脐带间充质干细胞知识问答
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脐带间充质干细胞新生儿脐带组织——脐带间充质干细胞脐带间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cells,MSCs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞,它能分化成许多种组织细胞,具有广阔的临床应用前景。
脐带间充质干细胞的特性:间充质干细胞是干细胞的一种,因能分化为间质组织而得名,具有亚全能分化潜能,在特定的体内外环境下,能够诱导分化成为多种组织细胞。
间充质干细胞具有干细胞的共性,即自我更新、多向分化和归巢的能力。
脐带间充质干细胞的分化能力:间充质干细胞具有向多种类型细胞分化的能力,可以分化为神经、心脏、肝脏、骨、软骨、肌腱、脂肪、上皮等多种细胞。
这种多向分化的能力给人类多种疾病的治疗提供了重要的原材料。
脐带间充质干细胞的取材:脐带间充质干细胞来源于新生儿脐带华通氏胶,取材方便,体外增殖能力强。
一根脐带提取的间充质干细胞的数量相当于成人5000毫升骨髓中的间充质干细胞数量,且质量优、活性高、更纯净,可多次使用,是理想的间充质干细胞来源。
脐带间充质干细胞的分离培养:1. 取新鲜健康脐带,用PBS冲洗干净后,用剪刀镊子剔去血管,剥出里面的华氏胶组织。
2. 将所得组织充分剪碎至1 mm3大小,加入α-MEM培养液置于37℃,5%的CO2培养箱培养,培养液中含10% FBS,100U/ml 青霉素,100U/ml链霉素。
3. 脐带组织培养5-7天后,可见有部分细胞从组织块周围爬出,形态呈细小的梭形,4. 一周后,细胞开始迅速增殖,形成大小不等的细胞集落,待细胞长满后,用0.25%胰蛋白酶消化传代。
间充质干细胞临床应用美国FDA已批准了近60项临床试验,主要包括以下几个方面:1)造血干细胞移植:增强造血功能;促使造血干细胞移植物的植入;治疗移植物抗宿主病。
2)组织损伤的修复:骨、软骨、关节损伤、心脏损伤;肝脏损伤;脊髓损伤和神经系统疾病。
3)自身免疫性疾病:系统性红斑狼疮、硬皮病、炎性肠炎等。
脐带间充质干细胞脐带间充质干细胞(Mesnchymal Stem Cells,MSCs)是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞,它能分化成许多种组织细胞,具有广阔的临床应用前景。
目录1概念2优势3分离培养4用途5干细胞研究▪期刊简介▪研究对象▪研究内容1概念脐带间充质干细胞是以人脐带血血清为主体的培养体系的脐带间充质干细胞培养扩增的方法:流式细胞仪检测结果显示,贴壁细胞均表达CD44、CD29,低表达CD106,不表达造血细胞表型CD14、CD34、CD45和内皮细胞表型CD31,也不表达HLA-DR:细胞倍增时间为30h,细胞周期分析表明,G0~G1期和+G2+M期所占比例分别为78.84%和11.16%。
结论:应用灭活脐带血清培养体系可成功扩增人脐带间充质干细胞,培养的细胞具有间充质干细胞的基本特性,为建立间充质干细胞库和临床应用提供了理论依据。
2优势脐带间充质干细胞(MSCs)具有较高的分化潜能,可向多个方向进行分化。
它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景。
有报道从人脐带中分离出MSCs,且细胞含量、增殖能力优于骨髓MSCs,免疫原性比骨髓MSCs低[1],并且具有取材方便,无伦理学争议等优点,因此越来越受到研究工作者们的关注。
干细胞的培养体系主要应用含动物血清(如胎牛血清)的培养基,在此种环境下生长的干细胞,其内部结构会发生何种变化尚未可知,为避免含动物血清培养中病毒等病原体污染和异种血清所致的过敏反应,课题组进行了以人脐带血血清为主体的培养体系体外培养扩增脐带间充质干细胞的实验研究。
以探讨人脐带血血清替代动物血清用于培养临床组织工程用干细胞的可行性。
同时研究脐带间充质干细胞形态学、生长特性、细胞周期、免疫表型等特性,旨在建立脐带间充质干细胞的富集方法,为建立脐带间充质干细胞库和临床应用提供有力的理论依据。
[2]3分离培养脐带间充质干细胞的获取主要有组织块贴壁法与酶消化法,由于酶对细胞的损伤较大,且细胞得率较低,费用昂贵,因此大多数实验室采取了组织块贴壁法进行培养。
1.下列哪种细胞通常被认为是具有自我更新能力和多向分化潜能的干细胞?A.成熟的红细胞B.胚胎干细胞C.神经元细胞D.心肌细胞2.胚胎干细胞在体外培养时,维持其未分化状态的关键生长因子是?A.EGF(表皮生长因子)B.FGF(成纤维细胞生长因子)C.TGF-β(转化生长因子-β)D.LIF(白血病抑制因子)及bFGF(碱性成纤维细胞生长因子)3.成体干细胞主要存在于人体的哪些部位?(多选)A.骨髓B.大脑C.皮肤D.肝脏E.肌肉4.下列关于诱导多能干细胞(iPS细胞)的描述,正确的是?A.无需基因操作即可直接从体细胞获得B.保留了原始体细胞的遗传特性但失去了分化能力C.通过导入特定的重编程因子使体细胞获得类似胚胎干细胞的特性D.临床应用广泛,无伦理争议5.干细胞在再生医学中的应用不包括?A.修复受损的心脏组织B.治疗帕金森病等神经退行性疾病C.替代已衰竭的胰岛细胞治疗糖尿病D.直接用于癌症的根治性治疗6.造血干细胞移植主要用于治疗哪种类型的疾病?A.先天性心脏病B.自身免疫性疾病C.血液系统恶性肿瘤及遗传性疾病D.神经系统损伤7.下列哪种细胞不属于间充质干细胞(MSCs)的来源?A.骨髓B.脂肪组织C.脐带血D.胎盘组织8.干细胞在体外培养过程中,为保持其增殖能力和分化潜能,通常需要哪种条件?A.高浓度血清培养B.缺氧环境C.严格控制的无菌条件及适宜的温度、pH值D.使用抑制细胞分化的化学物质9.胚胎干细胞向特定细胞类型分化的过程称为?A.定向分化B.去分化C.转分化D.自我更新10.干细胞研究面临的主要伦理问题包括哪些?(多选)A.胚胎来源的伦理争议B.个体基因信息的隐私保护C.干细胞治疗的安全性和有效性评估D.干细胞治疗后的长期随访和监管E.干细胞研究成果的商业化利用。
脐血干细胞的功能脐血干细胞即脐血中具有的能自和更新和分化能力的细胞,是脐血中的原始多能干细胞,具有分化成为人体各种细胞的潜能,有抗衰老的作用。
细胞是生命体结构和功能的基本单位,细胞更新换代和发育分化是生命发生发展的关键因素,因此,细胞是健康和衰老的重点。
衰老涉及细胞数量和功能的变化,从细胞角度来研究抗衰老的措施是最佳途径。
干细胞是各种组织细胞更新换代的种子细胞,从干细胞的角度进行抗衰老治疗和保健是最有效的办法。
干细胞抗衰老就是让单个核细胞(MNC)进入全身各组织,系统性提高全身细胞更新换代的能力和活性,全面改善组织器官功能,明显改善老年人的生活质量,从根本上延缓衰老,延长生命。
一、人体衰老的机制生命都经历过发育、成熟,逐渐走向衰老,这是由于体内干细胞不断增殖和分化,必然导致干细胞族群的老化和减少。
老化的干细胞虽然保留了增殖和分化的能力,但这时所分化出的细胞种类逐渐减少、形态结构和生理功能上都不如早期阶段所分化出的细胞。
于是在细胞衰老需要更新时,新生的细胞补充不足,衰老细胞不能及时被替代,体内细胞的稳态更新则受到破坏。
由于细胞动态失衡,体内衰老的细胞越积越多,细胞总体发生老化,各个组织器官得不到及时的修复,生理功能就会逐渐衰退,最终反映出人体的衰老。
干细胞老化导致人体衰老这一自然现象,靠我们自身是无法改变的。
二、移植脐血干细胞,抑制衰老,延长生命既然人体衰老的根本原因是干细胞数量减少和分化能力降低,那么只有通过体外移植干细胞,从而增加体内干细胞的数量、恢复干细胞的早期质量,才能从根本上抑制衰老,有效延长生命时间。
移植的脐血单个核细胞(MNC)进入人体后,将根据机体需求,增殖、分化出大量的年轻细胞,替换体内衰老的细胞,使机体重新获得细胞的动态平衡,各个组织和器官得以及时的修复,全身各系统的生理功能迅速提高。
年轻的细胞增多,衰老的细胞减少,那么人体也必然回归到年轻状态。
从分化功能上讲,移植越早期的单个核细胞(MNC),细胞分化能力就越强,更新速度就越快,因而从根本上改变人体内细胞的总体衰老。
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Stem Cell Knowledge Quiz Series「1 」什么是干细胞?干细胞存在于人体哪些地方?What are stem cells干细胞是具有自我复制、多向分化和归巢潜能的原始细胞,是机体的起源细胞,是形成人体各种组织、器官的始祖细胞。
如同一棵树干,可以长出树杈、树叶、开花和结果一样。
现如今科学家已经成功从许多器官或组织中分离出了干细胞,其中包括视网膜干细胞、胰腺干细胞、成骨干细胞等。
研究表明,干细胞不仅存在于胚胎,而且存在于成人体内,可以从脐血、脐带、胎盘、骨髓、脂肪、血液等组织中分离出相应的干细胞。
「2 」干细胞从何而来?Stem cells come from在细胞分化的过程中,由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配,使得一个子细胞不可逆地走向分化的终端成为功能专一的分化细胞,直至完全失去了再分裂的能力,最终衰老死亡。
机体为了弥补这一不足,保留了一部分未分化的原始细胞,使这保持了亲代的特性。
这部分被保留下来的未分化的原始细胞,称为干细胞,一旦生理需要,这些干细胞可按照发育途径通过分裂而产生分化的细胞。
「3 」干细胞的特性和分类?Characteristics and classification■干细胞的特性(1)无限增殖分裂;(2)干细胞可连续分裂几代,也可以长时间的处于静息状态;(3)受体内信号调控;(4)干细胞分裂产生的两种途径:分化具有分化能力的细胞,仍保持亲代特征,作为干细胞待命;不可逆地向终末分化,失去分化能力,最终衰老死亡。
■干细胞的分类根据干细胞所处的发育阶段可分为:(1)胚胎干细胞(2)成体干细胞根据干细胞的发育潜能分为:(1)全能干细胞(2)亚全能干细胞(3)多能干细胞(4)单能干细胞按干细胞分化形成的组织类型可分为:(1)造血干细胞(2)间充质干细胞(3)神经干细胞(4)肌肉干细胞(5)脂肪干细胞「4 」干细胞的任务是什么?The task of stem cells干细胞的任务,就是透过它可以无限量复制的特性,大量的产生工作细胞,使人体器官能够正常工作。
脐带间充质干细胞制备原理一、概述脐带间充质干细胞(Wharton's jelly mesenchymal stem cells,WJ-MSCs)是一种来源于新生儿脐带的干细胞。
与其他来源的干细胞相比,WJ-MSCs具有易于获取、无伦理争议、低免疫原性和多向分化潜能等优点,因此在临床应用中具有广泛的前景。
本文将就WJ-MSCs制备原理进行详细介绍。
二、脐带间充质干细胞的来源脐带是连接胎盘和新生儿的管道,其中包含了丰富的干细胞资源。
在脐带中,除了血液造血干细胞外,还存在着一种特殊类型的干细胞——脐带间充质干细胞。
这种干细胞主要存在于脐带Wharton's jelly (WJ)中,与周围组织隔离。
三、WJ-MSCs制备方法1. 脐带获取制备WJ-MSCs首先需要获取新生儿脐带组织。
通常情况下,在新生儿出生后不久即可进行采集。
采集过程中需要注意消毒和无菌操作。
2. 分离WJ组织将采集到的脐带组织进行分离,去除血管和外层膜等部分,得到WJ组织。
WJ组织是一种透明的胶状物质,通常呈现出白色或浅黄色。
3. 制备单细胞悬液将WJ组织切成小块,并加入胶原酶等消化酶进行消化。
消化后,用PBS等缓冲液洗涤多次,最后制备成单细胞悬液。
4. 培养和扩增将制备好的单细胞悬液接种在干细胞培养基中,并放置于37℃、5% CO2的培养箱内进行培养和扩增。
在培养过程中需要定期更换培养基,并对干细胞进行观察和评估。
5. 鉴定和纯化经过一段时间的培养,可以通过流式细胞术等方法对干细胞进行鉴定和纯化。
通常情况下,WJ-MSCs表达CD73、CD90、CD105等特征性标志物,并且不表达CD34、CD45等血液细胞特征性标志物。
6. 冻存经过纯化和鉴定后,WJ-MSCs可以进行冻存。
在冻存过程中需要使用特殊的冻存液,并在低温下保存。
四、WJ-MSCs的应用前景WJ-MSCs具有广泛的应用前景。
目前已经有多项临床试验显示,WJ-MSCs可以用于治疗多种疾病,如心血管疾病、神经系统疾病、肝脏疾病等。
脐带间充质干细胞概述医学实验班70080103王雪彤脐带是胎儿时期连接母体与胎儿的索状结构,其外被羊膜,内含2条脐动华尔通氏脉、1条脐静脉,在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织胶(WhartonpsJelly),从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(HUMSCs)。
1人脐带间充质干细胞(HUMSCs)的形貌分析:倒置显微镜下观察人脐带间充质干细胞贴壁生长,为形态相对均一的梭形细胞,呈平行排列生长或旋涡状生长,低密度时较扁平,密度增加趋于融合时细胞变细长。
扫描电镜下观察呈长条状纤维样,细胞膜表面不光滑,有小结节状物,细胞无明显突起,细胞间无网络状连接。
透射电镜观察核大,不规则,核仁明显,常染色质多,异染色质少,胞浆少。
胞质内细胞器较少,以粗面内质网和线粒体为主,内有大量游离核糖体,部分细胞可见内质网月中胀。
植块法培养获得的人脐带间充质干细胞(X200)例如三代细胞的形态学特征一一人体脐带间充质干细胞离体培养后,培养至第三代。
第三代人脐带间充质干细胞以均一长梭形的细胞为主,细胞周边有较多的丝状伪足,见图1,2;并形成毗邻细胞之间的网状连接,见图3;细胞核较大,核膜清晰,含两三个核仁,核质比较小,见图4。
2人脐带间充质干细胞(HUMSCs)的生物学特性:HUMSCs既非胚胎干细胞又非成体干细胞,是别于两者之间的一类新的多能问充质细胞,它们之间既有联系又有差异。
根据国际细胞疗法间充质与组织干细胞委员会(theMesenchymalandTissueStemCellCommitteeoftheInternation2alSocietyforCellul arTherapy)制定的最低标准,脐带间充质干细胞(MSCs)需满足以下条件:1)MSCs在标准培养条件下呈贴壁生长;2)MSCs表达CD105,CD73和CD90,不表达CD45,CD34,CD14或CD11b,CD79a或CD19和HLA2DR;3)MSCs在体外至少能向成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞分化。
干细胞入岗培训资料一、干细胞知识问答二、河南省干细胞库介绍及优势三、常见问题解答一、干细胞知识1.干细胞的概念干细胞是在生物个体的生长和发育中起“主干”作用的原始细胞,具有自我复制和多向分化潜能的细胞,它是一种未充分分化,尚不成熟的细胞,具有再生人体各种组织器官的潜能,医学界称之为“万用细胞”。
干细胞研究成为继人类基因组大规模测序之后最具活力、最有影响和最有应用前景的生命学科研究领域!1999年干细胞研究被美国《科学》杂志评为1999年度世界十大科学之冠,2000年干细胞研究再次被《科学》杂志评为该年度世界十大科学成就之一。
2、干细胞的类型:胚胎干细胞embryonic stem cells胚胎干细胞主要是指来自囊胚内细胞团的细胞,有自我更新和多向分化潜能,可以分化为内、中、外三个胚层的各类细胞。
成体干细胞adult stem cells成体干细胞是处于干细胞状态的成体细胞,包括成年和未成年动物组织中的各种干细胞,因此又称为组织干细胞。
如神经干细胞、造血干细胞、骨髓间质干细胞、上皮干细胞、肝干细胞、胰腺干细胞等。
成体干细胞功能:自然条件下成体干细胞倾向于分化成所在组织的细胞,参与组织更新和损伤修复;外界条件诱导下成体干细胞可横向分化成其他组织的细胞,参与这些组织的损伤修复。
3.什么是干细胞治疗?干细胞治疗是一种使用健康的干细胞来代替或修复病人受损细胞和组织的治疗方式,干细胞治疗法就像给机体注入新的活力,是从根本上治疗许多疾病的有效方法。
4.什么是间充质干细胞(MSC)?间充质干细胞是干细胞的一种,因能在体内外特定环境下,分化成为骨、软骨、肌肉、脂肪等间叶组织而得名。
间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSC)是干细胞的一种,因能分化为间质组织而得名,具有亚全能分化潜能,在特定的体内外环境下,能够诱导分化成为多种组织细胞。
间充质干细胞具有干细胞的共性,即具有自我更新和多向分化潜能的生物学特性;此外,间充质干细胞还具有体外扩增的特性。
脐带血间充质干细胞的分离培养和鉴定概述脐带血间充质干细胞(Wharton’s jelly mesenchymal stem cells, WJ-MSCs)是一类来源于脐带的干细胞。
WJ-MSCs具有较强的增殖能力、多向分化潜能、免疫调节功能等,是目前研究领域中备受关注的干细胞类型之一。
在该文档中,我们将介绍如何从脐带血样中分离出WJ-MSCs,并进行相关的细胞培养和鉴定。
分离过程脐带血样获取首先需要从人体获得脐带血样。
脐带血样一般可以在婴儿出生后通过脐带穿刺等方式获取。
获取脐带血样需要得到母亲的同意,并通过相关机构进行规范化处理。
分离WJ-MSCs脐带血样获取后,需要将其中的WJ-MSCs进行分离。
具体分离步骤如下: 1.将脐带血样转移至离心管中; 2. 加入相同体积的PBS,并轻轻混合; 3. 通过低速离心分离脐带血样中的血细胞等成分; 4. 取下沉后的WJ组织,加入胶原酶等酶类消化物进行消化,离心分离细胞; 5. 通过细胞培养等方式扩增细胞数量。
细胞培养在分离得到WJ-MSCs之后,需要进行相关的细胞培养。
具体培养步骤如下:1. 将分离得到的WJ-MSCs转移至新的培养皿中; 2. 加入含有10% FBS的DMEM低糖培养基; 3. 定期更换培养基,并记录生长状况。
鉴定方法确定分离的细胞为WJ-MSCs的方法很多,常用的方法如下: #### 形态学鉴定通过显微镜观察细胞形态、吸附能力等,判断细胞是否符合WJ-MSCs的特征。
免疫学鉴定通过使用针对WJ-MSCs标记的分子抗体(如CD73、CD90等)对细胞进行标记,并使用流式细胞仪等方法进行检测。
活力检测通过MTT法、细胞增殖实验等,检测WJ-MSCs是否具备较强的增殖能力。
多向分化鉴定通过对WJ-MSCs进行分化培养,如脂肪细胞培养、软骨细胞培养等,检测WJ-MSCs是否显示多向分化的潜能。
结论通过脐带血样的分离,可以获得WJ-MSCs,并通过相关的培养和鉴定方法,确定其为WJ-MSCs,并进一步应用于生物医学实验中,具有潜在的临床应用前景。
脐带间充质干细胞-是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞,具有来源丰富、免疫原性低、移植后不需应用免疫抑制剂的情况下长期存活等诸多特性脐带间充质干细胞-是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞,具有来源丰富、免疫原性低、移植后不需应用免疫抑制剂的情况下长期存活等诸多特性,为其应用于临床开阔了更好的前景。
学术术语来源---人脐带间充质干细胞生物特性比较:胰酶冷消化和组织块法体外培养文章亮点:1实验创新性地采用胰酶冷消化法培养人脐带间充质干细胞,从细胞形态、生长曲线、细胞表面标记物及诱导分化能力4个方面与传统组织块法比较,为不同需求的科研工作者获得较多的脐带间充质干细胞、更完整的细胞结构及其功能以满足实验要求提供一些资料。
2结果显示组织块法培养原代细胞形态优于胰酶冷消化法,第3代细胞增殖速率显著快于胰酶冷消化法,两种方法获得的脐带间充质干细胞具有相同的表面标志,经诱导后均表达神经干细胞特征性标志物nestin,说明组织块法更适合用于培养脐带间充质干细胞。
关键词:干细胞;脐带脐血干细胞;胰酶冷消化法;组织块法;脐带间充质干细胞;组织工程;生物学特性主题词:脐带;间质干细胞;细胞培养技术;细胞,培养的摘要背景:以往采用胰酶冷消化法培养脐带间充质干细胞的研究较少。
目的:比较两种方法体外培养人脐带间充质干细胞的生物学特性。
方法:采用胰酶冷消化法和组织块法从人脐带中分离、纯化和传代培养人脐带间充质干细胞,记录首次出现贴壁细胞时间及原代培养周期,倒置相差显微镜观察脐带间充质干细胞的形态及生长情况,制作第3代脐带间充质干细胞生长曲线,流式细胞仪分析检测第3代脐带间充质干细胞表面标志的表达,第3代脐带间充质干细胞加入成神经诱导培养基诱导分化第3天行荧光免疫化学染色检测Nestin的表达。
结果与结论:使用上述两种方法均可获得脐带间充质干细胞,胰酶冷消化法首次出现贴壁细胞时间早于组织块法(P < 0.05);原代培养周期差异无显著性意义(P > 0.05)。
问答手册干细胞技术 (1)干细胞治疗特点 (3)糖尿病 (10)抗衰老 (14)肝硬化 (17)骨科 (21)股骨头坏死 (22)骨质疏松 .............................................................................. 错误!未定义书签。
骨质增生 .............................................................................. 错误!未定义书签。
心血管疾病 ................................................................................. 错误!未定义书签。
心肌病 .................................................................................. 错误!未定义书签。
心肌梗塞 .............................................................................. 错误!未定义书签。
冠心病 .................................................................................. 错误!未定义书签。
自身免疫性疾病 ......................................................................... 错误!未定义书签。
红斑狼疮 .............................................................................. 错误!未定义书签。
1、什么是脐带血?脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液,通常是废弃不用的。
近十几年的研究发现,脐带血中含有可以重建人体造血和免疫系统的造血干/祖细胞,可用于造血干细胞移植,治疗多种疾病。
因此,脐带血已成为造血干细胞的重要来源,特别是无血缘关系造血干细胞的来源,也是一种非常重要的人类生物资源。
2、脐带血有哪些用途?脐带血中的造血干细胞可以用来治疗多种血液系统疾病和免疫系统疾病,包括血液系统恶性肿瘤(如急性白血病、慢性白血病、多发性骨髓瘤、淋巴瘤等)、骨髓增殖异常综合征、血红蛋白病(如海洋性贫血)、骨髓造血功能衰竭(如再生障碍性贫血)、先天性代谢性疾病、先天性免疫缺陷疾患、自身免疫性疾患、某些实体肿瘤(如小细胞肺癌、神经母细胞瘤、卵巢癌等)。
3、脐带血有这么好的用途,能把它保存起来吗?能。
脐带血现在可以保存在脐带血造血干细胞库里。
在脐带血库里脐带血经过检测、分离、制备等多道医学工序,冷冻在-196℃的深低温液氮中,并能长期保存。
4、什么是脐带血库(生命银行)?脐带血库全称叫“脐带血造血干细胞库”。
是专门提取和保存脐带血造血干细胞并为患者提供查询的特殊医疗机构,国际上也称之为脐血银行(CORD BLOOD BANK),或生命银行(LIFE BANK)。
它包括公共库和自体库。
5、为什么要建立脐带血库?脐带血中含有丰富的造血干细胞,这些干细胞可以代替骨髓干细胞进行移植,治疗很多不治之症。
而且疗效好,副作用小,医疗费用低。
但是由于干细胞移植需要配型,非亲属之间的配型完全相同的的概率极低,寻找供体非常困难,所以需要有大基数库存才有意义,且婴儿出生时的脐带血须立即处理并保存,否则即成废物。
因此建立脐带血库就可以把脐带血造血干细胞这一人类重要的生物资源储存起来,达到取之于大众,为大众服务的目的,同时也可以满足个人自体储存的特别需要,以备日后不时之需。
6、为什么要为孩子储存脐带血?脐带血造血干细胞是孩子一生只有一次机会保留的重要个人生物资源,储存了孩子的脐带血就等于为孩子作了一份生命备份,脐带血目前不仅已能有效地治疗几十种难治性疾病和多种不治之症,而且它所能治疗的疾病种类还在不断地增加。
人脐带间充质干细胞国际细胞治疗协会定义的标准人脐带间充质干细胞国际细胞治疗协会定义的标准1. 引言人脐带间充质干细胞(Wharton's jelly-derived mesenchymal stem cells,WJ-MSCs)是一种被广泛研究和应用的干细胞资源。
作为这个领域的重要组成部分,人脐带间充质干细胞国际细胞治疗协会(International Society for Cell & Gene Therapy)制定了一系列标准来定义人脐带间充质干细胞,这些标准不仅对于科学研究具有重要意义,同时也对于临床应用和治疗效果的评估至关重要。
2. WHO 推行的初衷和原则人脐带间充质干细胞国际细胞治疗协会的标准旨在确保干细胞的质量和安全性,以便更好地应用于细胞治疗领域。
这些标准不仅限定了干细胞的来源和特性,还包括细胞处理和存储的要求等。
通过制定这些标准,国际细胞治疗协会为临床研究和细胞治疗的发展提供了指导。
3. 人脐带间充质干细胞定义的关键指标根据国际细胞治疗协会的定义,人脐带间充质干细胞可以通过以下几个关键指标来判断:a. 来源:主要来源于脐带的Wharton's jelly组织,这是一种丰富而易获得的干细胞来源。
b. 表面标记:表达特定的免疫表面标记,如CD73、CD90、CD105等,并且不表达CD34、CD45等造血干细胞标记。
c. 多向分化潜能:具有分化为多种细胞类型的潜能,如骨、脂肪、软骨等。
d. 免疫抑制能力:具有调节免疫功能,可以抑制免疫反应和自身免疫性疾病等。
e. 活力和增殖能力:繁殖能力强,能够长时间维持干细胞特性。
4. 临床应用和治疗效果评估根据人脐带间充质干细胞的定义标准,科研人员和临床医生可以更好地评估细胞治疗的效果和潜在风险。
这些标准也为细胞治疗产品的质量控制和监管提供了依据,确保细胞治疗的安全性和可行性。
5. 对于干细胞研究和应用的启示人脐带间充质干细胞国际细胞治疗协会定义的标准,不仅适用于人脐带间充质干细胞,也为其他干细胞类型的研究和应用提供了借鉴。
脐带间充质干细胞制备存储标准脐带间充质干细胞(Wharton's Jelly Mesenchymal Stem Cells,WJ-MSCs)是一种来源于脐带的多潜能干细胞,具有广泛的临床应用前景。
为了确保脐带间充质干细胞的制备和存储质量,制定脐带间充质干细胞制备存储标准非常重要。
脐带间充质干细胞的制备和存储标准应包括以下几个方面:1.取材标准:脐带是脐带间充质干细胞的主要来源,因此在制备和存储过程中需要确保脐带的质量。
取材时,应确保脐带来自经过筛选和检测的健康母亲,脐带的无菌处理应符合相关规定。
2.分离和培养标准:脐带间充质干细胞的分离和培养是制备过程中的关键步骤。
应采用符合相关规定的分离和培养方法,确保脐带间充质干细胞能够获得最佳生长和增殖环境。
3.鉴定标准:在制备过程中,需要对脐带间充质干细胞进行鉴定。
鉴定标准可以包括表面标记物的检测、多向分化潜能的检测等指标,以确保制备的细胞具有干细胞的特性。
4.冻存标准:为了确保脐带间充质干细胞的长期保存,应采用合适的冻存方法和条件。
冻存标准可以包括冷冻液的选择、冷冻速率的控制、冷冻样品的保存温度等指标。
5.质量控制标准:脐带间充质干细胞的制备和存储过程中应进行严格的质量控制。
质量控制标准可以包括细胞数目的检测、细胞活力的检测、无菌检测等项目,以确保制备的细胞符合质量要求。
在制定脐带间充质干细胞制备存储标准时,需要参考国内外相关的法规和标准。
同时,制定标准时需要考虑到国内的实际情况和相关研究的最新进展。
制定标准应充分结合实际情况和科学研究,确保标准的可行性和科学性。
脐带间充质干细胞的制备和存储标准对于保证脐带间充质干细胞的质量和应用的安全性具有重要意义。
符合标准的脐带间充质干细胞可以应用于临床医学领域,对于治疗一些疾病和促进组织再生具有重要的作用。
因此,制定脐带间充质干细胞制备存储标准是当务之急,对于推动相关领域的研究和应用具有重要的意义。
小鼠脐间带充质干细胞培养方法引言充质干细胞(me se nc h ym al st em ce ll s,M SC s)是一类具有多向分化潜能的多能干细胞,具有广泛的应用前景。
在生物医学领域,小鼠脐间带充质干细胞是一种重要的来源之一。
本文将介绍小鼠脐间带充质干细胞的培养方法,帮助研究人员更好地利用这一珍贵的细胞资源。
原料与试剂准备1.小鼠脐带组织2.DM EM/F12培养基3.胎牛血清(F BS)4.细胞培养袋5.1×PB S缓冲液步骤1.小鼠脐带的处理(1)准备一个无菌操作台,并在工作区上喷洒酒精消毒剂,手套等工具也需要经过灭菌处理。
(2)取出小鼠脐带组织,置于无菌的1×P BS缓冲液中,用剪刀剪碎细胞片段。
(3)将小鼠脐带组织片段转移到细胞培养袋中。
(4)加入适量的DME M/F12培养基,保证组织片段被完全浸润。
(5)将细胞培养袋密封,并置于37°C恒温培养箱中,进行消化和悬浮培养,时间约为4-6小时。
2.细胞的收获和培养(1)将消化后的细胞悬液通过100μm的细胞滤网过滤,去除大颗粒残渣。
(2)将滤液离心,去除上清液,沉淀的细胞用DM EM/F12培养基洗涤。
(3)将洗涤后的细胞沉淀用适量的D MEM/F12培养基重新悬浮。
(4)将细胞悬液转移到细胞培养瓶中,每瓶加入适量的培养基和10%的F BS。
(5)将细胞培养瓶放置于37°C恒温培养箱中,进行培养。
(6)每2-3天更换一次培养基,保持细胞的健康生长。
3.细胞的传代与冻存(1)当细胞达到80-90%的密度时,将培养瓶内的细胞用1×P BS缓冲液洗涤。
(2)用胰酶对细胞进行消化,停止细胞的生长。
(3)加入适量的DME M/F12培养基,将细胞悬液转移到新的细胞培养瓶中。
(4)将细胞培养瓶放置于恒温培养箱中继续培养。
4.脐带间充质干细胞的鉴定(1)使用流式细胞仪对培养的小鼠脐带间充质干细胞进行免疫鉴定。
丰泽汇干细胞项目知识—百问百答一、干细胞综合知识问答1.干细胞抗衰老疗法安全吗?答:就这个问题需要从干细胞的属性、取材、制备、临床四个方面来回答您:1.干细胞属性:干细胞是一种未分化未成熟的细胞,其细胞表面的抗原表达很微弱,人体自身的免疫系统对这种未分化细胞的识别能力很低,无法判断它们的属性,从而避免了细胞输注时引起的免疫排斥反应及过敏反应等,使干细胞的输注会非常的安全。
2.干细胞取材:丰泽汇使用的干细胞均来自经过严格检测的新生婴儿的脐带和脐带血,而在脐带和脐带血采集之前,已进行了对母体血液样本的各项检测,保证了细胞的绝对安全。
3.干细胞制备过程:细胞制备是在完全符合GMP(国家药品质量管理规范)标准的实验室中严格进行,使用的是流式细胞仪、倒置荧光显微镜等具备国际领先水平的高端仪器设备,同时使用的细胞均经过无菌、支原体、内毒素、细胞活率、形态、数量、纯度与均一致、流式检测等。
4.干细胞的临床应用:在临床应用前,干细胞就已完成了全套安全性实验,包括急性毒性试验,长期毒性试验,致瘤性试验,致畸性试验,局部刺激性试验,发热试验和免疫毒性试验,结果表明,干细胞临床应用是安全,无毒的,13000多例5万多次干细胞治疗临床应用表明,干细胞治疗无任何不良伴随反应发生,表明其临床应用的安全的(所以如此严格的制作流程下,干细胞抗衰老疗法是绝对安全的)2.干细胞输注后的维持时间是多久?答:干细胞输注会因受体体质、年龄、健康状态、输注疗程及输注次数的区别,出现不同的作用结果,输注干细胞后在干细胞的作用下人体会分泌大量的活性因子直接作用于人体的某些组织或器官进行彻底的修复,输注后一般整体状况可年轻5-15年。
3.你们的价格为什么比别的机构要高呢?与其他同行业干细胞相比,你们的优势在哪?答:回答您的这个问题我想从细胞的出处、细胞的数量、细胞的临床应用成功案例来回答你,1、丰泽汇的干细胞项目是源于深圳北科生物强大的技术支持,(北科生物是目前世界上最大最有实力的干细胞研发企业,公司汇集了干细胞领域成果卓越的数十位国际知名专家及国内干细胞学科带头人在内的400多人的专业技术研发团队。
脐带间充质干细胞26问1. 什么是干细胞?干细胞是指那些具有自我复制和多向分化能力的细胞,它们可以不断地自我更新,并在特定条件下转变分化成为一种或多种构成人体组织或器官的细胞。
2. 什么是成体干细胞?成体干细胞是指存在于成体不同组织中的干细胞,当机体需要时可以被激活分化成具有特定功能的细胞,如造血干细胞可分化形成各种血细胞等。
3. 什么是胚胎干细胞?胚胎干细胞是指来源于早期胚胎的干细胞,它们可以产生构成机体所有组织器官的细胞。
4. 干细胞如何分类?有几种分类方法。
根据发育阶段不同,分为胚胎干细胞、胎体和成体干细胞。
根据来源不同,可分为骨髓、骨膜、脂肪、滑膜、骨骼肌、肝、乳牙、脐带、脐带血干细胞等,根据功能不同,可分为造血、神经、心肌、血管、皮肤干细胞等。
5. 什么是多向分化?在特定的生理或体外诱导条件下,可以分化成具有不同功能的成熟细胞,如心肌细胞,神经细胞,血细胞等。
6. 什么是自我复制?通过细胞分裂的方式复制自身,完成数量上的飞跃。
7. 间充质干细胞只存在于脐带吗?不是,间充质干细胞广泛分布于胎儿、成体骨髓、骨膜、松质骨、脂肪、滑膜、骨骼肌、胎肝、乳牙、脐带、脐带血中。
8. 什么是间充质干细胞(MSC)?间充质干细胞是干细胞的一种,因能在体外特定环境下,分化成为骨、软骨、肌肉、脂肪等间叶组织而得名。
间充质干细胞(Mesenchymal Stem Cell,MSC)是干细胞的一种,因能分化为间质组织而得名,具有亚全能分化潜能,在特定的体外环境下,能够诱导分化成为多种组织细胞。
间充质干细胞具有干细胞的共性,即具有自我更新和多向分化潜能的生物学特性;此外,间充质干细胞还具有体外扩增的特性。
9. 什么是脐带间充质干细胞?我们所说的脐带间充质干细胞是指存在于新生儿脐带中的间充质干细胞。
11. 我们为什么选择用脐带制造间充质干细胞?首先,脐带通常在婴儿出生后就被作为废物丢弃了,我们用脐带制造干细胞,是变废为宝,不存在从胚胎提取干细胞所带来的伦理学问题;其次,脐带的采集简便易行,不会引起母亲和新生儿任何不适的感觉或产生任何不良的影响,避免了从骨髓和脂肪等组织提取干细胞的繁杂操作以及给供者带来的不适感觉;再次,与其它来源的间充质干细胞相比,脐带的间充质干细胞含量相对丰富,体外增殖潜能高,并且具有较低的免疫原性,临床应用不存在组织配型的问题;最后,脐带间充质干细胞是从新生儿的脐带中分离而得的,在很大程度上可以避免受到细菌、病毒等病原微生物的污染以及后天疾病的影响。
12. 间充质干细胞只存在于脐带吗?不是,间充质干细胞广泛分布于胎儿、成体骨髓、骨膜、松质骨、脂肪、滑膜、骨骼肌、胎肝、乳牙、脐带、脐带血中。
13.脐带间充质干细胞和脐带血造血干细胞的区别?脐带间充质干细胞脐带间充质干细胞主要来源于脐带组织;脐带间充质干细胞属于多能干细胞,扩增后的子代干细胞数量过亿;脐带间充质干细胞增殖能力强,可供多次使用;脐带间充质干细胞用途广泛,可用于组织器官损伤与及神经系统、免疫系统、分泌系统等系统疾病的治疗;脐带间充质干细胞治疗适用于各年龄段人群;家庭成员使用脐带间充质干细胞无需配型,全家均可受益。
脐带血造血干细胞脐带血造血干细胞来源于脐带血液;脐带血造血干细胞属于专能干细胞,目前尚未发现可在体外扩增;脐带血造血干细胞只供一次使用;脐带血造血干细胞主要用于治疗血液系统疾病,如白血病、再生障碍性贫血、地中海贫血等;单份符合入库储存标准的脐带血造血干细胞理论上可治疗30公斤左右的病人(相当于10周岁儿童的体重);家庭成员使用脐带血造血干细胞需配型,配型成功后可使用。
14.间充质干细胞在细胞替代治疗中的前景以组织工程学为手段可望解决的问题几乎涉及人类面临的大多数医学难属,如烧伤、放射损伤等患者的植皮;肌肉、骨及软骨缺损的修补;髋、膝等关节的替换;血管疾病或损伤后的血管替代;糖尿病患者的胰岛植入;心脏病患者的瓣膜替代、房室间隔缺损的修补;癌症患者手术切除后组织或器官的替代;放射损伤及大剂量放疗、化疗后的造血与免疫重建;肝、肾等重要脏器因损伤或功能衰竭的置换;部分遗传缺陷性疾病的治疗等。
在不久的将来,某些组织工程产品,如人造皮肤、血管、骨、软骨、肌肉、瓣膜、神经甚至胰岛、肾、肝等组织器官或细胞将相继问世,然后植入患者体,用以恢复损伤、替代退行性组织器官以及改变遗传缺陷性组织器官的功能。
人类也将进入实际应用现代组织工程产品的新时代。
目前,在组织干细胞定向分化领域取得了明显的进展。
在体外可以定向诱导一些多能干细胞分化为骨、软骨、肌肉、脂肪、肌腱、神经等多种组织细胞,这些成果很令人鼓舞。
造血干细胞的移植已得到广泛开展,通过输注造血干细胞来对恶性血液病患者进行造血重建已取得成功,这为组织干细胞的研究提供了成功的例。
MSC因其具有高度的自我更新能力和多向分化潜能,以及取材方便、体植入后不良反应较弱等优点而备受关注,将成为细胞替代治疗的理想种子细胞。
MSC与生物材料相结合,能够修复骨、软骨、肌腱等各种组织的缺损,这是组织工程中的新领域。
MSC在治疗组织09官退行性疾病方面也展示了前景。
随着年龄的增长,机体的组织器官会出现退行性的改变,从而引发一些相关疾病,如肌肉萎缩、肌营养不良、脑萎缩、帕金森病、阿尔茨海默综合征等。
而这些组织的再生比较固难,MSC在体外能够分化为肌肉细胞和神经细胞,为治疗这些退行性疾病带来了希望。
遗传缺陷性疾病发病率也很高,而且治疗难度极大。
利用体外分离的MSC或其诱导分化后的细胞来改善遗传缺陷组织的功能,这一治疗途径正在被尝试。
15. 间充质干细胞在基因治疗中的前景一些干细胞不仅具有多向分化潜能,而且易于外源基因的转染和表达。
将体外经过基因修饰的干细胞用于治疗,可以避免转染载体进入受体产生的不良影响。
基因修饰的干细胞可以在多个靶位发挥作用。
(1)干细胞潜能的改变——干细胞靶位基因转染以后可以改变干细胞的某些特性。
从成人或成年动物分离的干细胞有时会表现出年龄相关性、遗传性或获得性疾病相关性再生能力损伤,基因转录或酶切修饰可以有效地维持、加强或抑制干细胞的分化和增殖能力。
(2)器官系统性能的改善——干细胞子代靶位转入干细胞的基因可以随着干细胞的分化传代而遗传给子代细胞,在基因转导的干细胞重建的器官系统中持续表达,改善重建器官系统的功能。
(3)加速损伤组织的再生——再生过程靶位损伤组织的修复是通过于细胞的扩增和分化来完成的。
如皮祖细胞完成血管的重建,神经干细胞完成神经的再生,造血干细胞和间充质干细胞完成骨髓的重建等。
由于损伤严重、疾病和年龄因素的影响,自然的修复过程往往比较缓慢。
经过基因修饰使于细胞增加丝裂源特性或产生抑制负调控的因子,可加速组织再生过程。
(4)产生外源基因表达的组织——系统靶位基因修饰的干细胞植入体,产生有修饰基因持续表达的替代组织或器官,进而提供一定数量的用于治疗的靶分子。
16.储存脐带间充质干细胞的意义:1. 抓住一生中仅有的一次机会,给予孩子和家人全方位的健康保障.2. 脐带来源的间充质干细胞丰富,变废为宝.3. 脐带间充质干细胞临床适用疾病围广,其中包括多种传统方法无法解决的难治性疾病.4. 亲缘关系越亲的干细胞临床使用的效果越显著.5. 低投入,高保障,为将来急需使用节省大笔费用.17.分娩后的脐带真的就没有用途了吗?以往,新生儿出生后的脐带一直被人们视作废弃物。
近些年,随着科技的进步和医学知识的普及,已有不少人知道从脐带血中提取脐带血造血干细胞可用于血液系统疾病的治疗,而提取血液后的脐带同样被当作医疗废弃物处理掉。
其实,脐带组织中蕴含丰富的干细胞资源,其中间充质干细胞最为丰富,间充质干细胞是一种具有奇特功能的干细胞,被认为最具临床应用价值,除了支持造血功能之外,还可用于心血管疾病、肝硬化、骨和肌肉衰退性疾病、脑及脊髓神经损伤、老年痴呆及红斑狼疮和硬皮病及自身免疫性疾病等的治疗,并在美容、保健、抗衰老等方面显示了巨大的应用潜力。
从脐带组织中提取的间充质细胞均一性好、活性强、免疫原性低,扩增数量巨大,可供多次使用,是理想的间充质干细胞来源。
孩子出生时是唯一一次获取高质量、高纯度的间充质干细胞的机会,储存脐带间充质干细胞,给孩子和家人一份健康保障!18.干细胞的特征在细胞分化的过程中,细胞往往由于高度分化而完全失去了再分裂的能力,最终衰老死亡。
机体在发展适应过程中为了弥补这一不足.保留了一部分未分化的原始细胞,称之为干细胞。
一旦生理需要,这些干细胞可按照发育途径通过分裂而产生分化细胞。
干细胞有以下特点:①干细胞本身不是终末分化细胞(即干细胞不是处于分化途径的终端);②干细胞能无限增殖分裂;③干细胞可连续分裂几代,也可在较长时间处于静止状态;④干细胞分裂产生的于细胞只能在两种途径中迭择其一——或保持亲代特征,仍作为干细胞;或不可逆地向终末分化。
由于细胞质中的调节分化蛋白不均匀地分配,使得一个子细胞不可逆地走向分化的终端成为功能专一的分化细胞;另一个保持亲代的特征,仍作为干细胞保留下来。
分化细胞的数目受分化前干细胞的数目和分裂次数的控制,可以说,干细胞是具多向潜能和自我更新特点的增殖速度较缓慢的细胞。
19.为什么要储存脐带间充质干细胞?目前已发现脐带间充质干细胞可以治疗包括人体神经系统、免疫系统、消化系统、运动系统等系统的80多种疾病,脐带间充质干细胞在人体抗衰老方面的研究也已取得重大突破并已进行应用尝试,有专家预测,干细胞抗衰老技术的广泛应用,将使人类的寿命在2050年普遍达到120岁以上。
脐带间充质干细胞作为重要的再生医学资源在疾病治疗和人体抗衰老的应用领域有非常重要的使用价值,但由于脐带间充质干细胞仅存在于脐带中,如果脐带被当作医疗废弃物丢掉,则脐带间充质干细胞这一异常珍贵的再生医学资源也将随之浪费且无法补救。
因此,非常有必要将这一宝贵的再生医学资源及时保存起来以便将来使用。
20.脐带血干细胞的优点1. 零岁:干细胞处於最活跃状态。
2. 纯淨:较少受到放射线、病毒、药物污染。
3. 再生及分化力强:干细胞可塑性、分化能力强。
4. 来源容易:从胎盘及脐带抽取,不伤及婴儿及母体。
5. 低排斥性:异体移植时,抗宿主疾病较轻。
6. 组织相容性高: 人体白细胞抗原HLA兼容性高(6对只需4对脗合便可,骨髓必须6对全部脗合)7. 实时性:干细胞解冻后实时使用,不须浪费时间找寻。
8. 采集费用低:脐带血为自身所有,不须花费庞大金额找寻及购买。
21.储存脐带与储存脐带血的区别?通常所说的储存脐带实际上是指储存脐带中的脐带间充质干细胞,而储存脐带血实际上是指储存脐带血中的脐带血造血干细胞。
脐带间充质干细胞与脐带血造血干细胞的区别如表所示。
区别脐带间充质干细胞脐带造血干细胞来源脐带组织脐带血液干细胞数10亿个百万个使用次数可供多次使用只供一次使用制造工艺复杂、需要培养和扩增采集和分离适用围广泛,可用于组织器官损伤与及神经系统、免疫系统、分泌系统等系统疾病主要用于治疗血液系统疾病,如白血病、再生障碍性贫血、地中海贫血等;适用人群适用于各年龄段人群;单份符合入库储存标准的脐带血造血干细胞理论上可治疗30公斤左右的病人(相当于10周岁儿童的体重);配型家庭成员使用无需配型,全家均可受益家庭成员使用需配型,配型成功后可使用22.脐带间充质干细胞可治疗哪些疾病?带间充质干细胞目前可以治疗神经系统、分泌系统、免疫系统、消化系统、运动系统、泌尿系统的80多种疾病,与造血干细胞混合使用还可以支持人体造血功能。