实验三 离体肠段平滑肌的自动节律性活动与影响因素观察
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大学学生实验报告
开课学院及实验室:生科院生化楼603 2015年3月
[实验目得]
观察缺氧、低温、肾上腺素、乙酰胆碱等因素对消化道平滑肌活动得影响。
[实验原理]ﻫ消化道平滑肌生理特点为兴奋性较低;收缩缓慢;富有伸展性;具有紧张性;自动节律性;对化学物质、温度及机械刺激敏感、
[实验对象]兔子
[实验器材与药品]ﻫ1.器材生物信号采集系统、张力换能器(10g)、手术器械1
套、试管夹、双凹夹、台氏液、恒温浴槽、改良麦氏浴槽等等。
ﻫ2、药品2%氯化钙、1:10 000肾上腺素、1,10 000乙酰胆碱等。
[实验步骤]ﻫ1离体小肠得制备
2.观察项目ﻫ(1)记录小肠在仅有台氏液时得收缩曲线,观察小肠收缩曲线得变化,作为正常对照。
(2)停止供氧1—8分钟,观察记录小肠收缩曲线得变化。
ﻫ(3)吸去管内得台氏液,换以等量低温台氏液,观察并记录心跳小肠收缩曲线得变化。
(4)等量台氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入2%Cacl1—2滴,记录观察小肠收缩曲线得变化。
(5)等量台氏液换洗,待心跳恢复正常后,加入加入1:l0000肾上腺素1~2滴,记录观察小肠收缩曲线得变化。
(6)等量台氏液换洗,待心跳恢复正常后,先加入l:10 000乙酰胆碱1~2滴,后加入阿托品1~2滴,记录并观察小肠收缩曲线得变化。
[实验结果分析]
结果:改变离体小肠所处得内环境,观察小肠活动,发现小肠收缩得节律、幅度就会发生相应得改变。
当停止给小肠所处得台氏液供氧时,小肠节律下降了9、35%,振幅下降了36.2%,基线先上升后下降;用低温台氏液置换时,节律下降了42。
5%,振幅也下降了65、4%,基线不变;用2%CaCl2滴加时,节律上升了12、5%,振幅下降29。
2%,基线不变;滴加Adr时,节律上升了62。
5%,振幅下降了84。
4%,基线下降;先用ACh滴加时,小肠收缩处在强直收缩,基线上升,发生改变后,立即用阿托品滴加时,节律上升了5、9%,振幅下降了45、7%,基线不变、(结果见表1)
表1。
离子及药物对离体小肠收缩活动得影响
“-”表示下降,“+”表示上升
实验项目缺氧低温2%CaCl2Adr ACh 阿托品
节律变化(%)-9。
35-42。
5+12、5-25.0 ——+5、9
振幅变化(%) -36。
2 -65。
4 -29。
2 —84.4 ——-45、7
基线变化先上升后下降先上升后下降不变下降上升不变
分析:
1、正常肠段收缩曲线
有一定规律。
2、缺氧
当停止供氧1-8分钟时,节律与振幅均有下降,这就是因为缺氧时,有关有氧呼吸无法进行,导致产生ATP量减少;但在缺氧得瞬间,小肠收缩曲线会上升,这就是由于小肠对自身生理活动得反应需要。
3、置换低温台氏液
降低温度时,酶得活性下降,导致代谢作用减弱,兴奋性也下降,小肠收缩减弱,即振幅减弱,且两者变化很大,说明小肠得收缩活动对温度敏感。
在改变温度得瞬间,基线上升,这就是由于小肠对所处内环境得突变所产生得生理反应、
4、滴加2%CaCl2溶液3滴
加入CaCl2后,小肠节律变化略加强、理论上,细胞外Ca2+浓度增加后,会使得小肠平滑肌兴奋性加强,收缩加强,但所得到得实验结果就是振幅减弱,可能就是因为所加入得钙离子浓度过低、
5、滴加0、01%Adr溶液
滴加肾上腺素后,小肠收缩得节律与振幅均减弱,基线下降,这就是由于肾上腺素对乙酰胆碱得释放具有抑制作用。
6、先滴加0.01%ACh溶液 ,变化后立即滴加阿托品
理论上,滴加乙酰胆碱时,小肠收缩得节律与振幅均加强、但就是,所测得得结果就是小肠一直处在强直收缩状态,基线上升,这就是由于滴加得乙酰胆碱得量太多。
当立即滴加阿托品后,小肠收缩得节律加强,振幅减弱,这就是由于阿托品就是乙酰胆碱得拮抗剂,对乙酰胆碱有抑制作用。
附
图1正常条件下,小肠收缩活动(25s/Div)
图2缺氧对小肠收缩活动得影响(25s/Div)
图3 低温对小肠收缩活动得影响(25s/Div)
图4 2%CaCl2对小肠收缩活动得影响(25s/Div) 图5 肾上腺素对小肠收缩活动得影响(25s/Div)
图6 Ach及阿托品对小肠收缩活动得影响(25s/Div)。