抗原抗体结合的影响因素
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一、抗原抗体反应的基本原理:Ag与Ab的特异性结合是基于Ag决定簇与超变区分子间的结构互补性和亲和性。
二、Ag与Ab结合力有四种:静电引力,范德华力,氢键结合力,疏水作用力四种结合力的强弱。
疏水>氢键>静电>范德华力三、Ag与Ab反应特点:特异性,比例性,可逆性。
沉淀反应曲线的意义:曲线的高峰部分是AgAb分子比例合适的范围,称为AgAb的等价带。
在此范围内结合充分,沉淀物形成快而多。
当ab过量时称为前带,反之后带。
四、影响AgAb反应因素,主要有两方面,一、反应物自身因素。
环境因素,电解质,ph,温度。
五、佐剂:与Ag一起或预先注入机体内,可增强机体对该Ag免疫应答能力或改变应答类型的物质。
六、单克隆抗体:由一个B细胞克隆产生的,只能识别某一个抗原表位的高度特异性Ab称为单克隆抗体七、Ch50试验:即补体50%溶血试验,是根据补体能使致敏的SRBC发生溶血的原理而建立起测定补体活性的试验,该试验以50%溶血作为终点指标,因此称为ch50试验。
八、超敏反应:是指机体对某些抗原初次应答致敏后,再次接触相同抗原刺激时,所出现的一种以生理功能紊乱和组织细胞损伤为主的异常免疫应答。
九、M蛋白:单克隆免疫球蛋白,是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序十分均一的异常单克隆免疫球蛋白;多见于多发性骨髓瘤、巨秋蛋白血症和恶性淋巴瘤,故命名为M蛋白。
十、AID:自身免疫性疾病:当机体免疫系统受某些内因、外因或遗传等因素作用产生针对自身正常或变性的自身抗原发生免疫应答,导致自身组织器官损伤或功能障碍所致的疾病称自身免疫性疾病。
十一、TAA:肿瘤相关抗原,非肿瘤细胞所特有的抗原成分,也少量存在于正常细胞,但是在肿瘤发生的机体可异常表达。
十二、GVHR:移植物抗宿主反应,由于移植物中的大量免疫活性细胞,受体免疫功能低下,供受体之间MHC抗原不符等引起杀伤宿主靶细胞的现象。
十三、包被:特异性抗原或抗体充分反应,形成固相抗体/载体复合物的过程。
简述抗原抗体反应的基本特点与影响因素抗原抗体反应是指在机体内,抗原与抗体结合形成抗原抗体复合物,从而触发免疫反应。
这种反应具有以下基本特点:1. 特异性:抗原抗体反应是高度特异的,即抗体只能与其所识别的特定抗原结合。
抗体通过其特异性的抗原结合位点与抗原结合,形成稳定的抗原抗体复合物。
2. 亲和力:抗体与抗原结合的亲和力直接影响抗原抗体反应的强度和稳定性。
亲和力越高,抗体与抗原结合越紧密,反应越强烈。
亲和力的高低取决于抗体的结构和抗原的特性。
3. 反应动力学:抗原抗体反应具有动态平衡的特点。
在反应初期,抗原与抗体结合的速率很快,但随着反应进行,反应速率逐渐下降,最终达到平衡。
平衡时,抗原抗体复合物的浓度达到一定的稳定值。
4. 反应强度:抗原抗体反应的强度取决于抗原和抗体的浓度。
当抗原浓度较低时,抗体与抗原结合的机会减少,反应弱;当抗原浓度较高时,抗体与抗原结合的机会增加,反应强。
5. 反应平台:抗原抗体反应的最佳pH和温度范围称为反应平台。
不同抗原抗体对反应平台的要求不同,有些在酸性环境中反应较强,有些在碱性环境中反应较强。
6. 影响因素:抗原抗体反应的强度受多种因素影响。
其中包括抗原和抗体的浓度、亲和力、结构、特异性,以及反应环境的pH、温度等。
此外,还有其他因素如反应时间、离子浓度、抗体的同种异种等也会对反应产生影响。
抗原抗体反应的特点和影响因素对于免疫学的研究和临床诊断有着重要意义。
抗原抗体反应的特异性使其成为检测和诊断疾病的重要手段。
通过设计特异性抗体,可以检测和鉴定特定抗原的存在与浓度变化,从而实现疾病的早期诊断和治疗监测。
抗原抗体反应的亲和力和反应动力学特性使其成为制备特定抗体和药物的重要手段。
通过调节抗原和抗体的结构和亲和力,可以提高抗体的亲和力和稳定性,从而更好地应用于药物研发和治疗。
了解抗原抗体反应的影响因素,可以优化反应条件,提高反应效率和特异性。
例如,调节反应的pH和温度,可以提高抗原抗体反应的效果;调节抗原和抗体的浓度,可以控制反应的强度和特异性。
转载某理工大学讲义,如果有更新的研究文章更好,呵呵第一节抗原抗体反应的原理抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇(表位)与抗体超变区的沟槽分子表面的结构互性与亲合性而结合的。
一、抗原抗体的结合力抗原抗体间结合为非共价键结合,有四种分子间引力参与。
(1)静电引力:是抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相互吸引的力。
又称为库伦引力。
这种引力的大小与两电荷间的距离的平方成反比。
两个电荷距离越近,静电引力越强。
(2)范登华引力:是抗原与抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作用时,因两者电子云中的偶极摆动而产生吸引力。
能促使抗原抗体相互结合,这种引力的能量小于静电引力。
(3)氢键结合力:是抗体上亲水基团与相应抗原彼此接近时,相互间可形成氢键,使抗原抗体相互结合。
氢键结合力较范登华引力强。
(4)疏水作用力:是抗原表位与抗体超变区靠近时,相互间正、负极性消失,亲水层也立即失去,排斥了两者之间的水分子,使抗原抗体进一步相互吸引,促进其结合。
疏水作用力是这些力中最强的,对维系抗原抗体结合作用最大。
二、抗原抗体的亲合性和亲合力亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适应而存在的引力,它是抗原抗体之间固有的结合力,可用平衡常数K 来表示:K=K1/K2,K 值越大,亲合性越高;亲合性越高,与抗原结合越牢。
抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度,与抗体结合价直接相关,即所谓多价优势,如IgG 为两价,亲合力为单价的103倍,IgM 为5~10 价,亲合力为单价的107倍。
由于抗原抗体的结合反应是可逆的,若抗体的亲合力高,与抗原分子结合牢固,不易解离;反之即容易解离。
三、亲水胶体转化为疏水胶体大多数抗原为蛋白质,抗体是球蛋白,它们溶解在水中皆为胶体溶液,不会发生自然沉淀。
这种亲水胶体的形成机制是因蛋白质含有大量的氨基和羧基残基,在溶液中这些残基带有电荷,由于静电作用,在蛋白质分子周围出现了带相反电荷的电子云并形成了水化层,由于电荷的相斥,就避免了蛋白质分子间靠拢、凝集和沉淀。
临床免疫学检验练习题库(附参考答案)一、单选题(共100题,每题1分,共100分)1、因使用外用药物发生的接触性皮炎属于A、迟发型超敏反应B、免疫复合物型超敏反应C、细胞溶解型超敏反应D、Ⅲ型超敏反应E、速发型超敏反应正确答案:A2、影响抗原抗体反应的因素有:A、电解质、pH值和温度B、温度、电解质和反应体积C、电解质与温度D、温度、pH值和反应体积E、电解质、pH值和反应体积正确答案:A3、下列哪一种物质可以引起Ⅲ型超敏反应A、补体B、单核吞噬细胞C、免疫复合物D、免疫球蛋白E、细胞因子正确答案:C4、金免疫层析试纸条测HCG,出现质控处和检测区均无红色线条,诊断为A、HCG阳性B、HCG阴性C、试纸条无效D、HCG强阳性E、HCG弱阳性正确答案:C5、免疫防御功能是指A、清除、杀灭病原微生物,防止感染B、清除体内突变的细胞,防止肿瘤发生C、清除体内衰老的细胞D、防止自身免疫病的发生E、清除体内变性和损伤的细胞正确答案:A6、防止自身免疫病发生的免疫功能是A、变态反应B、免疫识别C、免疫监视D、免疫防御E、免疫自稳正确答案:E7、下列五类Ig的特性哪项是错误的A、IgG是唯一通过胎盘的免疫球蛋白B、SIgA多为双聚体C、IgM分子量最大D、免疫应答过程中产生最早的是IgGE、正常血清中IgE含最量少正确答案:D8、人类IgG不同亚类中血浆半衰期,最短的是A、IgG3B、IgG2C、IgG4D、IgGlE、IgG5正确答案:A9、发生毛细血管扩张性共济失调综合征的主要免疫学表现是:A、B细胞减少B、T细胞减少C、补体减少D、白细胞粘附功能降低E、红细胞易被溶解正确答案:B10、用来去除未结合的游离的荧光素最好用A、透析法B、离子交换层析法C、搅拌法D、盐析法E、凝胶过滤法正确答案:B11、关于温度的说法,下列哪项正确A、温度低于56℃时,可导致复合物解离B、温度越高,抗原抗体反应速度越快C、温度越低,抗原抗体结合越牢固D、温度越高,抗原抗体反应速度越慢E、温度越高,抗原抗体分子运动越慢正确答案:B12、必须与蛋白质载体结合才具有免疫原性的是A、耐受原B、完全抗原C、变应原D、半抗原E、超抗原正确答案:D13、结核菌素皮试属于下列哪一型超敏反应A、迟发型超敏反应B、速发型C、免疫复合物型D、Ⅵ型E、细胞毒型正确答案:A14、关于公式K=K1/K2,下列说法错误的是A、K2固定,K1越大,亲和性越低B、K1固定,K2越大,亲和性越低C、K1越大,与抗原结合越牢固D、K2固定,K1越大,亲和性越高E、K越大,亲和性越高正确答案:A15、下列哪一项属于长臂活化生物素A、BCNHSB、BNHSC、BHZD、BCHZE、MPB正确答案:A16、下列哪项描述类风湿关节炎的特征是错误的A、外周血白细胞下降B、RF乳胶凝集定性试验阳性C、血清中可检出RFD、多发于青壮年,女多于男E、关节病变为主的慢性自身免疫性疾病正确答案:A17、B细胞作为抗原提呈细胞,其表面主要具有的第二信号作用的分子是:A、CD28B、CD40C、CD40LD、B7E、MHC-II类分子正确答案:D18、T细胞分化抗原主要是检测A、CD9B、CD10C、CD3、CD4、CD8D、CD19E、CD20正确答案:C19、关于补体旁路(替代)途径的激活,下列哪项是错误的A、由细菌脂多糖及凝聚的IgG4、IgA所激活B、D、P因子参与作用C、C3转化酶是C3bBb3bD、在感染早期发挥作用E、可通过C3b的正反馈途径产生更多的C3b正确答案:C20、对流免疫电泳中,泳向正极侧的Ig是A、IgG1,IgG3B、IgG1,IgG2C、IgG3,IgG4D、IgG1,IgG4E、IgG2,IgG4正确答案:C21、CD4分子主要表达在哪种细胞上A、辅助性T细胞(Th)B、细胞毒T细胞(CTL或Tc)C、NK细胞D、B细胞E、中性粒细胞正确答案:A22、广泛放射免疫技术不包括A、免疫放射分析B、放射免疫分析C、放射受体分析D、放射配体分析E、放射供体分析正确答案:E23、血清中补体分子含量最低是A、C1B、C2C、C3D、C4E、C5正确答案:B24、荧光效率是指A、物质产生荧光的效率B、表示荧光色素即吸收的光能转变为荧光的百分率C、是指接受激发光后,荧光物质所产生的荧光的色调D、是指接受激发光后,荧光物质所产生的荧光的色调E、是指荧光色素产生荧光的强度正确答案:B25、肿瘤疫苗与传统疫苗的主要区别是:A、肿瘤疫苗是人工被动免疫疗法B、肿瘤疫苗主要用于肿瘤的治疗C、肿瘤疫苗属于过继性免疫D、传统疫苗主要用于疾病的治疗E、肿瘤疫苗主要用于肿瘤的预防正确答案:B26、临床上最常见的移植类型是A、自体移植B、同种同基因移植C、同种异基因移植D、异种移植E、以上均不是正确答案:C27、属于自身抗原的是A、ABO血型抗原B、肺炎球菌荚膜多糖C、类脂D、眼晶体蛋白E、破伤风类毒素正确答案:D28、检测颗粒型抗原的血清学试验是A、直接凝集反应B、火箭免疫电泳C、对流免疫电泳D、琼脂扩散试验E、协同凝集试验正确答案:A29、T细胞活化时,只有第一信号,缺乏第二信号,其结果是A、导致T细胞分裂B、T细胞立即死亡C、T细胞处于免疫应答无能状态D、导致T细胞克隆扩增E、以上都不是正确答案:C30、单倍型HLA包括或指的是A、控制一个HLA特异性的基因,例如HLA-A或HLA-DPB、同一家族中膜表面所有的同种异型特异性的一半C、同一家族中在一个孩子而不是其他孩子身上发现的基因D、由一条染色体上基因决定的一组抗原表型特异性E、人类第六对染色体的一半基因正确答案:D31、荧光色素中呈现明亮黄绿色荧光的是A、异硫氰酸荧光素B、四甲基异硫氰酸罗丹明C、亮绿D、藻红蛋白E、四乙基罗丹明正确答案:A32、NK细胞活性测定时,使用以下哪种细胞作为靶细胞A、B细胞B、T细胞C、神经细胞D、肿瘤细胞E、单核细胞正确答案:D33、目前,常用来作为直肠癌、结肠癌治疗后的随访项目,检测肿瘤扩散和复发的非创伤性指标是A、AFPB、CA125C、CEAD、CA19-9E、PSA正确答案:C34、具有调理作用的主要Ig是A、IgAB、IgMC、IgGD、IgDE、IgE正确答案:C35、下列哪一种膜分子有关与B淋巴细胞摄取抗原A、BCRB、FcRC、MHC I类分子D、黏附分子E、以上均不是正确答案:A36、对流免疫电泳中,若待测抗原在阳极侧孔,已知抗体在阴极侧孔,抗原、抗体泳动方向分别是A、抗原向阳极侧泳动,抗体向阴极侧泳动B、抗原向阴极侧泳动,抗体一部分向阴极侧泳动,一部分向阳极侧泳动C、抗原、抗体均向阴极侧泳动D、抗原、抗体均向阳极侧泳动E、抗原向阴极侧泳动,抗体向阳极侧泳动正确答案:B37、最常见的自身抗体检测方法为A、ELISAB、免疫荧光法C、固相免疫电泳D、RIAE、Farr法正确答案:B38、哪一种HLA抗原不用血清学方法鉴定A、HLA-A抗原B、HLA-B抗原C、HA-C抗原D、HLA-D抗原E、HLA-DR抗原正确答案:D39、介导Ⅰ型超敏反应的生物活性物质主要是由下列哪一种细胞释放A、巨噬细胞B、单核细胞C、肥大细胞D、B细胞E、中性粒细胞正确答案:C40、下列哪些细胞间作用时受MHC限制A、CTL细胞与肿瘤细胞B、NK细胞与肿瘤细胞C、NK细胞与肿瘤细胞D、Th细胞与B细胞E、朗格汉斯细胞与巨噬细胞正确答案:D41、补体固有成分中,含量最高的是A、C1B、C2C、C3D、C4E、C5a正确答案:C42、终点法散射比浊应保证A、抗原过量B、抗体过量C、抗原:抗体为1:2D、抗体与抗原处于最适比E、抗原:抗体为2:1正确答案:B43、初次应答时,B细胞活化的第二信号产生主要是:A、BCR识别抗原肽-MHC I类分子复合物B、BCR识别抗原肽-MHC II类分子复合物C、B细胞上的CD40与Th细胞上的CD40L结合D、B细胞上的B7与Th细胞上的CD28结合E、BCR与抗原结合正确答案:C44、男性患者,1岁,反复感染4个月,血型为AB型,E花环试验Et值为70%,可初步排除下列何种疾病A、Bruton型丙种球蛋白缺乏症B、体液免疫缺陷症C、DIGeorge综合征D、原发性联合免疫缺陷症E、选择性IgA缺乏症正确答案:C45、遗传性血管神经性水肿的发生机制是:A、C2a过多B、C3a过多C、C3转化酶过多D、C5转化酶过多E、C4a过多正确答案:A46、与其他标记技术相比,免疫组化技术最大的优点是A、形态学观察B、精密度高C、高特异性D、重复性好E、高敏感性正确答案:A47、木瓜蛋白酶水解IgG所获片段中,能与抗原特异结合的是A、Fab段B、Fc段C、F(ab)2D、pFc’段E、以上均不对正确答案:A48、关于第二抗体沉淀法,说法不正确的是A、反应结束时只需加入二抗B、反应结束时只需加入一抗C、反应结束时只需加入一抗同种动物的血清D、反应结束时只需加入一抗同种动物的IgGE、以上说法都对正确答案:E49、产生浆细胞瘤的因素之一,是异常分泌高水平的A、IL-6B、IL-4C、IL-3D、IL-5E、IL-7正确答案:A50、关于抗原的说法不正确的是A、所有抗原均需T细胞辅助才能产生抗体应答B、为任何可诱发免疫反应的物质C、抗原与耐受原可能是等同物D、宿主对抗原应答的控制是通过免疫应答基因表现出来的E、超抗原连接MHCⅡ类分子又连接T细胞受体正确答案:A51、在骨髓中,自身反应性B 细胞克隆被消除是由于A、自身反应性B细胞缺乏辅助细胞而不能激活B、自身反应性B细胞缺乏辅助细胞而不能激活C、大量多价抗原使未成熟B细胞表面受体交联“冻结”D、细胞表面受体封闭E、缺乏协同刺激信号正确答案:A52、既具有吞噬杀菌作用又具有抗原加工提呈作用的细胞是A、中性粒细胞B、巨噬细胞C、树突状细胞D、B细胞E、NK细胞正确答案:B53、下列哪个属于中枢免疫器官A、皮下组织B、胸腺C、脾脏D、淋巴结E、粘膜相关淋巴组织正确答案:B54、TCR识别抗原的信号传递是通过下列哪个分子?A、CD3B、CD2C、CD4D、Igα、IgβE、CD8正确答案:A55、三条补体激活途径的共同点是A、参与的补体成分相同B、所需离子相同C、C3转化酶的组成相同D、激活物质相同E、膜攻击复合物的形成及其溶解细胞效应相同正确答案:E56、补体系统各成分中,分子量最小的是A、C1B、C2C、C3D、C4结合蛋白(C4bpE、D因子正确答案:E57、结合肥大细胞和嗜碱性粒细胞的Ig是A、IgMB、IgGC、IgAD、IgDE、IgE正确答案:E58、单克隆抗体的应用不包括A、肿瘤的诊断B、肿瘤的治疗C、血清Cl-含量测定D、激素水平测定E、细胞受体测定正确答案:C59、火箭免疫电泳的特点是A、电流方向有规律地改变B、单项免疫扩散和电泳相结合的检测技术C、电流逐渐减小D、电泳时间大大缩短E、灵敏度有极大的提高正确答案:B60、选择性IgA患者一般不采用下列治疗方法:A、骨髓移植B、基因治疗C、输入免疫球蛋白D、用抗生素治疗感染E、长期预防感染的发生正确答案:C61、在火箭免疫电泳中,抗原、抗体的泳动方向是A、琼脂凝胶中的抗体不移动,样品孔抗原向阳极泳动B、琼脂凝胶中的抗体不移动,样品孔抗原向阴极泳动C、琼脂凝胶中的抗原不移动,样品孔抗原向阳极泳动D、琼脂凝胶中的抗原不移动,样品孔抗原向阴极泳动E、抗原、抗体均向正极泳动正确答案:A62、下列属于非标记免疫技术的是A、放射性核素标记免疫技术B、免疫电泳技术C、荧光标记免疫技术D、酶标记免疫技术E、发光免疫技术正确答案:B63、以下哪种不是专职抗原提呈细胞:A、巨噬细胞B、树突状细胞C、B淋巴细胞D、内皮细胞E、朗格汉斯细胞正确答案:D64、可以寻找过敏原并从嗜碱性粒细胞水平研究I型变态反应的试验是A、RASTB、皮内试验C、HBDTD、ELISAE、支气管激发试验正确答案:C65、发育早期的NK 细胞的特有标志是A、CD3 分子B、IKAROS 基因C、CD16 分子D、CD56 分子E、CD15 分子正确答案:D66、B细胞表面特有的标志是A、E受体B、pHA受体C、C3b受体D、IL-2受体E、抗原受体(mIgM和mlgD)正确答案:E67、下列各项用于反映B细胞功能的试验是A、淋巴细胞转化B、血清免疫球蛋白检测C、迟发型超敏反应D、移动抑制试验E、以上都不正确正确答案:B68、与内源性抗原降解为多肽有关的分子是A、HLA-DM分子B、TAPC、蛋白酶体D、ERE、Ia相关恒定链(Ii)正确答案:C69、以下关于IgG 生物学特性的错误叙述是A、能通过胎盘B、能激活补体C、是参与I型超敏反应的主要IgD、能发挥调理作用E、能发挥ADCC作用正确答案:C70、在DC细胞内抗原肽与MHCⅡ类分子的结合部位主要是A、吞噬小体B、MCⅡC、溶酶体D、内质网E、蛋白酶体正确答案:B71、前向散射光(FSC)信号的强弱与下述哪项成正比:A、细胞性状B、体积大小C、颗粒多少D、位移速度E、荧光强弱正确答案:B72、实验本身即可避免内源性非特异荧光干扰的检测方法为A、TRFIAB、FPIAC、荧光酶免疫分析D、直接法荧光抗体染色E、直接法荧光抗体染色正确答案:A73、TCR的双识别是指A、同时识别MHCⅠ类分子和MHCⅡ类分子B、同时识别抗原分子的T细胞表位和B细胞表位C、同时识别抗原肽和mIg的复合物D、同时识别抗原肽和MHC分子E、同时识别Igα和Igβ正确答案:D74、关于ELISA竞争法,正确的是A、用于检测抗原B、被测物与酶标记物的免疫活性各不相同C、被测物少则标记物被结合的机会多D、待测管的颜色比参照管的淡表示被测物量少E、结合于固相的酶标抗原量与样品中被测抗原量成正比正确答案:C75、使用流式细胞术对细胞群体进行分析,可在多长时间内完成A、8-10minB、4-5minC、10-12minD、1-2minE、6-7min正确答案:D76、定时散射比浊分析时,如果待测标本抗原浓度过高,则应A、增加抗体的浓度后重新检测B、将待测标本稀释后重新测定C、照常进行反应D、进行全量样本检测E、测量结果更可靠正确答案:B77、以下哪类疾病是由于CD40L缺陷引起的A、性联无丙种球蛋白血症B、重症联合免疫缺陷C、性联高IgM综合征D、DiGeorge综合征E、慢性肉芽肿病正确答案:C78、AIDS属于哪种免疫缺陷病A、原发性T细胞缺陷病B、获得性免疫缺陷病C、原发性免疫缺陷病D、原发性B细胞缺陷病E、原发性联合免疫缺陷病正确答案:B79、人类免疫缺陷病毒(HIV)的受体是A、CD2B、CD3C、CD4D、CD8E、CD28正确答案:C80、通常的流式细胞仪结构组成,不包括下述哪一项结构系统:A、流体系统B、温度控制系统C、数据处理系统D、光学系统E、分选系统正确答案:B81、FITC的荧光寿命约为A、15nsB、20nsC、30nsD、45nsE、60ns正确答案:D82、有关半抗原(hapten)论述正确的是A、只能引起体液免疫应答B、本身不具有免疫原性C、是大分子物质D、通常是多肽E、只有与载体偶联后才能与抗体分子结合正确答案:B83、属于I型超敏反应的疾病是A、青霉素过敏性休克B、新生儿溶血症C、系统性红斑狼疮性肾炎D、接触性皮炎E、输血反应正确答案:A84、下列不属于自身免疫性疾病的是:A、系统性红斑狼疮B、类风湿性关节炎C、自身免疫性溶血性贫血D、性联无丙种球蛋白E、特发性血小板减少症正确答案:D85、与放射免疫分析法比较,免疫放射分析法的特点是A、分析误差大B、反应模式为竞争抑制C、灵敏度高D、特异性较低E、标记简单正确答案:C86、包膜蛋白部分包括A、跨膜蛋白gp41B、外膜蛋白gp120C、信号肽D、外膜刺突上嵌有与细胞受体结合位点E、以上都包括正确答案:E87、随机误差是由下述哪项造成的A、人为失误B、校准品C、仪器设备D、标准品E、试剂正确答案:A88、免疫细胞间相互作用受小鼠H-2复合体中哪一区域的基因所调控A、K区B、D区C、I区D、S区E、以上都不是正确答案:C89、抗人球蛋白试验不能用于A、溶血性贫血的研究B、细菌或立克次体的抗原检查C、输血配型D、血型抗原抗体的检查E、新生儿溶血性贫血疾病的诊断正确答案:B90、吞噬细胞主要包括A、NK 细胞和单核-巨噬细胞B、单核-巨噬细胞和中性粒细胞C、中性粒细胞和树突状细胞D、NK 细胞和中性粒细胞E、中性粒细胞和APC正确答案:B91、实验动物切除胸腺后,对淋巴结产生的影响是A、深皮质区缺乏T细胞B、生发中心生成受影响C、胸腺依赖区T细胞数目和生发中心均不受影响D、深皮质区T细胞缺乏,同时生发中心形成也受影响E、浅皮质区无明显影响正确答案:A92、疫苗注射并非完全无害,最适用于免疫缺陷宿主的疫苗是A、萨宾脊髓灰质炎疫苗B、麻疹疫苗C、卡介苗D、肺炎球菌疫苗E、腮腺炎疫苗正确答案:D93、下列关于正向间接凝集试验的说法中正确的是A、抗体致敏载体,以检验标本中相应抗原B、用于检测标本中抗原C、形成肉眼可见凝集块者为阴性D、临床用于检测HBsAg、AFP等E、抗原致敏载体,以检测标本中相应的抗体正确答案:E94、BCR能识别:A、天然蛋白质抗原决定簇B、线性决定簇C、连续决定簇D、Ag肽-MHC复合物E、特异性坑原正确答案:A95、CTL细胞杀伤靶细胞时下列哪项是正确的?A、CTL细胞无需与靶细胞接触B、靶细胞被溶解时,CTL细胞同时受损C、CTL细胞具特异性杀伤作用D、穿孔素诱导靶细胞凋亡E、一个CTL细胞只能杀伤一个靶细胞正确答案:C96、下列哪项不是死疫苗的特点?A、一般需接种2-3次B、不能诱导局部免疫C、免疫效果好D、疫苗较易保存E、接种剂量较大正确答案:C97、下列哪类细胞的功能用溶血空斑试验检测:A、粒细胞B、B细胞C、T细胞D、NK细胞E、巨噬细胞正确答案:B98、与抗原结合后,可激活补体经典途径的Ig是A、IgM和IgEB、IgD和IgMC、IgA和IgGD、SIgA和IgGE、IgG和IgM正确答案:E99、机体内功能最强的抗原提呈细胞是A、B淋巴细胞B、NK细胞C、巨噬细胞D、树突状细胞E、内皮细胞正确答案:D100、在B细胞上不出现下列哪一个标志A、SmlgB、MHCI类抗原C、MHCl类抗原D、C3受体E、CD3抗原正确答案:E。
抗原抗体反应的特点、影响因素和制备抗原与相应抗体相遇可发生特异性结合,并在外界条件的影响下呈现某种反应现象,如凝集或沉淀,藉此可用已知抗原(或抗体)检测未知抗体(或抗原)。
试验所采用的抗体常存在于血清中,因此又称之为血清学反应(serological reaction)。
一、抗原抗体反应的特点(一)抗原抗体结合的特异性抗原借助表面的抗原决定簇与抗体分子超变区在空间构型上的互补,发生特异性结合。
同一抗原分子可具有多种不同的抗原决定簇,若两种不同的抗原分子具有一个或多个相同的抗原决定簇,则与抗体反应时可出现交叉反应(cross reaction)。
(二)抗原抗体结合的可逆性抗原抗体结合除以空间构型互补外,主要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等分子表面的非共价方式结合,结合后形成的复合物在一定条件下可发生解离,回复抗原抗体的游离状态。
解离后的抗原和抗体仍保持原有的性质。
抗原抗体复合物解离度在很大程度上取决于特异性抗体超变区与相应抗原决定簇三维空间构型的互补程度,互补程度越高,分子间距越小,作用力越大,两者结合越牢固,不易解离;反之,则容易发生解离。
(三)抗原抗体结合的比例性与结合物的可见性抗原与抗体的结合能否出现肉眼可见的反应,取决于两者的比例。
若比例合适,则可形成大的抗原抗体结合物,出现肉眼可见反应现象;反之,虽能形成结合物,但体积小,肉眼不可见。
由于这种分子比例的差异,分别形成了三种区带现象。
等价带表示抗原与抗体比例最合适,形成大而多的结合物,此时在反应体系中测不出或有极少游离的抗原或抗体;抗体过剩带(前带)和抗原过剩带(后带)皆表示抗原与抗体的比例不合适,所形成的结合物少且小,其反应体系中存在着游离的抗原或抗体。
抗原抗体分子的比例与结合物大小的关系如图18.1所示。
小分子可溶性抗原,因其表面积大,容易导致后带现象;而细胞等颗粒性抗原,在与抗体反应时则易出现前带现象。
因此在抗原抗体检测中,为能得到肉眼可见的反应,在了解抗原的物理性状之后,对抗原或抗体进行稀释,以调整二者的比例。
简述抗原抗体反应的一般规律
1. 特异性:抗原与抗体之间的结合具有高度的特异性,即一种抗原只能与其相应的抗体结合。
这种特异性是由抗原表位与相应抗体的抗原结合部位的空间构象互补性决定的。
2. 可逆性:抗原抗体之间的结合是一种物理结合,可以在一定条件下解离。
这种可逆性使得抗原抗体反应具有一定的灵活性。
3. 定比性:抗原物质通常是多价的,而抗体一般是双价的。
只有当抗原与抗体的比例合适时,才会出现可见反应。
这种定比性有助于确定抗原或抗体的浓度。
4. 阶段性:抗原抗体反应通常分为两个阶段。
第一阶段是特异性结合阶段,反应进行较快,但无肉眼可见反应出现。
第二阶段是可见反应阶段,在抗原与抗体特异结合的基础上,受环境中电解质、温度、pH等因素的影响,出现凝集、沉淀等可见反应。
5. 条件依赖性:抗原抗体反应需要一定的条件,如适当的pH(通常为6-8)、温度(通常为37-45℃)以及电解质的存在。
这些条件可以影响抗原抗体反应的速率和程度。
2016 第二章抗原抗体反应一、A11、抗原抗体反应的环境影响因素包括A、电解质、温度和酸碱度B、抗原抗体浓度、反应体积和温度C、抗原分子量和抗体效价D、温度、电解质和反应体积E、酸碱度、温度和抗原抗体浓度2、抗原抗体反应最适PH为A、6.2~7.4B、7.2~7.4C、6.2~8.4D、7.2~8.4E、6.0~9.03、对抗原抗体反应叙述正确的是A、抗原抗体结合特异性指抗原表位与抗体铰链区结合B、抗原越多肉眼可见免疫复合物越多C、抗体越多肉眼可见免疫复合物越多D、抗原抗体复合物在一定条件下可发生解离E、抗原抗体结合是一种共价结合4、关于抗原抗体反应特点的叙述错误的是A、抗原抗体只有在适当比例时才形成肉眼可见的凝集团块B、抗原抗体反应依赖于两种的特异性结合C、抗原抗体反应具有可逆性D、抗原过量称为前带E、抗原抗体比例合适反应充分,称为等价带5、抗原抗体反应中,何种条件形成肉眼可见的免疫复合物A、抗原显著多于抗体B、抗体显著多于抗原C、抗原略多余抗体D、抗体略多于抗原E、抗原抗体比例适当6、抗原特异性主要取决于抗原分子的A、物理性状B、结构的复杂性C、分子量大小D、表面的特殊化学结构E、异物性7、抗原抗体反应的特点不包括A、特异性B、可逆性C、可见性D、比例性E、阶段性8、根据抗原抗体反应的特点,以下说法正确的是A、抗原抗体结合牢固不易受环境影响B、解离后的抗体结构活性改变C、解离后抗体不能再与抗原结合D、抗体与抗原结合后仍可与其他抗原结合E、解离后抗体的活性和特异性不变9、不属于抗原抗体反应的是A、放射免疫技术B、免疫电泳技术C、酶联免疫技术D、免疫比浊技术E、淋巴细胞转化试验10、体外抗原抗体反应,最适合的条件是A、0.65%NaCl、PH2~6、35℃B、0.85%NaCl、PH6~8、37℃C、0.85 %NaCl、PH2~6、35℃D、0.85%NaCl、PH2~6、37℃E、0.65%NaCl、PH6~8、37℃11、抗原抗体反应中,抗体的合适浓度是A、固定的B、规定的C、与抗原相对而言D、随便设定的E、人为规定的12、抗原抗体反应最适宜的温度(℃)是A、25℃B、30℃C、33℃D、37℃E、40℃13、影响抗原抗体反应的因素下列说法不正确的是A、抗原的理化性质和分子量B、抗体的浓度、特异性和亲和力C、抗原决定簇的种类和数目D、电解质和酸碱度E、湿度14、在抗原抗体反应中,通常被用作抗原抗体稀释液的溶液是A、0.70% NaCl溶液B、0.60% NaCl溶液C、0.75% NaCl溶液D、0.85% NaCl溶液E、0.95% NaCl溶液15、有关交叉反应的描述,正确的是A、为非特异性抗原抗体反命B、由于不同抗原分子上存在公共抗原表位所致C、对免疫学诊断结果判断无影响D、利用交叉反应进行诊断典型例子是肥大试验E、抗原分子大小相似可导致交叉反应16、人类ABO血型抗原属于A、异种抗原B、异嗜性抗原C、同种异性抗原D、自身抗原E、半抗原17、抗原的特异性取决于A、抗原的化学组成B、抗原结构的复杂性C、抗原表位的数量D、抗原决定簇的性质及空间构型E、抗原分子量的大小18、抗原抗体结合过程中,下面哪种力所起作用最小A、静电引力B、范德华引力C、氢键结合力D、疏水作用力E、共价键19、必须与蛋白质载体结合才具有免疫原性的是A、超抗原B、变应原C、半抗原D、完全抗原E、耐受原20、人体血清中的抗原、抗体等分子不会发生自然沉淀,主要原因是A、带有大量的氨基和羧基残基形成水化层B、周围电荷的相吸作用C、亲水肢体转化为疏水胶体D、抗原抗体比例合适E、静电引力21、供氢体上的氢原子与受氢体上氢原子间的引力是A、静电引力B、范德华引力C、氢键结合力D、疏水作用力E、分子间结合力22、抗原抗体反应中为促进沉淀物或凝集物的形成,常用下列何种作为抗原抗体的稀释液A、0.85%NaClB、0.95%NaClC、0.75%NaClD、0.70%NaClE、0.80%NaCl23、抗原抗体特异性反应时,若抗原或抗体极度过剩则无沉淀形成,称为A、后带B、前带C、带现象D、等价带E、拖尾24、免疫学技术中的亲和层析是利用的抗原抗体反应的哪种特点A、特异性B、比例性C、可逆性D、结合性E、不可逆性25、抗原抗体反应的pH值一般为A、5.0~6.0B、6.0~9.0C、6.0~7.0D、6.0~8.0E、5.0~7.026、抗原与抗体结合的哪种特性,是其应用于临床诊断的基础A、特异性B、可逆性C、比例性D、阶段性E、交叉反应性27、根据抗原抗体反应的特点,以下提法哪一点是错误的A、特异性B、最适比例C、反应分阶段D、反应都不可逆E、最适反应温度为37℃28、完全抗原的特钲是A、有反应原性,无免疫原性B、有免疫原性,无反应原性C、无免疫原性和反应原性D、有免疫原性和反应原性E、必须与载体结合才具有免疫原性29、沉淀反应中抗体过量的现象称为A、后带B、前带C、带现象D、等价带E、拖尾30、下列哪种不属于抗原抗体反应的特点A、特异性B、敏感性C、比例性D、可逆性E、存在交叉反应31、可以用已知抗原或抗体来检测相对应的抗体或抗原,是由于抗原抗体反应的A、特异性B、比例性C、可逆性D、亲和性E、带现象二、B1、A.沉淀反应B.凝集反应C.补体参与的反应D.中和反应E.溶血反应<1> 、琼脂凝胶扩散试验的反应类型A B C D E<2> 、抗球蛋白试验的反应类型A B C D E答案部分一、A11、【正确答案】A【答案解析】影响抗原抗体反应的环境因素包括电解质、温度和酸碱度。
抗原抗体之间的作用力
抗原抗体之间的作用力是免疫系统中最关键的过程之一,它能够保护
身体免受外部细菌和病毒的侵害。
下面我们将就抗原抗体之间的作用
力进行详细的剖析。
1.什么是抗原抗体?
抗原是指能够诱导免疫系统产生反应的物质,一般来说是细菌、病毒、真菌、寄生虫等微生物及其产生的代谢产物。
而抗体则是一种产生于
机体免疫细胞中的具有专一性结构的蛋白质,可以识别和结合与其特
异性相应的抗原。
2.抗原抗体之间的作用力
当抗原被机体识别为异物时,机体会启动免疫系统,并产生与其相应
的抗体。
抗体和抗原之间的作用力主要体现在两个方面:
(1)特异性结合:抗体和抗原之间存在一种非常特异的结合关系,每个
抗体只能结合到其相应的抗原上,这种特异性结合是抗体的优势之一,使得机体能够更好地识别并攻击外部的病原体。
(2)中和作用:抗体在与抗原结合后,能够中和细菌、病毒等病原体的
毒素,防止其对机体产生危害。
另外,在中和过程中,抗体能够吸引
噬菌细胞对细菌进行吞噬和杀伤,进一步提高机体的抵抗能力。
3.抗原抗体之间的影响因素
抗体的结合和中和能力受许多因素影响,包括抗体的种类、浓度、亚
型以及抗原的结构、浓度等。
例如,某些抗体只能结合一种抗原或者
其特异性非常狭窄,像重链亚型IgG2a就比IgG1更容易识别多种细菌、特别是被包裹在膜集中的菌物,从而保证身体更加有效的保护。
总而言之,抗原抗体之间的作用力是一种非常严谨而有效的机体免疫
反应过程,对维持人体健康具有非常重要的意义。
我们应该加强健康
宣传,提高公众对免疫系统的认识,从而更好地保护自己的身体和健康。
一、实验目的1. 了解抗原抗体结合反应的基本原理和过程。
2. 掌握抗原抗体结合实验的操作方法。
3. 观察抗原抗体结合现象,加深对免疫学基础知识的理解。
二、实验原理抗原抗体结合反应是指抗原与相应抗体在一定条件下发生特异性结合,形成抗原抗体复合物的过程。
该实验利用抗原抗体结合的特异性,通过观察沉淀反应或凝集反应等现象,检测待测样品中是否存在特定的抗原或抗体。
三、实验材料与仪器1. 材料:- 抗原:待测样品(如血清、尿液等)- 抗体:特异性抗体- 稀释液:生理盐水、PBS缓冲液等- 阳性对照:已知含有特定抗原或抗体的样品- 阴性对照:不含特定抗原或抗体的样品- 试剂:沉淀试剂、凝集试剂等2. 仪器:- 微量移液器- 酶标仪- 实验台- 混匀器- 烧杯- 试管四、实验方法1. 样品处理:将待测样品和阳性、阴性对照分别进行适当稀释。
2. 抗原抗体混合:将抗体和待测样品(或对照)混合,室温下反应一定时间。
3. 沉淀反应:向反应体系中加入沉淀试剂,观察沉淀形成情况。
4. 凝集反应:向反应体系中加入凝集试剂,观察凝集现象。
5. 数据记录:记录阳性对照、阴性对照、待测样品的沉淀反应或凝集反应结果。
五、实验结果与分析1. 阳性对照:在抗原抗体混合后,加入沉淀试剂或凝集试剂,出现明显的沉淀或凝集现象。
2. 阴性对照:在抗原抗体混合后,加入沉淀试剂或凝集试剂,无沉淀或凝集现象。
3. 待测样品:在抗原抗体混合后,加入沉淀试剂或凝集试剂,根据沉淀或凝集现象的强弱,判断待测样品中是否存在特定抗原或抗体。
六、实验结论通过本次实验,我们成功掌握了抗原抗体结合实验的操作方法,观察到了抗原抗体结合的沉淀反应和凝集反应现象。
实验结果表明,待测样品中存在特定抗原或抗体。
七、实验注意事项1. 实验过程中,应严格控制温度和时间,确保抗原抗体充分结合。
2. 试剂的浓度和用量要准确,避免影响实验结果。
3. 实验操作要规范,防止污染。
4. 数据记录要准确,便于分析。
第二十二章免疫学检测技术的基本原理第一节体外抗原抗体结合反应的特点及影响因素(一)抗原抗体反应特点1.高度特异性抗原与抗体的结合具有高度特异性,这种特异性是由抗原表位与抗体分子中的超变区互补结合所决定的。
空间构型互补程度越高,抗原表位与抗体可变(V)区之间结合力越强,抗原抗体结合的特异性越强,亲和力也越高。
利用这一特点,在体外可以对许多未知的生物学物质进行特异性鉴定。
如利用抗伤寒杆菌的抗体检测伤寒杆菌;也可用已知的抗原(如乙型肝炎病毒)来检测相应的抗体(抗乙型肝炎病毒抗体)。
2.表面化学基团之间的可逆结合抗原抗体结合除了空间构象互补外,主要以氢键、静电引力、范德华力和疏水键等分子表面的化学基团之间的非共价方式结合。
这种非共价键不如共价键结合稳定,易受温度、酸碱度和离子强度的影响而解离,解离后抗原和抗体仍具有原有的特性。
解离度主要取决于两个方面:一是抗体与抗原结合的亲和力(affinity)。
亲和力指抗体分子单一抗原结合部位与一个相应抗原表位之间互补结合的强度。
抗体亲和力越高,解离度越低;反之抗体的亲和力越低,解离度越高。
二是抗原抗体反应的环境因素如温度、酸碱度和离子强度。
因此在体外进行抗原抗体反应时,要求适当的温度、酸碱度和离子强度等条件。
2010-4-137K (亲和常数)=Ag+AbAg Ab3.适宜的抗原抗体浓度和比例抗原抗体结合后能否出现肉眼可见的反应取决于两者适当的浓度和比例。
在反应体系中,如果抗原与抗体的浓度和比例适当则抗原抗体复合物体积大、数量多,出现肉眼可见的反应。
若抗原或抗体过剩,抗原-抗体复合物体积小、数量少,不能出现肉眼可见的反应。
故在具体实验过程中要适当稀释抗原或抗体,以调整两者浓度和比例,使其出现最大复合物,避免假阴性的发生。
2010-4-138抗原过剩抗体过剩抗原抗体比例合适4.抗原抗体反应的两个阶段抗原抗体反应可分为两个阶段:第一个阶段是抗原抗体特异性结合阶段。
抗原分子与抗体分子之间是互补的非共价结合,该反应迅速,可在数秒钟至几分钟内完成,一般不出现肉眼可见的反应。
抗原抗体结合最佳pH值1. 引言抗原抗体结合是免疫学研究中的重要过程,也是许多诊断和治疗方法的基础。
抗原抗体结合的最佳pH值是指在哪个酸碱度条件下,抗原和抗体之间的结合能力最强。
了解最佳pH值对于优化实验条件、提高检测灵敏度以及理解免疫反应的机制都具有重要意义。
本文将从抗原和抗体的特性、pH值的影响因素以及实验方法等方面,深入探讨抗原抗体结合最佳pH值的研究。
2. 抗原和抗体的特性2.1 抗原抗原是指能够诱导机体产生免疫应答的物质,可以是蛋白质、多糖、脂质等。
抗原通常具有复杂的结构和多样性,这使得抗原抗体结合的条件需要精确控制。
抗原分子上的特定区域,称为抗原决定簇(epitope),是与抗体结合的关键部位。
2.2 抗体抗体是由机体免疫系统产生的一类具有高度特异性的蛋白质,能够与抗原结合并发挥免疫效应。
抗体的结构包括两个重链和两个轻链,重链和轻链之间通过二硫键连接。
抗体的可变区域决定了其与抗原结合的特异性。
3. pH值对抗原抗体结合的影响因素3.1 抗原和抗体的电荷抗原和抗体的电荷是pH值影响抗原抗体结合的重要因素之一。
抗原和抗体上的氨基酸残基可以带有正电荷、负电荷或无电荷。
在不同的pH值下,抗原和抗体的电荷状态会发生改变,从而影响它们之间的相互作用。
一般来说,当抗原和抗体具有相反的电荷时,它们的结合能力较弱;而当它们具有相同的电荷时,它们的结合能力较强。
3.2 抗原和抗体的构象变化pH值的改变还会引起抗原和抗体的构象变化,进而影响它们之间的结合。
抗原和抗体的构象是指它们的空间结构和形状。
在不同的pH值下,抗原和抗体的离子键、氢键和范德华力等相互作用会发生改变,从而导致它们的构象发生变化。
当抗原和抗体的构象适配程度较高时,它们之间的结合能力较强。
3.3 溶液的离子强度溶液的离子强度也会对抗原抗体结合的最佳pH值产生影响。
离子强度是指溶液中的离子浓度和电荷的综合效应。
较高的离子强度会增加溶液的电导率,从而影响抗原和抗体之间的相互作用。
抗原抗体结合力的大小顺序
抗原抗体结合力的大小可以根据多种因素来进行排序。
首先,抗原抗体结合力的大小受到抗原和抗体之间的亲和力影响。
亲和力是指抗体与抗原结合的强度,通常由它们之间的非共价相互作用力来决定,如静电相互作用、氢键和疏水相互作用等。
一般来说,亲和力越大,抗原抗体结合力越强。
其次,抗原和抗体的结构对结合力也有影响。
如果抗原与抗体的结构高度相容,它们之间的结合力可能会更强。
此外,抗体的类型也会影响结合力的大小。
例如,IgG 类抗体通常具有较高的结合力,而IgM类抗体则具有更高的价位效应,因此在特定情况下可能表现出更强的结合力。
最后,抗原和抗体的浓度也会对结合力产生影响。
在相同的条件下,更高浓度的抗原或抗体通常会导致更强的结合力。
综上所述,抗原抗体结合力的大小顺序受到多种因素影响,包括亲和力、结构相容性、抗体类型和浓度等。
因此,要准确确定抗原抗体结合力的大小顺序,需要综合考虑这些因素。
抗体抗原结合原理
抗体(antibody)是由免疫动物或人体内的单核巨噬细胞,通过抗原刺激而产生的具有抗体活性的免疫球蛋白。
是人体免疫系统中一种重要的细胞。
它能够识别和结合抗原,在免疫系统中起着重要的作用,其种类和数量均受年龄、性别、种族、地域及疾病等因素影响。
抗体可分为IgM(免疫球蛋白M)和IgG(免疫球蛋白G)两种。
前者是针对相应抗原决定簇的特异性IgM,后者是针对相应抗原决定簇的特异性IgG。
抗体又可分为免疫球蛋白、抗毒素和抗体干三种类型。
抗体分子可分为多个亚类,但一般均由三个以上的抗原决定簇构成,一个亚类的抗原决定簇称为一类抗原决定簇,每一类抗原决定簇对应着一个特异性抗体分子,每一种特异性抗体分子又可以再由不同亚类组成。
根据不同类型抗体与抗原结合的方式不同,可分为可溶性结合、非可溶性结合和不可溶性结合三种类型。
可溶性结合是指抗体分子与抗原分子直接接触并发生吸附,不与其他物质相结合。
—— 1 —1 —。
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第一节抗原抗体反应的原理
抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇 ( 表位 )与抗体超变区的沟槽
分子表面的结构互性与亲合性而结合的。
一、抗原抗体的结合力
抗原抗体间结合为非共价键结合,有四种分子间引力参与。
(1)静电引力:是抗原抗体分子带有相反电荷的氨基和羧基基团之间相
互吸引的力。
又称为库伦引力。
这种引力的大小与两电荷间的距离的平方
成反比。
两个电荷距离越近,静电引力越强。
(2)范登华引力:是抗原与抗体两个大分子外层轨道上电子之间相互作
用时,因两者电子云中的偶极摆动而产生吸引力。
能促使抗原抗体相互结
合,这种引力的能量小于静电引力。
(3)氢键结合力:是抗体上亲水基团与相应抗原彼此接近时,相互间可
形成氢键,使抗原抗体相互结合。
氢键结合力较范登华引力强。
(4)疏水作用力:是抗原表位与抗体超变区靠近时,相互间正、负极性
消失,亲水层也立即失去,排斥了两者之间的水分子,使抗原抗体进一步
相互吸引,促进其结合。
疏水作用力是这些力中最强的,对维系抗原抗体
结合作用最大。
二、抗原抗体的亲合性和亲合力
亲合性是指抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原表位之间相互适
应而存在的引力,它是抗原抗体之间固有的结合力,可用平衡常数K 来表示: K=K1/K2 , K 值越大,亲合性越高;亲合性越高,与抗原结合越牢。
抗体的亲合力是指抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度,
与抗体结合价直接相关,即所谓多价优势,如IgG为两价,亲合力为单价
的 103 倍, IgM为5~10价,亲合力为单价的107 倍。
由于抗原抗体的结合反应是可逆的,若抗体的亲合力高,与抗原分子结合牢固,不易解离;反
之即容易解离。
三、亲水胶体转化为疏水胶体
大多数抗原为蛋白质,抗体是球蛋白,它们溶解在水中皆为胶
体溶液,不会发生自然沉淀。
这种亲水胶体的形成机制是因蛋白质含有大量
的氨基和羧基残基,在溶液中这些残基带有电荷,由于静电作用,在蛋白质
分子周围出现了带相反电荷的电子云并形成了水化层,由于电荷的相斥,就
避免了蛋白质分子间靠拢、凝集和沉淀。
当抗原抗体结合后,使水化层表面
电荷减少或消失,水化层变薄,电子云也消失,蛋白质由亲水胶
体转化为疏水胶体。
再加入电解质,如NaCl,则进一步使疏水胶体物相互靠拢,形成可见的抗原抗体复合物。
第二节抗原抗体反应的特点
一、特异性
抗原抗体的特异性是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结
合的特异性,由两者之间查问结构互补决定的。
抗体分子 VH 区和 VL 区上各自具有的三个高变区共同组成抗原结合部位,该部位形成一个与抗原决
定簇互补的槽沟,决定了抗体的特异性。
因此,在抗原抗体反应的免疫学实
验中,可以用已知的抗原或抗体来检测相应的抗体或抗原。
但较大分子
的蛋白质常含有多种抗原表位。
如果两种不同的抗原分子上有相同的抗原
表位,或抗原、抗体间构型部分相同,皆可出现交叉反应。
二、比例性
比例性是指抗原抗体特异性结合时,生成结合物的量与反应物浓度的
关系,只有当二者浓度比例适当时,才出现可见的反应。
因此在进行抗原
抗体试验时,抗原抗体反应比例最合适的范围,称为抗原抗体反应的等价
带。
当抗体过量时,称为前带,抗原过量时,称为后带。
三、可逆性
抗原与抗体结合形成复合物后,在一定条件下,有可以解离为游离的
抗原与抗体,这种特性称为抗原抗体反应的可逆性(renersibility)。
抗原
抗体的结合是分子表面的非共价键结合,形成的复合物是不牢固的,在一定
条件下可以解离,因此抗原抗体反应形成复合物的过程是一个动态平衡。
抗
原抗体复合物解离取决于两方面的因素:一是抗体对应抗原的亲合
力;二是环境因素对复合物的影响。
高亲合力抗体的抗原结合点与抗原表位
的空间构型上非常适合,两者结合牢固,不容易解离;反之,低亲合力
抗体与抗原形成的复合物较易解离。
环境因素中pH 过高或过低均可破坏离子间静电引力,降低抗原抗体的结合力,促使其解离。
免疫技术中的亲合
层析法,常用改变 pH 和离子强度促使抗原抗体复合物解离,从而纯化抗原或
抗体。
四、反应阶段性
抗原抗体反应可分为两个阶段。
第一阶段为抗原与抗体发生特异性结
合的阶段,此阶段反应快,仅须数秒至数分钟,但不出现可见反应;第二
为可见反应阶段,这一阶段抗原抗体复合物在环境因素 (如电解质、 pH 、温度、补体 )的影响下,进一步交联和聚集,表现凝集、沉淀、溶解、补体结
合介导的生物现象等肉眼可见的反应。
此阶段反应慢,往往需要数分钟至
数小时。
实际上这两个阶段难以严格区分,所需时间亦受多种因素和反应条件的影
响,如反应开始时抗原抗体浓度较高,且两者比例恰当,则很快能形成可
见反应。
第三节影响抗原抗体反应的因素
影响抗原抗体反应的因素很多,主要有两个方面:一是抗原抗体本身
的因素;另一方面是反应环境因素。
一、反应物自身因素
抗原抗体反应中,抗原和抗体是反应的主体,所以它们的特性直接影
响其结合情况。
(一 )抗原
抗原的理化性状、表面抗原决定簇的种类和数目等均可影响抗原抗体
反应的结果。
(二 )抗体
抗体对抗原抗体反应的影响主要有以下三个方面:
(1)来源:不同动物来源的免疫血清,其反应性存在差异。
如家兔等大
多数动物的免疫血清,由于具有较宽的等价带,与相应抗原结合易出现可
见的抗原抗体复合物。
马、人的免疫血清等价带窄,抗原不足或过剩,均
易形成可溶性复合物。
而单克隆抗体一般不用于沉淀或凝集反应。
(2)浓度:抗体的浓度是相对于抗原而言的,二者浓度合适时才易出现
可见的反应结果,所以在试验前应先进行预试验,滴定抗原抗体最佳反应
浓度。
(3)特异性与亲合力:特异性与亲合力是影响抗原抗体反应的关键因
素,它们共同影响试验结果的准确度。
试验试剂应尽可能选择高特异性、
高亲合力的抗体,以保证试验的可靠性。
二、环境条件
(一 )电解质
抗原与抗体发生结合后,由亲水胶体变为疏水胶体的过程中须有电解
质参与才能进一步使抗原抗体复合物表面失去电荷,水化层破坏,复合物
相互靠拢聚集,形成大块的凝集或沉淀。
若无电解质参加,则不出现可见
反应。
为了促使沉淀物或凝集物的形成,常用O.85 %氯化钠或各种缓冲液
作抗原及抗体的稀释液及反应液。
但电解质的浓度不宜过高,否则会出现
盐析现象。
(二 )酸碱度
蛋白质具有两性电离性质,因此每种蛋白质都有固定的等电点。
抗原抗体
反应必须在合适的pH 环境中进行,pH 过高或过低都将影响抗原与抗体的理
化性质。
抗原抗体反应一般在pH为6~ 9进行。
(三 )温度
抗原抗体反应必须在合适的温度中进行,一般以15 ~ 40 ℃为宜,最适
反应温度为37 ℃。
某些特殊的抗原抗体反应,对温度有
一些特殊的要求,例如冷凝集素在4℃左右与红细胞结合最好,20 ℃以上反而解离。
此外,适当振荡和搅拌也能促进抗原抗体分子的接触,加速反应,其
作用与反应物粒子大小成正比。
第四节抗原抗体反应的类型
随着免疫学技术的飞速发展,在原有经典免疫学实验方法的基础上,
新的免疫学测定方法不断出现,使免疫学实验技术更特异、更敏感和更稳
定。
目前根据抗原和抗体性质的不同和反应条件的差别,抗原抗体反应出
现的现象和结果不同,以及反应时参与的其他条件不同,可将抗原抗体反
应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生的凝集反应(agglutination) ;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生的沉淀反应(precipitation) ;③抗原抗体结合后激活补体所致的细胞溶解反应
(cytolysis) ,细菌抗原表现为溶菌反应,红细胞抗原表现为溶血反应;④
细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致的中和反应;⑤免疫标记的抗原抗
体反应等。