大鼠总胆固醇(TC)ELISA试剂盒说明书

总胆固醇（total cholesterol，TC）含量测定试剂盒说明书分光光度法50管/48样注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：TC包括游离胆固醇和胆固醇酯。

TC是指组织中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。

测定原理：利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇（FC）和游离脂肪酸（FFA），从而把胆固醇酯转化为FC；进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化，生成△4-胆甾烯酮和H2O2；最后利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚，生成红色醌类化合物；在500nm有特征吸收峰，其颜色深浅与TC含量成正比。

自备仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、异丙醇和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：异丙醇50mL（自备）。

试剂二：液体50mL×1瓶，4℃保存；试剂三：粉剂×1瓶，4℃保存；试剂四：液体100μL×1瓶，4℃保存TC标准品：液体1mL×1支，0.5μmol/mL，4℃保存。

TC的提取：1、组织中TC的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g 4℃离心10min，取上清，即TC待测液。

2、细胞、细菌中TC的提取：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），即TC待测液。

3、血清（浆）等样品：直接测定。

测定操作：1. 分光光度计预热30 min，调节波长到500 nm，蒸馏水调零。

2. TC工作液的配制：临用前，吸取约0.8mL试剂二分别加入试剂三和试剂四瓶中，充分溶解后再全部转移回试剂二瓶中，充分混匀，TC工作液置于37℃水浴10min。

用不完的工作液4℃保存一周。

3. 标准管：依次在1mL玻璃比色皿中加入100μL FC标准液和900μL TC工作液，混匀，37℃静置3h后于500nm测定A标准管。

第1篇一、实验目的本次实验旨在通过血液检测，了解受试者的血胆固醇水平，分析其胆固醇组成，并探讨血胆固醇水平与个体健康状况之间的关系。

二、实验原理胆固醇是人体内一种重要的脂质，分为高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）两种。

HDL-C被称作“好胆固醇”，对心血管有保护作用；而LDL-C被称作“坏胆固醇”，长期偏高会增加心血管疾病的风险。

本次实验采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定受试者的血胆固醇水平。

三、实验材料1. 试剂：胆固醇测定试剂盒（ELISA法）、标准品、酶联反应板、洗涤液、底物、终止液、显色剂等。

2. 仪器：酶标仪、移液器、微量加样器、振荡器等。

3. 样品：受试者空腹静脉血。

四、实验方法1. 样品处理：将受试者空腹静脉血采集后，按照试剂盒说明书要求，分离血清。

2. 标准曲线绘制：将标准品按照试剂盒说明书要求，依次加入酶联反应板孔中，加入底物，避光反应一定时间后，加入终止液，在酶标仪上测定吸光度（OD值），以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 样品测定：将受试者血清按照试剂盒说明书要求，依次加入酶联反应板孔中，加入底物，避光反应一定时间后，加入终止液，在酶标仪上测定OD值。

4. 结果计算：根据标准曲线，计算受试者的血胆固醇水平。

五、实验结果1. 标准曲线：以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线，线性回归方程为：Y=0.065X-0.013，相关系数R²=0.998。

2. 受试者血胆固醇水平：受试者A的血胆固醇水平为5.2mmol/L，其中HDL-C为1.5mmol/L，LDL-C为3.7mmol/L；受试者B的血胆固醇水平为6.8mmol/L，其中HDL-C为1.8mmol/L，LDL-C为5.0mmol/L。

六、分析与讨论1. 实验结果显示，受试者A的血胆固醇水平为5.2mmol/L，属于正常范围；受试者B的血胆固醇水平为6.8mmol/L，属于偏高范围。

卵磷脂软胶囊对大鼠血脂功能的影响摘要：目的：探讨卵磷脂软胶囊对大鼠血脂功能的影响。

方法：经口给予模型大鼠每日0.20g/kgBW、0.40g/kgBW、1.20g/kgBW不同剂量的卵磷脂软胶囊30d 后，测定各组大鼠血清总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇。

结果：与模型组比较，该受试物在0.40g/kgBW组能降低高血脂模型大鼠血清中总胆固醇含量（P＜0.05）；在1.20g/kgBW组能降低高血脂模型大鼠血清中总胆固醇含量（P＜0.05）、能降低血清甘油三酯含量（P＜0.01）、能降低血清低密度脂蛋白胆固醇的含量（P＜0.01），受试物对各剂量大鼠血清高密度脂蛋白胆固醇无影响，对大鼠体重增长无不良影响。

结论：卵磷脂软胶囊具有辅助降血脂功能。

卵磷脂是1844年法国人高布利第一次从蛋黄中分离出含有氯及磷的脂肪混合物，并以希腊文命名为Lecithoes即卵磷脂。

20世纪30年代又在大豆油脂加工后的副产物中发现了大豆卵磷脂。

卵磷脂具有乳化性、分散性，是一种纯天然的表面活性剂，在食品、化工、医药等行业具有广泛的用途【1】。

随着我国居民膳食结构的改变，动物性食物摄入比例增加，植物性食物的摄入量相对减少，导致高血脂症患病人数不断上升，高脂血症是诱发动脉粥样硬化及多种心脑血管疾病的重要危险因素，因此，合理有效的预防、控制高脂血症有重要意义。

本研究通过大豆卵磷脂对大鼠血脂指标的影响，为有效预防高血脂症提供科学依据，并对大豆卵磷脂的开发利用提供理论依据。

1.材料与方法1.1样品卵磷脂软胶囊：主要原料大豆卵磷脂、大豆油（其中大豆卵磷脂占比25%），规格1.2g/粒。

人体推荐量每日4.8g/60kgBW。

1.2实验动物选用中国食品药品检定研究院[许可证号：SCXK-(京）2009-0017]繁殖的健康SPF级雄性大鼠共60只。

高脂饲料和维持饲料由北京华阜康生物科技股份有限公司提供。

1.3剂量实验设人体推荐量的2.5倍、5倍、15倍，即每日0.20g/kgBW、0.40g/kgBW、1.20g/kgBW为低、中、高剂量组。

大豆卵磷脂软胶囊辅助降血脂动物实验研究摘要：目的探讨大豆卵磷脂软胶囊对高血脂大鼠的降血脂作用。

方法：健康SPF雄性SD大鼠共60只，分为5组，空白对照组给予基础饲料，其余各组给予高脂饲料喂养，13天后按照总胆固醇水平分组为模型对照组和低、中、高三个剂量组。

各剂量组给予不同剂量的大豆卵磷脂软胶囊内容物，模型对照组和空白组给予等体积的玉米油，31天后观察大鼠体重及血脂水平的变化。

结果：模型对照组大鼠血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、体重显著高于空白对照组，差异均有统计学差异（P＜0.05），模型成立。

与模型对照组比较，高剂量给药组血清总胆固醇、血清甘油三酯含量和血清低密度脂蛋白含量显著降低（P＜0.05），各剂量血清高密度脂蛋白含量无显著性差异（P＞0.05）。

结论：大豆卵磷脂软胶囊通过降低血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）达到辅助降血脂的作用。

1引言高血脂症是一种常见的疾病，系人体脂代谢失常所致。

主要指血清中总胆固醇、甘油三酯和低密度脂蛋白水平过高或高密度脂蛋白水平过低。

高血脂症早期没有明显的临床症状。

它对身体的损害是隐匿性、渐行性的，而且是全身性的。

高血脂可以加速动脉粥样硬化。

一旦动脉堵塞，就会引起很多疾病。

如心脑血管疾病、肾脏疾病、肝脏疾病等。

心脑血管疾病是中老年人致死的主要原因，是威胁人类健康的头号杀手。

据世界卫生组织统计每年大约有1700万人死于这种慢性疾病，占全球总死亡人数的30%左右。

影响人体血脂水平的因素主要有遗传因素和环境因素。

遗传因素的影响是有限的，主要是环境因素的影响。

影响人体血脂水平的环境因素主要有：（1）高胆固醇、高饱和脂肪酸饮食。

当人体进食大量的饱和脂肪酸及高胆固醇，会使血液中胆固醇和甘油三酯的含量过高，形成高血脂症。

（2）高糖饮食。

进食糖量的比例过高，会引起血糖升高，刺激胰岛素分泌增加，出现高胰岛素血症。

高脂血症大鼠模型几种造模方法的筛选及优化孙赫;梁桂洪;林勇凯;黄宇新【摘要】To filter an ideal method which can build hyperlipidemia rat model out of different modeling methods,we divided 40 rats stochastically as the blank group,the model Group Ⅰ,the model Group Ⅱ, and the model Group Ⅲ,and there were 10 rats in each group.Except the blank group,three different modeling methods were used to build Hyperlipidemia rat models in the other three model groups.GroupⅠ:high fat diet;Group Ⅱ:normal diet respectively with intragastric administrati onof fat emulsion;model Group Ⅲ:before intragastric administration of fat emulsion the same as model group Ⅱ,give an intraper-itoneal injection of vitamin D3 60 000 U/kg.We took the orbital venous plexus blood of all the rats both at the end of 1,3 and 5 weeks during the models,then detected the seral levels of TC,TG,HDL-C ,LDL-C, SOD,MDA,NO and MPO,and detected the levels of body weight and the liver index of the rats in each group.The results showed that the rats Group Ⅱ and model Group Ⅲ became hyperlipoidemic and the model of hyperlipidemia was formed pared with model Group Ⅰ and Group Ⅱ,the model-ing cycle of model group Ⅲ was significantly reduced,which saved the cost of the experiment,and was more stable.This study revealed that Group Ⅲ it is an ideal method of building hyperlipidemia rat model.%通过几种具有代表性的造模方法诱导高脂血症大鼠模型，观察实验性高脂血症模型大鼠血清SOD 活性、MPO、NO 和 MDA 含量水平，筛选出理想的高脂血症造模方法。

总胆固醇测定试剂盒－TC （CHOD-PAP 法）说明书通用名称：总胆固醇测定试剂盒（CHOD-PAP 法）包装规格：单一试剂：4×40mL 单一试剂：5×60mL 单一试剂：2×100mL预期用途本试剂用于体外定量测定人体血清中总胆固醇的含量。

血清中TC 水平升高是冠心病的主要危险因素之一。

病理状态下，高TC 有原发与继发两类。

原发的如家族性高胆固醇血症、家族性APOB 缺陷症、混合性高脂蛋白血症。

继发的见于肾病综合征、甲状腺功能减退、糖尿病等。

〔1〕临床测定总胆固醇用于冠心病、糖尿病等的辅助诊断。

检验原理脂化的胆固醇经酯酶水解成游离胆固醇，游离胆固醇与胆固醇氧化酶、过氧化物酶、4-氨基安替比林、对羟基苯甲酸反应，生成红色的敖合物。

该敖合物颜色的深浅与血清中的总胆固醇的含量成正比。

通过与同样处理的标准液比较即可求出血清中的总胆固醇的含量。

主要组成成份缓冲液100mmol/L CHO（胆固醇氧化酶）≥1KU LPL（酯酶）≥1.5KU POD（过氧化物酶）≥35KU 4-AA（4-氨基安替比林）0.5mmol/L 对羟基苯甲酸3mmol/L 表面活性剂2%注：不同批号试剂盒中各组分未经试验不可互换。

储存条件及有效期试剂原包装2～8℃储存，有效期为18个月。

开口后的试剂在试剂仓中可稳定30天。

适用仪器日立7020、东芝-40，7600，迈瑞300、奥林巴斯AU400、东软400、7170、AU640、贝克曼LX20全自动生化分析仪。

样本要求样本应为新鲜、不溶血血清。

在2℃～8℃可存放30天。

检验方法使用全自动生化分析仪时基本参数及操作：测定温度37℃波长520nm 吸光度范围0-2A 比色杯光径 1.0cm 试剂用量300μL 样本用量3μL 测试模式终点法测定时间300秒操作流程图：试剂：300µl 标本：3µl520nm 测定0秒300秒计算方法样本浓度校准品浓度（校准）样本）=⨯A A (校准品及质控品本产品使用朗道公司的校准品、质控品已进行了性能验证。