淀粉含量的测定方法

谷物中淀粉含量的测定

本方法参考GB/T5009.9-2008《食品中淀粉的测定》的第二法酸水解法。

适用范围：本方法适用于谷物原料中淀粉含量的测定。

原理：试样经除去脂肪及可溶性糖类后，其中淀粉用酸水解成具有还原性的糖，然后按还原糖测定，并折算成淀粉。

方法一

1 试剂和材料

1.1 酒石酸铜甲液：34.639g CuSO4溶于水，加入0.5mL浓H2SO4，稀释到500mL；

酒石酸铜乙液：173g酒石酸钾钠，加50g NaOH，稀释到500mL；

1.2 氢氧化钠溶液：c(NaOH)=1mol/L；

1.3 硫酸铁溶液：50g/L（称取50g硫酸铁，加入200mL水后，慢慢加入100mL硫酸，冷后加入稀释至1000mL）；

1.4 高锰酸钾标准滴定溶液：c(1/5KMnO4)=0.1mol/L；

1.5 乙醇溶液：85% v/v；

1.6 HCL：1+1和1+3；

1.7 NaOH溶液：40%；

1.8 乙酸铅溶液：20%；

1.9 硫酸钠：10%。

2 仪器设备

2.1粉碎磨：粉碎样品，使其完全通过孔径0.45mm（40目）筛。

2.2锥形瓶：250mL。 2.3回流冷凝装置：能与250mL锥形瓶瓶口相匹配。

3操作步骤

称取样品(粉碎过40目筛)2.0g～5.0g，准确至0.0002g，置于放有慢速滤纸的漏斗中，用50mL石油醚分5次洗去样品中脂肪，再用150mL85%乙醇溶液分数次洗涤残渣，以除去可溶性糖类物质，滤干乙醇溶液，将滤纸连同残渣一并转移至250mL锥形瓶中。

加100mL水、30mL(1+1)HCl，在沸水浴上回流2h，回流完毕后，立即在流水中冷却，待样品水解液冷却完全后，加2滴甲基红指示剂，先用NaOH溶液（400g/L）调至黄色，再用(1+1)的HCl调至水解液刚变红色。若水解液颜色较深，可用pH试纸测试，使试样水解液的pH值约为7，然后加20mL的乙酸铅溶液（200g/L），摇匀，放置10min，再加20mL的硫酸钠溶液(100g/L)，以除去过多的铅。摇匀后，将全部溶液及滤渣转入500mL容量瓶中，用水洗涤锥形瓶，洗液合并于容量瓶中，定容，摇匀，过滤，弃去初滤液20mL，滤液供测定用。

碘显色法测定烟叶淀粉含量

实验原理：

为了快速准确地测定烟草中的淀粉含量，借鉴食品中淀粉的测定，建立了碘显色法测定烟样中淀粉含量的方法。即在600nm处测定淀粉一碘反应液的吸光度，再根据淀粉标准曲线计算出烟草中的淀粉含量。

实验仪器和试剂：

仪器：分光光度计、电子天平

试剂：可溶性淀粉（标样）、碘和碘化钾（AR)、蒸馏水

实验方法：

一、溶液配制

1 碘-碘化钾溶液：精确称取0.5000gI2和5.000gKI于烧杯中，用蒸馏水溶解后转入到250mL容量瓶中，定容。

2 淀粉标准储备液：精确称取0.1500g直链淀粉和0.6000g支链淀粉于烧杯中，用沸水完全溶解、冷却后，分别转入500mL容量瓶中，定容摇匀后各取30mL移入到同一个100mL容量瓶中，定容后得到了淀粉混合标准溶液。

3 40％高氯酸溶液：市售的高氯酸如果要配置精确就必须先标定下它的具体浓度，这个浓度是质量分数的。 如果要求不精确就可以用70%做为它的浓度了，然后进行稀释就好了。

4 80%乙醇-氯化钠饱和溶液：加入过量的氯化钠于80%的乙醇中，超声搅拌溶解后，直到溶液里还有没有溶解的氯化钠或者有氯化钠析出，此时转移上清液即可。

二、标准曲线的制作

分别移取淀粉混合标准工作液0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.O ml置于50ml容量瓶中，加入5ml 40％高氯酸溶液，用蒸馏水定容，再取10ml定容后的溶液加1ml碘一碘化钾溶液使其显色，选定600nm为吸光波长，利用分光光度计检测。根据所测数值作出淀粉的标准曲线。其中x代表溶液中的溶液质量(单位为mg)，Y代表吸光度值，R2=0.999要在以上。

三、样品测定

准确称取磨碎的烟叶(过40目筛)O.2000g置于具塞三角瓶中，加入25

mL 80％的乙醇-氯化钠饱和溶液，50℃条件下振荡20min后过滤，再向滤渣中加入10 mL 40％高氯酸溶液，室温下振荡25 min，然后加入10 mL蒸馏水过滤，并将滤液置于100 mL容量瓶中，定容摇匀后即成待测液。取10ml待测液加1 mL碘-碘化钾溶液使其显色，在600 nm测定吸光度，然后从工作曲线上查出对应的含量。

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实验六 （红薯/马玲薯/黄地瓜等淀粉块茎类植物）中淀粉含量测定（酸水解法）

综合设计（4学时）

一、实验原理

1、淀粉提取，也称为浆渣分离或分离，是淀粉加工中的关键环节，直接影响到淀粉提取率和淀粉质量。粉碎后的物料是细小的纤维，体积大于淀粉颗粒，膨胀系数也大于淀粉颗粒，比重又轻于淀粉颗粒, 将粉碎后的物料，以水为介质，使淀粉和纤维分离开来。

2、淀粉是食品中主要的组成部分，也是植物种子中重要的贮藏性多糖。淀粉跟稀硫酸在加热的条件下能够完全水解成葡萄糖、麦芽糖等还原糖。还原糖的测定是糖定量测定的基本方法。还原糖在碱性条件下被氧化成糖酸及其他产物，3，5-二硝基水杨酸则被还原成棕红色的3-氨基-5硝基水杨酸。在一定范围内，还原糖的量与棕红色物质的深浅成正比关系，利用分光光度计，在540nm 波长下测定光密度值，查对标准曲线。由于淀粉完全水解成还原糖的量是成正比的，所以，也与棕红色物质的深浅成正比关系。

二、材料、仪器与试剂

（一）材料：五指山红薯。

（二）仪器：分光光度计722、小台秤、分析天平、烧杯（100mL）、研钵、容量瓶（100mL）、洗瓶、漏斗、滤纸、具塞刻度试管（15mL）、恒温水浴、移液管（1mL, 2mL）。

（三）试剂

1 2mol/L NaOH 溶液

准确称取4g NaOH固体，溶于15 mL蒸馏水中，并倒入50ml容量瓶中，用蒸馏水分几次清洗烧杯并将清洗的溶液倒入容量瓶中，用蒸馏水定容至刻度线。

2 3，5-二硝基水杨酸试剂

准确称取3，5-二硝基水杨酸1g，溶于2mol/L NaOH 溶液20mL，加入50mL蒸馏水，再加入30g酒石酸钾钠，待溶解后用蒸馏水定容至100mL。盖紧瓶塞，勿让CO2进入。若溶液浑浊，可过滤后使用。

3 0.1mol/L柠檬酸缓冲液（pH5.6）

A液（0.1mol/L柠檬酸）：称取C6H8O7٠H2O 21.01g，用蒸馏水溶解并定容至1000mL。

淀粉和纤维素含量的测定

一、淀粉含量的测定(旋光法)

(一)实验目的

1.熟习旋光仪的使用方法。

2.了解旋光仪测定淀粉的原理并掌握其具体方法。

(二)实验原理

淀粉(starch)是植物的主要能量贮藏物质，主要存在于种子、块根和块茎中。淀粉不仅是重要的营养物质，并且在工业上的应用也很广泛。

将磨细的含淀粉样品与酸性氯化钙溶液共煮，可使样品中淀粉轻度水解，同时由于钙离子与淀粉分子上的羟基络合，使淀粉分子充分地分散到溶液中，成为淀粉溶液。淀粉分子具有不对称碳原子，因而具有旋光性，利用旋光仪测定淀粉溶胶的旋光度(α)，旋光度的大小与淀粉的浓度成正比，据此可以求出淀粉含量。

应注意的是，酸性氯化钙溶液必须保持pH 值2.30，密度1.30，加时间的长短也要控制在一定范围，以保证各种不同来源的淀粉溶液的比旋度［α］恒定不变(20℃)。样品中其他旋光性物质(如糖分)必须预先除去。

(三)仪器、原料和试剂

仪器

植物样品粉碎机、离心机、分析天平；粗天平、旋光仪及附件、三角瓶、分样筛(100目)、布氏漏斗、抽滤瓶及真空泵、离心管、小电炉。

原料

面粉或其他风干样品

试剂

1. 醋酸—氯化钙溶液：

500g 氯化钙溶于600mL 蒸馏水中，过滤至澄清，用比重计在20℃条件下调节比重 1.3左右，再滴加冰乙酸调pH 为

2.3。

2. 30％ZnSO4溶液

3. 15％K4Fe(CN)溶液

(四)操作步骤

1.样品准备

(1)称样脱脂：将样品风干、研磨，通过100目筛，精确称取约2.5g 样品细粉(要求含

淀粉约2g)，置于离心管内，加乙醚数mL 到离心管内，用细玻棒充分搅拌，离心，倾出上清液，再加入乙醚如此操作数次，以去除样品的大部分油脂、色素等成分(因油脂的的存在会使以后淀粉溶液的过滤困难)。

收集上清液以备回收乙醚。大多数谷物样品含脂肪较少，可免去这个脱脂手续。

(2)抑制酶活性：加含有氯化高汞的乙醇溶液10mL 到离心管内，充分搅拌，然后离心，