常用荧光染料探针列表
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荧光检测方法荧光检测是一种常用的分析方法,通过检测样品发出的荧光信号来获取样品的信息。
荧光检测方法广泛应用于生物医学、环境监测、食品安全等领域。
本文将介绍荧光检测的原理、常用的荧光探针和荧光检测技术。
一、荧光检测原理。
荧光检测原理是基于样品在受激光照射后发出荧光信号的特性。
当样品受到特定波长的激发光照射后,样品中的荧光探针会吸收光能并发生激发态跃迁,随后再释放出荧光光子。
荧光光子的强度和波长可以提供样品的信息,如浓度、纯度、活性等。
荧光检测原理简单、灵敏度高,因此被广泛应用于科学研究和工业生产中。
二、常用的荧光探针。
1. 荧光染料。
荧光染料是最常用的荧光探针之一,它可以与样品中的特定分子结合并发出荧光信号。
荧光染料具有多种颜色和波长的荧光光子,适用于不同样品的检测需求。
常见的荧光染料有荧光素、罗丹明、FITC等。
2. 荧光蛋白。
荧光蛋白是一类来源于生物体的荧光探针,它可以在特定条件下发出荧光信号。
荧光蛋白具有天然的荧光特性,被广泛用于细胞标记、蛋白质定位、蛋白质相互作用等研究领域。
3. 量子点。
量子点是一种新型的荧光探针,具有窄的荧光发射峰和宽的激发光谱,可以同时发出多种颜色的荧光信号。
量子点具有优异的光学性能和化学稳定性,适用于多种样品的荧光检测。
三、常用的荧光检测技术。
1. 荧光光谱法。
荧光光谱法是最常用的荧光检测技术之一,通过记录样品在不同激发波长下的荧光发射光谱,可以获取样品的荧光特性和信息。
荧光光谱法具有高灵敏度、高选择性和高分辨率的优点,被广泛应用于生物医学、环境监测等领域。
2. 荧光显微镜。
荧光显微镜是一种利用荧光探针标记样品后进行观察和分析的技术。
荧光显微镜可以实现对生物细胞、组织的高分辨率成像,被广泛用于生物医学研究和临床诊断。
3. 荧光免疫分析法。
荧光免疫分析法是一种利用荧光标记的抗体或抗原对特定分子进行检测的技术。
荧光免疫分析法具有高灵敏度、高特异性和高通量的优点,被广泛应用于临床诊断和生物医学研究中。
DiI (细胞膜红色荧光探针)产品编号 产品名称包装 C1036DiI (细胞膜红色荧光探针)10mg产品简介:DiI 即DiIC 18(3),全称为1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanine perchlorate ,是最常用的细胞膜荧光探针之一,呈现橙红色荧光。
DiI 是一种亲脂性膜染料,进入细胞膜后可以侧向扩散逐渐使整个细胞的细胞膜被染色。
DiI 在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。
DiI 被激发后可以发出橙红色的荧光,DiI 和磷酯双层膜结合后的激发光谱和发射光谱参考下图。
其中,最大激发波长为549nm ,最大发射波长为565nm 。
DiI 的分子式为C 59H 97ClN 2O 4,分子量为933.88,CAS number 为41085-99-8。
DiI 可以溶解于无水乙醇、DMSO 和DMF ,其中在DMSO 中的溶解度大于10mg/ml 。
发现较难溶解时可以适当加热,并用超声处理以促进溶解。
DiI 被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂(long-term tracer)。
DiI 通常不会影响细胞的生存力(viability)。
被DiI 标记的神经细胞在体外培养的条件下可以存活长达4周,在体内可以长达一年。
DiI 在经过固定的神经元细胞膜上的迁移速率为0.2-0.6mm/day ,在活的神经元细胞膜上的的迁移速率为6mm/day 。
DiI 除了最简单的细胞膜荧光标记外,还可以用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP(Fluorescence Recovery After Photobleaching)检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
用于细胞膜荧光标记时,DiI 的常用浓度为1-25µM ,最常用的浓度为5-10µM 。
脂质过氧化荧光探针
脂质过氧化荧光探针是一种用于检测脂质过氧化反应的荧光探针。
脂质过氧化是指脂质分子在氧气存在下发生的一种氧化反应,会导致细胞膜的损伤和细胞死亡。
因此,对脂质过氧化的检测具有重要的生物学意义。
脂质过氧化荧光探针的原理是利用荧光分子的特性,当荧光分子与脂质过氧化产生反应时,荧光分子的荧光强度会发生变化,从而可以检测脂质过氧化的程度。
目前常用的脂质过氧化荧光探针有BODIPY、DCFH-DA、DHE等。
BODIPY是一种荧光染料,具有高荧光强度和良好的稳定性,可以用于检测脂质过氧化的程度。
DCFH-DA是一种非极性荧光探针,可以通过细胞膜进入细胞内,被细胞内的酯酶水解成DCFH,然后与脂质过氧化反应产生荧光。
DHE是一种脂质过氧化荧光探针,可以通过细胞膜进入细胞内,被细胞内的脂肪酸酯酶水解成DHE,然后与脂质过氧化反应产生荧光。
脂质过氧化荧光探针的应用非常广泛,可以用于检测细胞膜的脂质过氧化程度,评估细胞的氧化应激水平,研究脂质过氧化与疾病的关系等。
例如,在肝脏疾病中,脂质过氧化是导致肝细胞损伤和肝纤维化的重要因素之一,因此可以利用脂质过氧化荧光探针来评估肝细胞的脂质过氧化程度,为肝脏疾病的诊断和治疗提供参考。
脂质过氧化荧光探针是一种重要的生物学工具,可以用于检测脂质过氧化反应的程度,为研究脂质过氧化与疾病的关系提供重要的实验手段。
(⼀)免疫荧光标记最常⽤的荧光染料
最常⽤的染料有FITC和藻红蛋⽩类(PE)及罗丹明等。
FITC(异硫氰酸荧光素):绿⾊530nm
PE(藻红蛋⽩):橙黄⾊575nm
PerCP(多甲藻黄素叶绿素蛋⽩):深红⾊675nm
PI(碘化丙啶):橙红⾊620nm
488nm波长的氩离⼦激光激发
APC(别藻青蛋⽩):红⾊660nm
630nm波长的氦氖激光或红⾊⼆极管激光激发
(⼆)免疫荧光标记
常⽤的标记染⾊为直接免疫荧光染⾊和间接免疫荧光染⾊。
在进⾏双参数或多参数分析时,常常需要进⾏荧光抗体的组合标记,⽬前已经有双⾊、三⾊以及四⾊标记。
(三)细胞⾃发荧光
⾃发荧光信号为噪声信号,在多数情况下会⼲扰对特异荧光信号的分辨和测量。
在免疫细胞化学等测量中,对于结合⽔平不⾼的荧光抗体来说,如何提⾼信噪⽐是个关键。
⼀般说来,细胞成分中能够产⽣⾃发荧光的分⼦(例如核黄素、细胞⾊素等)的含量越⾼,⾃发荧光越强;培养细胞中死细胞/活细胞⽐例越⾼,⾃发荧光越强;细胞样品中所含亮细胞的⽐例越⾼,⾃发荧光越强。
常见的小分子荧光探针种类1.引言1.1 概述小分子荧光探针是一类被广泛应用于生物领域的化学工具,通过其具有的荧光性质,可以用于生物成像、药物传递、疾病诊断等方面。
小分子荧光探针具有分子结构简单、稳定性好、探测灵敏度高等特点,在生物学研究中起着重要的作用。
小分子荧光探针的种类繁多,根据其不同的结构和功能特点,可以分为许多不同的类别。
常见的小分子荧光探针包括有机荧光探针、金属配合物荧光探针、聚合物荧光探针等。
有机荧光探针是指由有机化合物构成的荧光探针,其分子结构多样,可以通过调整结构来实现特定的探测目标。
常见的有机荧光探针包括荧光染料、荧光蛋白等。
荧光染料具有较强的荧光强度和良好的化学稳定性,可以用于细胞成像、生物传感等领域。
荧光蛋白是一类来源于特定生物体的蛋白质,其具有自身天然的荧光性质,可以通过基因工程技术进行改造和调整,广泛应用于生物研究中。
金属配合物荧光探针是指由金属离子与配体形成的荧光探针,其具有较强的荧光性能和较长的寿命。
金属配合物荧光探针具有选择性较高的特点,可以用于特定金属离子的探测和诊断。
常见的金属配合物荧光探针包括铜离子、锌离子、铁离子等的配合物。
聚合物荧光探针是指由高分子聚合物构成的荧光探针,其具有较好的溶解性和稳定性。
聚合物荧光探针可以通过调整聚合物的结构和链长来实现特定的探测需求。
常见的聚合物荧光探针包括聚合物分子探针、聚合物纳米探针等。
总之,常见的小分子荧光探针种类繁多,具有不同的结构和功能特点,可以根据具体的研究需求选择适合的荧光探针进行应用。
这些小分子荧光探针为生物学研究提供了有力的工具,有助于深入理解生命的基本过程和疾病的发生机制。
未来,随着技术的不断发展和突破,相信小分子荧光探针在生物领域的应用会得到更广泛的推广和应用。
1.2文章结构1.2 文章结构本文主要围绕"常见的小分子荧光探针种类"展开讨论。
文章分为引言、正文和结论三个部分。
在引言部分,将进行概述、文章结构和目的的介绍。
流式细胞仪测定常用的荧光染料
流式细胞仪测定常用的荧光染料有多种,他们分子结构不同,激发光谱和发射光谱也各异,选择荧光染料时必须依据流式细胞仪所配备的激光光源的发射光波长(如氩离子气体激光管,它的发射光波488ηm,氦氖离子气体激光管发射光波长633ηm)。
488ηm激光光源常用的荧光染料有FITC(异硫氰酸荧光素)、PE (藻红蛋白)、PI(碘化丙啶)、CY5(化青素)、preCP(叶绿素蛋白)、ECD(藻红蛋白-得克萨斯红)等。
他们的激发光和发射光波长分别是:
激发光波长(ηm)发射光峰值(ηm)
FITC 488 525(绿)
PE 488 575(橙红)
PI 488 630(橙红)
ECD 488 610(红)
CY5 488 675(深红)
PreCP 488 675(深红。
荧光探针和荧光染料来源:互联网 作者:未知 发布时间:2006-10-18实时荧光PCR 定量包括探针类和非探针类两种,探针类是利用与靶序列特异杂交的探针来指示扩增产物的增加,非探针类则是不利用杂交原理,而利用其他的一些理化特征指示扩增产物的增加。
前者由于增加了探针的识别步骤,特异性更高,但后者则简便易行。
1.TaqMan 探针TaqMan 探针是一种寡核苷酸探针,荧光基团连接在探针的5’末端, 而淬灭剂则在3’末端。
当探针与靶序列配对时,荧光基团发射的荧光因与3’端的淬灭剂接近而被淬灭。
在进行延伸反应时,聚合酶的5’外切酶活性将探针切断, 使得荧光基团与淬灭剂分离,发射荧光。
一分子的产物生成就伴随着一分子的荧光信号的产生。
随着扩增循环数的增加,释放出来的荧光基团不断积累。
因此Taqman 探针检测的是积累荧光。
常用的荧光基团是FAM ,TET ,VIC ,HEX 。
2.分子信标(molecular beacon)分子信标是一种呈发夹结构的茎环双标记寡核苷酸探针,两端的核酸序列互补配对,因此标记在一端的荧光基团与标记在另一端的淬灭基团紧紧靠近。
荧光基团被激发后产生的光子被淬灭剂淬灭,由荧光基团产生的能量以红外而不是可见光形式释放出来。
分子信标的茎环结构中,环一般为15-30 个核苷酸长,并与目标序列互补;茎一般5-7 个核苷酸长,并相互配对形成茎的结构。
荧光基团标记在探针的一端,而淬灭剂则标记在另一端。
在复性温度下,因为模板不存在时形成茎环结构,当加热变性会互补配对的茎环双链解开,如果有模板存在环序列将与模板配对。
与模板配对后,分子信标将成链状而非发夹状,使得荧光基团与淬灭剂分开。
当荧光基团被激发时,因淬灭作用被解除,发出激发光子。
由于是酶切作用的存在,分子信标也是积累荧光。
常用的荧光基团:FAM ,Texas Red 。
3.SYBR Green ISYBR Green I 是一种能与双链DNA 结合发光的荧光染料。
荧光探针的研究及应用随着科技的不断发展,荧光探针逐渐成为生命科学研究领域中不可缺少的重要工具。
荧光探针是一种能够发射出荧光信号的分子,在分子生物学、生物医学和化学生物学等领域中有着广泛的应用。
它们可以被用来研究细胞内的分子相互作用、识别生物分子、分析细胞功能,并可以在体内用作活体成像和药物筛选的工具。
本文将简要介绍荧光探针的基本原理、常见的荧光探针类型和其在生物学研究中的应用。
一、荧光探针的基本原理荧光探针的基本原理是荧光共振能量转移(FRET),其通过将荧光分子与生物分子(生物样品)耦合,使两者之间发生相互作用,从而产生能量转移。
FRET 能量转移是从能量接受者的激发态到另一个分子的荧光染料的发射态的一种非辐射性能量转移。
在FRET中,激发荧光染料的光子会被共振耦合到另一个染料的激发态,从而使其发出荧光光子。
这样,在激发荧光染料的时候,可以用荧光染料的荧光光子来检测另一个染料的存在和位置。
荧光探针对于荧光光子的发射特征和其它的生化参数是很敏感的,所以它们可以被用来探测各种细胞和分子。
二、常见的荧光探针类型1. 荧光染料:荧光染料是最常见的荧光探针类型之一,它们有着广泛的应用,可以被用来标记蛋白质、核酸等生物分子。
常见的荧光染料包括荧光素、草铵膦、偶氮染料等。
2. 荧光蛋白:荧光蛋白是一种具有自发荧光性质的蛋白质,其最早源自于水母Aequorea victoria。
荧光蛋白可以用来跟踪胞内或胞外的重要过程,如蛋白质、核酸合成、信号传递等。
3. 量子点:量子点是一种半导体纳米粒子,具有窄的发射光谱、强的光稳定性和较大的荧光量子产率。
这些特点使得量子点成为新一代高亮度及高灵敏度的荧光探针。
三、荧光探针在生物学研究中的应用荧光探针广泛地应用于细胞内信息传递、化学生物学、生物传感、药物筛选和临床诊断等方面。
以下为举几个常见的案例:1. 细胞内信息传递:荧光探针可被用于研究细胞内信号转导、磷酸化和蛋白质相互作用等过程。
常见荧光染料及用途《常见荧光染料及用途》荧光染料是一种能够吸收可见光或紫外光,并在吸收能量的激发下发射可见光的化学物质。
它们的应用非常广泛,涵盖了许多领域,例如生物医学、材料科学、环境监测等。
以下介绍几种常见的荧光染料及其主要用途。
1. 墨水蓝(BR):墨水蓝是一种具有强烈蓝色荧光的染料,常用于生物实验中的DNA染色。
它与DNA结合后能发出强烈的荧光信号,从而在实验中方便地观察和分析DNA的存在和定位。
2. 罗丹明B(RhB):罗丹明B是一种红色荧光染料,广泛用于组织切片和细胞染色。
它能够与细胞核和胞浆中的核酸结合,以显示细胞和组织的结构,帮助科研人员研究细胞分裂和组织结构变化。
3. 草酸罗丹明G(OG):草酸罗丹明G是一种绿色荧光染料,主要应用于蛋白质和核酸的定量分析。
在分光光度计中配合荧光检测器使用,可以精确测定溶液中蛋白质和核酸的浓度。
4. 罗丹明110(Rh110):罗丹明110是一种黄绿色荧光染料,常用于细胞活性检测。
通过与细胞内的酶或细胞膜结合,罗丹明110可以用来评估细胞的活力和存活情况,特别适用于细胞毒性测试和细胞增殖研究。
5. 荧光素(FITC):荧光素是一种与生物相容性极高的荧光染料,常用于免疫染色和分子生物学实验。
它能与抗体特异性结合,在免疫组化和流式细胞术中用于检测蛋白质的表达以及细胞表面标记。
以上只是常见的荧光染料中的几种,它们的应用还远不止于此。
随着科学技术的不断进步,新型的荧光染料不断问世,为各个领域的研究提供了更多更有力的工具。
通过荧光染料的运用,科学家们能够更好地理解和研究生物、物质和环境,进一步推动科学的发展。
这是来自于Salk的一个比较全的荧光染料列表,这些荧光染料可广泛用于流式细胞术以及荧光显微镜技术,汇集了各种荧光染料的特性,方便大家查找。
可根据实际所用的检测平台、染料的最大激发光波长和最大发射光波长来选择合适的荧光染料用于实验。
请注意这上面所显示的颜色可能会由于所用浏览器不同而有所不同,他们只是一个与实际颜色的近似值。
Ex: Peak excitation wavelength (nm)
Em: Peak emission wavelength (nm)
QY: Quantum yield
BR: Brightness; Extinction coefficient * Quantum yield / 1000 PS: Photostability; time to 50% brightness (sec)
光色波长λ(nm)代表波长
红(Red)780~630700
橙(Orange)630~600620
黄(Yellow)600~570580
绿(Green)570~500550
青(Cyan)500~470500
蓝(Blue)470~420470
紫(Violet)420~380420。