马铃薯培养基配方
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土豆培养基的配制方法
土豆培养基是一种广泛应用于微生物学和生物学实验中的培养基,以下是土豆培养基的配制方法:
材料:
- 马铃薯:250克
- 燃油:10毫升
- 蛋白胨:1克
- 磷酸二氢钾:2克
- 水:1000毫升
步骤:
1. 将马铃薯去皮,切成小块
2. 将马铃薯放入锅中,加入1000毫升水,煮沸15分钟
3. 将煮好的马铃薯用纱布过滤,取得马铃薯液
4. 向马铃薯液中加入1克蛋白胨、2克磷酸二氢钾和10毫升燃油,混合均匀
5. 将混合物煮沸15分钟,然后冷却至室温
6. 使用无菌技术将土豆培养基倒入无菌试管、烧杯或培养皿中
注意事项:
1. 在制备过程中,必须使用无菌技术,以避免细菌等微生物的污染。
2. 制备完成后,应尽快使用,以避免培养基过期、变质等影响实验的因素。
3. 马铃薯培养基可以根据实验需要适当调整其成分,如添加某些抗生素等。
各种食用菌栽培配方(参考)PDA培养基配方:马铃薯200克,葡萄糖20克,琼脂20克,水1000mlPSA培养基配方:马铃薯200克,蔗糖20克,琼脂20克,水1000ml。
一、香菇:母种配方:1)PDA加富培养基:PDA+麸皮50克或PDA+蛋白胨2克。
2)PSA培养基原种、栽培种配方:1)木屑78%、麸皮20%、蔗糖、石膏各1%。
含水量60%。
出菇包配方:1)杂木屑78%、麸皮20%、石膏1%、碳酸钙1%、PH6.0-6.5、料水比1:1~1:1.2。
2)杂木屑78%、麸皮16%、玉米粉2%、食糖1.2%、石膏2%、过磷酸钙0.5%、尿素0.3%、料水比1.1:1.二、平菇:母种配方:1)PDA加富培养基:PDA+麸皮50克或PDA+蛋白胨2克或玉米粉30克。
2)PSA培养基原种、栽培种配方:2)木屑78%、麸皮20%、蔗糖、石膏各1%。
含水量60%。
出菇包配方:1)玉米芯96%、石灰粉2%、石膏粉和过磷酸钙各1%、料水比1:1.3,麸皮5-10%。
2)木屑75%、麸皮20%、石膏1%、石灰粉2%、过磷酸钙1%、糖1%,含水量60-65%以上配方中需加0.1多菌灵,PH8三、秀珍菇:母种配方:PDA培养基原种、栽培种配方:杂木屑40%、棉籽壳36%、麸皮23%、石灰粉1%,含水61-63%出菇包配方:1)木屑63%、棉籽壳20%、麸皮12%、玉米粉2%、石灰粉2.5%过磷酸钙0.5%。
2)木屑49%、棉籽壳40%、麸皮7%、石灰粉2.5%、过磷酸钙0.5%。
含水61-63%,PH6.5左右。
四、金针菇:母种配方:PDA或玉米粉40克、蔗糖10克、琼脂20克、水1000ml。
原种、栽培种配方:1)木屑78%、麸皮20%、石膏、糖各1%。
2)棉籽壳35%、杂木屑35%、麸皮23%、玉米粉5%、石膏、糖各1%。
3)小麦100kg,碳酸钙0.5kg,石膏1.5kg。
以上配方含水量为60-63%。
出菇包配方:1)棉籽壳38%、麸皮32%、淋水陈积杂木屑25%、玉米粉3%、轻质碳酸钙1.5%、过磷酸钙0.5、PH自然,含水63-65%。
食用菌试管培养基配方
答案:
食用菌试管培养基的配方
PDA培养基
配方:土豆200克、葡萄糖18~20克、琼脂18~22克,水1000毫升。
制作方法:土豆去皮切块煮沸20~30分钟,过滤取滤液,加入琼脂加热溶解,再加入葡萄糖,冷却后分装。
综合马铃薯培养基
配方:马铃薯200克、葡萄糖20克、磷酸氢二钾3克、硫酸镁1.5克、维生素B1 10毫克、琼脂20克,水1000毫升。
制作方法:马铃薯煮沸15~20分钟,过滤取滤液,加入其他成分加热溶解。
合成培养基
配方:马铃薯20克、葡萄糖20克、磷酸二氢钾2克、蛋白胨5克、酵母膏5克、硫酸镁1克,水1000毫升。
制作方法:煮沸过滤后加入其他成分加热溶解。
大米培养基
配方:大米适量、磷酸二氢钾10克、硫酸镁5克,水1000毫升。
制作方法:大米加入营养液中,加热灭菌后接种。
制作方法
PDA培养基制作方法
将土豆切块煮沸20~30分钟,过滤取滤液。
加入琼脂加热溶解,再加入葡萄糖搅拌均匀。
冷却后分装,灭菌后制成斜面培养基。
综合马铃薯培养基制作方法
马铃薯煮沸15~20分钟,过滤取滤液。
加入其他成分加热溶解,分装灭菌。
合成培养基制作方法
煮沸过滤后加入其他成分加热溶解,分装灭菌。
大米培养基制作方法
大米加入营养液中,加热灭菌后接种。
马铃薯葡萄糖培养基常备法马铃薯葡萄糖培养基是优良的半合成培养基,因马铃薯营养丰富,性能稳定,适宜大多数真菌类微生物(如食用菌、酵母菌等)的培养,故被微生物工作者视为基础培养基,实际上它确实是四季必备的常用培养基。
但马铃薯的收获是有季节性的,错过季节,往往因购不到马铃薯而无法制备马铃薯培养基,以致影响科研和生产的正常进行。
下面介绍两种制作马铃薯葡萄糖培养基的常备方法。
1.液体马铃薯培养基常备法(1)制取马铃薯常备液在马铃薯上市季节,选购一批个大,皮滑,无病毒的马铃薯,按常规,将其清洗、削皮、切片,按料水20∶100的比例配方,以80℃的水温浸煮60min,使其营养物质充分溶解水中,过滤,装瓶加塞。
以1.5×105pa的压力灭菌30min,备用。
为使马铃薯常备液更理想,在配制时还需注意以下事项:1、削皮时一定要将马铃薯的芽眼挖尽。
因芽眼中往往存有很多芽孢杆菌,如不挖除不仅消毒麻烦,亦易招致细菌性污染。
2、配制的常备液如短期内使用,则可用棉花塞瓶口。
如欲放置较长时间,应用橡皮塞塞瓶口。
高压灭菌时一定逐渐排除冷空气,如快速排气,会使瓶塞弹出。
3、常备液装瓶时,可以装上几种不同的量,以备制用时按需取液。
4、常备液于常温环境中,一般可保存8个月左右。
保存于冰箱内,可一年不变质。
(2)制马铃薯葡萄糖培养基何时需用马铃薯葡萄糖培养基,可随时将马铃薯常备液取来,加热后溶入2%琼脂,再加2%葡萄糖,然后装入试管,按常规高压灭菌,制成即可。
2.固体马铃薯培养基常备法(1)制取马铃薯常备粉块同样需选购好马铃薯,然后将其洗净、削皮,挖去芽眼,用蒸具隔水蒸30min。
但切勿放在水中烧煮,致使营养损失。
然后,将马铃薯取出,研成泥浆状,压薄后摊于搪瓷盘中,晒干或置于37℃的恒温箱内烘干,备用。
(2)制马铃薯葡萄糖培养基将已制好备用的马铃薯粉块,按100ml水加马铃薯粉块约15g的比例,先置于沸水中浸煮30min,浸出其营养成份后,过滤。
试剂与培养基配方 Jenny was compiled in January 2021PDA培养基马铃薯去皮200g,切成小块,加水煮烂,纱布过滤,加入15g葡萄糖加热,加琼脂20g,继续加热搅拌混匀,待琼脂溶解完后,搅拌均匀,稍冷却后补纯水定容至1000mL,121℃高压灭菌20min,室温保存。
0.5MTris-Cl(PH8.0)Tris30.25g,纯水400mL,先加入8mL浓盐酸,待溶液冷却至室温后再缓慢加入浓盐酸直至PH值到8.0,加纯水定容至500mL,121℃高压灭菌20min,4℃保存。
0.5MTris-Cl(PH7.0)Tris30.25g,纯水400mL,浓盐酸20mL,冷却至室温后缓慢加入浓盐酸调节PH值到7.0,加纯水定容到500mL,121℃高压灭菌20min,4℃保存。
0.5MEDTA(PH8.0)EDTANa2·2H2O93.06g,纯水400mL,NaOH10g,再用NaOH溶液缓慢调节PH值到8.0,加纯水定容至500mL,121℃高压灭菌20min,4℃保存。
TE缓冲液配方0.5MTris-Cl(PH8.0)10mL,0.5MEDTA(PH8.0)1mL,加纯水定容至500mL,121℃高压灭菌20min,4℃保存。
CTAB抽提液CTAB20g,0.5MTris-Cl(PH8.0)200mL,0.5MEDTA(PH8.0)40mL,NaCl81.8g,加纯水定容至1L,121℃高压灭菌20min,室温保存。
3M醋酸钠(PH5.2)NaAc·3H2O40.8g,纯水70mL,溶解后加入冰醋酸调节pH值至5.2,加纯水定容至100mL,121℃高压灭菌20min,4℃保存。
RNase(10mg/ml)配方RNA酶100mg,TE10mL,沸水浴20min,分装于2mL离心管-20℃保存。
TB3培养基YeastExtract3g,酸水解酪蛋白3g,蔗糖200g,补纯水定容至1L,121℃高压灭菌20min,4℃保存。
马铃薯培养基的制备
马铃薯培养基是一种常用的细菌、真菌、植物细胞、昆虫细胞和动物细胞培养基,以下是马铃薯培养基的制备方法:
材料:
马铃薯200克
石膏20克
酵母提取物1克
蔗糖10克
蒸馏水1L
琼脂15克
步骤:
1. 将马铃薯洗净切成小块,用蒸馏水煮沸30分钟,煮沸过程中加入石膏,每500ml加入10克。
煮沸后过滤,得到20%的马铃薯汁。
2. 将酵母提取物和蔗糖加入马铃薯汁中,用蒸馏水调整至1L后混合均匀。
3. 加入琼脂混合均匀后灭菌。
4. 热液培养:将灭菌后的培养基倒入装有菌落的平底烧杯中,摇晃让培养基均匀包裹住烧杯表面和菌落,待凝固。
5. 固体培养:将灭菌后的培养基倒入无菌培养皿中,待凝固。
注意事项:
1. 灭菌时要充分加热,一般为121℃压力121kpa,时间为20-30分钟。
2. 培养基要在无菌条件下制备,使用前要先用高压蒸汽灭菌。
PDA培养基的配方及配制方法PDA培养基是马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称,即Potato Dextrose Agar (Medium),分别对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文。
它属于固体培养基、半合成培养基.PDA培养基宜于微生物生长发育、节省原料等优势,一般在培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌方面应用广泛.PDA培养基的配方土豆 200g葡萄糖 20g琼脂 15~20g水 1000mLpH值自然PDA培养基的配制(1)称量和熬煮按培养基配方逐一称取去皮土豆。
土豆切成小块放入锅中,加水1000ml,在加热器上加热至沸腾,维持20—30min,用可用2层纱布趁热在量杯上过滤,滤渣弃取。
滤液补充水分到1000ml。
(2)加热溶解把滤液放入锅中,加入葡萄糖20g,琼脂15~20g(提前搞碎),然后放在石棉网上,小火加热,并用玻棒不断搅拌,以防琼脂糊底或溢出,待琼脂完全溶解后,再补充水分至所需量。
(3)分装按实训要求,将配制的培养基分装入试管或500ml三角瓶内。
分装时可用三角漏斗以免使培养基沾在管口或瓶口上造成污染。
分装量:固体培养基约为试管高度的1/5,灭菌后制成斜面,分装入三角瓶内以不超过其容积的一半为宜;半固体培养基以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.(4)加棉塞培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞(或泡沫塑料塞或试管帽等),以阻止外界微生物进入培养基内造成污染,并保证有良好的通气性能。
(5)包扎加塞后,将全部试管用麻绳或橡皮筋捆好,再在棉塞外包一层牛皮纸,以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道线绳或橡皮筋扎好,用记号笔注明培养基名称、组别、配制日期。
36种常用微生物培养基配制汇总微生物培养基是一种用于培养和繁殖微生物的营养介质,通常包含碳源、氮源、无机盐、维生素和辅助物质。
不同微生物对培养基的要求不同,因此配制不同的培养基可以满足不同微生物的需求。
下面是常用的36种微生物培养基的配制方法。
1. Luria-Bertani培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母粉、10g海藻糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
2. 马铃薯葡萄糖培养基:取马铃薯50g,洗净去皮切块,加入1000ml蒸馏水中,煮沸15分钟,过滤得到1000ml的马铃薯汁液,加入20g葡萄糖,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
3.BHIA培养基:取1L蒸馏水,加入37gBHIA粉,调pH至7.2-7.4,加入蒸馏水补足至1L。
4. 番茄汁琼脂培养基:取200ml番茄汁、20g琼脂,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的番茄汁琼脂培养基。
5. Sabouraud培养基:取1L蒸馏水,加入20g葡萄糖、10g蛋白胨、40g沙门氏糖,调pH至5.6-5.8,加入蒸馏水补足至1L。
6.TSB培养基:取1L蒸馏水,加入17gTSB粉,调pH至7.3-7.5,加入蒸馏水补足至1L。
7.LB培养基:取1L蒸馏水,加入10g蛋白胨、5g酵母提取物、10g氯化钠,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
8.爱德华培养基:取1L蒸馏水,加入20g牛肉精、10g酵母提取物、5g胆汁、10g胆石脂、5g葡萄糖,调pH至7.4-7.6,加入蒸馏水补足至1L。
9.VC培养基:取1L蒸馏水,加入10g蔗糖、10g大豆蛋白酸水解物、2g柠檬酸钠、0.1g亚铁氯化物、0.1g亚铜硫酸盐、0.1g亚锰酸盐、0.02g硼酸、0.1g维生素B1、0.02g抗坏血酸,调pH至7.0,加入蒸馏水补足至1L。
10. 铁琼脂培养基:取200ml铁琼脂粉,加入800ml蒸馏水中,煮沸溶解琼脂,过滤得到1L的铁琼脂培养基。