生物胺的检测方法评价
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生物胺液质检测报告
名称:生物胺液(Biogenic Amine Solution)
生产日期:2021年8月15日
生产厂家:ABC化工厂
检测日期:2021年8月18日
检测机构:XYZ检测服务公司
检测结果:
以下数据表示在检测日期的生物胺液样品中的含量(mg/L)。
组胺:0.02
酪胺酸:0.03
苯乙胺:0.01
亚硝酸盐:0.10
总谷氨酸:0.05
备注:
生物胺液是一种含有生物胺化合物的化学品。
生物胺是由微生物代谢的,通常存在于食品和饮料中。
高浓度的生物胺可以导致头痛、呕吐和食物中毒等症状。
因此,规定了针对生物胺液的检测标准及相关限制要求。
检测结果显示,该生物胺液的含胺量符合相关法规要求,达到了安全标准。
鸡肉中生物胺含量的测定标准鸡肉是我们日常生活中经常食用的肉类之一,在鸡肉中生物胺的含量是一个非常重要的指标。
生物胺是一类含有氨基基团的有机碱物质,可以在食物中形成,尤其在蛋白质分解和微生物活动的过程中会产生大量的生物胺。
高含量的生物胺不仅会对食物的质量和安全性产生负面影响,而且还会对人体健康造成潜在的危害。
因此,对鸡肉中生物胺含量的测定标准非常重要。
首先,为了确保鸡肉中生物胺含量的准确测定,需要建立一套科学合理的测定标准。
这个标准应该包括以下几个方面的内容:1.检测方法:测定鸡肉中生物胺含量的方法有很多种,包括高效液相色谱、气相色谱、电化学分析等。
因此,标准中应明确指定使用的检测方法以及操作步骤,以确保结果的准确性和可比性。
2.检测指标:生物胺有许多种类,包括组胺、酪胺、精胺等。
标准中应明确指定需要测定的生物胺种类,并设定相应的检测限和容许范围。
3.样品采集:为了确保测定的准确性,标准中应明确指定鸡肉样品的采集和保存方法。
样品的采集应遵循一定的原则,如随机采样和多点采样,以减少抽样误差。
4.标准曲线和质控:标准中应规定建立标准曲线和质控体系的方法和要求,以确保结果的可重复性和可比性。
标准曲线应该由外部标准品制备,并根据实验室内部条件校准。
5.结果解释与评价:标准中应明确指定生物胺含量的结果解释和评价方法,如限量、健康风险评估等。
这些评价方法应基于科学家对生物胺对人体的危害作用的认识,以确保鸡肉的质量和安全性。
除了以上几个方面的内容,标准中还应明确指出测定的要求,如实验室条件、器材和试剂准备、实验操作流程等,以确保结果的准确性和可比性。
此外,为了使测定结果更具可信度和可靠性,标准还可以包括一些辅助性的内容,如检测设备的验证、实验室质量控制的要求等。
总而言之,鸡肉中生物胺含量的测定标准对于保证食品质量和安全性具有重要意义。
只有建立了科学合理的测定标准,才能保证检测结果的准确和可靠。
这样的测定标准能够为监管部门提供依据,以监控鸡肉质量和安全性,并制定相应的措施来保障消费者的健康。
生物胺BTP-生物胺类物质分析生物胺是一类具有生物活性含氮的低分子量有机化合物的总称。
生物胺按组成成分又可以分为两类:单胺和多胺。
单胺主要有酪胺、组胺、腐胺、尸胺、苯乙胺、色胺等,一定量的单胺类化合物对血管和肌肉有明显的舒张和收缩作用,对精神活动和大脑皮层有重要的调节作用;多胺主要包括精胺和亚精胺,其在生物体的生长过程中能促进DNA、RNA和蛋白质的合成,加速生物体的生长发育。
多胺能够与细胞内的DNA结合,可以作为转译过程中核糖体移码的启动子。
细胞中多胺合成受到抑制时,细胞生长会停止或是严重延迟,外源性的多胺则可以用于恢复这些细胞的生长。
在高速增殖的细胞中,多胺转运系统非常活跃,是一些化疗药物的靶标蛋白。
百泰派克公司建立了以ACQUITY UPLC/TripleQuad5500(Waters/AB Sciex)为主的分析手段,能够实现对多种生物胺物质进行定量及定性分析。
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BTP可检测生物胺类物质。
关于样品血清、血浆、尿液、胆汁、胆酸;细胞、肝脏、脑组织等动物组织及粪便等;植物、酵母、微生物等。
样本需求量:血样、胆汁等:10微升。
各种组织:10毫克。
粪便等:10毫克。
其它样本类型及用量请与百泰派克销售联系。
样品运输:以3-4公斤干冰挥发一天计算,请使用足量的干冰运输(建议尽量选用较大块的干冰,大块的干冰挥发较慢),并用泡沫盒封闭。
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中/英文项目报告在技术报告中,百泰派克会为您提供详细的中英文双语版技术报告,报告包括:1.实验步骤(中英文)。
2.相关的质谱参数(中英文)。
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226中国航班理论与争鸣Theory and contentionCHINA FLIGHTS葡萄酒中生物胺的检测技术夏磊|烟台市产品质量监督检验所摘要:生物胺由前体氨基酸形成,主要通过微生物脱羧作用。
这些化合物的存在在生物学中起着至关重要的作用,因为大量的它们会导致健康问题。
因此,葡萄酒中生物胺的来源、检测和数量对葡萄酒的生产至关重要。
本研究以近5年来的文献为基础,综述了生物胺的分析方法,并从微生物学和生物学因素的角度描述了生物胺的来源,总结了生物胺降解的策略。
本综述中提供的信息对提醒葡萄酒产品的质量不高很重要,需要整个生产链和政府的努力来实现消费者安全。
关键词:生物胺;控制;检测生物胺(BAs)是一类具有生物活性的低分子量有机化合物,通常存在于各种发酵食品(如奶酪、牛奶、啤酒、葡萄酒等)中。
这些低分子氮化合物的形成主要通过四种酶的反应:(1)脱羧,(2)转胺(3)还原胺化和(4)降解。
根据BAs 的结构将其分为三类:脂肪族;芳香族;杂环。
在葡萄酒行业,BAs 的产生是不可避免的。
在葡萄酒生产和贮藏的不同阶段,不同微生物的作用形成了BAs。
在发酵过程中,乳酸乳酸发酵(MLF),即乳酸菌(LAB)将苹果酸转化为乳酸,对脱酸、影响风味的化合物和发酵稳定性有重要影响。
一般认为,在酒精发酵(AF)结束时,BAs 浓度较低,主要在MLF 时升高。
在葡萄酒中起着重要的作用。
不仅因为高水平的BAs 摄入会导致多种人体症状,而且在葡萄酒中发生BAs 也可能导致变质。
为了保证葡萄酒产品的健康安全的储存方法,BAs 的水平可以是一个重要的质量和安全指标。
因此,应努力避免胺的形成,建立快速检测方法并控制其含量。
1 葡萄酒中BAs 的健康风险生物胺被认为是生物体的正常成分,在生物细胞中具有生理功能。
然而,过量摄入会导致多种健康问题,如头痛、脸红、瘙痒、皮肤刺激、呼吸障碍、心率加速、高血压、低血压和呕吐等。
如今,葡萄酒中最具代表性的BAs 是组胺酪胺、和苯乙胺等。
生物胺的检测方法嘿,朋友们!今天咱来聊聊生物胺的检测方法。
你可别小看这生物胺,它在咱们生活中可有着不小的影响呢!想象一下,要是咱吃的食物里生物胺超标了,那可不得了哇!可能会让咱身体不舒服呢。
所以检测生物胺就显得特别重要啦!那怎么检测呢?有一种常见的方法就是高效液相色谱法。
这就好像是一个超级侦探,能把生物胺从一堆东西里精准地找出来。
它通过特殊的柱子和流动相,让生物胺乖乖现形。
是不是很厉害?还有一种方法是酶联免疫吸附法,这就像是一个敏锐的小雷达,能快速捕捉到生物胺的信号。
它利用抗体和抗原的反应,一下子就能察觉到生物胺的存在。
再说气相色谱法,这就如同一个精细的筛选器,把生物胺从复杂的混合物中分离出来进行检测。
那这些方法怎么用呢?这可得好好说道说道。
就拿高效液相色谱法来说吧,得先准备好样品,把它处理得干干净净的,可不能有杂质来捣乱。
然后设置好仪器的参数,让它工作起来。
等结果出来,就能知道生物胺的情况啦。
酶联免疫吸附法呢,得先准备好抗体和试剂,就像给小雷达装上敏锐的“眼睛”。
然后让样品和这些东西反应,最后通过颜色变化或者其他信号来判断生物胺的有无和多少。
气相色谱法也不简单呀,要精确地控制温度和气流,就像给筛选器调整好合适的工作状态。
每种方法都有它的特点和适用范围,咱可得根据实际情况来选择。
就像咱出门穿衣服,得看天气和场合呀,不能随便乱穿不是?检测生物胺可不是一件容易的事儿,需要细心、耐心和专业知识。
这就好像是一场战斗,我们要拿着合适的武器去攻克敌人。
而且检测过程中可不能马虎,一个小失误可能就会让结果不准确。
大家想想,如果因为检测不准确而让有问题的食品流入市场,那会给多少人带来危害呀!所以检测人员可得认真负责,像守护我们健康的卫士一样。
总之,生物胺的检测方法是非常重要的,它们能帮我们把关食品的安全,让我们吃得放心、安心。
咱可不能小瞧了这些方法,它们可是保护我们健康的有力武器呢!希望大家都能了解这些方法,让生活更加美好!。
⽣物胺检测⽅法1. 电化学⽣物传感器法电化学⽣物传感器法是⾷品中⽣物胺的⼀种初步筛选⽅法,主要是将酶、细胞、组织、抗体、抗原等⽣物活性物质作为分⼦识别固定在电极表⾯,利⽤⽣物分⼦之间的特异性作⽤将⽬标分⼦捕获,再通过换能器将浓度信号转换为电信号,从⽽实现物质的定性定量分析。
电化学⽣物传感器具有操作简单,专⼀性强等特点,但所需酶成本⾼、难保存且不可重复使⽤。
2. 薄层⾊谱(TLC)法TLC⼜称薄层层析法,是⼀种微量、简单、快速的检测⽅法,常⽤于分析挥发性⼩或⾼温下易发⽣化学变化的物质。
薄层⾊谱法对设备要求不⾼,成本低,操作简单,可⽤于⾷品中⽣物胺的定性和半定量分析。
3. ⽑细管电泳(CE)法CE⼜称⾼效⽑细管电泳法,是⼀种新型液相分离技术。
按分离原理的不同,CE可分为⽑细管区带电泳、⽑细管凝胶电泳、⽑细管等电电泳、⽑细管等速电泳以及胶束电动⼒学⽑细管电泳,其中,⽑细管区带电泳和胶束电动⼒学⽑细管电泳常⽤于⽣物胺检测,⽽且只有⽑细管区带电泳⽆需衍⽣化,直接对⽣物胺进⾏检测分析。
⽑细管电泳法具有操作简单、进样量少、分离速度快、灵敏度⾼等特点,但其重现性和检出限都不如⾼效液相⾊谱(HPLC)。
4. ⽓质联⽤(GC-MS)法GC-MS由⽓相⾊谱结合质谱检测器组成,适⽤于⼩分⼦、易挥发、热稳定、能⽓化的化合物。
⽓质联⽤法具有灵敏度⾼、准确度⾼、重现性好等特点,可同时检测多种⽣物胺的含量。
5. ⾼效液相⾊谱(HPLC)法HPLC是⽬前⽣物胺检测最常⽤的⽅法。
由于⽣物胺的紫外吸收低且不能发射荧光,因此需对⽣物胺进⾏柱前或柱后衍⽣化处理,再使⽤HPLC检测,其中柱前衍⽣⽐柱后衍⽣使⽤更普遍。
⽣物胺HPLC检测的常⽤检测器包括荧光检测器、⼆极管阵列检测器、紫外检测器、质谱检测器等。
迪信泰检测平台采⽤⾼效液相⾊谱(HPLC)与不同检测器(荧光检测器、⼆极管阵列检测器、紫外检测器、质谱检测器)结合的⽅法,可⾼效、精准地实现腐胺、⼫胺、⾊胺、精胺、亚精胺等多种⽣物胺的检测。
生物胺实验报告简介生物胺是一类含有胺基的有机化合物,广泛存在于自然界中的生物体内,包括人类和动物体内。
它们在生命活动过程中发挥着重要的生理调节作用,但也会在一些情况下引起健康问题。
为了准确检测生物胺的含量,本实验利用了高效液相色谱法(HPLC)来分析和测定样品中生物胺的含量。
本报告旨在介绍实验的目的、材料和方法、结果和讨论等内容。
实验目的1.掌握高效液相色谱法(HPLC)的基本原理和操作流程;2.了解生物胺的检测方法和意义;3.实际操作并熟悉HPLC仪器;4.测量样品中生物胺的含量。
材料和方法材料•HPLC仪器•高性能液相色谱柱•生物胺标准溶液•样品(如食品、生物样本等)•甲醇•去离子水方法1.样品准备:–将样品加入适量的甲醇中,并进行均匀混合。
注意样品的浓度应适当,过低浓度可能导致检测结果不准确。
–使用0.45微米的滤膜过滤样品,以去除悬浮物和杂质。
–将样品溶液保存在冰箱中,以防止生物胺的降解。
2.仪器准备:–打开HPLC仪器,并将高性能液相色谱柱按照仪器操作手册连接到系统中。
–注入足够的去离子水和甲醇来稳定HPLC系统的流动相。
–调整和校准HPLC仪器的流速、柱温等参数。
3.样品进样:–使用微量注射器取一定体积的标准溶液,进样到HPLC仪器中进行测试,并记录峰面积。
–重复上述操作,对样品进行进样,并记录样品峰面积。
4.计算结果:–利用样品的峰面积值与标准曲线之间的关系,可计算出样品中生物胺的含量。
结果和讨论本次实验使用HPLC分析了多个样品中生物胺的含量,结果如下表所示:样品编号生物胺1含量(mg/L)生物胺2含量(mg/L)样品1 10.5 5.2样品2 12.8 8.9样品3 9.3 6.7从实验结果可以看出,不同样品中生物胺的含量是不同的。
这表明生物胺的含量在不同样品中存在差异,可能与样品来源及处理方法有关。
此外,通过与标准溶液的对比,我们可以进一步了解样品中生物胺的绝对含量,从而评估其安全性和质量。
微生物发酵铵离子检测方法
1. 离子选择电极法,这是一种常用的铵离子检测方法,通过测量铵离子浓度与电极电位的关系来确定铵离子的浓度。
这种方法操作简单,灵敏度高,可以实时监测铵离子的变化。
2. 分光光度法,分光光度法是通过测量溶液中铵离子与某种试剂形成的复合物的吸光度来确定铵离子的浓度。
这种方法需要使用特定的试剂,操作相对复杂,但具有较高的准确性和灵敏度。
3. 色谱法,色谱法是通过色谱仪分离并测定样品中的铵离子。
这种方法需要专门的色谱设备,操作较为繁琐,但可以实现对铵离子的高效分离和定量分析。
4. 生物传感器法,生物传感器是一种利用生物材料(如酶、细胞等)对目标物质进行特异性识别并转化为可测信号的装置。
可以利用特定的微生物或酶来构建铵离子生物传感器,实现对铵离子的高灵敏检测。
需要根据具体的实验条件和要求选择合适的方法进行微生物发酵铵离子的检测。
同时,还需要注意样品的预处理、仪器的精确操
作以及数据的准确分析,以确保获得可靠的检测结果。
希望以上信息能够对你有所帮助。
2007年第4期12月出版浅谈食品中生物胺的检测方法Discussiononbiogenicaminedeterminationmethodinfood张微1李秀缺1陆容2于爱华31(河北省产品质量监督检验院,石家庄050051)2(保定味群食品工业有限公司,保定071000)3(中国方圆标志委员会河北审核中心,石家庄050051)*张微,女,1976年出生,河北农业大学食品科技学院在读硕士,工程师。
收稿日期:2007-08-24摘要生物胺是一种低分子量的有机物,主要是通过氨基酸的脱羧作用生成。
他广泛存在于发酵香肠、泡菜、干酪、酸奶等发酵食品中,人体摄入过量的生物胺会引起过敏反应,严重的还会危及生命。
另外,食品中生物胺含量与食品质量具有一定的相关性。
通过对近年来食品生物胺的检测方法进行了综述,重点介绍了高效液相色谱、毛细管电泳和薄层色谱等方法的特点及其在食品生物胺测定中的应用。
关键词生物胺高效液相色谱毛细管电泳薄层色谱AbstractThebiogenicamineisonekindoflowmolecularweightorganicmatter,mainlyisescapesthefunctionproductionthroughtheaminoacidItwidelyexiststofermentationfoodandsooninfermentationsausage,pickledvegetable,cheese,yogurtThehumanbodytakesintheexcessivebiogenicaminetobeabletocauseallergicreaction,isseriousalsocanendangerlife.Moreover,infoodthebiogenicaminecontentandfoodqualityhavethecertainrelevance.Thisarticlehascarriedonthesummarytotherecentyearsfoodbiogenicamineexaminationmethod.Introducedwithemphasisthehighlyeffectiveliquidchromatography,thecapillaryvesselelectricityswimswithmethodtheandsoonthinlayerchromatographchar-acteristicanditsinfoodbiogenicaminedeterminationap-plication.KeywordsBiogenicamineHighlyeffectiveliquidch-romatographyThecapillaryvesselelectricityswimsThinlayerchromatograph生物胺根据其结构可分为三类:脂肪族,包括腐胺、尸胺、精胺、亚精胺等,他们是生物活性细胞必不可少的组成部分,在调节核酸与蛋白质的合成及生物膜稳定性方面起着重要作用;芳香族,包括酪胺、苯乙胺等;杂环胺,包括组胺、色胺等。
生物胺的检测方法评价导读生物胺是一类含氮低分子化合物,对动植物和微生物有重要的生理作用。
适量的生物胺有助于人体正常的生理功能,过量则会引起不良的生理反应。
目前国内外食品中的生物胺的检测主要采用液相色谱,一般仅是组胺检测。
实际上许多食品中还含有其它的生物胺(腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、色胺、尸胺、苯乙胺、章鱼胺),且其存在会对组胺的毒性有协同作用。
因此,多组分生物胺的同时检测对于食品的安全和水产品出口有着重要的意义。
本文对国内外比较常见的生物胺检测方法作了叙述和比较。
Appraisal of Biogenic Amines DeterminationLiu Chen-qi Ding Zhuo-ping* Wang Xi-chang(College of Food Science and Technology, Shanghai Fisheries University 200090)Abstract: Biogenic amines are aliphatic, alicyclic or heterocyclic organic bases of low molecular mass, which arise as a consequence of metabolic processes in animal, plants and microorganisms. They can also cause unnatural or toxic effects when they are consumed in large amounts. A high performance liquid chromatographic method is described as the main method of determining biogenic amines in food, especially histamine. There are also many biogenic amines to be determined, such as: tryptamine, octopamine, phenylethylamine, putrescine, cadaverine, tyramine, spermidine, and spermine. So it is meaningful and worthwhile for aquatic products export and food safety that different kinds of biogenic amines can be determined together. In this article, the different determination methods of biogenic amines are introduced and compared .Key words: biogenic amines; determination of biogenic amines; food safety1 引言生物胺是一类含氮的低分子量有机化合物的总称。
生物胺的检测方法评价刘辰麒 丁卓平* 王锡昌(上海水产大学食品学院 上海 200090)E-mail: zpding@ 摘 要 生物胺是一类含氮低分子化合物,对动植物和微生物有重要的生理作用。
适量的生物胺有助于人体正常的生理功能,过量则会引起不良的生理反应。
目前国内外食品中的生物胺的检测主要采用液相色谱,一般仅是组胺检测。
实际上许多食品中还含有其它的生物胺(腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、色胺、尸胺、苯乙胺、章鱼胺),且其存在会对组胺的毒性有协同作用。
因此,多组分生物胺的同时检测对于食品的安全和水产品出口有着重要的意义。
本文对国内外比较常见的生物胺检测方法作了叙述和比较。
关键词 生物胺;生物胺检测;食品安全中图分类号 O657.72;O623.731Appraisal of Biogenic Amines DeterminationLiu Chenqi, Ding Zhuoping*, Wang Xichang(College of Food Science and Technology, Shanghai Fisheries University, Shanghai 200090, China)Abstract Biogenic amines are aliphatic, alicyclic or heterocyclic organic bases of low molecular mass, which arise as a consequence of metabolic processes in animal, plants and microorganisms. They can also cause unnatural or toxic effects when they are consumed in large amounts. A high performance liquid chromatographic method is described as the main method of determining biogenic amines in food, especially histamine. There are also many biogenic amines to be determined,such as: tryptamine, octopamine, phenylethylamine, putrescine, cadaverine, tyramine, spermidine, and spermine. So it is meaningful and worthwhile for aquatic products export and food safety that different kinds of biogenic amines can be deter-mined together. In this article, the different determination methods of biogenic amines are introduced and compared.Key words Biogenic amines; determination of biogenic amines; food safety收稿日期:2006-05-09基金资助:上海市重点学科建设项目( 编号:T1102); 上海科委标准专项 (编号:04DZ05018)。
作者简介:刘辰麒(1982-), 硕士研究生,研究方向:食品安全与营养。
*通信作者:丁卓平(1957-), 副教授。
1 引 言生物胺是一类含氮的低分子量有机化合物的总称。
根据结构可以把生物胺分成3类:脂肪族:腐胺、尸胺、精胺、亚精胺等;芳香族:酪胺、苯乙胺等;杂环族:组胺、色胺等。
1.1 生理作用各种动植物的组织中都含有少量的生物胺,也普遍存在于多种食品和酒、饮料中。
生物胺不仅是生成荷尔蒙、核酸、蛋白质的前体,也是生成致癌物质的前体。
少量的生物胺对人体有益,如儿茶胺、组胺等能调节神经活动,控制血压;苯乙胺和酪胺有升压作用。
过量摄入则会引起中毒。
1.2 生物胺引起的食品安全和水产品出口问题生物胺中组胺对人类的健康的影响最大,其次是酪胺。
摄入8~40mg 组胺产生轻微中毒症状,超过40mg 产生中等中毒症状,超过100mg 产生严重中毒症状。
酪胺超过l00mg 会引起偏头痛。
当食品中生物胺含量达到1000mg ·kg -1时会对人体健康造成极大的危害。
除了组胺、酪胺本身的作用外,其他生物胺的存在会增强组胺和酪胺的不良作用。
因此,很难确定一个标准来衡量生物胺的毒性。
美国FDA 通过对爆发组胺中毒的大量数据的研究,确定食品中组胺的危害作用水平为:500mg ·kg -1;欧盟规定鲭科鱼类中组胺含量不得超过100 mg ·kg -1,其他食品中组胺不得超过100mg ·kg -1,酪胺不得超过100~800mg ·kg -1;我国规定鲐鱼中组胺不得超过1000mg ·kg -1,其他海水鱼不得超过300 mg ·kg -1[1]。
我国水产品出口企业如没有重视生物胺的检测,出口产品易遭罚没,而造成严重的经济损失。
2 生物胺检测方法胺的分析方法包括HPLC 、TLC 和酶联免疫分析等。
组胺等生物胺含有-NH 2能形成氢键,所以常用的方法是HPLC-FLD 、HPLC-UV 。
国内没有同时测定多种生物胺(8种以上)的检测方法。
2.1 国内文献有关生物胺的测定方法[2]采用高效液相色谱法,以1,6-己二胺为内标,测定柿子中的精胺、亚精胺、尸胺和腐胺。
样品经丹磺酰氯衍生,硅胶柱净化,Lichrosorb NH2柱(5μm,200mm ×4.0mm)分离后,以氯仿:乙酸乙酯:三乙胺(98.4:1.5: 0.1)为流动相,流速为1.5mL·min-1,荧光检测器检测。
激发波长为336nm,发射波长为495nm,精胺、亚精胺、尸胺和腐胺的线性相关系数均大于0.99,其回收率分别为98.99%、94.02%、96.46%和105.44%。
生物胺定量检测限1-5mg·kg-1。
2.2 国外文献有关生物胺的测定方法2.2.1 7-氟-4-硝基苯并二唑(NBD)柱前衍生/毛细液相色谱-串联质谱法测定生物胺[3]生物胺包括色胺、组胺和胍丁胺,进行衍生反应后,在毛细柱(20m*0.25mm C8 5μm)上分离,选择电喷雾离子化,碰撞诱导解离(CID)得到特征的子离子。
胍丁胺是一种潜在的神经递质。
胍丁胺的检测限为0.6ng·mL-1 (信噪比=3),在15-1000ng·mL-1浓度范围内,线性相关系数为0.9997。
此方法优点是能准确地定性定量,但对仪器要求较高,经济性和普及性都不好,测定的胺种类较少。
2.2.2 丹酰氯(Dansyl chloride)柱前衍生高效液相色谱法测定生物胺[4-5]HPLC检测香肠中的色胺,苯乙胺,腐胺,尸胺,组胺,5-羟基色胺,酪胺,亚精胺和精胺。
用高氯酸处理、丹酰氯衍生后,用氨水去除尸胺附近的干扰峰。
C18反相色谱柱梯度分离,流动相为乙腈:甲醇:水:乙酸=43:30: 26:1。
紫外检测器(λ=254nm),流速为1.0mL·min-1,该方法对于单个胺的检测限是1-5mg·kg-1。
线性相关系数都要大于0.9999。
丹酰氯衍生法是一种简单,可靠,实用的方法,选用微波反应系统能大量缩短实验时间,衍生产物稳定。
2.2.3 苯甲酰氯(benzoyl chloride)柱前衍生高效液相色谱法测定生物胺[6-7]以苯甲酰氯为柱前衍生剂,用HPLC检测生物胺是一种快速,灵敏的方法。
最佳衍生条件:30℃,40min;线性范围在0.02-4μm之间。
用6%的三氯乙酸处理。
梯度洗脱(在4min内,甲醇:水=55:45到80:20),C18柱分离,紫外检测器检测(254nm),流速为1.0mL·min-1。
该方法的主要特点与丹酰氯衍生法类似,产物稳定,实验简便。
但衍生时间长,样品中其它杂质能与苯甲酰氯反应形成干扰峰。
在前处理中使用固相萃取,以及调节好流动相极性对于分离杂质峰与生物胺是非常关键的。
2.2.4 邻苯二醛(o-phthalaldehyde) 柱后衍生高效液相色谱法测定生物胺[8-9]邻苯二醛(OPA)作为一种常用的柱后衍生剂,其特点衍生反应快,但产物不稳定易分解,先通过乙酸乙酯把生物胺从样品中萃取出来,C18反相色谱柱分离,梯度洗脱(在15min内,0.08mol·L-1醋酸:甲醇:乙酸胺=52: 45:3到0:100:0),OPA柱后衍生,荧光检测器(入射波长=340nm,发射波长=440nm)进行检测。
其检测限在100-300μm·L-1之间,线性范围为0.5-15mg·L-1,柱温:40℃。
流速为1.0mL·min-1。
此方法特点是快速、灵敏、产物不稳定易分解,柱后衍生还需要添置柱后衍生装置,在实验室条件允许的情况下可选用这种方法。
2.2.5 荧光胺(fluorescamine)柱后衍生高效液相色谱法测定生物胺[8]根据国外文献报道,荧光胺曾用来检测酒中的生物胺。
取样加pH=8.0的硼酸缓冲溶液,充分混匀,C18反相色谱柱分离,梯度洗脱(在20min内,0.08 mol·L-1醋酸:甲醇:乙酸胺=48:46:6到0:100:0),荧光胺(浓度为0.5mg·mL-1)柱后衍生,用荧光检测器检测(入射波长=395nm,发射波长=460nm)。
流速为1.0mL·min-1。
该方法分离检测8种单氨基胺的混合标准品耗时不过30min。
但在衍生过程中双氨基或多氨基的生物胺会产生多个吸收峰,对分离产生影响,因此检测的胺种类少,有一定局限性。
荧光胺法的特点是快速、灵敏,与邻苯二醛法类似,但产物不稳定,需添置额外柱后衍生装置。
3 结 论国内外检测方法都以HPLC,衍生剂以丹酰氯和苯甲酰氯等柱前衍生剂居多,其特点是简便、快速、灵敏、稳定,能同时处理大量样品,用 HPLC紫外检测器,是值得推广的检测方法。
荧光胺和OPA作为柱后衍生剂,特点是快速、灵敏度更高,但产物不稳定,分解快,需要使用柱后衍生装置和荧光检测器,根据报道荧光胺多用在测定酒类中的生物胺,分离测定食品种类有限。
7-氟-4-硝基苯并二唑(NBD)柱前衍生/毛细液相色谱-串联质谱法测定生物胺也是一种可靠、灵敏的方法,但要使用到LC-MS/MS,作为一种日常的检测的方法不大合适。