化学发光技术综述
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化学发光技术原理及应用化学发光技术,是指通过化学反应的方法来产生发光现象的一种技术。
它主要依赖于化学反应的能量释放和物质发生转化的过程中产生能量的特点,使用一定的化学试剂,通过物质的化学反应,来使化学能转化为光能,从而实现发光的效果。
化学发光技术广泛应用于生物医学、物质分析、环境监测、能源技术、材料科学等领域。
本文将分别探讨化学发光技术的基本原理,以及它在不同领域中的应用。
一、化学发光技术的基本原理化学发光技术的基本原理是通过特定的化学反应来激发发光分子的能级,使发光分子达到激发态,释放出光子实现发光的过程。
因此,化学发光技术的实现需要开发出一系列符合要求的发光试剂。
常见的发光方式有如下几种。
1. 化学发光化学发光法利用特定的化学反应,使反应物的活化能转化为光能而产生发光。
比如,乳酸氧化酶催化下乳酸和过氧化氢反应生成的基质产生化学发光,可以用于检测血液中的乳酸含量。
2. 其他类型的光化学反应还有一些类型的光化学反应也能产生发光现象,比如化学发光酶免疫分析法。
如果特定化学反应产生的物质与酶或抗体结合,这时的化学发光就能表现出高度的选择性和灵敏度。
3. 高分子发光材料发光高分子材料的制备通常是将一定量的化学反应物和发光剂混合,进一步地,将混合后的料加入到具有合适性能的基体中。
高分子发光材料因其易于加工、成本低廉、安全稳定等优点,在环境监测、生物医学等诸多领域都得到有效应用。
二、化学发光技术在生物医学领域的应用发光技术在生物医学领域的应用非常广泛。
一般来讲,生化指标对临床诊断和病理变化的判断测试和检测是具有非常重要价值的。
其中最重要的生化指标之一是蛋白质,通过检测蛋白质浓度、酶活性等参数的变化,能够早期发现人体的变化,这对于疾病预防和治疗至关重要。
化学发光技术能够针对不同类型的指标开发出相应的检测方法,如果高灵敏度、特异性,检测的速度也十分快。
三、化学发光技术在环境监测领域的应用化学发光技术在环境监测领域的应用十分广泛。
鲁米诺化学发光分析研究综述化学发光是化学反应体系中的某些分子,如反应物、中间体或反应产物吸收了化学反应释放出的化学能,由基态跃迁至激发态,当其从激发态返回基态时所产生的光辐射[1]。
化学发光法则是根据化学反应的发光强度或发光总量确定相应组分含量的一种分析方法。
同荧光法相比,化学发光法不需要外来的光源,减少了拉曼散射和瑞利散射,降低了噪音信号的干扰,提高了检测的灵敏度[4],扩大了线性范围。
鲁米诺(5-氨基-2,3-二氢-1,4-二杂氮萘二酮,也称3-氨基邻苯二甲酰肼)因其结构简单、易合成、水溶性好,以及发光量子效率高等特点,鲁米诺是最常用的液相化学发光试剂之一。
自从1928年albrecht首次报道了鲁米诺与氧化剂在碱性溶液中的化学发光反应以来,人们对该化学发光体系的研究就一直十分活跃,使得该化学发光体系被应用于许多领域之中。
white等通过比较鲁米诺体系的化学发光光谱和3-氨基邻苯二甲酸根离子的荧光光谱,提出鲁米诺化学发光反应的发光体。
在碱性条件下,鲁米诺首先被氧化为叠氮酮,然后形成桥式六元环过氧化物中间体,分解后以光子的形式释放出能量产生化学发光。
下面笔者简要介绍鲁米诺化学发光反应的机理,详细地总结近五年来鲁米诺化学发光体系的应用进展。
鲁米诺化学发光体系的分析应用主要基于以下几个方面。
鲁米诺-过氧化氢化学发光体系应用最为广泛。
许多过渡金属离子对鲁米诺-过氧化氢化学发光反应具有很好的催化作用。
李正平等发现铁蛋白催化,产生很强的化学发光信号,建立简便灵敏的检测铁蛋白的化学发光方法。
方法的线性范围为0.5~10μg/l,检出限为0.36μg/l,为铁蛋白作为纳米粒子标记物及直接检测提供一种新的途径。
戴路等报道了一种新的测定雌性激素的流动注射化学发光方法。
在碱性条件下,金银复合纳米粒子能显著地增强鲁米诺-过氧化氢化学发光,而雌性激素能明显地抑制该体系的化学发光强度,建立了测定天然雌激素(雌酮、雌二醇和雌三醇)的化学发光方法。
化学发光分析技术的研发和应用化学发光分析技术是一种基于化学反应的光学分析方法,通过测量样品反应后产生的光信号来检测和分析样品中的化学成分。
这种分析方法具有高灵敏度、高选择性和高速度等优点,在医学诊断、环境监测、食品安全等领域有着广泛的应用。
一、化学发光分析技术的原理化学发光分析技术根据样品中的物质与化学试剂发生化学反应并激发出发光现象来进行分析。
在实验中,我们可以使用一些化学试剂,比如称为“增强剂”的化学试剂,将荧光信号增大。
样品经过反应后会释放出一个电子,如果这个电子在激发态上释放光子的话,就能从基态升至激发态。
激发态具有较短的寿命,很快就会退回到基态上,因此就会放出一个光子,这样就形成了化学发光信号。
利用化学发光分析技术探测的物质是适用这个原理的,也就是所谓的荧光物质。
二、化学发光分析技术的应用1. 医学诊断化学发光分析技术在疾病诊断方面有着广泛的应用。
比如,医院中的临床检验科通常会使用化学发光分析仪器对患者的血液和尿液等生物样品进行检测,以确保病人的健康安全。
以荧光标记的抗体可以用于癌症等生物诊断,因为它们会特异性地结合在癌细胞上,以此来帮助诊断最早迹象。
2. 环境监测化学发光分析技术在环境监测中也有着广泛的应用。
比如,有些能够发生化学反应的污染物质、有毒物质等,通过和某些荧光试剂作用可发生化学反应并产生荧光信号,此时若检测到荧光信号便说明该环境中存在所检测的污染物质或其他有毒物质。
3. 食品安全化学发光分析技术也可以被用来监测食品中的营养成分和有害物质。
例如利用人工合成的荧光化学物质或其他检测剂作为指示剂来识别化学物质,这些化学物质在食品中是不合法的或者超过了规定的安全限制。
借助化学发光分析技术,我们可以更加准确和快速地得出有关食品成分以及其安全性的结论。
三、未来的发展趋势未来化学发光分析技术将继续朝着更高的灵敏度、更高的选择性和更好的实时性方向发展。
为了应对更广泛的的应用领域和更多样的样品类型,我们需要进一步探索和研究新的化学发光体系和试剂。
化学发光分析技术的研究及应用一、引言化学发光分析技术已经成为生物医学领域中最受欢迎的检测方法之一。
它已广泛应用于生物分析、临床诊断、环境监测和食品安全等领域。
本文旨在探讨化学发光分析技术的研究及应用。
二、化学发光分析技术的概述化学发光分析可分为电化学发光和化学发光两类。
电化学发光是指在电极表面发生电化学反应,电化学反应所产生的激发态物质向基态跃迁时发生的发光现象,即电化学发光现象。
在这种方法中,通过电化学反应产生光,再利用光子计数器分析样品中的目标分子。
化学发光是指在化学反应中产生激发态物质,该物质向基态跃迁时释放出光子,即化学发光现象。
对于化学发光分析,灵敏度和选择性是关键。
三、化学发光分析中的发光机理化学发光分析是基于化学反应中放出的光子对产物浓度进行检测的技术。
光子释放的机理主要有三种:单分子化学发光、能量转移化学发光和化学反应发光。
1. 单分子化学发光机理单分子化学发光机理是指发光来自于一个分子的瞬间存在的激发态基态。
其内部转移是通过激发态、激发态分子、电子转移和融合步骤完成的。
2. 能量转移化学发光机理能量转移化学发光机理是指一个分子从一个激发态到另一个激发态的过程发射出光子,这种过程通常与非辐射过程相结合。
3. 化学反应发光机理化学反应发光机理通常涉及化学反应产生激发态物质,该物质向基态跃迁时释放出光子。
四、化学发光分析技术的应用化学发光分析技术已经应用于许多领域,包括生物分析、临床诊断、环境监测和食品安全等。
1. 生物分析化学发光分析技术可以用于检测细胞生长、酶活性、蛋白质分析、DNA检测和细胞代谢活性等。
典型的化学发光分析方法包括化学发光酶免疫法(CLEIA)和化学发光免疫测定(CLIA)。
2. 临床诊断化学发光分析技术可用于肿瘤标志物、激素及其代谢产物、风湿因子以及肾功能和心脏病等方面的临床诊断。
典型的化学发光分析方法包括固相化学发光免疫测定(SPCLIA)和发光免疫层析法(LIA)。
化学发光法的研究进展综述【摘要】化学发光分析法实际上是利用化学发光的原理,而建立起来的一种分析方法。
化学发光分析法的特点较为明显,主要表现在化学发光不需要任何光源,同时在实践的过程中化学发光分析法与其他方法相比较其灵敏度也较高,此外线性范围宽和仪器简单也是化学发光分析法的特点之一。
正式基于这些特点,化学发光分析法在环境化学、临床检验、药物分析等领域得到十分广泛的应用和研究。
本文针对化学发光法的研究进展进行综述,希望本文的研究能够为相关领域提供一些指导和借鉴。
【关键词】化学发光法;研究进展;综述doi:10.3969/j.issn.1004-7484(x).2012.08.686 文章编号:1004-7484(2012)-08-2967-021 化学发光概述所谓化学发光(chemiluminescence,cl)实际上是产生于化学反应过程中的一种光辐射。
化学发光法的基本原理就是:化学反应的反应物或生成物吸收了反应释放的化学能由基态跃迁至电子激发态,再由激发态的最低振动能级返回基态,同时将能量以光辐射的形式释放出来,产生化学发光。
2 常见化学发光体系及其应用2.1 鲁米诺化学发光体系鲁米诺是1928年albrecht首先发现的一种发光试剂。
鲁米诺属肼类有机化。
由于鲁米诺及其衍生物性质稳定,结构简单,易于合成,且无毒不污染环境,水溶性较好,从而成为研究最多,使用最早,应用范围最广泛的化学发光试剂之一。
它在碱性溶液中可以被强氧化剂氧化而处于激发态,激发态回到基态时同时发射425nm的蓝光,所以鲁米诺的发光体都是3-氨基邻苯二甲酸根。
2.2 吖啶类化合物的化学发光体系一光泽精化学发光体系光泽精(lucigenin,lc)化学发光体系是一个性能优良、应用广泛的化学发光体系,在国内对该体系的研究与应用还很少。
国外对lc发光体系作了较深入、系统的研究。
和鲁米诺一样,光泽精在碱性介质中被h2o2氧化,裂解为激活态,发出蓝色的光,其发光效率也较高,只是氧化产物n-甲基吖啶酮难溶于水,常沉积在反应器壁上,为此常加入表面活性剂如十六烷基三甲基溴化铵(ctab)使之增活。
化学发光分析技术及其在环境检测中的应用一、化学发光分析技术概述化学发光分析技术是指利用化学作用产生的化学发光现象进行分析的一种技术手段。
化学发光分析技术具有灵敏度高、特异性强、快速准确、操作简单等特点,已经成为现代分析化学领域中的主要手段之一,广泛应用于药物分析、环境监测、食品质量控制等领域。
化学发光分析技术可以划分为化学发光和化学发光光谱两种。
其中,化学发光是指在化学反应中产生的化学发光现象,而化学发光光谱则是在化学发光的基础上,通过光谱技术对化学发光现象进行分析。
化学发光分析技术的基础是化学反应的化学发光作用。
化学发光通常是由于化学反应的自发放热或化学反应后续的放热而导致的。
如果将发光现象与可见光谱区域的光谱结合起来,可以实现对物质的定性和定量分析。
二、化学发光分析技术在环境检测中的应用1. 水质检测水是我们生活中必不可少的组成部分,但随着工业化和城市化的快速发展,水质问题越来越引起人们的重视。
化学发光分析技术可以用于水中有毒污染物质的检测,如苯系列、多氯化联苯PCBs、三氯乙烯等。
化学发光分析技术对这些污染物质的检测具有灵敏度高、准确度高、样品处理快等特点,因此被广泛应用于水环境的检测。
2. 大气污染物检测大气污染物对人类健康及环境造成的危害是不可忽视的。
针对大气污染问题,化学发光分析技术可以用于大气中有毒污染物质的检测,如二氧化硫SO2、二氧化氮NO2、一氧化碳CO、臭氧O3等。
采用化学发光分析技术对这些污染物质的浓度进行监测,可以为大气污染的防治提供重要的参考数据。
3. 土壤污染物检测土壤污染是指在土壤中发现的对人类健康和环境造成危害的物质的一种现象。
化学发光分析技术可用于土壤中有毒污染物质的检测,如重金属元素、农药等。
利用化学发光分析技术,可以快速、准确地检测出土壤中的有毒污染物质,并对土壤的污染程度进行评估。
4. 化工污染物检测化工污染物是化学厂以及相关生产企业的废弃物质。
这些废弃物质中含有很多对人类健康和环境造成危害的物质。
化学发光技术:发展趋势与挑战一、化学发光技术概述化学发光技术是一种基于化学反应产生光子的技术,其原理是化学反应过程中产生的能量能够激发分子至激发态,当这些分子返回到基态时,会以光子的形式释放出能量。
自20世纪70年代以来,化学发光技术已广泛应用于分子诊断、药物研究、环保检测等诸多领域。
二、化学发光技术的应用领域与发展趋势1. 分子诊断:化学发光技术为分子诊断提供了高灵敏度、高特异性和快速简便的检测手段。
例如,利用化学发光技术可以检测DNA、RNA和蛋白质等生物分子,为肿瘤、传染病和遗传病等疾病的诊断提供了有力支持。
2. 药物研究:化学发光技术可用于药物的合成、代谢和药代动力学研究。
例如,通过化学发光技术可以追踪药物在体内的分布、吸收和排泄情况,有助于新药的开发和优化。
3. 环保检测:化学发光技术可用于环境监测,如水体、土壤和大气中污染物的检测。
该技术具有高灵敏度和高选择性,可以快速准确地检测出各类有害物质。
三、化学发光技术的创新发展1. 新型化学发光试剂盒开发:随着临床和科研的需求日益增长,开发新型化学发光试剂盒已成为研究热点。
例如,针对特定疾病的生物标志物,设计研发高特异性、高灵敏度的化学发光检测试剂盒,可实现疾病的早期诊断。
2. 更高灵敏度与分辨率的仪器设备:为了提高化学发光技术的检测限和空间分辨率,研发新型的高灵敏度、高分辨率仪器设备至关重要。
例如,通过采用先进的光学系统和高灵敏度探测器,提高现有化学发光成像设备的性能。
3. 临床试验及成果转化策略:加强化学发光技术在临床实践中的应用研究,通过大规模临床试验验证其可行性和有效性。
同时,建立与医疗机构、科研院所和产业界的紧密合作,推动化学发光技术的成果转化和产业化。
4. 人工智能与大数据在化学发光技术中的应用:借助人工智能的数据处理能力和深度学习算法,对化学发光数据进行模式识别和预测性分析。
例如,通过人工智能技术对大量的医学影像数据进行处理和分析,为疾病的早期诊断提供依据。
化学发光分析法综述化学发光分析法是一种基于光的检测技术,其原理是通过化学反应产生光的发射,利用发光强度与待测物质浓度之间的关系进行定量分析。
化学发光分析法在生物医学、环境监测、食品安全等领域有着广泛的应用。
本文将综述化学发光分析法的原理、方法和应用研究进展。
化学发光分析法的原理可以归纳为两类:化学发光增强原理和化学发光自身原理。
前者基于化学反应中发光物质的生成和增强,如钒酸盐-含氮化物体系中产生的荧光;后者则是通过一些物质在化学反应中的产生发光,如氧化还原反应中的增白剂和催化剂的发光作用。
化学发光分析法的方法包括化学发光法、电化学发光法和光生发光法。
其中化学发光法是应用最广泛的一种方法,其步骤通常包括试剂的制备、反应条件的优化、发光体系的选择和测量装置的设计。
电化学发光法则是利用电化学反应中产生的电流转化成光信号进行检测。
光生发光法是利用光照射样品后产生的催化剂发光进行分析。
在应用研究方面,化学发光分析法在生物医学领域有着广泛的应用。
例如,生物芯片技术结合化学发光分析法可以用于检测DNA序列、蛋白质和细胞等。
此外,化学发光分析法还可以用于检测环境中的有毒物质,如重金属离子和有机污染物。
食品安全是一个重要的应用领域,化学发光分析法可以用于检测食品中的农药残留、添加剂和毒素等。
近年来,一些新的发展和研究方向也出现在化学发光分析法中。
例如,利用纳米材料和纳米光子学的原理,可以制备出高灵敏度、特异性的化学发光探针。
此外,不断提高化学发光分析方法的自动化程度,可以实现高通量的分析和测量。
同时,与其他分析技术的结合,如质谱技术和色谱技术,也是当前的研究重点。
综上所述,化学发光分析法是一种重要的分析技术,具有广泛的应用前景。
随着研究的不断深入,化学发光分析法在生物医学、环境监测和食品安全等领域的应用将会得到进一步的扩展。
化学发光技术综述
化学发光免疫测定()是将抗原与抗体特异性反应与敏感性的化学发光反应相结合而建立的一种免疫检测技术。
(一)原理
化学发光免疫测定()属于标记抗体技术的一种,它以化学发光剂、催化发光酶或产物间接参与发光反应的物质等标记抗体或抗原,当标记抗体或标记抗原与相应抗原或抗体结合后,发光底物受发光剂、催化酶或参与产物作用,发生氧化还原反应,反应中释放可见光或者该反应激发荧光物质发光,最后用发光光度计进行检测。
(二)特点
特异性高、敏感性高、分离简便、快速、试剂无毒、安全稳定、可自动化。
(三)分类
1、从反应原理上,化学发光免疫技术主要分为直接化学发光和酶促反应化学发光。
1.1直接化学发光
化学发光剂在发光免疫分析过程中不需酶的催化作用,直接参与发光反应,它们在化学结构上有产生发光的特有基团,可直接标记抗原或抗体。
直接化学发光速度快、试剂稳定性好,但灵敏度略低于酶促发光。
代表性的发光剂有:吖啶酯、三联吡啶钌。
1.1.1 吖啶酯
在碱性条件下被H2O2氧化时,发出波长为470的光,具有很高的发光效率,其激发态产物甲基吖啶酮是该发光反应体系的发光体。
这类化合物的发光为闪光型,加入发光启动试剂后0. 4s 左右发射光强度达到最大,半衰期为0.9s左右。
特点:
①发光反应中在形成电子激发态中间体之前,联结于吖啶环上的不发光的取代基部分从吖啶环上脱离开来,即未发光部分与发光部分分离,因而其发光效率基本不受取代基结构的影响。
②吖啶酯或吖啶磺酰胺类化合物化学发光不需要催化剂,在有H2O2 的稀碱性溶液中即能发光。
因此应用于化学发光检测具有许多优越性。
优点主要有:
①背景发光低,信噪比高;
②发光反应干扰因素少;
③光释放快速集中、发光效率高、发光强度大;
④易于与蛋白质联结且联结后光子产率不减少;
⑤标记物稳定(在2-8 ℃下可保存数月之久)。
1.1.
2.三联吡啶钌
三联吡啶钌 [()3]2+是电化学发光剂,它和电子供体三丙胺()在阳电极表面可同时失去一个电子而发生氧化反应。
1.2 酶促反应化学发光
是利用标记酶的催化作用,使发光剂(底物)发光,这一类需酶催化后发光的发光剂称为酶促反应发光剂。
酶促化学发光灵敏度高,但速度慢,酶活性容易受外界影响,其代表性的发光物质有鲁米诺及其衍生物、
1.2.1. 鲁米诺及其衍生物()
激活酶为辣根过氧化物酶(),鲁米诺体系的发光基本上为闪光型且信号弱。
但在使用增强剂的情况下,发光的持续时间可延到30-60,发光强度至少增加100倍以上。
现通常采用的体系是2O2体系,即用标记抗原或抗体,以鲁米诺或异鲁米诺及其衍生物作发光底物,对碘苯酚或对苯基酚等作增强剂,用2O2作发光启动试剂,化学发光反应2后,光反射强度达到最高峰;20后,光强度减少20%。
1.2.2. 异鲁米诺()
新产业的化学发光使用的发光剂,使用的是闪光非酶激活技术,加入启动液后测试0.1-3s时间内的发光强度。
1.2.3. ()
激活酶为碱性磷酸酶()
的特性:
(1) 在碱性环境下,的非酶解性的水解程度低,即本底低;
(2) 热稳定性好,在7.0的水中,30℃时的分解半衰期为142h;
(3) 发光为辉光型,波长为470,在15时强度达到高峰,15-60内光信号强度维持一致,变化很小,即使在12h后仍能测定得出正确结果;
(4) 加入增强剂如聚氯苄乙烯苄基二甲基铵()或等,能明显增强酶解的发光强度,增强因素达100-100000倍。
现通常采用的体系是,即用碱性磷酸酶()标记抗原或抗体,用(金钢烷)-1,2-二氧乙烷或其衍生物作发光底物,在发光底物中加入增强剂。
使用此系统的有美国公司的和公司等,迈瑞的化学发光所使用的底物基本上属于。
2、从固相载体上,一般分为板式分离和磁珠分离
2.1 板式分离技术:
将抗原/抗体包被在微孔板上,反应时,待检物质通过抗原抗体反应结合于包被板上,通过洗涤液数次洗涤,实现结合部分和未结合部分的分离,后加入底物、启动试剂,用光电倍增管检测发出的光信号。
此分离技术和酶联免疫分析技术()一致,只是将最后的显色剂改为发光剂得以实现,多数手工法检测,及部分半自动仪器使
用这种分离技术,由于抗原抗体结合在反应孔中,反应面积有限,所以为达到充分反应,孵育时间一般比较长。
常为0.52h。
手工法化学发光最常用的发光体系是鲁米诺2O2/增强剂,规格和基本一致,为4896T。
2.2 磁珠分离技术
超顺磁珠是一种表面带有特定活性基团、大小均匀、球形、具有超顺磁性及保护壳的微粒。
超顺磁珠在有外磁场存在时表现出磁力而发生聚集,无磁场时又失去磁力而分散开来。
通过一定的方法可将抗原/抗体等活性物质和磁珠表面的活
性基团结合而包被于磁珠上面,检测时,将待检物和包被有抗原/抗体的磁珠在一定条件下孵育,通过抗原抗体反应结合,后通过增加外部磁场,磁珠产生磁性而聚集在一起,即可进行洗涤,实现结合部分和未结合部分的分离,最后加入底物、启动试剂,用光电倍增管检测发出的光信号。
使用磁珠法分离,由于反应时磁珠均匀分布于整个液体中,反应面积较大,更容易充分反应,故孵育的时间较短。
(四)一些自动化仪器使用的方法原理:。