诺卡菌的诊断与治疗

检验项目诺卡菌培养检验项目：诺卡菌培养在医学检验的众多项目中，诺卡菌培养是一项具有重要意义但相对不太为人熟知的检验内容。

诺卡菌是一种条件致病菌，其感染可引发多种严重疾病，因此准确的诺卡菌培养对于疾病的诊断、治疗和防控都至关重要。

首先，我们来了解一下什么是诺卡菌。

诺卡菌属是一群需氧的革兰阳性杆菌，在自然界中广泛存在，比如土壤、腐烂的有机物等环境中。

然而，对于人体而言，在免疫力正常的情况下，诺卡菌通常不会造成感染。

但当人体免疫力下降，或者存在某些基础疾病，如慢性肺部疾病、免疫抑制治疗、器官移植等，诺卡菌就有可能趁虚而入，引发感染。

诺卡菌感染可累及多个器官系统，其中最常见的是肺部。

患者可能出现咳嗽、咳痰、胸痛、发热等症状，类似于其他肺部感染性疾病，这给临床诊断带来了一定的困难。

此外，诺卡菌还可以引起皮肤和软组织感染、中枢神经系统感染、播散性感染等，不同部位的感染症状各有特点，但往往缺乏特异性，这就更加凸显了实验室检验的重要性。

那么，诺卡菌培养是如何进行的呢？一般来说，标本的采集是第一步。

常见的标本类型包括痰液、脓液、脑脊液、组织活检等。

采集过程需要严格遵循无菌操作原则，以确保标本不受污染，从而保证检验结果的准确性。

采集到标本后，就进入了培养环节。

诺卡菌的培养需要特定的培养基和条件。

常用的培养基有血琼脂平板、巧克力平板等。

培养环境通常为有氧环境，温度一般设定在 35 37℃。

培养时间相对较长，通常需要 3 7 天，有时甚至需要更长时间，这是因为诺卡菌生长较为缓慢。

在培养过程中，检验人员需要密切观察培养基上的菌落形态。

诺卡菌的菌落通常呈现出干燥、粗糙、有皱褶等特点，颜色也有所不同，可能为黄色、粉色或白色等。

但仅凭菌落形态还不能完全确定就是诺卡菌，还需要进行进一步的鉴定。

鉴定诺卡菌的方法有多种。

显微镜检查是常用的手段之一，通过革兰染色，可以观察到诺卡菌为革兰阳性杆菌，部分菌体还可能有分枝。

此外，还可以进行生化反应检测，如糖类发酵试验、触酶试验等，以确定其生化特性。

诺卡菌鉴定技术诺卡菌鉴定技术主要是针对诺卡菌属（Nocardia）细菌进行检测和鉴定的一种方法。

诺卡菌属是一群需氧性放线菌，广泛分布于土壤、腐烂的植物、粉尘及水中。

对人体致病的主要有3种：星形诺卡菌（N. asteroides）、巴西诺卡菌（N. brasiliensis）和豚鼠诺卡菌（N. cavae）。

其中星形诺卡菌在我国最常见，致病力最强。

所致疾病称为诺卡菌病，常表现为肺部化脓性炎症与坏死，严重者可通过血流播散至全身。

诺卡菌鉴定技术的主要方法如下：1. 形态学观察：通过光学显微镜观察菌落形态、菌丝结构和革兰氏染色特征。

诺卡菌形态与放线菌属相似，但菌丝末端不膨大。

革兰染色阳性。

部分诺卡菌抗酸染色呈弱阳性，但如延长脱色时间则变为阴性，据此与典型的结核杆菌相区别。

2. 培养鉴定：在普通培养基或沙保培养基上进行细菌培养，观察菌落生长情况。

诺卡菌属为专性需氧菌，能形成气生菌丝。

繁殖速度慢，一般需5~7天可见菌落。

3. 生化试验：对菌落进行生化试验，如氧化酶、触酶、脂肪酶等试验，以区分不同种类的诺卡菌。

4. 分子生物学方法：通过对细菌的基因进行分子生物学分析，如16S rRNA基因测序、DNA指纹图谱等，进行种属鉴定。

5. 血清学试验：利用血清学方法，如凝集试验、免疫扩散试验等，检测细菌抗原，从而进行鉴定。

6. 基因芯片和生物信息学分析：利用基因芯片技术对诺卡菌进行鉴定和分型，结合生物信息学方法对基因序列进行分析，提高鉴定准确性。

综合以上方法，诺卡菌鉴定技术可以对不同种类的诺卡菌进行准确检测和鉴定，为临床诊断和治疗提供依据。

但由于诺卡菌培养困难、生长缓慢，实验诊断较为困难，因此需要综合运用多种鉴定技术，以提高诊断准确性。

在实际操作过程中，还需结合临床表现、影像学检查等其他相关信息，进行全面分析和判断。

加州鲈诺卡氏菌病的诊断和治疗案例一、病原：诺卡氏菌二、主要症状：加州鲈发病后，根据病鱼的特征和病原的流行病学特征，可以简单判断此病。

1.病鱼在池塘表面慢游，患病个体反应迟钝，离群独游，食欲下降。

2.部分鱼鳃上有白色结节。

诺卡氏菌感染的患鱼在体表有鳃结节型和躯干结节型两类表现型。

①鳃结节型：在鳃丝基部形成乳白色的大型结节，鳃明显褪色。

②躯干结节型：在躯干部的皮下脂肪组织和肌肉发生溃疡，外观上呈大小不一、形状不规则的结节。

鱼体表出现白色或淡黄色结节，直径通常在0.5～2.0厘米。

3.病鱼烂身，体表损伤并溃烂出血，病灶在背鳍起始位置后侧的区域多见，烂身时从表皮向肌肉腐烂，呈现漏斗状腐烂，病灶常呈红色。

尾鳍有时也有溃烂出血。

4.肝常有白色或淡黄色结节，直径0.1～0.3厘米，肝脏受损、出血，胆变色、萎缩。

部分鱼脾、肾也可观察到结节。

因体内有结节，有些地区认为是内脏孢子虫。

肝胰脏切片中观察到小的“肉芽肿”、结节。

5.该病主要对造血系统(肝、脾、肾等)进行破坏。

从发病器官来看，发病最严重的都是与血液循环关系最为密切的器官，说明该菌很可能通过血液循环而到达各靶器官，然后在各组织器官中固着，逐渐繁殖而形成白色或淡黄色结节。

6.腹腔有结节。

在发病后期，在腹腔肌肉或粘膜上可见结节。

部分鱼随着病情加重，体表出现创伤，溃烂出血，鳍条有充血现象，伴有肛门红肿，腹部膨大，膨大的腹腔内有少量透明或淡黄色液体。

加州鲈诺卡氏案例一例基本情况：2017年6月3日，南海区沙头田心崔老板。

池塘面积7亩，水深2米。

一两左右每尾，一天死亡200条左右。

主要症状：鳃丝腐烂，鳃耙有白色结节，腹部，尾鳍基部及尾部有溃烂，肝脏有明显白斑结节。

治疗方案：1、消毒：盛典（3亩／瓶）+烂身消（1.5亩／瓶）；2、内服：盛弗康3包+均克2包+盐酸多西环素2包+肽酶激安3包，拌5包料（40斤每包），连喂7天。

治疗效果：治疗第3天，死亡量从200多条降到50多条；7天后零星死亡，建议内服“三黄+肽酶激安”保肝护胆，增强免疫力。

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引言—诺卡菌病是一种罕见的革兰阳性细菌感染，是由诺卡菌属中的需氧放线菌所致。

诺卡菌属某些种能够引起人类和动物的局部或全身性化脓性疾病[1-5]。

诺卡菌病通常被认为是一种机会性感染，但约1/3的感染者免疫功能正常[5]。

诺卡菌病有两大特征：一是几乎能播散到所有器官，特别是中枢神经系统(central nervous system, CNS)；二是尽管给予了适当治疗，往往仍会复发或进展。

诺卡菌病的治疗将总结在此，诺卡菌病的微生物学、流行病学、发病机制、临床表现和诊断将单独讨论。

(参见“诺卡菌病的微生物学、流行病学和发病机制”和“诺卡菌病的临床表现和诊断”)抗菌药物敏感性—在不同的研究、国家和诺卡菌属的不同种间，所报道的抗菌药物敏感模式不同。

在一项针对1995-2004年间自愿提交到美国疾病预防控制中心(Centers for Disease Control and Prevention, CDC)的765株分离株的回顾性研究中，42%的分离株对复方磺胺甲噁唑(trimethoprim-sulfamethoxazole, TMP-SMX)耐药，61%的分离株对磺胺甲噁唑耐药[6]；这一耐药率明显高于其他报告中的耐药率。

但这项研究有一些局限性，其作者认为提交的数据或许并不能代表美国的所有病例。

例如，与具有对药物敏感的分离株且对治疗有反应的患者相比，因耐药而治疗无效的患者更有可能将分离株送到CDC。

由于对上述CDC研究的结果感到意外，故又进行了一项研究。

相比之下，该研究对2005-2011年间从美国6家主要医疗转诊中心收集到的552株临床分离株进行了检验，发现仅2%的分离株对TMP-SMX和/或磺胺甲噁唑耐药[7]。

奴卡菌的诊断与治疗药物选择奴卡菌概述奴卡菌是革兰阳性、分枝棒状、需氧菌，弱抗酸性，呈分枝状的菌丝，普遍存在于泥土、空气、草丛和腐败的植物中，分类学上属细菌而非真菌，属放线菌目。

奴卡菌属数量众多，包括9个种，包括超过 80种细菌，其中临床具有致病性的包括星形奴卡菌、巴西奴卡菌、豚鼠奴卡菌、南非奴卡菌、鼻疽奴卡菌、新星奴卡菌等6个种。

感染人体最常见的星形奴卡菌是一组对抗菌素敏感性不同的细菌复合体，命名为星形奴卡菌复合体，其中包括狭义的星形奴卡菌、鼻疽奴卡菌、巴西奴卡菌等；2005年确认新型菌株Nocardia concava。

我国最为常见的是星形奴卡菌和巴西奴卡菌，其中肺和播散性奴卡菌病主要由星形奴卡菌引起，而巴西奴卡菌多引起皮肤的原发感染（约占80％）。

危险因素肺奴卡菌病系一种罕见但严重的肺部机会性感染，大多数患者均存在免疫缺陷，最常见的为细胞介导的异常。

发病前患者多有免疫功能低下的基础，肿瘤、实质脏器及骨髓移植、免疫抑制剂应用、HIV感染、胶原血管性疾病、糖尿病以及慢性阻塞性肺疾病是常见的危险因素。

肺奴卡菌病也可发生在免疫正常的宿主。

日本一项205例社区肺脓肿的病原学调查，3例患者为奴卡菌感染，提示奴卡菌感染在免疫功能正常的患者中也可发生。

临床表现奴卡菌病临床表现无特征性，肺部感染大多数有发热、咳嗽、咯脓痰，血行播散者可有脑脓肿、脑膜炎、皮下脓肿、心包炎等症状。

胸部CT主要表现为结节状或肿块影、部分伴有空洞形成。

肺奴卡菌感染常误诊为肺脓肿、放线菌病、肺结核以及恶性肿瘤。

实验室诊断肺奴卡菌感染的诊断关键是从血液、痰、脓液或脑脊液等标本中分离出奴卡菌。

但奴卡菌培养分离困难且分离率偏低，其在培养基上生长缓慢，一般在37℃需氧培养下多数于2-7ｄ内生长为肉眼可见的菌落，有时需4-6周，一般要求培养4周，做生化反应鉴定则需更长的时间，所以该菌在常规检验中很容易被遗漏.因此当临床上出现对常规抗生素治疗无效的肺炎，若出现发热、咳嗽、咯血等呼吸系统症状，影像学显示肺内斑片或实变影，尤其是合并有肺内空洞及胸腔积液者，尤其对于存在易感因素的个体，应及时考虑本病，同时对可疑标本进行弱抗酸或六胺银染色检查，并将可疑病例接种于选择性培养基，培养时间＞２周，可能有助于该病的早期诊断。

诺卡菌鉴定技术诺卡菌鉴定技术在近年来得到了广泛关注，该技术在医学、农业、食品工业等领域具有重要意义。

本文将详细介绍诺卡菌鉴定技术的原理、方法及其在各个领域的应用前景。

一、诺卡菌鉴定技术原理诺卡菌鉴定技术主要基于分子生物学方法，通过对诺卡菌的基因组、转录组和蛋白质组进行研究，揭示其生物学特性，从而实现对不同种类的诺卡菌进行准确鉴定。

目前，常用的分子生物学方法包括以下几种：1.核酸分子杂交技术：通过检测诺卡菌的特异性核酸序列，实现对不同种类诺卡菌的鉴定。

2.聚合酶链反应（PCR）：利用特异性引物扩增诺卡菌的基因组DNA，再通过测序分析，对诺卡菌进行鉴定。

3.16S rRNA基因序列分析：16S rRNA基因在细菌鉴定中具有较高的保守性和种特异性，通过分析诺卡菌的16S rRNA基因序列，可实现对不同种类诺卡菌的准确鉴定。

4.基因芯片技术：通过检测诺卡菌特异性基因的表达水平，对不同种类诺卡菌进行鉴定。

二、诺卡菌鉴定技术方法1.传统鉴定方法：包括形态观察、生理生化试验、血清学试验等。

这些方法操作繁琐、耗时较长，且准确性相对较低。

2.分子生物学方法：如上文所述，包括核酸分子杂交技术、PCR、16S rRNA基因序列分析、基因芯片技术等。

这些方法具有较高的准确性、敏感性和特异性，已成为诺卡菌鉴定研究的主要手段。

3.生物信息学方法：通过计算机算法对核酸序列进行比对、进化树构建等分析，实现对诺卡菌的鉴定。

三、诺卡菌鉴定技术应用前景1.医学领域：诺卡菌感染在临床上较为罕见，但病情严重，及时准确地鉴定诺卡菌种类对临床诊断和治疗具有重要意义。

2.农业领域：诺卡菌在农业生产中可作为生物防治剂，对植物病害具有良好的防治效果。

准确鉴定诺卡菌种类有助于优化农业生产策略。

3.食品工业：诺卡菌在食品加工过程中可能引起食品污染，快速准确地鉴定诺卡菌种类有助于确保食品安全。

4.环境保护：诺卡菌广泛存在于土壤、水体等环境介质中，准确鉴定诺卡菌种类有助于评估环境质量及污染源追踪。

“诺卡菌病“的临床诊断及治疗方法一概述诺卡菌病为诺卡菌引起的一种人兽共患的传染病，多数为亚急性或慢性化脓性，少数为肉芽肿性疾病。

可侵袭皮肤和内脏，以肺部和中枢神经系统较常见。

诺卡菌病并不常见，但分布于世界各地，各年龄组均可发病，但以中年以后为多见，男性约为女性的2倍。

淋巴网状系统恶性疾病、器官移植、大剂量皮质类固醇或其他免疫抑制剂治疗均为好发因素，但约一半患者并无预先存在的疾病。

本病已被认为是晚期艾滋病患者的一种机会性感染。

二病因诺卡菌属共百余种，广布于土壤，大多为需氧菌。

多数为腐物寄生性的非病原，不属于人体正常菌群，故不呈内源性感染。

对人致病的主要有3种：星形诺卡菌、豚鼠诺卡菌和巴西诺卡菌。

以星形诺卡菌和巴西诺卡菌多见，后者致病力强，可引起暴发流行。

三临床表现诺卡菌侵袭皮肤和内脏，发生局部和全身感染，引起多种临床表现。

1.肺部感染即肺诺卡菌病，部分病例侵袭肺部，呈急性或亚急性起病。

表现为小叶性或大叶性肺炎，以后趋向于慢性病程，可类似肺结核病表现。

咳嗽，开始为干咳，无痰，继而产生黏脓性痰，也可在痰中带血；若有空洞形成，可有大量咯血。

常伴有发热、盗汗、胸痛、消瘦、全身不适，体温在38℃～40℃之间。

累及胸膜可发生胸膜增厚、胸腔积液或脓胸，窦道可以穿透胸壁，也可以伸展到整个腹腔内脏，继而引起血源播散。

胸部X线表现多种多样，无特异性。

如肺段或肺叶浸润性病变，厚壁空洞，坏死性肺炎，大叶性肺炎，单发或多发性肺脓肿，孤立性或多发性结节，胸腔积液，支气管胸膜瘘等，亦可表现为肺内粟粒性阴影，但较为少见。

2.脑部感染即脑诺卡菌病，1/3病例有中枢神经系统受侵袭，多由肺部病灶迁徙而来，少数亦可为原发性。

侵袭脑膜引起脑膜炎，侵袭脑实质形成多发性脓肿，亦可以相互融合成大的脓肿。

出现脑膜刺激症状或脑占位性病变，可有头痛、头晕、恶心、呕吐、不规则发热、乏力、抽搐、麻木、偏瘫、颈项强直、视力障碍、神志不清、视盘水肿、瘀血、外周血白细胞计数增高等表现。