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精选doc 白血病细胞的免疫分型
正常血细胞从多能干细胞分化、发育、成熟为功能细胞的过程中，细胞膜、细胞浆或胞核抗原的出现、表达增多与减少甚至消失与血细胞的分化发育阶段密切相关，而且表现出与细胞系列及其分化程度相关的特异性。因此，这些抗原的表达与否可作为鉴别和分类血细胞的基础。白血病是造血系统的恶性肿瘤，在形态上变化虽相当大，但仍能表达正常血细胞所具有的抗原，因而仍可依据其抗原的表达谱对白血病进行免疫分型。由于白血病细胞具有肿瘤细胞的特征，其抗原表达又不完全同于正常血细胞，常可出现某些抗原缺乏、过度表达、系列交叉表达某一系列或阶段不应有的抗原，这又增加了白血病免疫分型的复杂性。
近年来白血病的免疫分型已成为诊断血液恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一。国际上公认的通用的方法是流式细胞术（FCM），此外还有免疫组化法，电镜和荧光显微镜也可以帮助诊断。其中流式细胞术（FCM）和免疫组化法较为常用。
流式细胞术中，白血病免疫分型是利用荧光素标记的单克隆抗体（McAb）作分子探针，多参数分析白血病细胞的细胞膜和细胞浆或细胞核的免疫表型，由此了解被测白血病细胞所属细胞系列及其分化程度。因为FCM能快速，多参数，客观的定性又定量测定细胞膜，浆，核的抗原表达。另一个重要理由是至今尚未发现白血病的特异抗原。所以能用正常血细胞的单抗来进行免疫分型是基于白血病形成的分化阻断学说即白血病细胞基因异常，分化受阻于某阶段形成不同亚型的白血病。这群细胞充盈于骨髓。抗原表达与其相应系列/阶段的血细胞无明显差异。与形态学检查相似仅能根据数量的差异来判断病变细胞的属性。单参数免疫标志测定易将正常细胞包括在内。因此，近年来主张用设门（gating）方法。即用CD45与侧向角（side scatter,SSC），对数取样后可将骨髓细胞清晰地分出淋巴细胞，单核细胞，成熟粒细胞，幼稚细胞和红细胞群，其理论依据是CD45是所有白细胞的抗原。其表达量在淋巴细胞最高，单核细胞，成熟粒细胞，早期造血细胞（blasts）依次减弱。红细胞（中，晚幼红细胞，成熟红细胞）不表达CD45。SSC反映细胞的颗粒性，成熟粒细胞SSC最高，依次为单核细胞，淋巴细胞，blasts，红细胞。以CD45/SSC双参数，对数取样时即可把各细胞群区分出来。若同时加上一个，二个甚或三个荧光标记的单抗，则很容易识别非正常细胞群所表达的抗原。这样可以排除正常细胞的干扰。在幼稚细胞％低的情况下或检测残存白血病时尤为必要 。FCM分析白血病免疫表型时，测量细胞数量一般在10000～50000细胞之间，而且快速、特异、准确，重复性好，能区分细胞起源、划分其分化发育阶段等，对白血病的诊断与分型、治疗方案选择与预后判断、发病机理研究等有重要价值。
・ １８５４ ・ 国际检验医学杂志２０１１年１Ｏ月第３２卷第１６期Ｉｎｔ Ｊ Ｉ ｂ Ｍｅｄ，Ｏｃｔｏｂｅｒ ２０１１，ＶＯｌ＿３２，Ｎｏ．１６
［７］Ｋａｎｇ ＣＰ，Ｌｅｅ ＨＳ，Ｊｕ Ｈ，ｅｔ ａ１．Ａ ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌ ｈａｐｌｏｔｙｐｅ ｏｆ ｔｈｅ ＰＡＤ Ｉ４ ｇｅｎｅ ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉ— ｔｙ ｉｎ Ｋｏｒｅａｎｓ［Ｊ］．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ，２００６，５４（１）：９０—９６． ［８］Ｈｏｐｐｅ Ｂ，Ｈ￣ｉｕｐｌ Ｔ，Ｇｒｕｂｅｒ Ｒ，ｅｔ ａ１．Ｄｅｔａｉｌｅｄ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｖａｒｉａ ｂｉｌｉｔｙ ｏｆ ｐｅｐｔｉｄｙｌａｒｇｉｎｉｎｅ ｄｅｉｍｉｎａｓｅ ｔｙｐｅ ４ ｉｎ Ｇｅｒｍａｎ ｐａｔｉｅｎｔｓ ｗｉｔｈ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ：ａ ｃａｓｅ—ｃｏｎｔｒｏｌ ｓｔｕｄｙ［Ｊ］．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｅｓ Ｔｈｅｒ， ２００６，８（２）：Ｒ３４． ［９３ Ｐｌｅｎｇｅ ＲＭ，Ｐａｄｙｕｋｏｖ Ｌ，Ｒｅｍｍｅｒｓ ＥＦ，ｅｔ ａ１．Ｒｅｐｌｉｃａｔｉｏｎｓ ｏｆ ｐｕｔａ ｔｉｖｅ ｃａｎｄｉｄａｔｅ ｇｅｎｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｗｉｔｈ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｉｎ＞４ ０００ ｓａｍｐｌｅｓ ｆｒｏｍ Ｎｏｒｔｈ Ａｍｅｒｉｃａ ａｎｄ Ｓｗｅｄｅｎ：ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ ｓｕｓ— ｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｗｉｔｈ ＰＴＰＮ２２，ＣＴＬＡ４，ａｎｄ ＰＡＤＩ４［Ｊ］．Ａｍ Ｊ Ｈｕｍ Ｇｅｎｅｔ，２００５，７７（６）：１０４４—１０６０． ［１ｏ］Ｈａｒｎｅｙ ＳＭ，Ｍｅｉｓｅｌ Ｃ，Ｓｉｍｓ ＡＭ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｅｔｉｃ ａｎｄ ｇｅｎｏｍｉｃ ｓｔｕｄ— ｉｅｓ ｏｆ ＰＡＤＩ４ ｉｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ［Ｊ］．Ｒｈｅｕｍａｔｏｌｏｇｙ（Ｏｘ ｆｏｒｄ），２００５，４４（７）：８６９—８７２． ［１１］Ｃａｐｏｎｉ Ｌ，Ｐｔｉｔ Ｔｅｉｘｅｉｒａ Ｅ，Ｓｅｂｂａｇ Ｍ，ｅｔ ａ１．Ａ ｆａｍｉｌｙ ｂａｓｅｄ ｓｔｅｄｙ ｓｈｏｗｓ ｎｏ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｂｅｔｗｅｅｎ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ａｎｄ ｔｈｅ ＰＡ ＤＩ４ ｇｅｎｅ ｉｎ ａ ｗｈｉｔｅ Ｆｒｅｎｃｈ ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ［Ｊ］．Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ，２００５， ６４（４）：５８７－５９３． ［１２］Ｉ ｅｅ ＹＨ，Ｒｈｏ ＹＨ，Ｃｈｏｉ ＳＪ，ｅｔ ａ１．ＰＡＤＩ４ ｐｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｓ ａｎｄ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ：ａ ｍｅｔａ ａｎａｌｙｓｉｓ［Ｊ］．Ｒｈｅｕｒｎａ— ｔｏｌ Ｉｎｔ，２ＯＯ７，２７（４）：８２７—８３３． ［１ ３］Ｂｕｒｒ ＭＩ ，Ｎａｓｅｅｍ Ｈ，Ｈｉｎｋｓ Ａ，ｅｔ ａ１．ＰＡＤＩ４ ｇｅｎｏｔｙｐｅ ｉｓ ｎｏｔ ａｓ— ｓｏｃｉａｔｅｄ ｗｉｔｈ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｉｎ ａ ｌａｒｇｅ ＵＫ Ｃａｕｃａｓｉａｎ ｐｏｐｕ— ｌａｔｉｏｎＥＪ］．Ａｎｎ Ｒｈｅｕｍ Ｄｉｓ，２０１０，６９（４）：６６６—６７０． ［１ ４］Ｆｒｅｕｄｅｎｂｅｒｇ Ｊ，Ｌｅｅ ＨＳ，Ｈａｎ ＢＧ，ｅｔ ａ１．Ｇｅｎｏｍｅ—ｗｉｄｅ ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｓｔｕｄｙ ｏｆ ｒｈｅｕｍａｔｏｉｄ ａｒｔｈｒｉｔｉｓ ｉｎ Ｋｏｒｅａ：ｐｏｐｕｌａｔｉｏｎ—ｓｐｅｃｉｆｉｃ ｌｏｃｉ ａｓ ｗｅｌｌ ａｓ ｏｖｅｒｌａｐ ｗｉｔｈ Ｅｕｒｏｐｅａｎ ｓｕｓｃｅｐｔｉｂｉｌｉｔｙ ｌｏｃｉ ＥＪ］．Ａｒｔｈｒｉｔｉｓ Ｒｈｅｕｍ，２０１１，６３（４）：８８４—８９３． ［１ ５］冯忠军，梁芸，闻海丰，等．中国河北地区汉族健康人与ＲＡ患者 ＰＡＤＩ４９４单核苷酸多态性的研究［Ｊ］．临床检验杂志，２００９，２７ （２）：９７ ９９． ［１６］钟兵，方勇飞，李华，等．ＰＡＤＩ４基因多态性与类风湿关节炎的相 关性研究［Ｊ］ 第三军医大学学报，２０１０，３２（１１）：１１５５ １１５７． ［１ ７］Ｔａｋｉｚａｗａ Ｙ，Ｓａｗａｄａ Ｔ，Ｓｕｚｕｋｉ Ａ，ｅｔ ａ１．Ｐ印ｔｉｄｙｌａｒｇｉｎｉｎｅ ｄｅｉｍｉ
国际堕验医学杂志２０１２年６月第３３卷第１２期Ｉｎｔ Ｊ Ｌａｂ Ｍｅｄ，Ｊｕｎｅ ２０１２，Ｖｏ１．３３，Ｎｏ．１２
・临床检验研究论著・
多参数流式细胞术在白血病免疫分型中的应用探讨
熊 见，解小红，黄敏，王长本
（重庆三峡中心医院临床检验科４０４０００） ・ １４２７ ・
摘 要：目的 探讨多参数流式细胞术（ＦＣＭ）在白血病免疫分型中的应用。方法 利用ＣＤ４５／ＳＳＣ设门的四色荧光ＦＣＭ
检测３３９例白血病患者骨髓细胞表面标记。结果 ３３９例白血病中急性髓系白血病（ＡＭＬ）１５０例，占４４．２ ，髓系抗原表达率以
ＣＤ３３（８６．７ ）最高，其余从高到低依次为ＣＤ１１７、ＣＤ３、ｃＭＰＯ、ＣＤＩ５。淋巴细胞性白血病１８３例，占５４．０％，其中急性Ｂ淋巴细
胞白血病（ＡＩ Ｉ Ｂ）ｌ１０例、急性Ｔ淋巴细胞白血病（ＡＩ Ｉ Ｔ）２７例、慢性淋巴细胞白血病（ＣＬＬ）４６例。ＡＬ卜Ｂ淋巴系抗原表达率
以ＣＤ１９最高，其余由高到低依次为ｃＣＤ７９ａ、ＣＤ１０、ＣＤ２２、ＣＤ２０，ＡＩ Ｌ—Ｔ淋巴系抗原表达率以ＣＤ７最高，其余由高到低依次为 ＣＤ２、ＣＤ５、ＣＤ３。髓系白血病中常见交叉表达淋巴系抗原ＣＤ５６、ＣＤ７、ＣＤ９。ＡＩ Ｌ中常见交叉表达髓系抗原ＣＤ１３、ＣＤ３３，ＣＤ１４
的表达与单核细胞白血病相关。结论 应用多参数ＦＣＭ能对白血病进行分型，对于白血病的诊断治疗和预后判断均有重要
价值。
关键词：白血病； 流式细胞术； 免疫分型
ＤＯＩ：ｌ０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７３ ４１３０．２０ｌ２．１２．００８ 文献标识码：Ａ 文章编号：１６７３—４１３０（２０１２）Ｉ２－１４２７—０３
Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｕｌｔｉ—ｐａｒａｍｅｔｅｒ ｆｌｏｗ ｃｙｔｏｍｅｔｒｙ ｆｏｒ ｔｈｅ ｉｍｍｕｎｏｐｈｅｎｏｔｙｐｉｎｇ ｏｆ ｌｅｕｋｅｍｉａ Ｘｉｏｎｇ Ｊ ｉａｎ，Ｘｉｅ Ｘｉａｏｈｏｎｇ，Ｈｕａｎｇ Ｍｉｎ，Ｗａｎｇ Ｃｈａｎｇｂｅｎ
血液病免疫分型
血液病的免疫分型主要根据免疫表型和免疫遗传学特征进行分类。以下是一些常见的血液病免疫分型：
1. 急性淋巴细胞性白血病（Acute Lymphoblastic Leukemia，ALL）的免疫分型：
- B-ALL：由B淋巴细胞系发展而来。
- T-ALL：由T淋巴细胞系发展而来。
2. 慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞淋巴瘤（Chronic
Lymphocytic Leukemia/Small Lymphocytic Lymphoma，CLL/SLL）的免疫分型：
- CD5+/CD23+/CD20+：典型的B淋巴细胞来源。
- CD5-/CD23+/CD20+：非典型的B淋巴细胞来源。
- CD5+/CD23-/CD20+：突变的B淋巴细胞来源。
3. 急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia，AML）的免疫分型：
- 标准化治疗亚组（NCCN标准化治疗亚组）：包括核准的AML-M0至AML-M7亚型。
- 非标准化治疗亚组：包括AML-M0、AML-M6和AML-M7亚型以外的亚型。
4. 慢性髓性白血病（Chronic Myeloid Leukemia，CML）的免疫分型：
- Ph染色体阳性（Ph+）：含有Ph染色体（Philadelphia染色体）。
5. 骨髓增殖性肿瘤（Myeloproliferative Neoplasm，MPN）的免疫分型：
- 慢性骨髓性白血病（Chronic Myeloid Leukemia，CML）：Ph染色体阳性。
- 原发性骨髓纤维化（Primary Myelofibrosis，PMF）：包括JAK2V617F突变和CALR基因突变。
- 骨髓增殖性肿瘤不分类型（Myeloproliferative Neoplasm，NOS）：不符合上述分类的其他骨髓增殖性肿瘤。
