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1止凝血产品线移转沃芬中国08May 2012HemosIL Diluted Russell Viper Venom Time dRVVT ScreendRVVT Confirm 狼疮抗凝物试剂（DRVVT)HemosIL Diluted Russell Viper Venom TimedRVVT ScreendRVVT Confirm狼疮抗凝物（DRVVT)4/17/20133内容•前言•产品说明•主要特点•研究数据•竞争比较前言•狼疮抗凝物（LA）检测对抗磷脂综合征起着举足轻重的作用，当患者体内出现中高滴度的抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白I抗体时可被确定为高血栓形成风险。
•APS是一种由于体内出现抗磷脂抗体（aPL）导致的自身免疫失调，与血栓和/或妊娠发病率相关。
•LA能延长磷脂依赖性凝血实验的凝固时间，从而预示着某种抑制物的存在。
4前言•最新的LA指南指出，检测LA应该依赖于监测、混合和确诊实验。
应分别采用不同的方法学检测两个项目。
1.dRVVT被认为对高风险易栓症患者LA具有特异性2.基于硅的APTT需要低浓度的磷脂保证敏感性•LA阳性结果必须在＞12周后复检，以排除APL的瞬态性。
5前言•LA阳性结果应考虑在APS的背景下识别高风险的患者。
•IL提供两个完整的检测项目，满足国际血栓与止血学会委员会发布的针对狼疮抗凝/磷脂依赖性抗体的LA检测标准*.–HemosIL dRVVT–Silica Clotting Time–LA Positive and Negative Controls ( Mixing Study)*Pengo V, Tripodi A, Reber G, Rand H, Ortel T.L, Galli M and DeGroot P.G. Update of the guidelines for lupus anticoagulant detection. Thromb Haemost 2009;7:1737-17406前言•NEW HemosIL dRVVT Screen (PN 0020301500)•NEW HemosIL dRVVT Confirm (PN 0020301600)将会取代原来的：•HemosIL LAC Screen (PN 0020008000)•HemosIL LAC Confirm (PN 0020008200)7产品说明和规格•dRVVT Screen和dRVVTConfirm是改进的dRVVT试剂用于简化和规范LA的临床评估。
狼疮抗凝物质检测（LA）本检测用于评估延长的部分血浆凝血活酶时间和/或血栓形成事件，了解反复流产的原因，并作为判断抗磷脂综合征的条件之一，但并不是狼疮疾病的诊断性实验。
1.何时检测？PTT延长；出现静脉或动脉血栓；习惯性流产，特别是在怀孕中、后期的流产。
2.何种样本？采集手臂静脉血3.检测什么？狼疮抗凝物是一种会增加动静脉血栓形成风险性的蛋白质。
形成的血栓可以在体内任何部位阻塞血液流动，导致中风、心脏病发作、肺动脉栓塞、深静脉血栓（通常发生在腿部）和习惯性流产，特别是在怀孕中、后期的流产（认为与胎盘血管栓塞相关）。
狼疮抗凝物是一种获得性的物质，经常在一些自身免疫性疾病患者中发现，如系统性红斑狼疮(SLE)，但也会出现在感染、HIV/AIDS、癌症以及服用某些诸如吩噻嗪、普鲁卡因和凡西达等药物的患者体内。
目前认为约有1－2％的普通人群中存在这种抗体，但其形成的诱因还未知。
狼疮抗凝物（LA）并不是狼疮疾病的诊断实验，之所以得名是源于其与SLE相关，它通常会引起部分凝血活酶时间（PTT）延长。
PTT是一种血液凝固实验，当其时间延长时通常提示与血液不凝和出血有关，而不是血栓。
狼疮抗凝物由于能与PTT试剂中的磷脂相结合，会导致PTT以及其它一些相关检测的结果延长。
磷脂在体内血液凝固过程中发挥着关键的作用。
最初被发现于血小板表面并协助几种凝血因子的活化。
凝血因子是一组在血管和组织损伤后称为凝血瀑布学说的反应过程中被激活的蛋白质。
狼疮抗凝物是三种最主要的与血栓形成有关的抗磷脂抗体中的一种，其余两种为抗心磷脂抗体和抗β－2糖蛋白I型抗体（不太常见），三者共同引起抗磷脂抗体综合症（也称为Hughes综合症）。
一个人可能含有一种或多种磷脂抗体。
每一种磷脂抗体都会干扰血凝过程，但其作用方式仍不十分清楚。
一个或多个磷脂抗体都会增加血栓形成的危险。
抗心磷脂抗体和抗β－2糖蛋白I型抗体可以直接检测，但还没有一个试验可以检测狼疮抗凝物。
1止凝血产品线移转沃芬中国08May 2012HemosIL Diluted Russell Viper Venom Time dRVVT ScreendRVVT Confirm 狼疮抗凝物试剂（DRVVT)HemosIL Diluted Russell Viper Venom TimedRVVT ScreendRVVT Confirm狼疮抗凝物（DRVVT)4/17/20133内容•前言•产品说明•主要特点•研究数据•竞争比较前言•狼疮抗凝物（LA）检测对抗磷脂综合征起着举足轻重的作用，当患者体内出现中高滴度的抗心磷脂抗体和抗β2糖蛋白I抗体时可被确定为高血栓形成风险。
•APS是一种由于体内出现抗磷脂抗体（aPL）导致的自身免疫失调，与血栓和/或妊娠发病率相关。
•LA能延长磷脂依赖性凝血实验的凝固时间，从而预示着某种抑制物的存在。
4前言•最新的LA指南指出，检测LA应该依赖于监测、混合和确诊实验。
应分别采用不同的方法学检测两个项目。
1.dRVVT被认为对高风险易栓症患者LA具有特异性2.基于硅的APTT需要低浓度的磷脂保证敏感性•LA阳性结果必须在＞12周后复检，以排除APL的瞬态性。
5前言•LA阳性结果应考虑在APS的背景下识别高风险的患者。
•IL提供两个完整的检测项目，满足国际血栓与止血学会委员会发布的针对狼疮抗凝/磷脂依赖性抗体的LA检测标准*.–HemosIL dRVVT–Silica Clotting Time–LA Positive and Negative Controls ( Mixing Study)*Pengo V, Tripodi A, Reber G, Rand H, Ortel T.L, Galli M and DeGroot P.G. Update of the guidelines for lupus anticoagulant detection. Thromb Haemost 2009;7:1737-17406前言•NEW HemosIL dRVVT Screen (PN 0020301500)•NEW HemosIL dRVVT Confirm (PN 0020301600)将会取代原来的：•HemosIL LAC Screen (PN 0020008000)•HemosIL LAC Confirm (PN 0020008200)7产品说明和规格•dRVVT Screen和dRVVTConfirm是改进的dRVVT试剂用于简化和规范LA的临床评估。
DRVVT Screen缺少磷脂,使其对LA敏感。
dRVVT Confirm 添加额外的磷脂( bi-layers)，抵消LA，缩短凝固时间。
•dRVVT Screen 10 x 2 mL (Lyophilized)•dRVVT Confirm 10 x 2 mL (Lyophilized)8dRVVT Screen and Confirm特点•在ACL全自动血凝仪上检测•和原来的LAC有相似的性能•和原来的LAC试剂盒的配置一样•使用IL的4ml试剂瓶，每试剂盒比LAC能增加大约30%的检测量（从160到210测试/盒ACL TOP，扣除死腔量）•条码标签的使用使ACL TOP Family的试剂装载过程进一步自动化，且具有能够跟踪试剂效期等相关功能。
9dRVVT 特点•提升了2 –8 ºC 的存储时间，15 days vs 48 hours with LAC•改进了机载稳定性，3 days on TOP Family vs 2 days with LAC.10In House Method Comparison11In House Method Comparison ACL TOP12差异•在in house 研究中，正常与异常LA样本的确定没有差异，这批样本无论是参照CLSI文件使用95% 置信区间或者参照ISTH推荐的99%，两者的cut-off值都有一个特别的正常样本在cut-off值之上，此样本NR对LAC是1.14，对dRVVT是1.15，所以这个样本在LAC和dRVVT NR cut-off 之上，包括95% Cl和99%.13方法学比较: dRVVT Screen vs LAC Screen14y = 1.0482x - 3.4966r = 0.992040608010012014016020406080100120140160HemosIL LAC (sec)d R V V T (se c )结论:新的dRVVT 与LAC Screen 具有优异的相关性，斜率在10% 以内，r > 0.95.方法学比较: dRVVT Confirm vs LAC Confirm15y = 0.967x - 0.4431r = 0.972025303540455020253035404550HemosIL LAC (sec)d R V V T (se c ).结论:新的dRVVT Confirm 与LAC Confirm 具有优异的相关性，合适的斜率和相关系数方法学比较: dRVVT N.R. vs LAC N.R16y = 1.1212x - 0.1303r = 0.980.801.001.201.401.601.802.002.202.402.602.803.003.203.403.603.804.000.801.001.201.401.601.802.002.202.402.602.803.003.203.403.603.804.00HemosIL LAC (NR)d R V V T (N R )Conclusion:总体来说新的与LAC 的具有相同的结果临床试验Combined 3 Clinical Trials from U.S. into one95 % CI99th383 正常样本253 阳性样本144 非-LA 干扰样本9/383 正常> cut-off = 3744/383 > Cut-off = 37996/253 LA 阳性< cut-off = 157111/253 < Cut-off = 14317临床试验应用95% CI Cut-off18临床试验应用99th Percentile cut-off19差异20At the 95% CI cut-off dRVVT > 1.23 and LAC is > 1.24The following table shows that LAC has more positives in the NR range of >1.24 and < 1.40 than the dRVVT.CLSI 95% CI SAMPLES POSITIVE LAC NR LACdRVVT % Co-POS >1.24 to ≤1.4021943%>1.4013613398%Above an NR of > 1.40 we have excellent agreement.Incorporating the 99thpercentile we see a similar pattern. NR dRVVT 1.33 and LAC 1.32In the NR range of >1.32 and < 1.40 the LAC has a higher sensitivity than the dRVVT within the range that is very close to the cut-off.99th PERCENTILE SAMPLES POSITIVE LAC NR LACdRVVT % Co-POS >1.32 to ≤1.40 7 3 43% >1.4013613096%Samples above the NR range of >1.40 correlate excellently.Cut-Off at EU Launch•cut-off 基于central 95% ，应用95% 置信区间. ( 2.5 –97.5 percentile, n=153) Noramlized Ratio cut-off >1.13•建议用户应该建立自己的cut-off.•如果遵循ISTH•N= 40 ( ＜50岁)•99th Percentile.21竞争对比22HemosIL dRVVT Screen dRVVT ConfirmHemosIL LAC Screen LAC ConfirmStago DRVV Screen DRVV ConfirmSiemens LA 1 Screen &LA 2 ConfirmAmerican Diagnostica DVVtest &DVVconfirmPrinciple dRVVT dRVVT dRVVT dRVVT dRVVT PackagingdRVVT Screen 10 x 2 mL dRVVT Confirm 10 x 2 mLLAC Screen 10 x 2 mL LAC Confirm 10 x 2 mLDRVV Screen 12 x 5 mL DRVV Confirm 12 x 2 mLLA 1 Screen 10 x 2 mL LA 2 Confirm 10 x 1 mLDVV test 10 x 5 mL 10 x 2 mL DVV Confirm 10 x 2 mL 10 x 1 mLPreparation CLSI Type CLR Water CLSI Type CLR Water Distilled Water Distilled Water De-ionized Water Reconstituted Stability15 days at 2-8ºC 3 days at 15ºC On-board ACL TOPFamily48 hours at 2-8ºC 3 days at 15ºC On-board ACL TOPFamily 1 month at -20 ºC72 hours On-board7 days 2-8ºC 2 days at 15ºC 8 hours at 37ºC 1 month at -20ºC24 hours at 20 -25ºC 7 days at 2 -8ºC 1 month at -20 ºCInterference ClaimsHeparin (UF and LMW) up to 1 U/mL Hemoglobin up to 200 mg/dL Triglycerides up to 500mg/dL Bilirubin up to 10 mg/dL Heparin (UF and LMW) up to 1 U/mL Hemoglobin up to 125 mg/dL Triglycerides no claim Bilirubin up to 13mg/dLNo specific interference claims supplied by the manufacturer on the specific package insert No specific interference claims supplied by the manufacturer on the specific package insert UF Heparin up to 1U/mL LMW Heparin up to 2U/mL总结•相近的性能与目前的HemosIL LAC Screen PN 0002000800 and HemosIL LAC Confirm PN0020008200.•相同的规格与目前的HemosIL LAC Screen and HemosIL LAC Confirm:–dRVVT Screen : 10 x 2 mL (lyophilized)–dRVVT Confirm: 10 x 2 mL (lyophilized)•HemosIL dRVVT Screen and HemosIL dRVVT Confirm 使用IL的4ml试剂瓶，每试剂盒能增加大约30%的检测量（从160到210测试/盒ACL TOP，扣除死腔量）23总结•条形码管理•稳定性改进•15 days at 2 –8 ºC.•推荐使用质控：HemosIL LA Positive Control PN 0020012500 and HemosIL LA Negative Control PN0020012600.24材料和要求–HemosIL dRVVT Screen PN 0020301500 lot numberN0803551 expires May 2012–HemosIL dRVVT Confirm PN 0020301600 lot numberN0502703 expires February 2012–TOP Parameters 14.609 is required2526Screening Confirmatory Screening Confirmatory 整合的LA 检测项目dRVVT ScreendRVVT ConfirmSCT ScreenSCT ConfirmN.R. ≤ cut-off: LA (-)N.R. > cut-off: LA (+)N.R. ≤ cut-off: SCT (-)N.R. > cut-off: SCT (+)Platelet Poor PlasmadRVVT and SCT Results AnalysisdRVVT (-) & SCT (-)dRVVT (+) & SCT (+)dRVVT (+) & SCT (-)dRVVT (-) & SCT (+)No LupusAnticoagulants-排除因子缺乏或者因子抑制物存在对Normalized ratios 的影响-排除肝素对Normalized Ratios.的影响.参阅说明书中肝素的影响细节-口服抗凝药样本可能对Normalized Ratios 产生影响如果以上情况均不存在，患者存在LA 的概率极高Screen and Confirm Clotting Times > 2 SD RangeScreen and Confirm Clotting Times ≤ 2 SD Range Mixing studies necessary to investigate factor deficiencies or inhibitors. If mixing test is still prolonged it indicates that some anticoagulant other than LA is present2013携手发展27。
