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中药血清药理学方法的研究进展陈宁;宋冬雪;凌娜;徐昶儒【摘要】目的:阐述中药血清药理学在中医药基础研究中的进展,探讨如何确立最佳实验方案,为中药复方药理作用研究提供科学可靠的实验方法.方法:通过查阅文献,主要从血清药理学方法中的实验动物、给药途径、剂量、方案、采血时间、血清灭活与保存、血清添加量和对照组的设立等方面进行阐述.结果:随着血清药理学研究方法的不断细化和完善,使中药及其复方这种复杂药物的研究具备更强的可信性和科学性.但是该方法实验技术的操作方法尚待规范,同时,其在注重研究药效的基础上也应该对血清中的有效成分进行分析.结论:中药血清药理学在抗肿瘤、心血管、免疫、消化系统等方面都得到充分应用,如对其缺陷加以改进,定能为中药研究的发展探索出一系列新的科学方法.【期刊名称】《北京联合大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2014(028)001【总页数】4页(P40-43)【关键词】血清;体外实验;中药复方;实验方法【作者】陈宁;宋冬雪;凌娜;徐昶儒【作者单位】哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,哈尔滨 150076;国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨150076;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,哈尔滨 150076;国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨150076;黑龙江省农业科学院信息中心,哈尔滨 150086;哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心,哈尔滨 150076;国家教育部抗肿瘤天然药物工程研究中心,哈尔滨150076【正文语种】中文【中图分类】R285长期以来，中药药效的研究一直都是用体外实验结果代表药物的体内药效，存在一定的偏差和不确定性。
由于中药的化学成分较为复杂，包括有效成分和一些其他成分，如果将中药直接加入体外系统，会使其渗透压、酸碱度等理化因素发生改变而影响实验结果。
另一方面，由于体内肝脏的代谢酶系统对药物的代谢以及胃肠道菌群对药物中各种成分吸收程度的差异，都会导致中药体外实验结果与体内实验结果不一致，无法完全再现药物在体内的表现，难以反映实验研究的可靠性、客观性和精确性。
中药血清药物化学研究进展中药血清药物化学是通过口服给药后，对血中移行成分进行鉴定分析，从而快速筛选药效物质基础及揭示复方配伍规律的有效方法。
在近20年的发展中，得到了众多学者的认可及普遍应用。
随着血清药物化学和血清药理学、药代动力学、代谢组学、网络药理学、系统生物学等学科的交叉融合，其在沟通药物体内外变化、药物之间的相互作用、药物与机体之间的相互作用等方面体现出了较强的优越性，契合了中药配伍使用、多成分、多靶点、多种作用机制的复杂性。
该文通过查阅2013—2016年CNKI Scholar 和Pubmed 2个数据库中与中药血清药物化学相关的文献，对有关的研究成果进行了统计分析，并对血清药物化学研究中供试样品制备、实验动物选择、给药方案确定、取血方式和时间、血样制备和处理、血中移行成分分析等关键技术难题及多种解决方法进行了经验性归纳，同时，展望了中药血清药物化学的拓展及综合应用，以期为该方法在中医药研究中更好的应用奠定基础。
标签：血清药物化学；血中移行成分；药效物质基础；中药复方Research progress of serum pharmacochemistry of traditional Chinese medicineMA Feixiang，XUE Peifeng*，WANG Yuanyuan，WANG Yinuo，XUE Shuyuan（College of Pharmacy，Inner Mongolia Medical University，Hohhot 010110，China）[Abstract] Serum pharmacochemistry of traditional Chinese medicine（TCM）is an effective method to rapidly screen the effective substances and reveal the compatibility law of compound by identification and analysis of constituents migrating to blood after oral administration. In the last two decades，it has been universally accepted and widely applied in the field. With the crossfusion with other disciplines，such as serum pharmacology，pharmacokinetics，metabolomics，network pharmacology and systems biology，serum pharmacochemistry shows comprehensive superiority in explaining drug changes in vivo and in vitro，interactions between drugs，interactions between drug and body，which coincides with the complexity of TCM compatibility，multicomponents，multitargets and multimechanisms. Based on the references related with the serum pharmacochemistry from CNKI scholar and Pubmed in 2013—2016，the research results of serum pharmacochemistry were statistically analyzed，and the key technical problems during the study of serum pharmacochemistry，for example，preparation of test sample，selection of experimental animal，determination of drug delivery scheme，method and time of the adoption blood，preparation and pretreatment of blood sample，as well as analysis of constituents migrating to blood，and the solving ways were empirically introduced. In addition，the development and comprehensiveapplication of serum pharmacochemistry in TCM were summarized in this paper，hoping to lay a foundation for the further application of this method in TCM research.[Key words] serum pharmacochemistry；constituents migrating to blood；effective substances；Chinese medicine compound中藥是在中医理论指导下用于预防、治疗疾病或调节人体机能的药物。
中药血清药理学、血清药物化学的研究概况及展望
中药血清药理学和血清药物化学是研究中药在体内的药效和代谢过程的重要分支领域。
随着中药的广泛应用和临床需求的增加，中药血清药理学和血清药物化学的研究变得越来越重要。
本文将对中药血清药理学和血清药物化学的研究现状进行综述，并展望其未来的发展。
中药的复杂性和多样性使其在体内的药效和代谢过程十分复杂，因此中药血清药理学和血清药物化学的研究难度很大。
目前，研究人员主要通过体内和体外实验，结合分析技术，来探究中药在体内的药效和代谢过程。
中药血清药理学的研究主要包括药代动力学、药效学和药效动力学等方面。
其中，药代动力学研究中药在体内的吸收、分布、代谢和排泄等过程，药效学研究中药的药理活性和作用机制，药效动力学则探究中药在体内的作用时间和剂量效应关系等。
中药血清药物化学的研究则主要关注中药在体内的代谢和转化过程。
研究人员通过体内和体外实验，结合质谱技术和核磁共振技术等分析工具，对中药中的活性成分和其代谢产物进行分析和鉴定，以揭示中药在体内的代谢途径和代谢产物的结构特征。
展望未来，中药血清药理学和血清药物化学的研究将继续发展，且趋势将更加多样化和复杂化。
研究人员将进一步探索中药在体内的药效和代谢过程，以更好地指导中药的临床应用和开发。
同时，新的技术手段将被引入到中药血清药理学和血清药物化学的研
究中，以提高研究的效率和准确性。
例如，基于人工智能和机器学习的中药分析方法将被逐渐发展和应用。
中药血清药理学、血清药物化学的研究概况及展望
中药血清药理学和血清药物化学是目前研究中药药效和药物代
谢与排泄的热门领域。
中药血清药理学主要研究中药在体内的药效及其作用机制，而血清药物化学则研究血清对中药代谢产物的影响及其与药物的相互作用。
这两个领域的研究对于深入了解中药的药效和药代动力学具有重要意义。
在中药血清药理学方面，研究人员通过对中药在体内的药效和作用机制进行探究，为中药的临床应用提供了科学依据。
例如，通过对中药在体内的药代动力学和药效学进行研究，可以确定中药的最佳用药剂量和用药时间，以提高治疗效果和减少不良反应。
此外，中药血清药理学还可以为中药的新药研发提供重要参考。
在血清药物化学方面，研究人员主要探究血清对中药代谢产物的影响及其与药物的相互作用。
这些研究可以帮助我们更好地理解中药代谢途径和药物代谢动力学，为中药相互作用和药效调控提供科学依据。
此外，血清药物化学研究还可以为中药的新药研发提供重要参考。
总之，中药血清药理学和血清药物化学研究的不断深入，将为中药的临床应用和新药研发提供更加可靠的科学基础。
未来，我们可以期待更多的研究成果的涌现，推动中药研究向着更高的水平迈进。
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中药含药血清药理研究方法Pharmacological method of the drug-contained serum for Chinese Materia Medica in vitro概述中药血清药理研究方法：是指动物灌胃给予中药及制剂，经吸收进入机体血液循环，在一定时间采取血液，分离所得血清，必定含有一定量的该药物成分，此时的血药浓度反映了机体的真实血药浓度，以此血清加入到体外细胞培养体系，观察其药理作用的体外实验方法。
中药血清药理学研究方法的意义：1、采取的含药物血清与机体环境相一致且排除了中药制剂的各种影响因素（如pH，渗透压等），将其加入到体外细胞培养体系，观察其药理作用，具有更好的科学性，可行性；同时，使中药的研究易于深入到细胞分子水平，对于创建中药细胞分子药理学研究具有重要的促进作用。
2、于灌胃给药后不同时间采取的血清，其体外药理实验的效应及其变化，可以反映机体真实的血药浓度及其变化，无疑开创了对于许多成分不明或复方中药制剂药动学研究的一种新方法。
3、如采用中药血清药理学方法进行中药药效学研究时，同时分析测定血清中药物成分的含量，具有极强的针对性，可避免盲目地筛选药物有效成分的繁重工作，使中药药效与中药成分的研究更能协调一致。
从1988年日本学者田代真一正式提出了“血清药理学”这一新概念，至今已有十余年时间。
其研究主要经历了三个阶段：1、可行性探索研究2、方法学研究3、应用研究阶段。
可行性探索研究以含药血清进行体外的药效学试验，早在上世纪五十年代国即有所探索，自田代真一提出“血清药理学”的概念以后，重新引起了学术界的广泛关注。
国学者对其进行了广泛的可行性探索研究。
一.抗菌、抗病毒的实验研究奎等应用中药血清药理方法进行了中药体外抗菌实验，发现黄芩、藿香正气水、藿香正气液的血清分别具有明显的抑菌作用，抑制率高达70％以上。
该研究发现一些含中药血清相对于正常血清表现为促进细菌繁殖作用，表明一些中药可以降低机体抗御外邪的能力。
湖一南中医药大学学报２００７年６月第２７卷第３期７８ＪｏｕｍａｌｏｆＴＣＭＵｎｉｖ．０ｆＨ衄ａｎＪＩＩｌｌ．２００７Ｖ０１．２７Ｎｏ．３血清药理学方法在中药研究中的进展王国佐指导葛金文（湖南中医药大学，湖南长沙４１０００７）（摘要】血清药理学是指用含有药物成分的血清施加于体外实验反应体系的一种半体内实验方法。
目前已经广泛运用于对中药复方的药理作用乖作用机理的探讨。
本文论述了血清药理学方法研究的现状及进展，并结合作者的思路。
对中药药理学的研究进行展望。
［关键词］血清药理学；中药研究；半体内实验；评价；展望【中图分类号）Ｒ２８４．１［文献标识码］Ａ［文章编号］１０００一５６３３（２００７）０３—００７８－０３血清药理学是日本学者硪ｍｋｏ１ｗ锄ａ脚在１９８４年第一届和汉医药学会上首次提出的。
１９８８年，日本国东京都医院的田代真一曲正式提出了“血清药理学”的概念。
它是指将中药或中药复方经口给动物灌服一定时间后采集动物血液，分离血清。
用含有药物成分的血清进行体外实验的一种半体内实验方法。
１９９０年以后。
血清药理学开始在我国受到从事中药研究人员的关注。
该方法主要针对中药及其复方复杂多样的化学成分特点，用含药血清代替煎剂或粗提物进行体外实验，它克服了中药粗制剂直接进行体外实验的缺点，其结果的可信度明显优于中药粗制剂直接用于体外实验。
而且它结合了现代化学、微生物学、分子生物学、药理、临床等学科，血清药理研究方法不断地被应用于一些中药及西药的药理学研究，并取得了一定的进展。
本文就血清药理学在我国的研究进展、应用、评价及研究展望做一综述。
ｌ血清药理学的产生随着中药复方药理研究的逐步深入，要求研究者把研究水平提高到细胞、亚细胞甚至分子水平，不少科研需要在离体实验中进行。
离体试验的开展，使中药复方的研究必须借助一个载体。
１９８４年。
在第一届和汉医药学会上，日本学者Ｈｉｍｋｏ１ｗ岫ａ提出了给动物灌服中药，在一定的时间里，用含药血清代替煎剂或粗提物进行体外实验的设想。
其后，日本国立京都医院的田代真一。
又于１９８８年和１９９２年两次撰文，提出了“血清药理学”和“血清药化学”的概念（见图１），自此有关中药血清药理学的研究逐步展开。
图１血清药理学与血清药化学示意图［收稿日期）２００７一０３—０６［作者简介】王国佐（１９７８一），男，助教，在读硕士研究生，主要从事中西医结合基础研究． 万方数据第３期’王国佐。
等血清药理学方法在中药研究中的进展７９２血清药理学在我国的研究现状２．１血清药理学的时效关系研究利用含药血清来评价药效，何时能够采集到含药量较高的血清．找出给药后的最佳采血时间以避免由于药效物质代谢消耗或尚未吸收造成的假阴性结果，是非常重要的问题。
由于血清中确切的药效成分并不清楚，因此往往以药效指标来评判给药时间和采血时间的优劣，即“时效关系”的研究。
研究者们对不同给药时间和采血时间的药效进行了研究。
给药时间上，目前常用的方法有：１次给药，或间隔２４ｈ给药，或每天１—３次，连续３—１０ｄ。
王宁生口认为，根据药动学理论，固定给药时间的间隔，相同剂量多次重复给药后，血浆药物浓度达到稳态浓度。
并将在此浓度下不同采血时间取得的含药血清进行实验，均表现较高且相似的药理作用强度。
孟李等吲对复方丹参血清对中性粒细胞释放活性氧的影响进行研究，探讨含药血清制备方法的实验，也证实了此观点。
说明同一给药方案连续数日给药较１次给药有明显差异。
可能与药物诱导机体产生内源性生物活性物质有关嘲。
此结论目前已形成共识。
采血时间上。
较理想的采血时间应在血药浓度的高峰期。
蒙一纯等瞅为。
根据实验动物消化生理特点和中药吸收、生物转化特点确定采血时间范围是十分合理的。
如大鼠一般ｌ一２ｈ可达血药浓度峰值，此时血清即为含药血清；时间延长将有部分药物成分发生转化，成为药物代谢血清。
一般采血时间多集中在末次给药后．３０ｍｉｌｌ至３ｈ问。
由于中药复方给药后，不同药物达峰时间不同，故对于采血时间很难有统一标准。
如周明眉等川发现。
头风饮给药后３０ｍｉｎ的抑制血小板释放５一Ｈｒ比给药后其它时间作用强大，提出给药后３０ｌｌｌｉｎ为最佳采血时间。
李仪奎田通过对９６个药物达峰时间统计后提出药后１—２ｈ采血较为合理。
包金风等研认为应对不同时间分别采血进行预实验，将不同时问的含药血清进行比较后再确定采血时间是最可靠和科学的方法。
但是，李仪奎等在对大量的中药药物代谢动力学参数进行分析后．提出一种通行的方案，即每天给药２次，连续３ｄ，末次给药后１ｈ采血，称为“通法”㈣。
这有利于节约财力、人力和时间。
２．２血清药理学的量效关系研究给药剂量目前尚无定论．其量的大小主要取决于：一是动物的给药量，在一定程度上。
给药量愈大则血清中的含药量愈高；二是培养体系或反应体系中的含药血清浓度，血清浓度愈高则药量愈大。
但因含药血清加入体外反应体系后，浓度被稀释，使反应体系药物浓度达不到在体条件下的药物浓度。
王力倩等Ｉｌ－睫出用给药剂量等于临床用量乘以动物等体表面积系数、再乘以培养基内血清稀释度的公式计算制备含药血清的给药剂量较为合理。
研究表明，含药血清的量效是由动物给药量和血清浓度共同决定的。
由于培养体系中血清浓度的增减是有限的ｆ血清浓度过高会对细胞产生毒性作用。
在研究含药血清抑制细胞增殖或促细胞凋亡作用时。
有可能得出假阳性结果）。
杨彦芳等ｎ啾为应以临床等效剂量为基准，注意药物浓度，对于过高剂量（如临床等效剂量的５倍、１０倍）所得到的阳性结果，在作结论时应慎重或留有余地。
故相对固定含药血清浓度，通过改变动物给药量来调整药物血清的含药量，是一种较为现实的方法。
３血清药理学实验方法在我国科学研究中的应用３．１血清药理学实验方法在中药新药研制中的应用目前，中药的开发和研制主要是寻找药物的有效成分或有效部位、制备精炼的中药制剂、提高临床疗效和降低毒副作用。
血清药理学实验方法的建立，使这一目的的实现变得更为切实可行。
主要表现在以下几个方面：①在体外药理学实验中，进一步验证和评价药物的疗效，运用含药血清对有效药物和／或药物的有效成分进行初步筛选；②血清药理学与血清药化学、中药分析化学、中药药动学。
尤其是中药胃肠药动学、中药血清药动学、中药证治药动学等相结合，将有利于药物有效成分或部位的寻找和鉴定；③对药物的制剂工艺进行比较和筛选；④对药物的作用机理做更深入的研究。
３．２血清药理学在方剂药动学（ＰＫ）的应用黄席等将证治方剂药动学中的复方方剂药动学修正为复方效应成分动力学假说【瑚。
其方剂血清靶成分也是探索复方的药效成分物质基础的１１棚。
不仅如此，还研究靶成分在机体内的药时曲线、数学模型，其ＰＫ参数可直接指导临床用药，进行治疗药物监测ｃＩＤ聊，从而有力地提高疗效，因此是单纯方剂药效物质基础探索的深入和发展。
而血清药理学【巧研究过程是服用方剂后进行含药血清的体外药效学实验．通过探讨与方剂疗效相关的成分间接地阐明药效物质。
３．３血清药理学方法在肿瘤研究中的应用离体实验是研究中药抗肿瘤机理的重要方法之一。
对于抗肿瘤复方中药来说，在其配伍的多种中药的血清中的有效成分的定量分析检测尚未见突破性的进展情况下．血清药理学方法是抗肿瘤复方研究的一条行之有效的途径。
目前，此法被广泛用于中药抗肿瘤机理研究。
研究层面包括肿瘤细胞增殖与细胞周期的调节、肿瘤细胞凋亡及分化的诱导、肿瘤细胞基因表达及端粒酶活性调控等方面。
３．４血清药理学方法在神经药理学研究中的应用神经系统疾病的药物研究涉及到许多的体外模型。
运用这些模型有助于快速、高效地筛选出治疗疾病的药物。
合理使用血清药理学方法，结合疾病的体外模型。
可以帮助我们对中药复方进行分析，可较好地反映中药药效。
４对血清药理学实验方法的评价４．１血清药理学的优势血清药理学因其方法学上的特点使其在中医学的研究中已显示出一定的优势：①从中药复方本身来讲。
可克服体外实验不能直接观察到的复方经体内胃肠吸收、生物转化后的综合整体药理效应；②从方法学上解决了中药复方直接应用于离体实验的难点。
使中医药研究能在离体实验中直接与分子生物学技术相结合，从而推动中医药现代化的进程；③对含药 万方数据湖南中医药大学学报２００７年第２７器血清的成分进行药效、药动学研究并与原复方粗提物进行比较，可以发现中药复方发挥药效作用的物质基础，为探讨中药复方作用规律提供新思路；④可以用来验证一些中医学的基础理论。
如君臣佐使、中药配伍理论及一些中医基础理论的实际价值。
有助于为中医理论的现代化研究提供依据。
４．２血清药理研究方法存在的不足４．２．１在血清药理研究方法的理论依据方面：该方法建立的理论依据不足主要包括：①从胃肠吸收的中药有效成分在体内是进入血浆，而非血清；②凝血过程有一系列酶生成，同时刺激白细胞释放溶酶，这些酶可能降解某些中药成分；③凝血酶刺激血小板与白细胞释放大量生物活性物质；（多凝血过程伴有纤溶、补体、激肽等系统活化；⑤制备与灭活血清过程会导致中药成分与中药介导体内释放物质损失。
使用ＨＰＬＣ—ＭＳ指纹图谱分析与抗白血病细胞增殖实验表明利用血清药理方法可能带来错误结论。
应加强中药多层次半体内实验研究。
其中血浆药理方法可能能避免血清药理方法的弊病【ｌｑ。
４．２．２在血清供体动物的选择方面：按照血清药理学的初衷，为较准确地再现在体实验的整个过程，离体组织（细胞）的供体动物和含药血清的供体动物须有同质性。
除在种属、年龄、性别、体质量等方面外。
供体动物是否造模即是否处于相同的生理病理状态也是不容忽视的影响因素：①不同生理、病理状态对血清中含药成分的影响。
科学家们进行了多项比较性研究。
揭示出在不同生理、病理或遗传背景的基础上，不同人群对同一种药物的药代动力学参数有不同的特点；②不同证型对药物浓度影响。
樊亚萱等ｎ嘬据中医辨证论治理论提出的证治药动学假说。
认为：同一药物不同“证”的药代动力学参数经统计学处理有显著差别。
明显影响药物疗效和毒性反应，经用辨证施治后，差别可消失或减轻。
４．２．３在动物病理模型的制备方面：大多数血清药理学研究者均采用正常动物的含药血清。
但是，中药复方进入生理状态下动物机体与进入病理状态下的动物。
其体内过程是不完全一致的。
其消化吸收，体内分布，生物转化及排泄均可能有差异．也可能产生不同的内源性活性成分。
如果研究的是方药的治疗效应，有学者认为，应当采用相应的动物病理模型制备含药血清，会有较强的说服力ｆｌ羽。
４．２．４在中药作用机理方面：中药作用机理十分复杂。
绝大部分的实验结果均揭示出中药含药血清具有一定的药效，但也有一些研究结果是非常有趣味。
例如某些中药的粗提物无效，而其含药血清却有效；而另一些中药粗提物有效，但其含药血清却无效。
这些实验结果从一个侧面提示，某些中药是原药成分起作用，而有些中药则可能是其药物成分在机体作用下形成的代谢产物或药物的多种成分相互作用后产生的新的生理活性物质在起作用。
