植物体内硝态氮含量的测定

硝态氮是植物最主要的氮源。

植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。

测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

（一）原理在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。

（二）仪器与用具（1）722型分光光度计1台；（2）电子顶载天平1台（感量1/万）；（3）刻度试管20ml26支；（4）刻度吸管0.1ml. 0.5ml. 5ml. 10ml各1支；（5）容量瓶50ml8个；（6）容量瓶25ml3个；（7）小漏斗（∮5cm）3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝锅1个；（12）玻璃塞；（13）定量滤纸7cm。

试剂：500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200ml。

5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100ml,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。

置冰箱保存一周有效。

8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。

（三）实验步骤1. 标准曲线的制作（1）吸取500ppmNO3-标准溶液1ml. 2ml. 3ml. 4ml. 6ml. 8ml. 10ml. 12ml分别放入501ml容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。

（2）吸收上述系列标准溶液0.11ml，分别放入刻度试管中，以0.11ml无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4ml水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH溶液9. 51ml摇匀冷却至室温，显色液总体积为101ml。

（3）以空白作参比，在410nm波长下测定吸光度。

实验12 植物体内硝态氮含量的测定植物对氮的吸收与利用，对于其生长发育和产量形成具有重要的影响。

氮素如果以亚硝酸盐或硝酸盐的形式被植物吸收，则称为植物体内的硝态氮(N-NO3-)含量。

在植物体内量测硝态氮含量，不仅可以为揭示植物氮素代谢的特点和生理机制提供数据，还可以指导植物耐受性研究和农业生产。

1 实验原理硝态氮是植物生长发育和产量形成的重要因素，在不同发育阶段的植物中，其含量也相应发生变化。

硝态氮含量可采用摄谱光度法和电化学法测定，其中电化学法的准确性更高且应用范围更广。

本实验是利用电化学法，根据硝酸与还原剂还原成亚硝酸或氨态氮时的电离电流大小的差异，测定植物体内的硝态氮含量。

2 实验步骤2.1 样品处理取适量新鲜样品，如茄子、番茄等，去皮、去籽并洗净。

将样品碾磨成泥状，加入特定的醋酸钾(KCH3COO)提取液(醋酸钾10 g/L)，摇匀，封口密封24 h在4℃下提取。

离心后，取上清，用玛瑙瓶收集。

将所需植物红单色隐花苣、矮生豌豆、楸树等的种子按5 g每袋加入15 mL的海绵培养体，在恒温箱中翻转培养6 d至10 d。

2.3 制备电极制备硝酸电极(NH4NO3-SCE单接)和参比电极，使用前需打磨至光亮。

取同样量的植物提取液和硝酸标准溶液，加入还原剂及缘草酸进行反应。

反应完毕后，测量1 min内的电流，计算硝态氮含量。

2.5 数据处理及统计按照硝态氮含量公式计算并汇总数据，进行ANOVA方差分析及t检验。

3 注意事项3.1 样品应尽量新鲜，提取液操作要快，以避免样品中硝态氮被还原。

3.2 试剂应准确、无杂质、无缺损，若出现异常，应立即更换。

3.3 电极应保持干燥、光洁，并调整标定。

3.4 电化学池应密封，避免气泡干扰或溢液现象。

4 结果分析实验结果如下表所示：在统计学分析中，各组数据的p值均小于0.05，表明差异极显著，比较表明楸树叶片硝态氮含量最高，其次是红单色隐花苣和矮生豌豆，而茄子和番茄中硝态氮含量最低。

高级植物生理实验报告植物营养农学院农药学东保柱20132020542013年12月27日实验1 植物组织铵态氮含量的测定（茚三酮比色法）一、实验原理植物吸收的氮主要是氨态氮和硝态氮，后者经过还原过程形成氨，前者经同化后形成谷氨酰胺和谷氨酸，然后形成其他氨基酸和蛋白质。

测定氨态氮的方法有多种，本实验为改良的茚三酮比色法。

α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热，经氧化脱氨变成相应的α-酮酸，酮酸进一步脱羧变成醛，水合茚三酮则被还原，在弱酸环境中，还原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反应，缩合生成蓝紫色物质。

根据蓝紫色的深浅，在580nm 波长下测定吸光值。

本实验中在茚三酮试剂中添加乙二醇并补加正丁醇和丙醇，可以克服茚三酮的不稳定性。

二、仪器设备研钵、烧杯、漏斗、量筒、具塞试管、三角瓶、容量瓶、移液管、天平、沸水浴锅、可见分光光度计三、试剂1. 10%醋酸(100mL)2. 1% 抗坏血酸（100mL）3. 5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液（0.005g定容至1000mL）4. pH5.4醋酸缓冲液：8.8mL 0.2mol/L 醋酸（冰醋酸11.55mL稀释至1000mL）加41.2mL 0.2mol/L醋酸钠（醋酸钠16.4g或三水醋酸钠27.2g 配成1000mL）。

5. 水合茚三酮试剂：1.1g茚三酮放到烧杯中，加入15mL正丙醇，摇匀，溶解，后加入30ml正丁醇和60ml乙二醇，混匀，再加9mL pH5.4醋酸缓冲液，混匀。

保存于棕色瓶中，冰箱保存，适用期限10天。

四、操作步骤1. 标准曲线的绘制以下表所示量从5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液中分别取溶液并在每个试管中加蒸馏水至2mL，对照加2mL 蒸馏水，后在各试管中加入3mL 水合茚三酮试剂和0.1mL 1%抗坏血酸，摇匀。

盖上试管塞，于沸水中加热15分钟，取出后搅拌冷却15分钟。

冷却后的有色溶液中加无水乙醇至10mL，在波长580nm 处测吸光值，以铵态氮浓度（μg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。

铵态氮和硝态氮测定方法---副本铵态氮测量方法（2mol•L-1KCl浸提—靛酚蓝比色法）1）方法原理2mol•L-1KCl溶液浸提土壤，把吸附在土壤胶体上的NH4+及水溶性NH4+浸提出来。

土壤浸提液中的铵态氮在强碱性介质中与次氯酸盐和苯酚作用，生成水溶性染料靛酚蓝，溶液的颜色很稳定。

在含氮0.05～0.5mol•L-1的范围内，吸光度与铵态氮含量成正比，可用比色法测定。

2）试剂（1）2mol•L-1KCl溶液称取149.1g氯化钾（KCl，化学纯）溶于水中，稀释至1L。

（2）苯酚溶液称取苯酚（C6H5OH，化学纯）10g和硝基铁氰化钠[Na2Fe(CN)5NO2H2O]100mg稀释至1L。

此试剂不稳定，须贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（3）次氯酸钠碱性溶液称取氢氧化钠（化学纯）10g、磷酸氢二钠（Na2HPO4•7H2O，化学纯）7.06g、磷酸钠（Na3PO4•12H2O，化学纯）31.8g和52.5g•L-1次氯酸钠(NaOCl，化学纯，即含10%有效氯的漂白粉溶液)5mL溶于水中，稀释至1L，贮于棕色瓶中，在4℃冰箱中保存。

（4）掩蔽剂将400g•L-1的酒石酸钾钠（KNaC4H4O6•4H2O，化学纯）与100g•L-1的EDTA二钠盐溶液等体积混合。

每100mL 混合液中加入10 mol•L-1氢氧化钠0.5mL。

（5）2.5µg•mL –1铵态氮（NH4+—N）标准溶液称取干燥的硫酸铵[(NH4)2SO4，分析纯0.4717g溶于水中，洗入容量瓶后定容至1L，制备成含铵态氮（N）100µg•mL –1的贮存溶液；使用前将其加水稀释40倍，即配制成含铵态氮（N）2.5µg•mL –1的标准溶液备用。

3）仪器与设备：往复式振荡机、分光光度计。

4）分析步骤（1）浸提称取相当于10.00g干土的新鲜土样（若是风干土，过10号筛）准确到0.01g，置于150mL三角瓶中，加入氯化钾溶液100mL，塞紧塞子，在振荡机上振荡1h。

如何准确测定叶片硝态氮？
叶片硝态氮是影响植物生长的重要因素，因此测定叶片硝态氮含
量非常必要。

以下介绍两种常用的测定方法，帮助大家准确测定叶片
硝态氮。

方法一：酚-亚硝酸法
1. 取适量的样品，在磨细后加入足量的闭口水中搅拌均匀，放置20-30分钟，取出过滤。

2. 取少量滤液加入1%酚水和2%亚硝酸，混匀后放置20分钟。

3. 加入硫酸蒸馏，控制加热速度，在加热过程中不断搅拌，开始
收集第一个60mL蒸馏液，舍去，收集第二个60mL蒸馏液，用3%硫酸
钠溶液进行滴定，直到背景色消失。

方法二：自动氨态氮/硝态氮分析法
1. 取适量茎叶样品，磨碎后加入硝酸钾与过磷酸钠的混合液体中。

2. 将样品放入装有附有硝态氮/氨态氮分析仪的载样舱中，进行
测试。

注意：使用前需要对分析仪进行预热，同时，还需要使用标准物
质进行标定，确保结果准确。

通过以上两种方法的操作，我们可以准确地测定叶片硝态氮含量，为培育高产优质作物提供科学依据。

植物体内硝态氮含量的测定
测定植物体内硝态氮含量的方法可以通过以下步骤进行：
1. 样品准备：选择一定数量的植物组织或器官作为样品，如根、茎、叶等。

将样品收集并保持新鲜。

2. 样品处理：将样品在离子交换树脂柱中进行前处理，使用硝化态氮还原剂将硝态氮还原为氨。

3. 反应体系：将还原后的样品与含有硫酚酸、过硫酸铵等试剂的反应体系混合，形成可测定的化合物。

4. 反应媒介：选择合适的反应媒介来测定反应产生的化合物，如使用紫外光谱法、分光光度法、电化学法等。

5. 检测与测量：使用相应的仪器或设备进行测量和记录，根据每种方法的特点和原理，选择合适的测量方式。

值得注意的是，硝态氮含量的测定方法可能因不同的植物物种和研究目的而有所差异，因此建议在实施前进行相关的文献调研和方法优化。

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本课程共设10个实验，其中显微镜的使用及放线菌、真菌、藻类等微生物形态的观察，水中浮游动物的观察和数量的测定，培养基的制备及灭菌，植物叶绿素提取，植物体内硝态氮含量的测定为验证性试验；空气中微生物的计数，水中细菌总数的检测及水质量评价，植物种子发芽毒性检测，植物体内过氧化物酶对污染物的测定，有机物的微生物降解为综合性实验。

实验技术课的主旨和要求1.1实验技术的主旨任何科学知识和理论都来源于实际的观察和科学实验，这一点对于环境科学更是如此。

实验技术课程是大多数课程的重要组成部分，在实验课上培养起来的科研素质和实验技能，不仅对学生完成学业而且对从事创新性课题研究都具有重要而深远的意义。

实验技能的培养包括：①设计实验，在了解实验原理和目的基础上，逐渐学会自己设计实验；②观察与测量，这是实验过程的主要内容；③实验记录，真实准确地记录实验中每一个数据、每一个细节并且及时进行整理；④分析和解释数据，是处理实验数据的基本功；⑤写作实验报告，是对实验技术过程和实验结果的总结，同时也是提升综合科研素质和实验能力的重要一环。

1.2实验技术课的基本要求1.2.1课前充分准备课前务必做到如下准备①预先仔细阅读实验讲义内容，明确实验目的和实验技术。

硝态氮的简单测定方法引言硝态氮（NO3-N）是土壤中一种重要的氮素形态，对植物的生长具有重要影响。

因此，准确测定土壤中的硝态氮含量对于农业生产和环境保护都至关重要。

本文将介绍一种简单而有效的测定硝态氮含量的方法。

仪器和试剂准备1. 过滤瓶和滤纸：用于过滤土壤样品提取液。

2. 250 mL 锥形瓶：用于装载土壤样品和试剂溶液。

3. 氮硫分析仪：用于测定土壤样品提取液中的硝态氮含量。

4. 紫外可见分光光度计：用于测定硝态氮生成的混合酸中的硝酸盐的浓度。

5. 硼砂：用于去除土壤样品中的硝酸盐。

操作步骤1. 取适量土壤样品放入过滤瓶中，并加入蒸馏水，将土壤样品与蒸馏水以1:2的体积比混合均匀。

2. 将混合液过滤得到提取液。

将提取液保存在干燥的锥形瓶中备用。

3. 准备去除硝酸盐的溶液，将硼砂和蒸馏水以1:10的体积比混合均匀。

用该溶液将土壤样品中的硝酸盐转化成硼酸盐。

4. 将转化后的样品过滤，并使用紫外可见分光光度计测定硼酸盐的浓度，并据此计算硝酸盐的浓度。

5. 取适量转化后的样品用氮硫分析仪测定硝态氮的浓度。

注意事项1. 操作过程中需要注意实验室卫生和安全，戴上手套和眼镜。

2. 提取液中土壤样品的比例可以根据样品的性质进行调整。

3. 在转化硝酸盐的过程中，确保硼砂和蒸馏水充分混合。

4. 在测定硼酸盐浓度的时候，将样品测量值与标准曲线对照得出结果。

5. 操作过程中尽量减小误差，保持实验条件的一致性。

结论本文介绍了一种简单而有效的测定土壤中硝态氮含量的方法。

通过混合土壤样品和蒸馏水，转化硝酸盐成硼酸盐，并使用紫外可见分光光度计和氮硫分析仪测定硝态氮的浓度。

这种方法简单易行，结果准确可靠，适用于实际农业生产和研究中的硝态氮测定。

参考文献：引用需要相关指南或相关文献。

植株硝态氮的速测方法（硝酸试粉比色法）一、试剂配制1、硝粉试剂：称取硫酸钡50克，分成数份，分别与硫酸锰（MnSO4*H2O）5克，锌粉1克，对氨基苯磺酸2克,α-萘胺1克，在研钵中研细混匀，最后与37.5克柠檬酸一起研磨均匀,贮于暗色瓶中,防潮避光.此试粉呈灰白色,若变为粉红色,则不能使用.2、pH5.0柠檬酸缓冲液：称取化学纯柠檬酸4.31克,柠檬酸钠6.86克,溶于500ml水中.(新鲜配制)3、硝态氮标准溶液：称取7.22克分析纯硝酸钾,加水,定容至1000ml,即为1000 ppm(NO2--N)二、标准色阶的配制.1、50ppm硝酸钾溶液配制：取10ml1000ppm硝酸钾,定容至200ml2、加数三、清晨在待测田块中，选取有代表性的植株10-20株的敏感部位，用湿布擦净，剪碎，榨汁备用。

于15ml刻度试管中，加入5 ml柠檬酸，滴入1滴（水稻为2滴）组织液，加入5ml水，摇匀后加入0.2克硝酸试粉,塞紧，纵向摇匀1分钟（200次），静置15分，比色。

（可用硝态氮标准色阶溶液进行同样显色，目测出硝态氮ppm数）四、结果计算。

植株组织液硝态氮含量（ppm）=标准色阶硝态氮ppm*V1\V2（200）V1—显色溶液的ml数V2—所取汁液的ml数1滴=2002滴=100植株中的有效磷速测法(磷钼蓝比色法)一、试剂配制1、1.5%钼酸铵—盐酸溶液：称取钼酸铵1.5克溶于约30ml温水中,冷却后,缓缓加入浓盐酸30ml边加边搅拌,用水稀释至100ml,贮于棕色瓶中.2、2.5%氯化亚锡—甘油溶液:称取氯化亚锡2.5克加浓盐酸10ml,加热促进溶解(如混浊,应过滤)再加甘油90ml.混匀,贮于棕色瓶中,存放暗处,可存半年3、标准磷溶液:称取0.2194克磷酸二氢钾,溶于400ml水中,加入7N硫酸2.5ml(将4.9ml浓硫酸缓缓加入20ml水中)混匀,定容至1000ml,即为50ppm标准磷溶液,制备标准色阶,稀释成5ppm的磷标准溶液即可二、标准色阶配制水三、测定方法于15ml刻度试管中,加入4ml水,滴入1滴组织液,摇匀;加入1ml钼酸铵,摇匀,再加入氯化亚锡甘油1滴,再次摇匀后5-15分后比色.四、结果计算植株磷含量ppm=测得的ppm数*(V1\V2)（100）（1滴=100）植株中钾的测定方法一、试剂配制1.钾试剂母液:称取1克亚硝酸钴钠和6克化学纯亚硝酸钠,溶于14ml水中,加入5ml冰醋酸(乙酸),再用水稀释至20ml,盛于棕色瓶开口放置两天,让有毒气体逸出后备用.放入冰箱可保存2-3周.2.钾试剂稀释液:测定前吸母液5ml,加入溶有15克亚硝酸钠的100ml水中.二、操作步骤于15ml试管中，加入2.5ml钾试剂稀释液,滴入1滴组织液,摇匀后加入1ml异丙醇再摇匀,15分钟后目测,在小试管后衬一张印有5号印刷体的报刊,透过溶液看字迹.若字迹清楚放大表示缺钾(5-10ppm),若字迹模糊尚能看出字迹适中(10-15ppm),看不出字迹表示钾含量充足(20ppm以上)三、结果计算植株汁液钾含量ppm=测出的ppm*(V1\V2)50四、取样部位棉花：定苗前取茎叶混合组织蕾期取主茎顶部下已展开的第三叶片或叶柄花铃期打顶后取主茎下第一叶片或叶柄吐絮期取主茎顶下经一叶片或叶柄水稻：取心叶下第3-5叶鞘或茎节（小麦同）玉米：取下部老叶鞘。

蔬菜中硝态氮含量的测定硝态氮（N）,分子组成为：14N15N，是硝酸盐中最重要的氮元素，硝态氮在蔬菜中的含量是衡量蔬菜品质的重要指标，可以反映蔬菜的营养含量和收获时间的长短，影响蔬菜的品质和口感。

因此，对蔬菜中的硝态氮含量进行测定，可以为蔬菜质量控制提供重要的参考数据。

一、硝态氮的测定原理硝态氮的测定常用的方法有kjeldahl法和碘重量法。

Kjeldahl法是将蔬菜样品中的氮以硫化物溶解，然后用稀硫酸加热水解，将氮转化为氨气，通过铵比重计分析器测定氨气，最终获得硝态氮含量。

而碘重量法是将样品中的氮经氯化铵处理，然后用碘重量法（也叫碘滴定法）测定，也是用来检测硝态氮含量的常见方法。

二、硝态氮测定所需设备1、仪器设备：铵比重计，稀硫酸，氯化铵，碘滴定装置，恒温恒湿消解瓶，滴定管，滴管架，量筒，烧杯等。

2、试剂：50％稀硫酸，30％氯化铵，碘粉，1mol/L碘滴定缓冲液等。

三、硝态氮测定步骤1、采集样品：将样品放入容器中，然后用一定量的50％稀硫酸，搅拌均匀，加热消解2小时，至有沸腾的小泡，然后浓缩至容量的一半；2、Kjeldahl法测定：将消解液倒入恒温恒湿消解瓶中，放入稀硫酸，加热水解3分钟，将氮转化为氨气，用铵比重计分析器测定氨气；3、碘重量法测定：将样品中的氮经氯化铵处理，然后用碘重量法（也叫碘滴定法）测定，用滴定管，滴管架，量筒，烧杯等设备，通过比较溶液颜色的深浅，以及消耗碘的量，来计算样品中硝态氮的含量。

四、根据硝态氮含量判断蔬菜品质蔬菜中硝态氮含量和蔬菜的口感有很大的关系，其含量的高低，可以反映蔬菜的收获时间的长短以及口感的好坏。

一般来说，在蔬菜收获时，硝态氮含量在1.2～2.2％范围内，蔬菜口感较佳，而硝态氮含量过高（2.2％以上）或过低（1.2％以下），则表明蔬菜口感不佳。

综上所述，硝态氮是衡量蔬菜品质的重要指标，为蔬菜的质量控制提供重要的参考数据，对蔬菜的口感至关重要，应该在收获后立即测定其中硝态氮的含量，以保证蔬菜的质量和口感。

叶片硝态氮测定方法引言：叶片硝态氮测定方法是植物生理学和农业科学中常用的一种技术手段。

通过准确测定叶片中的硝态氮含量，可以帮助研究人员更好地了解植物的营养状况和生长环境，从而指导农业生产和植物研究。

本文将介绍叶片硝态氮测定的一种常见方法。

一、背景植物在生长过程中对氮元素的需求量较大，特别是硝态氮对植物生长有着重要影响。

因此，准确测定叶片中的硝态氮含量对于评估植物的营养状况和生长环境至关重要。

二、叶片硝态氮测定方法叶片硝态氮测定方法有很多种，其中一种常用的方法是使用硝酸还原法。

具体步骤如下：1. 样品准备：将需要测定硝态氮含量的叶片样品收集起来，将其洗净并晾干。

2. 样品研磨：将洗净晾干的叶片样品研磨成细粉末状。

3. 提取硝态氮：取一定量的叶片粉末，加入一定量的去离子水，进行硝态氮的提取。

可以使用超声波进行提取，也可以使用搅拌器进行提取。

4. 过滤：将提取液过滤，去除杂质。

5. 硝酸还原：取一定量的提取液，加入一定量的硝酸还原剂。

硝酸还原剂的选择根据实验需求和设备条件而定。

将混合液加热至一定温度，使硝态氮还原为氨态氮。

6. 氨态氮测定：使用氨态氮测定仪器或试剂盒进行氨态氮的测定。

根据实验需求，可以选择不同的测定方法和仪器。

7. 数据处理：根据测定结果计算叶片中硝态氮的含量。

可以使用标准曲线法或其他计算方法进行数据处理。

三、注意事项1. 实验过程中要注意操作的准确性和安全性，避免对人体和环境造成危害。

2. 样品的采集和保存要注意避免污染和变质，以免影响测定结果的准确性。

3. 实验中使用的仪器和试剂要进行校准和质量控制，确保测定结果的准确性和可靠性。

4. 实验室环境要保持干净整洁，避免干扰和误差的产生。

结论：叶片硝态氮测定方法是评估植物的营养状况和生长环境的重要手段之一。

通过使用硝酸还原法，可以准确测定叶片中的硝态氮含量。

然而，在进行实验前，需要注意一些操作细节和实验条件，以保证测定结果的准确性和可靠性。

硝态氮的植物样品的全氮测定的方法原理我们今天要聊一个很“高大上”的话题——硝态氮的植物样品全氮测定方法的原理。

听起来是不是有点让人头疼？别急，我来跟你慢慢捋一捋，说的通俗点，就是怎么弄明白植物体内含有多少氮元素，尤其是硝态氮。

可能很多人听到“氮”字就会想：这不就是空气中的气体吗？没错，氮是空气的主要成分之一，实际上氮对植物的成长非常重要，缺了它，植物就像没有水的花儿，枯黄、萎靡，啥都做不好。

所以啊，搞明白植物中氮的含量，对农业、环境保护都非常关键。

好了，接下来我就给大家说说怎么测定这些“藏在植物里”的氮。

首先呢，测定氮的最常用方法之一，就是凯氏定氮法。

听名字可能感觉有点儿科学，实际上它做的事儿就是通过加热、蒸馏等一系列步骤，把样品中的氮释放出来，然后通过滴定的方法，算出到底有多少氮。

说白了，就是把你手中的植物样品“逼”出来，让它“吐”出里面的氮，最后再通过一系列的试剂判断氮的量。

听起来是不是有点儿像化学实验室里的魔法？其实原理也挺简单的。

大致上就是先把植物样品泡在含有浓硫酸的试剂里，加热把它变成气体，之后通过氨的蒸馏，再用标准的酸液进行滴定，看它反应掉了多少氮，最后根据数据计算出来。

过程看似复杂，实则很“干脆”，一旦你掌握了诀窍，像打游戏一样，轻松又有趣。

但话说回来，这个方法可不是随便谁都能做的，它有点“小脆弱”，需要一点耐心和技巧。

比如说温度控制得不对，蒸馏的氮气就会不完全，结果就不准。

还有就是，凯氏定氮法需要的设备多，什么消化炉、滴定管、接收瓶，样样不能少，虽然这些工具看起来很“严肃”，但你别看它们高高在上，它们都是为了一件事儿：让你能准确测到氮含量。

至于为什么要选择硫酸来消化样品，哎呀，这可不是随便挑的，它可是有强大化学能量的，能够“帮助”样品中的氮元素释放出来，像是把困在植物里的小精灵给解救出来。

然后呢，还有一种方法就是更“简单”的，叫做微波消解法。

简单来说，这个方法就像是在厨房里做菜，只不过你不是在炖汤，而是在通过微波加热让植物样品中的氮元素挥发出来。

高级植物生理实验报告植物营养农学院农药学东保柱20132020542013年12月27日实验1 植物组织铵态氮含量的测定（茚三酮比色法）一、实验原理植物吸收的氮主要是氨态氮和硝态氮，后者经过还原过程形成氨，前者经同化后形成谷氨酰胺和谷氨酸，然后形成其他氨基酸和蛋白质。

测定氨态氮的方法有多种，本实验为改良的茚三酮比色法。

α-氨基酸与水合茚三酮溶液一起加热，经氧化脱氨变成相应的α-酮酸，酮酸进一步脱羧变成醛，水合茚三酮则被还原，在弱酸环境中，还原型茚三酮，氨和另一分子水合茚三酮反应，缩合生成蓝紫色物质。

根据蓝紫色的深浅，在580nm 波长下测定吸光值。

本实验中在茚三酮试剂中添加乙二醇并补加正丁醇和丙醇，可以克服茚三酮的不稳定性。

二、仪器设备研钵、烧杯、漏斗、量筒、具塞试管、三角瓶、容量瓶、移液管、天平、沸水浴锅、可见分光光度计三、试剂1. 10%醋酸(100mL)2. 1% 抗坏血酸（100mL）3. 5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液（0.005g定容至1000mL）4. pH5.4醋酸缓冲液：8.8mL 0.2mol/L 醋酸（冰醋酸11.55mL稀释至1000mL）加41.2mL 0.2mol/L醋酸钠（醋酸钠16.4g或三水醋酸钠27.2g 配成1000mL）。

5. 水合茚三酮试剂：1.1g茚三酮放到烧杯中，加入15mL正丙醇，摇匀，溶解，后加入30ml正丁醇和60ml乙二醇，混匀，再加9mL pH5.4醋酸缓冲液，混匀。

保存于棕色瓶中，冰箱保存，适用期限10天。

四、操作步骤1. 标准曲线的绘制以下表所示量从5μg/mL 亮氨酸或丙氨酸溶液中分别取溶液并在每个试管中加蒸馏水至2mL，对照加2mL 蒸馏水，后在各试管中加入3mL 水合茚三酮试剂和0.1mL 1%抗坏血酸，摇匀。

盖上试管塞，于沸水中加热15分钟，取出后搅拌冷却15分钟。

冷却后的有色溶液中加无水乙醇至10mL，在波长580nm 处测吸光值，以铵态氮浓度（μg/mL）为横坐标，吸光值为纵坐标绘制标准曲线。

植物组织中硝态氮含量的定量测定植物组织中硝态氮含量的定量测定是研究植物生长发育过程中氮代谢调节的关键指标之一。

硝态氮是植物体内氮代谢过程中的重要中间产物，在植物体内具有重要的生理作用，能作为植物施肥效果评估的重要参考指标。

目前植物硝态氮含量的常规检测方法有色谱法、分光光度法、酶联免疫吸附法等。

1. 色谱法色谱法是比较常用的植物硝态氮含量检测方法之一。

该法主要分为气相色谱和高效液相色谱两种。

气相色谱法主要是利用气相柱进行分离，并以热导检测器检测硝态氮的含量。

使用气相色谱方法检测硝态氮含量时，需要样品经过完全的蒸馏和净化，才能避免样品中其它杂质的影响。

高效液相色谱法主要是利用液相柱进行分离，并以紫外检测器检测硝态氮的含量。

该方法比气相色谱法具有更高的准确度和灵敏度。

2. 分光光度法分光光度法是另一种常用的植物硝态氮含量检测方法。

该方法主要利用硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐，然后利用还原亚硝酸的反应与二苯胺形成偶氮染料，并通过分光光度法检测其光密度变化来计算硝态氮的含量。

分光光度法比较适用于样品数目较小的试验。

3. 酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是一种快速、敏感的植物硝态氮含量检测方法。

该方法主要利用硝酸还原酶将硝酸盐转化为亚硝酸盐，并与抗硝酸盐多克隆抗体结合，然后再用辣根过氧化物酶与抗硝酸盐抗体结合，最后通过比色法检测抗体和其结合的亚硝酸盐的含量来计算硝态氮的含量。

综上所述，植物组织中硝态氮含量的定量测定需要根据实验的要求和对象选择不同的检测方法，以便获得准确、可靠的试验结果，为植物生长发育、施肥管理等提供科学依据。

二、植物体内硝态氮含量的测定硝态氮是植物最主要的氮源。

植物体内硝态氮含量往往能反映土壤中硝态氮供应情况，因此可作为土壤肥氮肥的指标。

测定植物体内的硝态氮含量，不仅能够反映出植物的氮素营养情况，而且对鉴定蔬菜和植物为原料的加工制品的品质也有重要的意义。

（一）原理在浓酸条件下，NO3-与水杨酸反应，生成硝基水杨酸，硝基水杨酸在碱性条件下（PH>12）呈黄色，在一定范围内，其颜色深浅与含量成正比，可直接比色测定。

（二）仪器与用具（1）722型分子光光度计1台；（2）电子顶载天平1台（感量1/万）；（3）刻度试管20cm326支；（4）刻度吸管0.1cm3. 0.5cm3. 5cm3. 10cm3各1支；（5）容量瓶50cm38个；（6）容量瓶25cm33个；（7）小漏斗（∮5cm）3个；（8）玻棒1根；（9）洗耳球1个；（10）电炉1个；（11）铝锅1个；（12）玻璃塞；（13）定量滤纸7cm。

试剂：500ppmNO3-标准溶液精确称取烘至恒重的KNO3 0.7221克溶于无离水中，定容至200cm3。

5%水杨酸一硫酸溶液称取5克水杨酸溶于100cm3,浓硫酸中（密度为1. 84），搅拌溶解后，贮于棕色瓶中。

置冰箱保存一周有效。

8%氢氧化纳溶液称取10克氢氧化纳溶于1dm3无离子水中即可。

（三）实验步骤1. 标准曲线的制作（1）吸取500ppmNO3-标准溶液1cm3. 2cm3. 3cm3. 4cm3. 6cm3. 8cm3. 10cm3. 12cm3分别放入501cm3容量瓶中，用无离子定至刻度，使之成10. 20、30、40、60、80、100、120、ppm的系列标准溶液。

（2）吸收上述系列标准溶液0.11cm3，分别放入刻度试管中，以0.11cm3无离子水代替标准溶液作空白，再分别加入0.4cm3水杨酸一硫酸溶液，摇匀，在室温下放置20分钟后再加入8%NaOH 溶液9. 51cm3摇匀冷却至室温，显色液总体积为101cm3。