绍厌氧培养实验的具体步骤：一、制备厌氧培养基制备厌氧培养基是进行厌氧菌培养的关键。
具体操作步骤如下：1.准备培养基，并在其中加入培养菌株所需的配方和其他适宜的添加剂。
2.将培养基分装到无菌针筒或暗口瓶中。
3.在体积的一半至三分之二处加入去氧剂（一般为Thioglycolate或Dithiothreitol）。
二、厌氧细菌接种与培养1.准备厌氧细菌培养物的接种种子。
一般情况下，把生长适应在厌氧条件下的细菌进行分生处理来获得设计数量的细胞，并将其重新悬浮在与培养基相同的缓冲液中。
2.在无氧条件下接种厌氧菌，避免暴露于空气中。
可以通过使用瓶盖和橡胶塞的局部替代或全封闭气密容器的方法来实现无氧条件。
03微生物在自然界和人类生活中的作用阐述微生物在生态系统、工业生产、医疗卫生等领域的重要性。
01微生物的定义与分类包括细菌、真菌、病毒等微生物的基本概念和分类方法。
02微生物的生物学特性介绍微生物的形态、结构、生理生化特性等。
微生物学概述01实验室安全制度包括实验室安全守则、危险标识识别、紧急情况下的应对措施等。
02实验操作规范介绍实验前准备、实验过程中的操作规范、实验后清理等注意事项。
03生物安全阐述生物安全的概念、生物安全级别的划分及相应防护措施。
实验室安全与规范介绍显微镜的种类、使用方法和维护保养。
显微镜介绍离心机的类型、使用方法和维护保养。
离心机阐述培养箱和摇床的工作原理、使用方法和注意事项。
培养箱与摇床包括分光光度计、电泳仪、PCR 仪等设备的简要介绍和使用方法。
其他常用设备常用仪器与设备实验报告格式包括标题、作者、摘要、正文、结论、参考文献等部分的撰写要求。
数据处理与图表制作介绍数据处理的方法、图表的制作规范及注意事项。
实验结果分析与讨论阐述实验结果的分析方法、讨论实验结果的合理性及可能存在的问题。
实验报告提交与评审说明实验报告的提交方式、评审标准及相关注意事项。
实验报告撰写要求03根据实验需求，选择适当的培养基类型，如营养琼脂、马丁氏琼脂等。
选择合适的培养基按照培养基配方准确称量各成分，加入蒸馏水或去离子水，加热溶解后调整pH 值。
配制培养基将配制好的培养基分装到试管、培养皿等容器中，采用高压蒸汽灭菌法或干热灭菌法进行灭菌处理。
培养基分装与灭菌培养基制备与灭菌微生物接种与培养接种前准备准备好无菌操作台、无菌接种环、酒精灯等接种工具，确保无菌操作环境。
微生物接种采用划线法、倾注法等方法将待测微生物接种到培养基上。
培养条件设置根据微生物的生长需求，设置好培养温度、湿度和光照等条件。
观察前准备准备好显微镜、载玻片、盖玻片等观察工具，确保无菌操作环境。
微生物形态观察通过显微镜观察微生物的形态、大小、排列方式等特征，记录并描述观察结果。
微生物学实验报告微生物学实验报告引言微生物学是一门研究微小生物的科学，它涉及到微生物的分类、结构、生理、生态以及与人类和环境的相互作用等方面。
本实验旨在通过观察和分析微生物的生长特性，了解微生物的繁殖规律和影响因素。
实验方法1. 实验材料准备我们选择了常见的细菌和酵母菌作为实验材料。
实验中使用的培养基包括富含营养的琼脂培养基和含有特定营养物质的选择性培养基。
实验器材包括培养皿、试管、移液管等。
2. 实验步骤首先，我们将培养皿分成不同的区域，分别涂抹不同的微生物样本。
然后，将培养皿放入恒温培养箱中，控制温度和湿度，观察微生物在不同条件下的生长情况。
接下来，我们将微生物样本接种到含有特定营养物质的选择性培养基上，观察其生长情况，以了解微生物对不同营养物质的需求。
实验结果在琼脂培养基上，我们观察到细菌和酵母菌在适宜的温度和湿度条件下迅速生长。
细菌呈现出白色或黄色的菌落，而酵母菌则呈现出乳白色的菌落。
在选择性培养基上，我们发现不同微生物对营养物质的需求有所不同。
例如，某些细菌只能在含有特定氨基酸的培养基上生长，而在其他培养基上则无法繁殖。
讨论与分析微生物的生长受到多种因素的影响，包括温度、湿度、营养物质等。
在实验中，我们控制了温度和湿度，使其处于适宜的范围，从而促进微生物的生长。
此外，我们还观察到微生物对不同营养物质的需求不同，这与微生物的代谢特性有关。
不同微生物的代谢途径和需求差异导致它们对不同营养物质的利用能力不同。
微生物的快速繁殖和适应性使其在自然界中起到重要的作用。
它们参与了有机物质的分解和循环，维持了生态系统的平衡。
此外，微生物还可以用于生物工程和医学领域。
例如，利用细菌进行基因工程，可以生产出许多重要的药物和化学物质。
然而，微生物也可能对人类和环境造成危害。
某些微生物会引起传染病，给人类的健康带来威胁。
此外，微生物还可能对环境产生负面影响，例如导致水体富营养化和生态系统的破坏。
结论通过本次实验，我们深入了解了微生物的生长特性和影响因素。
微生物学实验微生物学实验是研究微生物的生长、活动和相互作用的一种科学实验。
通过实验可以了解微生物的生理特性和遗传特性，探究微生物与环境的关系，以及微生物对人类健康和环境的影响。
本文将介绍微生物学实验的常见内容和方法，并举例说明其应用。
1. 常见（1）微生物的培养与分离：将微生物样品接种于培养基上，提供适宜的环境因素使其生长繁殖。
利用孵育箱或培养皿进行培养，观察微生物的孢子、菌丝和菌落等形态特征，通过分离与鉴定，确定微生物的种类和数量。
（2）微生物的生长曲线：利用培养皿或发酵罐等装置，监测微生物在不同时间内的生长情况，绘制生长曲线。
通过分析曲线上的不同阶段，了解微生物的生长特性，包括潜时期、对数期、平稳期和死亡期等。
（3）微生物的代谢分析：通过测定微生物培养过程中的代谢产物，如酸、气体、酶等，分析微生物的代谢途径和代谢产物对生物工艺和环境的影响。
常用的方法包括气相色谱、质谱和高效液相色谱等技术。
（4）微生物的遗传分析：通过构建基因工程菌株或利用遗传标记技术，研究微生物的基因表达、突变和遗传传递等现象。
例如，利用PCR技术检测微生物的特定基因序列，分析其在不同环境条件下的表达水平。
2. 微生物学实验方法（1）杀菌与消毒：在进行微生物实验前，需要对实验器材、培养基和试剂等进行杀菌和消毒处理，以防止外源菌的污染。
常用的方法有高温高压灭菌、酒精喷雾消毒和过滤器材消毒等。
（2）无菌技术：在进行微生物的培养和分离实验时，需要避免外界细菌的污染。
常用的无菌技术包括细菌装液的操作在无菌台上进行，采用无菌培养皿、培养基和工具，以及穿戴无菌手套等措施。
（3）微量液体处理：有些微生物实验需要处理微量的液体，如微生物菌液的接种、稀释和移液等。
在这种情况下，需要使用微量吸管、微量移液器和微量离心机等微量操作工具，保证实验的准确性和可重复性。
（4）统计分析：微生物学实验的数据分析通常需要进行统计处理，以确定实验数据的可靠性和显著性差异。
一、实验目的1. 掌握微生物的基本培养方法。
2. 学习显微镜的使用技巧，观察微生物的形态和结构。
3. 了解微生物染色技术，观察微生物的细胞结构。
4. 掌握微生物纯化技术，获得纯种菌株。
二、实验原理微生物是一类具有微小体积的生物，其形态和结构各异。
通过显微镜观察，可以了解微生物的形态特征。
微生物染色技术可以进一步揭示微生物的细胞结构，如细胞壁、细胞膜、细胞质等。
纯化技术则是获得纯种菌株的重要手段。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。
2. 试剂：营养肉汤、营养琼脂、革兰氏染液、无菌水、酒精、盐酸、氢氧化钠等。
四、实验步骤1. 微生物培养- 将微生物接种于营养肉汤中，置于37℃恒温培养箱中培养过夜。
- 将培养好的菌液涂布于营养琼脂平板上，置于37℃恒温培养箱中培养24小时。
2. 显微镜观察- 取培养好的菌落，制作临时装片。
- 使用显微镜观察菌落的形态、大小、颜色等特征。
- 使用革兰氏染色法观察细菌的细胞结构。
3. 微生物染色- 取培养好的菌液，制作临时装片。
- 使用革兰氏染色法观察细菌的细胞结构。
- 使用荧光染色法观察细菌的鞭毛、荚膜等特殊结构。
4. 微生物纯化- 将涂布于营养琼脂平板上的菌落挑取至新的平板上，重复数次，直至获得单菌落。
- 将单菌落接种于营养肉汤中，培养过夜。
五、实验结果与分析1. 微生物培养- 在营养琼脂平板上观察到不同颜色的菌落，表明微生物已成功培养。
2. 显微镜观察- 通过显微镜观察，发现大肠杆菌为杆状，金黄色葡萄球菌为球形，枯草芽孢杆菌为棒状。
- 革兰氏染色结果显示，大肠杆菌为革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性菌。
3. 微生物染色- 荧光染色结果显示，大肠杆菌具有鞭毛，金黄色葡萄球菌具有荚膜。
4. 微生物纯化- 通过纯化技术，成功获得纯种菌株。
六、实验结论1. 本实验成功培养了大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等微生物。
2. 通过显微镜观察和染色技术，成功观察了微生物的形态、结构和特殊结构。
实验1: 显微镜油镜的使用及细菌形态的观察（3学时）目的要求(1) 熟悉普通光学显微镜的构造及各部分的功能。
(2) 学习并掌握油镜的原理和使用方法。
1. 基本原理显微镜由机械装置和光学系统两大部分组成。
油镜物镜的基本原理微生物学研究用的显微镜的物镜通常有低倍物镜（16mm，10×）、高倍物镜（4mm，40—45×）和油镜（1．8 mm，95—100×）三种。
油镜通常标有黑圈或红圈，也有的以“OI字样表示，它是三者中放大倍数最大的。
根据使用不同放大倍数的目镜，可使被检物体放大1000—2 000多倍。
油镜的焦距和工作距离（标本在焦点上看得最清晰时，物镜与样品之间的距离）最短，光圈则开得最大，因此，在使用油镜观察时，镜头离标本十分近，需特别小心。
使用时，油镜与其他物镜的不同是载玻片与物镜之间不是隔一层空气，而是隔一层油质，称为油浸系。
这种油常选用香柏油，因香柏油的折射率n=1．52，与玻璃相同。
当光线通过载玻片后，可直接通过香柏油进入物镜而不发生折射。
如果玻片与物镜之间的介质为空气，则称为干燥系，当光线通过玻片后，受到折射发生散射现象，进入物镜的光线显然减少，这样就减低了视野的照明度。
利用油镜不但能增加照明度，更主要的是能增加数值孔径，因为显微镜的放大效能是由其数值孔径决定的。
所谓数值孔径，即光线投射到物镜上的最大角度（称为镜口角）的一半正弦，乘上玻片与物镜间介质的折射率所得的乘积，可用下列公式表示：NA＝n•sinα式中NA=数值孔径；n=介质折射率；α=最大入射角的半数，即镜口角的半数。
因此，光线投射到物镜的角度愈大，显微镜的效能就愈大（图Ⅲ-5），该角度的大小决定于物镜的直径和焦距。
同时，α的理论限度为90°，sin90°=1，故以空气为介质时（n=1），数值孔径不能超过1，如以香柏油为介质时，则n增大，其数值孔径也随之增大。
如光线入射角为120°，其半数的正弦为sin60°=0．87，则：以空气为介质时：NA=1×0．87=0．87以水为介质时：NA=1．33×0．87=1．15以香柏油为介质时：NA=1．52×0．87=1．32显微镜的分辨力是指显微镜能够辨别两点之间最小距离的能力。
它与物镜的数值孔径成正比，与光波长度成反比。
因此，物镜的数值孔径愈大，光波波长越短，则显微镜的分辨力愈大，被检物体的细微结构也愈能明晰地区别出来。
因此，一个高的分辨力意味着一个小的可分辨距离，这两个因素是成反比关系的，通常有人把分辨力说成是多少微米或纳米，这实际上是把分辨力和最小分辨距离混淆起来了。
显微镜的分辨力是用可分辨的最小距离来表示的。
式中λ=光波波长。
我们肉眼所能感受的光波平均长度为0．55μm，假如数值孔径为0．65的高倍物镜，它能辨别两点之间的距离为0．42μm。
而在0．42μm以下的两点之间的距离就分辨不出，即使用倍数更大的目镜，使显微镜的总放大率增加，也仍然分辨不出。
只有改用数值孔径更大的物镜，增加其分辨力才行。
例如用数值孔径为1．25的油镜时，能辨别两点之间的因此，我们可以看出，假如采用放大率为40倍的高倍物镜（NA=0．65），和放大率为24倍的目镜，虽然总放大率为960倍，但其分辨的最小距离只有0．42μm。
假如采用放大率为90倍的油镜（NA=1．25），和放大率为9倍的目镜，虽然总的放大率为810倍，但却能分辨出0．22μm间的距离。
2. 材料及器材显微镜、擦镜纸、二甲苯、香柏油、各种细菌微生物制片标本、吸水纸、纱布、瓷盘、酒精灯、接种工具、打火机、试剂瓶、牙签等。
3. 方法与步骤(1) 观察前的准备A. 置显微镜于平稳的实验台上，镜座距实验台边沿约3—4cm。
镜检者姿势要端正，一般用左眼观察，右眼便于绘图或记录，两眼必须同时睁开，以减少疲劳，亦可练习左右眼均能观察。
B. 调节光源，对光时应避免直射光源，因直射光源影响物像的清晰，损坏光源装置和镜头，并刺激眼睛。
如阴暗天气，可用日光灯或显微镜灯照明。
调节光源时，先将光圈完全开放，升高聚光镜至与载物台同样高，否则使用油镜时光线较暗。
然后转下低倍镜观察光源强弱，调节反光镜，光线较强的天然光源宜用平面镜；光线较弱的天然光源或人工光源宜用凹面镜。
在对光时，要使全视野内为均匀的明亮度。
凡检查染色标本时，光线应强；检查未染色标本时，光线不宜太强。
可通过扩大或缩小光圈、升降聚光器、旋转反光镜调节光线。
(2) 低倍镜观察找目的物(3) 高倍镜观察将高倍镜转至正下方，在转换物镜时，需用眼睛在侧面观察，避免镜头与玻片相撞。
然后由目镜观察，并仔细调节光圈，使光线的明亮度适宜，同时用粗调节器慢慢升起镜筒至物像出现后，再用细调节器调节至物像清晰为止，找到最适宜观察的部位后，将此部位移至视野中心，准备用油镜观察。
(4) 油镜观察A. 用粗调节器将镜筒提起约2cm，将油镜转至正下方。
B. 在玻片标本的镜检部位滴上一滴香柏油。
C. 从侧面注视，用粗调节器将镜筒小心地降下，使油镜浸在香柏油中，其镜头几乎与标本相接，应特别注意不能压在标本上，更不可用力过猛，否则不仅压碎玻片，也会损坏镜头。
D. 从接目镜内观察，进一步调节光线，使光线明亮，再用粗调节器将镜筒徐徐上升，直至视野出现物像为止，然后用细调节器校正焦距。
如油镜已离开油面而仍未见物像，必须再从侧面观察，将油镜降下，重复操作至物像看清为止。
E. 用同样的方法观察枯草芽孢杆菌染色标本。
F. 观察完毕，上旋镜筒。
先用擦镜纸拭去镜头上的油，然后用擦镜纸蘸少许二甲苯（香柏油溶于二甲苯）擦去镜头上残留油迹，最后再用干净擦镜纸擦去残留的二甲苯。
切忌用手或其他纸擦镜头，以免损坏镜头。
用绸布擦净显微镜的金属部件。
G. 将各部分还原，反光镜垂直于镜座，将接物镜转成八字形，再向下旋。
同时把聚光镜降下，以免接物镜与聚光镜发生碰撞危险。
4. 实验作业(1) 分别绘出你在低倍镜、高倍镜和油镜下观察到的金黄色葡萄球菌及枯草芽孢杆菌的状态，包括在三种情况下视野中的变化，同时注明物镜放大倍数和总放大率。
(2) 在使用高倍镜和油镜进行调焦时，应将镜筒徐徐上升还是下降？为什么？(3) 用油镜观察时，为什么要在载玻片上滴加香柏油？实验2: 细菌的单染色与革兰氏染色（3学时）1. 目的要求(1) 学习微生物涂片、染色的基本技术，掌握细菌的单染色方法及革兰氏染色方法。
(2) 巩固显微镜的使用方法。
2. 基本原理所谓单染色法是利用单一染料对细菌进行染色的一种方法。
此法操作简便，适用于菌体一般形态的观察。
在中性、碱性或弱酸性溶液中，细菌细胞通常带负电荷，所以常用碱性染料进行染色。
碱性染料并不是碱，和其他染料一样是一种盐，电离时染料离子带正电，易与带负电荷的细菌结合而使细菌着色。
例如，美蓝（亚甲蓝）实际上是氯化亚甲蓝盐（缩写为MBC），它可被电离成正、负离子。
带正电荷的染料离子可使细菌细胞染成蓝色。
常用的碱性染料除美蓝外，还有结晶紫、碱性复红、番红（又称沙黄）等。
细菌体积小，较透明，如未经染色常不易识别，而经着色后，与背景形成鲜明的对比，使易于在显微镜下进行观察。
革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。
它是1884年由丹麦医师Gram创立的。
革兰氏染色法不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G+表示；染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G-表示。
细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。
革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肽聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫-碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肽聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫-碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。
3、材料及器材(1) 载玻片，接种环，双层瓶，生理盐水，嗜碱性美蓝染色液，石炭酸复红染色液；显微镜、擦镜纸、二甲苯、香柏油、吸水纸、纱布、瓷盘、酒精灯、接种工具、打火机、试剂瓶、牙签等、培养箱、灭菌锅、革兰氏染色液。
(2) 白萄球菌，枯草芽孢杆菌菌种、大肠杆菌菌种、金黄色葡萄球菌菌种、乳酸菌种4 方法与步骤A、单染色法（1）涂片取两块干净的载玻片，各滴一小滴生理盐水于载玻片中央，用无菌操作，分别挑取白萄球菌和枯草芽孢杆菌于二载玻片的水滴中（每一种菌制一片），调匀并涂成薄膜。
注意滴生理盐水时不宜过多，涂片必须均匀。
（2）干燥于室温中自然干燥。
（3）固定涂片面向上，于火焰上通过2—3次，使细胞质凝固，以固定细菌的形态，并使其不易脱落。
但不能在火焰上烤，否则细菌形态将毁坏。
（4）染色放标本于水平位置，滴加染色液于涂片薄膜上，染色时间长短随不同染色液而定。
吕氏碱性美蓝染色液约染2—3分钟，石炭酸复红染色液约染1—2分钟。
（5）水洗染色时间到后，用自来水冲洗，直至冲下之水无色时为止。
注意冲洗水流不宜过急，过大，水由玻片上端流下，避免直接冲在涂片处。
冲洗后，将标本晾干或用吹风机吹干，待完全干燥后才可置油镜下观察。
（6）镜检按实验一作程序进行显微镜观察。
B、革兰氏染色(1) 涂片将培养14—16小时的枯草芽孢杆菌和培养24小时的大肠杆菌分别作涂片（注意涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。
固定时通过火焰1—2次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。
(2) 初染加草酸铵结晶紫一滴，约一分钟，水洗。
…(3) 媒染滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。
…(4) 脱色将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95％酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20—30秒钟，立即用水冲净酒精。
(5) 复染用番红液染1—2分钟，水洗。
(6) 镜检干燥后，置油镜观察。
革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。
以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准，过于密集的细菌，常常呈假阳性。
(7) 同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片，作革兰氏染色对比。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌；而脱色不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。
此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及部分菌自行溶解了，都常呈阴性反应。
5、实验作业(1) 在你所作的革兰氏染色制片中，大肠杆菌和枯草芽孢杆菌各染成何色？它们是革兰氏阴性菌还是革兰氏阳性菌？(2) 作革兰氏染色涂片为什么不能过于浓厚？其染色成败的关键一步是什么？(3) 当你对一株未知菌进行革兰氏染色时，怎样能确证你的染色技术操作正确，结果可靠？(4) 绘图实验3：细菌芽孢染色及鞭毛的观察（3学时）1. 目的要求学习并掌握芽孢染色法。
