锁阳对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响
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大鼠论文抗疲劳作用论文:参姜锁阳益气片对Wister大鼠的抗疲劳作用【摘要】目的研究参姜锁阳益气片灌胃给药对wistar 大鼠的抗疲劳作用。
方法选取体重相近、健康雄性wister 大鼠64只,随机分为:对照组,给药低剂量组、给药中剂量组及给药高剂量组。
分别按照对照组0mg/ml、低剂量组2mg/ml、中剂量组5 mg/ml、高剂量组12.5 mg/ml的剂量给予用0.9%生理盐水配制好的参姜锁阳益气片原料药溶液1ml/100g体重,每天一次,连续给药14天,并于第7天、第14天分别测定大鼠的负重游泳时间和血乳酸水平。
结果与对照组相比,在连续给药7天、14天后,给药高剂量组、给药中剂量组大鼠负重游泳时间显著延长,并呈现一定的剂量依赖;同时剧烈运动后即刻血乳酸上升水平明显降低。
结论参姜锁阳益气片能够增强集体耐力,延缓运动后血乳酸快速上升,具有一定的抗疲劳功效。
【关键词】大鼠抗疲劳乳酸疲劳是指机体生理过程不能持续在某一特定的水平或不能维持预定的运动强度,是人体脑力或体力持续活动到一定阶段时必然出现的一种正常的生理现象[1]。
随着现代社会生活压力不断增大,使人们长期处于紧张的疲劳状态而得不到充分的休息。
因此,开展抗疲劳研究具有极其重要的意义。
本文通过测定wister大鼠的负重游泳时间和血乳酸水平,探讨参姜锁阳益气片对wister大鼠的抗疲劳作用。
1 材料和方法1.1 材料体重相近、健康雄性wister大鼠64只(购自上海第二军医大学实验动物中心,清洁级),参姜锁阳益气片(沈阳军区第211医院,批号:091215),nacl(国药集团化学试剂有限公司,批号:20090903),肝素钠(12500单位,批号:060811),温度计、热水器、焊锡丝、morris水迷宫游泳池、ysi 1500 sport 乳酸测定仪、多功能秒表、电子天平。
1.2 方法1.2.1 分组128只wister大鼠随机分为4组,每组16只。
Effects of the Extract of Cynomorium Decocta on Free Radicals' Metabolism of the Heart Tissue of
Rats
作者: 李东哲;谢春雨
作者机构: 琼州学院体育系,海南五指山572200
出版物刊名: 浙江体育科学
页码: 122-124页
年卷期: 2010年 第1期
主题词: 锁阳煎剂;超氧化物歧化酶;总抗氧化能力;丙二醛
摘要:为研究锁阳煎剂对大鼠心肌自由基代谢的影响,将48只雄性Wister大鼠随机分成安静对照组、运动对照组、安静给药组、运动给药组。
服药组大鼠服用锁阳煎剂,7周后对大鼠进行力竭处理,测定心肌超氧化物歧化酶(SOD)、总抗氧化能力(T—AOC)和丙二醛(MDA)等指标。
结果显示:心肌超氧化物歧化酶(SOD)和总抗氧化能力(T—AOC)的活性均有显著性升高,心肌丙二醛(MDA)含量显著性降低。
结论:锁阳煎荆具有保护心肌免受自由基损伤的功能。
锁阳对小鼠免疫功能的影响
郑云霞;孙启祥;延自强
【期刊名称】《甘肃中医学院学报》
【年(卷),期】1991(8)4
【摘要】锁阳Cynomrium songaricum Rupr属锁阳科锁阳属多年生肉质寄生草本植物。
本药味甘、温,具有补肾壮阳,强腰膝、润肠等功效。
产于内蒙古、陕西、甘肃、新疆等地。
为探讨锁阳补肾壮阳机理我们用正常小鼠及阳虚小鼠的动物模型,研究了锁阳对小鼠免疫功能的影响。
现将实验结果报告如下。
1.材料动物:健康雄性昆明种小白鼠,体重18—23g,兰州生物制品研究所提供。
药物:锁阳由本院附属医院门诊部提供。
制成1g/ml煎剂,冰箱保存。
【总页数】3页(P28-30)
【关键词】锁阳;免疫功能
【作者】郑云霞;孙启祥;延自强
【作者单位】甘肃中医学院微生物寄生虫学教研室;甘肃中医学院中心实验室
【正文语种】中文
【中图分类】R282.710.5
【相关文献】
1.复方锁阳口服液对小鼠性激素水平及免疫功能的影响 [J], 刘如意;刘敏;任会勋;刘洁;黄思慧;李彦霖
2.锁阳乙醇提取物对运动小鼠抗疲劳能力的影响 [J], 万丽娜;王劼;杜玉枝;孙菁;孟
卫东;卢学峰;周玉碧
3.锁阳醇提物和水提物对小鼠免疫功能的影响 [J], 李敏;热西代姆·阿卜力孜;杨建华;胡君萍
4.锁阳多糖咀嚼片对衰老模型大鼠NO代谢及免疫功能的影响 [J], 苏韫;刘永琦;张毅;颜春鲁;吴建军;郑炜
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锁阳多糖对运动训练大鼠血清酶活性与尿蛋白含量的影响熊正英;刘海波;池爱平;王棣;强永浩;王娟;刘厚宇【期刊名称】《陕西师范大学学报(自然科学版)》【年(卷),期】2012(040)001【摘要】探讨锁阳多糖(Cynomrium songaricum Rupr polysaccharide,CSRP)对运动训练大鼠骨骼肌、心、肝、肾等组织细胞及线粒体的保护作用,为CSRP在运动医学中的应用提供实验依据.采用分光光度法测定安静对照组、运动训练组和运动+CSRP组大鼠血清琥珀酸脱氢酶(succinatedehydrogenase,SDH)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)、乳酸脱氢酶酶(lactate dehydrogenase,LDH)、丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)、天冬氨酸转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性和尿液总蛋白(total protein,TP)、尿液白蛋白(albumin,Alb)和尿液β2-微球蛋白(β2-microglobulin,β2-MC)含量等相关生物化学指标;跑台法测定运动训练组和运动+CSRP组大鼠运动至力竭的时间.结果表明:运动+CSRP组血清SDH、CK、LDH活性显著低于运动对照组(P〈0.05),ALT、AST活性显著低于运动对照组(P〈0.05),TP、Alb和β2-MC含量显著低于运动对照组(P〈0.05);运动+锁阳多糖组大鼠运动至力竭的时间与运动对照组比较明显延长(P〈0.05).表明CSRP可以降低血清SDH、CK、LDH、ALT、AST活性和TP、Alb和β2-MC含量,保护运动训练大鼠骨骼肌、心、肝、肾等不同组织细胞和线粒体的结构,维持其正常功能,可延长大鼠跑台运动至力竭时间,具有抗疲劳作用.%Effect of Cynomrium songaricum Rupr polysaccharide (CSRP)on protection role to skeletal muscle,heart,liver,kidney and other tissue cells and mitochondria in exercise training rats,for CSRP applicationin sports medicine and provide experimental ing spectrophotometry to measure serum succinate dehydrogenase succinate dehydrogenase(SDH)、 creatine kinase(CK)、 lactate dehydrogenase enzyme(LDH)、 alanine aminotransferase(ALT),aspartate aminotransferase(AST) activity and urine total protein(TP)、 urinary albumin(Alb)and urine fluid β2-microglobulin(β2-MC) content and other related biochemical indicators in rats of quiet control group,exercise training group and the exercise + CSRP group;treadmill exercise to measure exercise time to exhaustion in rats of training group and determined campaign + CSRP.The results showed: exercise + CSRP serum SDH、CK、LDH activity was significantly lower than the exercise control group(P0.05);exercise + CSRP serum ALT、 AST activity was significantly lower than the exercise control group(P0.05);exercise +CSRP group of TP、Alb,and β2-MC was significantly lower than the exercise control group(P0.05);exercise + Cynomorium polysaccharide rats exercise and exercise time to exhaustion of the control group was significantly longer(P0.05).The results show that CSRP can reduce the serum SDH、 CK、 LDH、 ALT、 AST activity and TP、Alb and β2-MC content,to protect rats muscle、heart、liver、kidney and other tissue cells and mitochondria of different structures,to maintain its normal Function,may be extended to exhaustive treadmill exercise time with antifatigue effect.【总页数】4页(P100-103)【作者】熊正英;刘海波;池爱平;王棣;强永浩;王娟;刘厚宇【作者单位】陕西师范大学体育学院,陕西西安710062;陕西师范大学体育学院,陕西西安710062;陕西师范大学体育学院,陕西西安710062;陕西师范大学体育学院,陕西西安710062;陕西师范大学体育学院,陕西西安710062;陕西师范大学体育学院,陕西西安710062;陕西师范大学体育学院,陕西西安710062【正文语种】中文【中图分类】G804.7【相关文献】1.递增负荷运动训练对大鼠血清及部分组织MDA、ROS含量和SOD活性变化的影响 [J], 刘宁;王轲;赵歌2.锁阳多糖对运动训练大鼠抗氧化水平与运动能力的影响 [J], 熊正英;石金丹;池爱平;王棣;于晓月;张馨匀;雷康3.锁阳多糖对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢与运动能力的影响 [J], 熊正英;张猛;马晓莲;孙岩;姚崇;池爱平;王威力;郑莉尧;李雷;马佳佳4.锁阳对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响 [J], 郭伟;曹建民;周海涛5.肾力欣颗粒对慢性肾功能衰竭大鼠血清超氧化物歧化酶、丙二醛及尿蛋白含量影响 [J], 王桐生;龙子江;王靓;陈明;王维胜;张玲;谢鸣因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
曲阜师范大学研究生学位论文原创性说明(根据学位论文类型相应地在“□”划“√”)本人郑重声明:此处所提交的博士□/硕士□论文《对比锁阳和锁阳淫羊藿合剂对训练大鼠肝脏的保护作用》,是本人在导师指导下,在曲阜师范大学攻读博士□/硕士□学位期间独立进行研究工作所取得的成果。
论文中除注明部分外不包含他人已经发表或撰写的研究成果。
对本文的研究工作做出重要贡献的个人和集体,均已在文中以明确的方式注明。
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作者签名:日期:曲阜师范大学研究生学位论文使用授权书(根据学位论文类型相应地在“□”划“√”)《对比锁阳和锁阳淫羊藿合剂对训练大鼠肝脏的保护作用》系本人在曲阜师范大学攻读博士□/硕士□学位期间,在导师指导下完成的博士□/硕士□学位论文。
本论文的研究成果归曲阜师范大学所有,本论文的研究内容不得以其他单位的名义发表。
本人完全了解曲阜师范大学关于保存、使用学位论文的规定,同意学校保留并向有关部门送交论文的复印件和电子版本,允许论文被查阅和借阅。
本人授权曲阜师范大学,可以采用影印或其他复制手段保存论文,可以公开发表论文的全部或部分内容。
作者签名:日期:导师签名:日期:摘要1.研究目的通过对大强度训练大鼠分别灌服锁阳提取物和锁阳淫羊藿合剂提取物来观察其对大鼠肝脏的影响,探讨锁阳和锁阳淫羊藿合剂对肝脏的保护作用,为中药更好地服务于运动实践提供更多的理论依据。
2.实验方法选取雄性Wistar大鼠90只,将其随机分成3组,即运动对照组、锁阳运动组、锁阳淫羊藿运动组,每组30只。
灌药和训练6周,宰杀之前每组按不同处死状态(安静状态,力竭即刻,力竭12h)分为三个亚组,每个亚组10只,并于相应时刻断头处死后取肝脏组织测定相关指标。
所有数据由SPSS17.0进行统计学处理。
3.实验结果3.1安静状态下,运动组肝指数显著低于锁阳淫羊藿运动组(P<0.05);锁阳淫羊藿运动组MDA含量显著低于锁阳运动组(P<0.05)和非常显著低于运动对照组(P<0.01);运动组ALT活性显著高于锁阳运动组、锁阳淫羊藿运动组(P<0.05);运动对照组AST活性显著高于锁阳淫羊藿运动组(P<0.05);运动组CAT活性显著低于锁阳运动组、锁阳淫羊藿运动组(P<0.05);运动组ChE活性非常显著高于锁阳淫羊藿运动组(P<0.01),其他无组间显著性差异。
锁阳对少弱精大鼠模型精液质量及性激素水平的影响顾娟,厉振北,祁玉娟,曹义娟(江苏省徐州市中心医院生殖医学中心,江苏徐州221000)摘要:目的分析锁阳水提取物对少弱精大鼠模型精液质量及性激素水平的影响。
方法选取SPF级SD健康雄性大鼠60只,随机分为空白组、模型组和锁阳实验组,每组20只。
模型组和锁阳实验组大鼠予以环磷酰胺腹腔注射,构建少弱精症模型。
建模成功后,锁阳实验组大鼠予以锁阳水提取物灌胃,空白组与模型组予以等量的0.9%NaCl溶液灌胃。
比较3组大鼠精子质量(附睾尾部精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度)和血清性激素水平[睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)]。
结果空白组大鼠的精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度均高于模型组与锁阳实验组(P<0.05),锁阳实验组大鼠精子密度、精子活率、精子活力以及直线运动速度高于模型组(P<0.05)。
模型组血清T水平低于空白组与锁阳实验组,血清FSH、LH水平高于空白组与锁阳实验组;锁阳实验组血清T水平低于空白组,血清FSH、LH水平高于空白组(P<0.05)。
结论锁阳有助于改善少弱精症大鼠的精液质量、改善性激素的异常分泌。
关键词:锁阳;少弱精症;大鼠The effect of Cynomorium on the semen quality and sex hormone level in the oligospermia rat modelGU Juan,LI Zhenbei,QI Yujuan,CAO Yijuan(Center of Reproductive Medicine,Xuzhou Central Hosptial,Xuzhou,Jiangsu,221000,China) Abstract:Objective To analyze the effect of Cynomorium cynomorium water extract on semen quality and sex hormone levels in oligospermia rat models.Methods60SPF-grade SD male healthy male rats were randomly divided into blank group,model group and Cynomorium cynomorium experimental group,with20rats in each group.Rats in the model group and the Cynomorium experimental group were given intraperitoneal injec-tion of cyclophosphamide to construct a model of oligospermia.The rats in the Cynomorium experimental group were given the water extract of Cy-nomorium,and the blank group and the model group were given the same amount of0.9%NaCl solution.The sperm quality(sperm density,sperm motility,sperm motility and linear motion velocity in caudal epididymis)and serum sex hormone levels[testosterone(T),follicle stimulating hor-mone(FSH),luteinizing hormone(LH)]were compared among the three groups.Results The sperm density,sperm motility,sperm motility,and lin-ear movement speed of the blank group were higher than those of the model group and Cynomorium experimental group(P<0.05).The sperm densi-ty,sperm motility,sperm motility and linear movement of the Cynomorium experimental group were higher than the model group(P<0.05).The se-rum T level of the model group was lower than the blank group and the Cynomorium experimental group,and the serum FSH and LH levels were higher than the blank group and the Cynomorium experimental group.The serum T level of the Cynomorium experimental group was lower than the blank group,and the serum FSH and LH levels were higher than the blank group(P<0.05).Conclusion Cynomorium can help to improve the se-men quality of rats with oligoasthenia and improve the abnormal secretion of sex hormones.Key words:Cynomorium;Oligoasthenospermia;Rats男性不育症的发病率在世界范围内均呈上升趋势,遗传、内分泌紊乱、感染、免疫功能障碍、环境因素可能是导致该疾病的病因[1-2]。
锁阳咀嚼片对衰老模型大鼠自由基代谢及免疫功能的影响的开题报告开题报告:一、研究背景锁阳是一种常见的中药,被广泛应用于改善男性生殖健康,提高性功能和治疗阳痿等男性疾病。
锁阳含有丰富的生物活性成分,如黄酮类、植物固醇、甾体等多种化学成分,具有很强的保健作用,被认为是一种潜在的抗衰老药物。
衰老是生物体不可避免的生理现象,伴随着机体代谢功能的下降和自由基的积累。
自由基是一种高度活性的氧化分子,能够损伤细胞膜、蛋白质和DNA等分子,导致细胞功能下降和衰老加速。
另外,衰老还导致人体免疫功能下降、易感感染和肿瘤等疾病。
因此,延缓衰老成为现代医学研究的重要课题。
二、研究目的本研究旨在探讨锁阳对衰老大鼠自由基代谢和免疫功能的影响,为其成分及功效提供科学依据。
三、研究内容和方法1. 实验动物:40只健康雄性SD大鼠,体重250g-300g。
2. 实验设计:随机分为4组,每组10只大鼠。
分别是:对照组:喂养普通饲料,口服蒸馏水。
高剂量组:喂养普通饲料,口服锁阳咀嚼片(每日剂量300mg/kg)。
中剂量组:喂养普通饲料,口服锁阳咀嚼片(每日剂量150mg/kg)。
低剂量组:喂养普通饲料,口服锁阳咀嚼片(每日剂量75mg/kg)。
3. 实验操作:1)检测抗氧化酶活性:检测大鼠肝组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)活性。
2)测定血清中丙二醛(MDA)的含量。
3)检测大鼠血清中的免疫球蛋白(IgG、IgA、IgM)水平。
4)检测血清中白蛋白浓度。
四、预期结果和意义预计锁阳咀嚼片能够增强大鼠体内的抗氧化酶活性,减少MDA的生成,增强免疫功能和蛋白质代谢。
本研究结果将为锁阳的开发和利用提供科学依据,为中药改善人体免疫和延缓衰老提供理论基础。
中药对大负荷游泳运动大鼠睾酮水平的影响刘晓燕;崔玉鹏【期刊名称】《辽宁中医杂志》【年(卷),期】2007(34)8【摘要】目的:探究中药(益气养阴补肾方剂)对大负荷运动训练导致的低血睾酮的作用。
方法:40只雄性SD大鼠被随机分为安静对照组、训练对照组、训练+睾酮组与训练+中药组。
训练大鼠进行为期6周的递增负荷游泳训练;中药通过灌胃方式补充,丙酸睾酮通过腹腔注射补充。
动物宰杀后,分别取血清、睾丸与垂体检测睾酮与促性腺激素FSH、LH。
结果:训练补充中药大鼠血清与睾丸组织的睾酮水平,以及血清和垂体LH水平均显著高于训练对照组大鼠的水平(P<0.05);训练对照组大鼠血清与睾丸组织的睾酮水平以及血清LH水平显著低于安静对照组大鼠的相应水平(P<0.05);训练补充丙酸睾酮组大鼠血清睾酮水平显著高于训练补充中药与安静对照组大鼠的水平(P<0.05),但其睾丸组织睾酮水平以及血清LH水平均显著低于训练补充中药与安静对照组大鼠的相应水平(P<0.05)。
结论:中药可明显改善运动训练导致的大鼠低血睾酮水平,其机制可能是益气养阴补肾方剂通过提高血清LH 水平刺激睾丸间质细胞进而增加了睾丸组织中睾酮的合成与分泌。
【总页数】3页(P1164-1166)【关键词】中药;大鼠;睾酮;大负荷运动【作者】刘晓燕;崔玉鹏【作者单位】北京中医药大学;首都体育学院【正文语种】中文【中图分类】R285.5【相关文献】1.优秀女子射箭运动员十年训练中人格变化与训练策略/对射击运动员苛求心理的研究/益气养阴补肾方剂对雄大鼠大负荷游泳训练后血清及睾丸组织睾酮水平的影响 [J],2.益气养阴补肾方剂对雄性大鼠大负荷游泳训练后血清及睾丸组织睾酮水平的影响[J], 崔玉鹏;刘晓燕;张凡;王保成;杨卫平;宋玉涛3.东革阿里对游泳训练大鼠血睾酮水平及运动能力的影响 [J], 宋昆鹏;赵之光;安江红4.玛咖对游泳训练大鼠运动能力及血清睾酮水平的影响 [J], 乔同岭;赵之光;安江红5.益气养阴补肾方剂对雄大鼠大负荷游泳训练后血清及睾丸组织睾酮水平的影响[J], 崔玉鹏因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
锁阳的作用功效与作用锁阳,又称淫羊藿,是一种常见的中药材,从古至今在中医药中被广泛应用。
锁阳具有较强的药用功效,被誉为“阳邪草”,主要用于治疗男性阳痿、早泄、遗精等男性性功能障碍问题。
此外,锁阳还具有一系列的保健作用,可以改善肾虚引起的各种症状,增强体力和抗疲劳能力。
本文将详细介绍锁阳的作用功效及其作用机理。
一、锁阳的作用功效:1. 改善男性性功能障碍:锁阳具有温肾壮阳的作用,可有效改善男性性功能障碍,例如阳痿、早泄、遗精等。
锁阳含有一种特殊的激素类物质,可以促进性腺激素的分泌,增强性欲,提高性功能。
2. 增强肾脏功能:锁阳有滋养肾脏的作用,能够有效改善肾虚引起的各种症状,如腰酸腿软、头晕目眩、遗尿等。
锁阳可以补肾壮阳,提高肾脏的功能,增加肾脏的代谢能力,使肾脏更加健康。
3. 增强体力和抗疲劳能力:锁阳可以提高身体的代谢能力,增强体力和抗疲劳能力。
锁阳中含有一种特殊的物质,能够增强肌肉的弹性和活力,提高身体的耐力和抗疲劳能力。
4. 提高免疫力:锁阳具有提高人体免疫力的作用,可以增强机体对外界各种病原体的抵抗力,预防和治疗各种感染性疾病。
锁阳对于改善机体的自身免疫功能和调节免疫系统平衡具有重要作用。
5. 抗氧化作用:锁阳具有显著的抗氧化作用,可以清除体内自由基,保护身体细胞免受氧化损伤。
锁阳还可以提高抗氧化酶的活性,增强细胞自我修复功能,保护身体健康。
6. 高血压和心血管疾病的治疗:锁阳具有降低血压的作用,能够减轻高血压患者的症状,预防和治疗心血管疾病。
锁阳中的活性成分可以扩张血管,改善血液循环,降低血压,减少心脑血管疾病的发生风险。
7. 保护肝脏:锁阳具有保护肝脏的作用,可以提高肝功能,促进肝细胞再生。
锁阳中的活性成分能够清除体内的毒素,减轻肝脏负担,保护肝脏健康。
二、锁阳的作用机理:1. 作用于神经系统:锁阳中的活性物质可以刺激神经系统,促进性腺激素的分泌,增强性欲和性功能。
2. 作用于内分泌系统:锁阳中的激素类物质可以模拟性激素的作用,促进性腺激素的分泌,提高性功能。
锁阳对小鼠免疫机能及大鼠血浆睾酮水平的影响
石刚刚;屠国瑞
【期刊名称】《中国医药学报》
【年(卷),期】1989(4)3
【摘要】本文报道锁阳醇提取物可使免疫受抑小鼠的腹腔巨噬细胞吞噬功能及脾
脏淋巴细胞转化机能有所恢复,使正常小鼠脾脏直接溶血空斑形成细胞数目增多,同
时报道其提取物可使幼年雄性大鼠血浆睾酮含量增高,说明有促进大鼠性成熟作用。
【总页数】2页(P27-28)
【作者】石刚刚;屠国瑞
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R285.5
【相关文献】
1.慢性低氧对雄性大鼠血浆皮质酮及睾酮水平的影响 [J], 章丽梅;潘安卿;胡健饶
2.针刺“足三里”对大鼠血浆睾酮、双氢睾酮含量的影响 [J], 孔天翰
3.复方锁阳口服液对小鼠性激素水平及免疫功能的影响 [J], 刘如意;刘敏;任会勋;
刘洁;黄思慧;李彦霖
4.锁阳对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响 [J], 郭伟;曹建民;周海涛
5.锁阳水煎剂、氢化可的松对小鼠血浆睾酮浓度的影响 [J], 延自强;杨斌武;王潇琴;吴勇杰
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锁阳乙醇提取物对运动小鼠抗疲劳能力的影响万丽娜;王劼;杜玉枝;孙菁;孟卫东;卢学峰;周玉碧【摘要】[目的]研究锁阳乙醇提取物对小鼠抗运动性疲劳作用的影响.[方法]选取青海产药材锁阳,通过加热回流提取获得锁阳乙醇提取物.将小鼠随机分为模型对照组,阳性对照组(红景天口服液、维生素E软胶囊),锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组(0.125、0.25、0.5 g/mL),连续灌胃给药14 d后,记录小鼠爬杆时间、负重游泳时间及测定小鼠三磷酸腺苷(ATP)、肝糖原、肌糖原、血糖、血尿素氮(BUN)、血乳酸(LD)、丙二醛(MDA)、肌酸激酶(CK)生化指标.[结果]与模型对照组比较,锁阳乙醇提取物不同剂量组均能明显延长小鼠爬杆及负重游泳时间;显著增加ATP、肝糖原、肌糖原、血糖含量;显著减少CK、LD、BUN含量;锁阳乙醇提取物中、高剂量组显著减少MDA含量(P<0.05).[结论]在一定剂量范围内,锁阳乙醇提取物可以增强运动耐力、提高氧化应激能力和改善能量代谢,有显著的抗疲劳作用.【期刊名称】《甘肃农业大学学报》【年(卷),期】2019(054)003【总页数】8页(P23-30)【关键词】锁阳;乙醇提取物;抗疲劳【作者】万丽娜;王劼;杜玉枝;孙菁;孟卫东;卢学峰;周玉碧【作者单位】中国科学院藏药研究重点实验室,中国科学院西北高原生物研究所,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室,青海西宁810001;中国科学院大学,北京100049;中国科学院藏药研究重点实验室,中国科学院西北高原生物研究所,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室,青海西宁810001;中国科学院大学,北京100049;中国科学院藏药研究重点实验室,中国科学院西北高原生物研究所,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室,青海西宁810001;中国科学院藏药研究重点实验室,中国科学院西北高原生物研究所,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室,青海西宁810001;青海道康农牧科技有限公司,青海都兰816100;中国科学院藏药研究重点实验室,中国科学院西北高原生物研究所,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室,青海西宁810001;中国科学院藏药研究重点实验室,中国科学院西北高原生物研究所,青海省青藏高原特色生物资源研究重点实验室,青海西宁810001【正文语种】中文【中图分类】R965.1疲劳是机体生理机能减退的一种现象,造成这一现象的原因多种多样[1].1982年第五届国际运动生化会议统一了疲劳的概念[2].据WHO调查,全球有35%以上的人处于疲劳状态,中年男性人群疲劳状态达60%[3].随着生活压力的增大,疲劳已成为影响人们生活质量的重要因素.疲劳发生后,如得不到及时消除,则易导致机体内环境紊乱、免疫力下降、大脑反应迟钝、甚至出现器质性病变,如:帕金森病、中风等[4].因此,如何缓解疲劳,实现高质量的生活成为人们研究的热点.越来越多的证据表明,不同中药材中的提取物,如竹节人参提取物、黄秋葵水提取物、黄芪提取物、野生水芹提取物在抗疲劳方面均具有较好的功效[5-8].锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)为锁阳科锁阳属植物,多年生肉质寄生草本,多寄生于白刺属植物的根上[9-10],主要分布于青海、内蒙古、甘肃、宁夏和新疆等荒漠化地区[11].锁阳是我国珍贵的传统中药材,素有“沙漠人参”的美称[12],与肉苁蓉并称为“大漠双雄”[13].锁阳中含有蛋白质、脂肪、无机离子及糖类等人体所需的重要营养成分,同时锁阳中还含有丰富的三萜类、甾体类、黄酮类、鞣质和有机酸等多种活性成分[14-16].近年来随着现代药理学研究表明,锁阳有增强免疫[17]、抗氧化[18]、抗衰老[19]、抗应激[20]、清除自由基[21]、抑制血小板凝集[22]等作用,且对心血管疾病有显著疗效[23].研究表明甘肃产锁阳黄酮对大鼠有增强运动耐力、提高机体抗氧化、抗疲劳等方面的作用[24],甘肃产锁阳水煎剂可提高机体抗疲劳能力[25-26];熊正英等[27]研究结果表明,锁阳多糖具有抗疲劳作用.尽管针对锁阳抗疲劳方面的研究已有报道,但针对青海产锁阳的抗疲劳功效研究还未见报道[28].锁阳是青海省著名的道地药材,资源储量大,具有极大的开发价值[29].因此,本试验以采自于青海都兰的锁阳为原料,探究锁阳乙醇提取物在小鼠抗运动性疲劳方面的作用,以期为我国西部地区锁阳资源的开发利用提供参考依据.1 材料与方法1.1 试验动物昆明种小鼠60只,SPF级,雌雄各半,体质量(20±2) g,由甘肃中医药大学动物实验中心提供.小鼠饲养于SPF级动物室,喂饲全价颗粒饲料.饲养条件湿度为50%~80%,温度21~23 ℃,每12 h明暗循环.60只小鼠适应性喂养3 d后,随机分为6组,每组10只,雌雄各半,分别为模型对照组(超纯水),锁阳乙醇提取物低剂量组(0.125 g提取物/mL)、锁阳乙醇提取物中剂量组(0.25 g提取物/ml)、锁阳乙醇提取物高剂量组(0.5 g提取物/mL),红景天口服液阳性对照组,维生素E软胶囊阳性对照组.1.2 药物与试剂红景天口服液产自阿坝州九寨生物科技有限公司,维生素E软胶囊产自青岛双鲸药业有限公司,锁阳乙醇提取物由本课题组自行制备,质量浓度为0.125、0.25、0.5 g/mL.ATP(武汉基因美科技有限公司,货号JYM0723Mo);肝糖原(南京建成生物工程研究所,批号20171218);肌糖原(南京建成生物工程研究所,批号20171218);血糖(苏州科铭生物技术有限公司,批号20171221);BUN(苏州科铭生物技术有限公司,批号20171221);LD(南京建成生物工程研究所,批号20171218);MDA(武汉基因美科技有限公司,货号JYM0345Mo);CK武汉基因美科技有限公司,货号JYM0627Mo).1.3 主要仪器与设备离心机(3K15,美国Sigma公司);恒温干燥箱(上海—恒科学仪器有限公司);超纯水器(Milli-QA-10,美国Millipore公司);循环水真空泵(SHZ-Ⅲ,上海亚荣生化仪器厂);电子天平(AL104,上海天平仪器总厂);多功能酶标仪(EnSpire,珀金埃尔默企业管理(上海)有限公司);可见分光光度计(722,上海棱光技术有限公司);游泳箱;有机玻璃杆;记时器;温度计;直尺.1.4 试验方法1.4.1 锁阳乙醇提取物的制备锁阳采自青海省都兰县,由中国科学院西北高原生物研究所卢学峰研究员鉴定为锁阳科锁阳属锁阳(Cynomorium songaricum Rupr.)的干燥肉质茎.清洗,晾干,取已晾干的锁阳茎1 000 g粉碎,用75%乙醇提取,固液比1∶4,提取温度80 ℃,提取6次,分别为8、8、6、6、6、6 h,将每次提取液合并后,利用负压回流浓缩提取液,获得浓缩液,然后将浓缩液至于80 ℃烘箱中烘干,备用.1.4.2 药物处理将锁阳乙醇提取物用超纯水配成药物浓度为0.125,0.25,0.5g/mL的溶液,记为锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量;红景天口服液拆除包装后直接取用;维生素E软胶囊去除胶囊外壳后使用;超纯水直接取自纯水机.1.4.3 动物给药每天上午固定时间按小鼠体质量比例给药一次,锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组每次均给予15 mL/kg,模型对照组小鼠用等体积超纯水进行灌胃,红景天口服液阳性对照组每次给予7 mL/kg,维生素E软胶囊阳性对照组每次给予5 mL/kg,连续灌胃给药.1.4.4 体质量测量分组方法同1.4,给药方法同2.3,连续灌胃给药14 d后,用电子秤称量体质量,与给药前的体质量进行比较(禁食不禁水12 h).1.4.5 抗疲劳试验1.4.5.1 小鼠爬杆试验分组方法同1.4,给药方法同2.3,连续灌胃给药14 d,末次给药30 min后(禁食不禁水12 h),将小鼠放于一根垂直固定的直径8 mm,长120 cm的有机玻璃杆上,使肌肉处于静力紧张状态,记录小鼠由于肌肉疲劳从玻璃棒上跌下的时间,联系悬挂3次,第3次跌落时终止试验,累计3次的时间作为小鼠爬杆时间,记录数据.1.4.5.2 小鼠负重游泳试验分组方法同1.4,给药方法同2.3,连续灌胃给药14 d,末次给药30 min后(禁食不禁水12 h),于小鼠尾部系一质量为其体重5%的重物,将小鼠置于水温为(25±1) ℃,水深为30 cm,游泳面积114.8 cm2/只的游泳箱中,强迫游泳至力竭,以小鼠游泳至死亡结束,记录时间作为小鼠负重游泳时间. 1.4.5.3 生化指标检测分组方法同1.4,给药方法同2.3,连续灌胃给药14 d,末次给药30 min后(禁食不禁水12 h),将小鼠置于水温为(25±1) ℃,水深为30 cm,游泳面积114.8 cm2/只的游泳箱中,游泳90 min后将小鼠捞起,即刻进行摘眼球采血备用.将所采血液常规分离血清,4 ℃ 3 000 r/min离心20 min,取上清液待测.肝糖原、肌糖原含量的测定采用蒽酮试剂法,血糖含量的测定采用葡萄糖氧化酶法,BUN含量的测定采用Fearon反应,ATP、MDA、CK采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附实验进行含量测定,LD采用比色法进行含量测定.肝糖原、肌糖原、LD指标测定采用可见分光光度计完成,其余指标测定均采用EnSpire多功能酶标仪检测完成.1.5 数据处理应用SPSS 19.0进行数据统计分析,试验数据均以均值±标准差表示,选用F检验、方差分析、LSD统计学方法判断结果的显著性,以α=0.05为检验水准,P<0.05表示统计学上有显著差异,P<0.01表示统计学上有极显著差异.2 结果与分析2.1 锁阳乙醇提取物对小鼠体质量的影响锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量进行灌胃给药14 d后,与模型组相比,体质量均有所增加,但差异均不显著(P>0.05),说明该剂量锁阳乙醇提取物处理对小鼠肌肉质量和体质量影响不大;组间两两比较差异均不显著(P>0.05)(表1).2.2 锁阳乙醇提取物对小鼠爬杆及负重游泳时间的影响在小鼠爬杆及负重游泳试验中,与模型对照组比较,锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组均能明显延长小鼠爬杆及负重游泳时间,差异具有统计学意义(P<0.01).锁阳乙醇提取物高剂量组与维生素E软胶囊阳性对照组相比,在延长小鼠爬杆及负重游泳时间上能力相近(P>0.05).锁阳乙醇提取物(中、高)剂量组在延长小鼠爬杆及负重游泳时间上与锁阳乙醇提取物低剂量组有显著差异(P<0.05),见表2.组别Group给药前体质量/gBody mass before administration给药后体质量/gBody mass after administration模型对照组Model controlgroup19.9±5.9a30.4±3.1a锁阳乙醇提取物低剂量组Low dose group of ethanol extract of C.songaricum22.1±2.5a30.5±3.6a锁阳乙醇提取物中剂量组Middle dose group of ethanol extract of C.songaricum21.9±2.0a31.3±3.4a 锁阳乙醇提取物高剂量组High dose group of ethanol extract ofC.songaricum19.2±5.8a30.9±4.1a维生素E软胶囊阳性对照组Vitamin E soft capsule positivecontrol group21.6±2.5a30.1±4.0a红景天口服液阳性对照组Rhodiola oral liquid positive control group22.4±1.8a30.7±4.4a组别Group爬杆时间/minClimbing time负重游泳时间/minWeight-bearing swimming time模型对照组Model control group44.6±16.378.3±7.7锁阳乙醇提取物低剂量组Low dose group of ethanol extract ofC.songaricum48.3±10.1c**88.4±9.6c*锁阳乙醇提取物中剂量组Middle dose group of ethanol extract of C.songaricum70.2±8.4b**98.0±14.4b**锁阳乙醇提取物高剂量组High dose group of ethanol extract ofC.songaricum79.7±15.9b**105.9±17.3ab**维生素E软胶囊阳性对照组Vitamin E soft capsule positivecontrol group78.8±13.1b**101.0±16.2ab**红景天口服液阳性对照组Rhodiola oral liquid positive controlgroup111.6±25.8a**113.0±21.6a**与模型对照组比较*表示差异显著( P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01);同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05).Compared with model control,* means significant difference (P<0.05);** means extremely significant difference (P<0.01).The different letters in the same column means significant difference (P<0.05).2.3 锁阳乙醇提取物对疲劳小鼠肝糖原、肌糖原、血糖的影响由表3所示,通过检测发现,与模型对照组比较,锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组能显著增加小鼠血糖、肝糖原、肌糖原含有量(P<0.01),表明锁阳乙醇提取物具有促进糖原储备的作用,从而有利于机体对抗运动性疲劳.锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组与维生素E软胶囊、红景天阳性对照组相比,在增加疲劳小鼠肝糖原、肌糖原、血糖含量上能力相近(P>0.05).锁阳(低、中、高)剂量组在增加疲劳小鼠肝糖原、血糖含量上差异不明显(P>0.05);在增加疲劳小鼠肌糖原含量上,锁阳高剂量组与锁阳(低、中、)剂量组存在显著差异,结果见表3.组别Group肝糖原/(mg·g-1)Hepatic glycogen肌糖原/(mg·g-1)Muscle glycogen血糖/(μmol·mL-1)Blood sugar模型对照组Model controlgroup12.3±0.413.3±1.01.1±0.2锁阳乙醇提取物低剂量组Low dose group of ethanol extract of C.songaricum16.9±2.0b**15.7±1.0c**2.2±0.5b**锁阳乙醇提取物中剂量组Middle dose group of ethanol extract ofC.songaricum17.4±2.6b**16.6±1.4c**2.4±0.6b**锁阳乙醇提取物高剂量组High dose group of ethanol extract ofC.songaricum17.7±2.9b**21.0±2.5ab**2.5±0.9b**维生素E软胶囊阳性对照组Vitamin E soft capsule positive controlgroup18.6±2.3ab**20.2±1.8b**3.3±0.8a**红景天口服液阳性对照组Rhodiola oral liquid positive control group20.7±2.2a**22.3±2.2a**3.5±0.6a**与模型对照组比较*表示差异显著( P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01);同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05).Compared with model control,* means significant difference (P<0.05);** means extremely significant difference (P<0.01).The different letters in the same column means significant difference (P<0.05).2.4 锁阳乙醇提取物对疲劳小鼠BUN、CK的影响通过检测发现,与模型对照组比较,锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组能极显著降低小鼠CK含有量(P<0.01),提示锁阳乙醇提取物对小鼠力竭游泳后肌肉损伤有较好的保护作用;锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组能显著降低小鼠BUN含有量(P<0.05);锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组与维生素E软胶囊、红景天阳性对照组相比,在降低疲劳小鼠BUN、CK含量上能力相近(P>0.05).锁阳乙醇提取物不同剂量组之间在降低CK、BUN含量上差异不明显,结果见表4.组别Group尿素氮/(mg·g-1)BUN肌酸激酶/(ng·mL-1)CK模型对照组Model control group1.5±0.34.4±0.8锁阳乙醇提取物低剂量组Low dose group of ethanol extract of C.songaricum1.0±0.5a*2.4±0.5a**锁阳乙醇提取物中剂量组Middle dose group of ethanol extract of C.songaricum1.0±0.3*a2.2±0.7a**续表4 Continued table 4组别Group尿素氮/(mg·g-1)BUN肌酸激酶/(ng·mL-1)CK锁阳乙醇提取物高剂量组High dose group of ethanol extract ofC.songaricum0.7±0.4a**2.0±0.5a**维生素E软胶囊阳性对照组Vitamin E soft capsule positive control group0.9±0.5a**2.3±0.5a**红景天口服液阳性对照组Rhodiola oral liquid p ositive control group0.7±0.5a**1.9±0.1a**与模型对照组比较*表示差异显著( P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01);同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05).Compared with model control,* means significant difference (P<0.05);** means extremely significant difference (P<0.01).The different letters in the same column means significant difference (P<0.05).2.5 锁阳乙醇提取物对疲劳小鼠LD、ATP、MDA的影响通过检测发现,与模型对照组比较,锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组能极显著降低小鼠LD含量(P<0.01),且不同剂量组之间差异显著;锁阳乙醇提取物(低、中、高)剂量组极显著增加了小鼠ATP含量(P<0.01),且锁阳乙醇提取物高剂量组与锁阳乙醇提取物(低、中)剂量组存在明显差异;锁阳乙醇提取物中、高剂量组能显著降低小鼠MDA含有量(P<0.05),说明锁阳乙醇提取物能提高力竭游泳小鼠抗氧化及抗疲劳能力.与阳性对照组比较,在降低疲劳小鼠血清中LD含量以及增加ATP含量上,锁阳乙醇提取物各剂量组与维生素E软胶囊阳性对照组相比能力相近(P>0.05),结果见表5.组别Group乳酸/(mmol·L-1)LD三磷酸腺苷/(ng·mL-1)ATP丙二醛/(ng·mL-1)MDA模型对照组Model control group17.5±1.615.5±1.1139.8±17.2锁阳乙醇提取物低剂量组Low dose group of ethanol extractofC.songaricum14.1±0.9a**18.4±2.7b*131.8±21.1a锁阳乙醇提取物中剂量组Middle dose group of ethanol extract ofC.songaricum8.4±1.7b**19.0±3.5b**121.3±8.8a*锁阳乙醇提取物高剂量组High dose group of ethanol extractofC.songaricum6.6±1.2c**20.35±2.5ab**121.7±15.1a*维生素E软胶囊阳性对照组Vitamin E soft capsule positive controlgroup6.2±1.3cd**20.9±4.7a**68.2±5.8b**红景天口服液阳性对照组Rhodiola oral liquid positive control group5.2±1.6d**22.4±2.8a**76.6±20.7b**与模型对照组比较*表示差异显著( P<0.05),**表示差异极显著(P<0.01);同列不同小写字母表示差异显著(P<0.05).Compared with model control,* means significant difference (P<0.05);** means extremely significant difference (P<0.01).The different letters in the same column means significant difference (P<0.05).3 讨论力竭时间是衡量机体运动能力的重要指标,运动能力的提高表明机体抗疲劳能力的增强[30].在抗疲劳研究领域中,常以负重游泳力竭时间来反映机体的运动耐力,机体运动耐力的提高,则可直接反映机体抗疲劳能力的增强.本研究通过爬杆实验、负重游泳试验发现锁阳乙醇提取物能明显延长小鼠的运动时间,说明在一定剂量下,锁阳乙醇提取物能提高小鼠运动耐力,具有一定的抗运动性疲劳的作用.本试验测定了与疲劳密切相关的肝糖原、肌糖原、血糖、BUN、LD、ATP、MDA、CK八项生化指标.血糖水平不仅可以用来反映机体的糖代谢水平,还可以反映中枢疲劳状况[31].通常情况下,机体血糖浓度保持在一定的平衡状态,但在激烈运动过程中,血糖大量消耗且得不到及时补充时,血糖水平会逐渐下降.与模型组比较,锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组能显著增加小鼠体内血糖含量,说明锁阳乙醇提取物可改善疲劳后的能量供应,具有一定的抗疲劳功效.糖原是机体运动的主要能量来源,可以通过肝糖原、肌糖原的储备量来说明疲劳产生的快慢或程度.与模型组比较,锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组可显著增加小鼠体内肝糖原和肌糖原的含量,进而说明锁阳乙醇提取物可通过提高小鼠游泳力竭后的糖原储备能力,有一定缓解小鼠运动性疲劳产生的作用.机体运动时所需能量直接来源于ATP的分解,开始运动时,机体首先以消耗ATP 为主,ATP含量的高低可直接衡量机体的供能状态和运动能力.与模型组比较,锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组显著增加了小鼠血清中的ATP含量,为运动小鼠直接提供了能量来源,有一定抗小鼠运动性疲劳产生的作用.乳酸是丙酮酸在乳酸脱氢酶作用下还原生成的一种酸性代谢产物,乳酸堆积是生理性运动疲劳产生的重要原因之一.尿素氮是氨基酸和蛋白质代谢的终产物,与机体疲劳程度以及负荷量的大小密切相关且呈正相关,可被用来作为评定运动量的指标[32].一般在短时运动时,蛋白质不参与机体供能,当长时间剧烈运动使正常的能量代谢平衡受到破坏,机体不能通过糖或脂肪分解获得足够的能量时,机体便会增加蛋白质和氨基酸的分解代谢用以供能.与模型组比较,锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组显著降低了运动小鼠体内LD的产生,减少了代谢产物的堆积,同时显著降低了BUN水平,减少了体内蛋白质和氨基酸的分解代谢,具有改善能量代谢,加速疲劳消除的作用.CK主要存在于细胞质和线粒体中,是一个与细胞内能量运转、肌肉收缩、ATP再生有直接关系的重要激酶,当肌膜严重损伤或细胞膜通透性改变时,骨骼肌中的CK会通过细胞膜渗出并进入血液中,使得血清中的CK含量升高.运动后可导致CK明显增高,且运动越剧烈、时间越长,CK升高越明显,因此血清中的CK含量可间接反映出机体运动肌肉损伤程度[33].锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组可降低游泳小鼠血清中CK的含量,对运动肌肉损伤有一定的保护作用.MDA是脂质过氧化的终产物,其含量既可以反映机体内发生脂质过氧化的程度,也可以反映生物膜的受损程度.锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组MDA含量均显著低于模型对照组,说明锁阳乙醇提取物低、中、高剂量组可以消除自由基的攻击,降低力竭及恢复状态下MDA的生成,保护机体,对延缓运动性疲劳的发生有积极的作用[34].综上所述,锁阳乙醇提取物可在一定程度上通过增强小鼠运动耐力,改善小鼠力竭游泳后氧化应激和能量代谢能力,有显著抗疲劳作用.参考文献【相关文献】[1] 段金成,罗顺迪,曹祖高,等.西归粗多糖对游泳力竭小鼠的抗运动性疲劳作用[J].中成药,2018,40(3):681-684.[2] 郑哲君,李晓莉,王朔.抗疲劳功能食品的研究进展[J].食品科技,2006,(2):4-7.[3] Maclaren D P,Gibson H,Parry-Billings M,et 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锁阳对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响郭伟;曹建民;周海涛【摘要】本文以大强度耐力训练大鼠为模型,对锁阳对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢及抗运动疲劳能力的影响进行了研究.试验中分别以0.75、1.5、4.5g/(kg.d)的剂量给大鼠灌胃49d,并进行负重游泳实验、血睾酮等生化指标测定.结果显示,锁阳各剂量组力竭游泳时间长于运动对照组(T组)(P<0.01);血清睾酮高于T组(P<0.01),血清皮质酮低于T组(P<0.05);各组间血清睾酮与皮质酮比值变化与睾酮变化较为一致;肝糖原(P<0.05)、肌糖原(P<0.01)高于T组;血尿素氮低于T组(P<0.05);血红蛋白高于T组(P<0.05).从而表明补充锁阳可以减轻大鼠血睾酮、皮质酮受高强度运动量的影响,维持在正常生理水平;促进蛋白质合成,抑制氨基酸和蛋白质分解,提高血红蛋白含量和糖原的储备,增强抗疲劳能力,具有多靶点、多途径的显著特点.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2014(026)001【总页数】6页(P27-32)【关键词】锁阳;睾酮;抗疲劳;促黄体生成素;促卵泡刺激素【作者】郭伟;曹建民;周海涛【作者单位】营口职业技术学院,营口115000;北京体育大学,北京100084;北京联合大学生物化学工程学院,北京100023【正文语种】中文【中图分类】R285.5锁阳(Cynomorium songarium Rupr,CSR),又名不老药、锈铁棒、地毛球,羊不锁拉。
为锁阳科(Cynomoriaceae)锁阳属的单科单属单种植物。
始载于《本草衍义补遗》。
其性甘、温,具补肾、助阳、益精、润肠、健胃、消食、补血及养身之功效,是兴阳益精、抗衰老的重要药物。
研究表明锁阳富含多种氨基酸及微量元素,已检测并确定的氨基酸有17 种之多,其中苯丙氨酸、赖氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、缬氨酸5 种为人体必需氨基酸;微量元素达24 种,其中如Fe、Cu、Zn、Mn、Ni、Co、Mo 等7 种均为WHO 公布的人体必需微量元素。
锁阳还含有如三萜类、甾体类、鞣质类、多糖类、有机酸以及多种挥发性物质,是中药和蒙药中的常用药物。
现代医学研究证明,其具有多种药理活性,可增强机体免疫功能、改善机体内分泌功能,提高清除自由基、抗缺氧、抗应激能力[1]。
已有研究表明,长时间大运动量训练造成的运动性低血睾酮症是机体运动能力下降和恢复过程延长的主要原因[2]。
本文以大强度耐力训练大鼠为模型,研究锁阳对运动训练大鼠睾酮含量、物质代谢与抗运动疲劳能力的影响,旨在为其临床应用提供理论依据。
1 材料与仪器1.1 试验动物清洁级雄性Wistar 大鼠55 只,42 d 龄,平均体重(195.1 ±15.1)g,北京大学医学部实验动物科学部提供,合格证编号SCXK(京)2006-0008。
在整个实验过程中,实验室内温度保持在(22 ±2)℃,相对湿度55%~75%,光照时间随自然变化。
所有实验大鼠均以基础饲料(北京大学医学部实验动物科学部提供)和蒸馏水常规饲养,自由饮食。
实验时间为56 d,正式训练时间为49 d。
1.2 试验用药锁阳(Cynomorium songarium Rupr),产自甘肃,北京同仁堂购得,批号:120814351,并经天津中瑞药业有限公司高占友高级工程师鉴定。
称取锁阳粉粒50 g 加蒸馏水250 mL,浸泡4 h,武火煮沸后文火煮25 min 后过滤。
药渣加蒸馏水250 mL 武火煮沸后文火煮15 min,过滤。
合并2 次滤液,浓缩至生药浓度1 g(生药)/mL,4 ℃存放备用。
1.3 主要仪器ALCYON300 全自动生化分析仪,美国雅培;LG 10-3A 高速冷冻离心机,北京医用离心机厂;DY 89-Ⅱ型电动玻璃匀浆机,宁波新芝生物科技股份有限公司;SHH.W21.Cr600 型三用电热恒温水箱,北京市东霞科学仪器厂;UV7502pcs型紫外可见分光光度计,上海欣茂仪器有限公司。
2 试验方法2.1 动物分组实验大鼠适应性饲养4 d 后,以20 min/d 的运动量对其进行为期3 d 的筛选,淘汰个别不适应游泳训练者,将剩余大鼠以数字随机分组法分为5 组:静止对照组(C 组)、运动对照组(T 组)、运动+低剂量锁阳组(TML 组)、运动+中剂量锁阳组(TMM组)、运动+高剂量锁阳组(TMH 组),每组10 只。
各组每天自由摄食饮水,采用专业灌胃器,每天灌胃(ig)一次。
低、中、高剂量组ig 剂量分别为0.75、1.5、4.5 g/(kg.d),相当于成人推荐剂量的5 倍、10倍、30 倍。
TM 各组ig 体积为5 mL/kg,对照组ig 等量生理盐水。
2.2 训练及测试方案C 组不进行任何训练。
其他组进行负重游泳训练,均采用100 cm×50cm ×60cm 的玻璃泳槽作为大鼠游泳训练装置,水深50 cm。
水温(31 ±2)℃,为防止大鼠在水面漂浮不动,特在游泳箱底部放置佳宝“AP1500”型水泵形成流动水。
训练42 d,第1周不负重,第2 周负2%体重,第3 周负4%体重,第4~7 周负5%体重,每次游泳训练至力竭[3]。
大鼠开始游泳至力竭所用时间为大鼠力竭运动能力[3]。
力竭标准以大鼠下沉后10 s 不露出水面为度。
处死前的最后1 次为无负重力竭游泳训练,记录力竭时的游泳时间。
2.3 指标测定各组在末次训练24 h 后称重,乙醚适度麻醉,从颈总动脉处取20 μL 全血测定血红蛋白含量,取0.5 mL 全血测定尿素氮含量,取2~3 mL 全血测定血清睾酮和血清皮质醇含量[4]。
加入柠檬酸钠溶液抗凝,37 ℃水浴中30 min 后,4 ℃3000 rpm 离心10 min,分离制备血清,并迅速取肝脏、双侧睾丸和深层股四头肌,剔除筋膜,置于预冷的生理盐水中洗净血污,滤纸吸干后置于-20 ℃冰箱保存备用。
组织匀浆制备:精确称取100 mg 肝脏组织、500mg 肌肉组织,按W(g)组织块重量/V(mL)匀浆介质为1/9 的比例加取预冷的匀浆介质(0.9%的NaCl 溶液)于烧杯中,迅速剪碎组织块(以上全部操作在冰水浴中进行)。
匀浆经3000 rpm 低温离心15 min,分离提取上清液,在4 ℃冰箱冷藏即用或-20 ℃冰箱冰冻备用。
血清睾酮、血清皮质酮、促黄体生成素和促卵泡刺激素采用放射免疫分析法测定。
试剂盒由天津九鼎医学生物工程有限公司提供,批号20120903。
肝糖原、肌糖原采用南京建成生物工程研究所的试剂盒所提供的方法测定,试剂盒编号:20120904。
血尿素氮采用UV-GLDH 法测定。
血红蛋白采用高铁氰化钾氧法测定,蛋白质定量采用双缩脲法[5]。
2.4 数据统计采用SPSS12.0 软件对所有数据进行统计学处理,数据用平均数±标准差()表示,组间比较采0.01 为标准,P <0.05 表示有差异,P <0.01 表示有显著性差异。
3 试验结果用t 检验,多组间比较采用方差分析,以α=0.05 与3.1 锁阳对大鼠体重及运动能力的影响表1 锁阳对大鼠体重及运动能力的影响(n=10,)Table 1 Effect of C.songarium extracts on weight and swimming ability of rats (n=10,)注:与C 组比较,1)表示P <0.05,2)表示P <0.01;与T 组比较,3)表示P <0.05,4)表示P <0.01。
Note:Compared with C group,1)represent P <0.05,2)represent P <0.01;compared with T group,3)and 4)represent P <0.05 and P <0.01,respectively.由表1 可知,TM 各组体重大于T 组(P <0.05)、小于C 组(P <0.05);TM 各组力竭游泳时间明显长于C、T 组,具有极显著性差异(P <0.01),且随剂量增大而延长。
3.2 运动及锁阳对大鼠血清睾酮、皮质酮水平的影响表2 运动及锁阳对大鼠血清睾酮、皮质酮水平的影响(n=10,)Table 2 Serum testosterone(T)and corticosterone(C)levels in various groups of rats(n=10,)注:与C 组比较,1)表示P <0.05,2)表示P <0.01;与T 组比较,3)表示P <0.05,4)表示P <0.01。
Note:Compared with C group,1)represent P <0.05,2)represent P <0.01;compared with T group,3)and 4)represent P <0.05 and P <0.01,respectively.由表2 可知:血清睾酮水平,T 组(P <0.01),TM 各组(P <0.05)低于C 组;TM 各组高于T 组(P<0.01);TM 各组间无显著差异。
血清皮质酮水平,TM 各组(P <0.05)低于T 组,TM 各组间及与C组间比较无显著差异。
各组间血清睾酮与皮质酮比值变化与睾酮变化较为一致。
3.3 运动及锁阳对大鼠肝、肌糖原储量的影响由表3 可知:肝、肌糖原水平,T 组(P <0.01)、TM 各组(P <0.05)低于C 组;TM 各组高于T 组(P<0.05),TM 各组间无显著差异。
3.4 运动及锁阳对大鼠血清LH 和FSH 水平的影响表3 运动及锁阳对大鼠肝、肌糖原水平的影响(n=10,)Table 3 Content of muscle and liver glycogen levels in various groups of rats(n=10,)注:与C 组比较,1)表示P <0.05,2)表示P <0.01;与T 组比较,3)表示P <0.05,4)表示P <0.01。
Note:Compared with C group,1)represent P <0.05,2)represent P <0.01;compared with T group,3)and 4)represent P <0.05 and P <0.01,respectively.表4 运动及锁阳对大鼠血清LH 和FSH 水平的影响(n=10,)Table 4 Luteinizing hormone and follicle-stimulating hormone levels in various groups of rats (n=10,)由表4 可知:各组间LH,FSH 水平较为接近,无显著差异。