氨基甲酸酯分析方法现场培训-waters

氨基甲酸酯分析方法原理：图1 氨基甲酸酯分析方法中测定的化合物上图中显示了11个EPA方法531.1分析物的结构。

它们依次从反相色谱C18上洗脱。

图2 氨基甲酸酯分析柱后反应的次序每一个氨基甲酸酯从反相色谱中洗脱后，在较高温度被强碱性溶液（NaOH）水解，释放出醇，CO2(以碳酸盐的方式)以及甲胺。

在第二步，甲胺与OPA反应并和巯基乙醇形成一个具有荧光的异氮(杂)茚基衍生物。

注意：请使用最高质量的试剂和溶剂，完全洗净的用于溶液、样品以及溶剂的玻璃器皿。

残留的清洁剂、指纹、香烟雾、呼吸，或者其它任何含有胺或者氨的物质，都可能导致分析中的干扰。

使用氨基甲酸酯分析方法标样，试剂和溶剂：氨基甲酸酯标样：氨基甲酸酯依次洗脱如下：1．Aldicarb sulfoxide 涕灭威亚砜2．Aldicarb sulfone 涕灭威砜3．Oxamyl 杀线威4．Methomyl 灭多威5．3-Hydroxycarbofuran 3－羟基克百威6. Aldicard 涕灭威7. Propoxur残杀威8. Carbofuran克百威9. Carbary 西维因10. 1-Naphthol 抗蚜威11. Methiocarb灭虫威12. BDMC（内标）化合物2－4以及6－11可得到干燥的结晶性粉末。

而所有的化合物都可购得独立的或者已混合的乙腈溶液。

柱后衍生试剂成分OPA，邻苯二甲醛，97％，尽量使用级别高的试剂，重结晶级更佳。

2－巯基乙醇，98％，尽量使用级别高的试剂。

十水硼酸钠，ACS级。

片状NaOH，ACS级（低CO2浓度）。

注：氢氧化钠必须处于低CO2浓度下保存。

溶剂和试剂乙腈（ACN），HPLC级甲醇（MeOH），HPLC级注：乙腈和甲醇，即使是HPLC级，也可能含有在柱后衍生系统内会与OPA/ME反应的胺或者氨水，形成高荧光吸收杂质。

这些衍生物可能造成基线漂移，相应随着溶剂组成而变化，并且/或者可能加大基线噪音。

产品简介Alliance系统的核心是Waters 2695分离模块。

2695是基于2690分离模块先进的溶剂和样品管理集成结构，并针对用户的迫切需求进行了大量的设计革新。

产品详细信息【性能参数】Alliance系统主要应用扩展：自动方法开发系统(AMDS)生化分离系统氨基甲酸酯(Carbamate)分析系统自动溶出度测试系统Alliance HT 系统(High Throughput)Alliance 离子分析系统Alliance LC/MS 系统Alliance GPC 2000聚合物分析系统系统配置系统附件在使用HPLC时您会面临这些挑战吗？如何保证系统的正常运行时间？如何培训新手？如何使用数据管理软件？如何技术本身的变异性？如何遵从法规？1996年，Alliance系统突破了传统液相性能的障碍，将HPLC引向了全新的发展方向。

今天，Waters的Alliance 系统重新定义了可靠性、耐用性和现代实验室意义上的性能概念。

随着全新的Alliance系统的使用，现代实验室能够维持全年、全周、全天24小时不停顿的运转。

Alliance系统拥有超群的精度，无需担心突发故障，所有的一切，给用户强大的信心。

遵从法规、培训时间、系统可正常运行时间、结果的变异性和数据管理是多数HPLC用户关心的问题。

这也是我们对Alliance系统提出的要求。

因此你可以确信你的Allanice系统始终运转，始终工作(always on, always working)。

系统介绍最佳的系统才有最佳的结果。

Alliance系统的核心是Waters 2695分离模块。

2695是基于2690分离模块先进的溶剂和样品管理集成结构，并针对用户的迫切需求进行了大量的设计革新。

Alliance系统中的2695分离单元设计可与Empower / MassLynx 软件协同工作，还包括Symmetry和Xterra色谱柱，多种可选的检测器(包括Micromass的ZQ™和Quattro micro™质谱检测器)。

高效液相色谱—质谱联用仪分析水质（直接进样法）中的氨基甲酸酯类农药残留本研究建立了水中的氨基甲酸酯类农药经直接进样富集，采用超高效液相色谱-三重四级杆质谱法分离检测10种氨基甲酸酯类农药残留的方法。

根据保留时间、特征离子定性，外标法定量。

实验结果得出：线性系数在0.998以上；方法检出限为0.1～2?g/L；对（加）不同浓度的标准溶液进行精密度和准确度实验，连续进样12次相对标准偏差小于6.87%，加标回收率在79.7%-103%，符合环境标准。

标签：超高效液相色谱-质谱；氨基甲酸酯类农药；地下水1 前言在农业生产中农药被大量的使用，一部分农药会直接或间接地残存于谷物、蔬菜、水产品、畜禽产品中，另一部分会直接残留在土壤和水中，由于地表径流、大气干湿沉降等环境迁徙行为进入地表水体，势必造成水环境与水资源的污染，进而通过饮用或食物链直接或间接地影响人类健康。

作为我国使用量较大的禁用杀虫剂之一，氨基甲酸酯类农药由于其有杀虫效果显著、分解快、代谢迅速的特点，被广泛运用于粮食、蔬菜、水果等各种作物。

但因为其原料易得、合成简单，被大量不科学的使用。

氨基甲酸酯类农药属于化学合成农药中有机合成化合物，此类杀虫剂进入体内可抑制乙酰胆碱酶，造成急性中毒，其过量使用对人体健康造成影响，同时造成水环境污染。

氨基甲酸酯类极性高，热稳定性强，被土壤吸附后水中残留浓度低，分析前需要对样品进行分离富集预处理，本论文采取直接进样，节省了前处理的时间和损失。

2 材料与方法2.1 仪器与试剂超高效液相色谱-串联四极杆质谱仪（QSight LX50：美国PerkinElmer公司产品，配有电喷雾离子源（ESI）；甲醇：色谱纯；乙腈：色谱纯；氨基甲酸酯农药标准物质，上海安谱公司。

取适量氨基甲酸酯农药标准品，用甲醇稀释并定容，配制成100?g/mL标准储备液，将该储备液于-4℃以下冷藏密封避光保存。

用90%甲醇，10%乙腈稀释溶液稀释成不同浓度的混合标准工作溶液，浓度依次为10、20、50、100、200?g/L。

氨基甲酸酯类农药残留分析方法的研究进展摘要：目前氨基甲酸酯类农药被广泛应用，其母体及代谢产物有较为严重的毒害作用。

建立快速、灵敏、有效的氨基甲酸酯类农药残留的检测技术，成为当前研究者关注的课题。

本文者从分光光度测定法、色谱分析、生物检测、免疫分析、生物传感器、联用技术6 个方面综述了目前氨基甲酸酯类农药残留分析方法的研究进展及应用现状。

关键字：氨基甲酸酯、农药残留、检测方法1、分光光度测定法由于早期在分光光度分析过程中没有分离步骤，因此颜色反应的特异性就成为目标化合物定量分析的主要因素，如环境中的总涕灭威残留量可用氨基甲酰肟基团的特殊反应来测定。

残留物用碱分解，产生涕灭威肟，再用酸水解放出羟胺。

后者用碘氧化成亚硝酸，然后用亚硝酸-偶氮法测定。

这种方法是早期使用的分析方法，由于其操作烦琐，灵敏度低,易受其它物质干扰，现已很少使用。

蒋淑艳等[ 2 ] 提出采用间接邻菲罗啉光度法测定氨基甲酸酯类农药，其标准偏差为0 . 21%～2 . 3%,变异系数为0. 22%～2. 43%，回收率达99.6 %～107. 8%。

目前对农药西维因也常采用分光光度分析法，并且采用不同的样品前处理、不同的耦合试剂和不同的波长条件下进行测定。

如可先将西维因氧化成1-奈酚，固定于固相吸附剂上，然后用分光光度计测定水样中的西维因；也可用固相萃取(SPE)浓缩西维因，经过洗脱和溶剂替换后，用分光光度法进行测定。

分光光度测定法对于农药残留量进行分析时，不足之处是首先需要进行富集,其优点为要求的设备简单，对于基层生产单位及一般实验室具有使用价值。

2、色谱法2.1 气相色谱法(GC)测定气相色谱法(GC)是一种经典的农残检测方法，约70％的农药残留都是用气相色谱法来检测。

氨基甲酸酯类农药在高温中不稳定，即使在选择柱条件方面下很大功夫，仍不可避免产生氨基甲酸酯的分解，同时也缺乏灵敏度高的选择性检测器，于是只能对不发生分解的氨基甲酸酯进行直接GC测定。

氨基甲酸酯分析方法介绍分光光度测定法由于早期在分光光度分析过程今没有分离步骤、因此颜色反应的特异性就成为目标化合物定量分析的主要因素，如环境中的总涕灭威残留量可用氨基甲酰肪基团的特殊反应来测定。

残留物用碱分解，产生涕灭威肟，再用酸水解放出羟胺。

后者用碘氧化成亚硝酸，然后用亚硝酸—偶氮法测定。

这种方法是早期使用的分析方法，由于其操作烦琐，灵敏度低．易受其它物质子干扰，观已很少使用。

蒋淑艳等提出采用间接邻非罗啉光度法测定氨基甲酸酪类农药，其标准偏差为0.21％一2．3％。

变异系数为0.22%—2.3%回收率达99．6％一107．8％。

目前对农药西维因也常采用分光光度分析法，并且采用不同的样品前处理、不同的耦合试剂和不同的波长条件下进行测定。

如，可先将西维因氧化成1—奈酚，固定于固相吸附剂上，然后用分光光度计测定水样今的西维因；也可用固相萃取浓缩西维因，经过洗脱和溶剂替换后，用分光光度法进行测定。

分光光度测定法对于农药残留量进行分析时，不足之处是首先需要进行富集，其优点为要求的设备简单，对于基层生产单位及一般实验室具有使用价值。

分析的检测波长采用254mmc样品经超临界流体萃取(SPE)后，再用HPLC上—UV检测，结果优于HPLC—发光检测。

近年，采用经SFE净化后，测定马铃薯中涕灭威及其代谢产物方法，其检测限达15μg/kg。

张洪兰采用国产C18柱提取生物体液中7种氨基甲酸酯类农药，用乙酸乙酌洗脱．采用二极管矩阵检测器和多通道信号检测，最低检测限为20—40ng。

1977年Moye等第一次采用柱后衍生HPLC—荧光检测法测定氨基甲酸酯类农药残留。

近20年来，柱后水解和衍生后进行荧光检测复杂介质中氨基甲酸酯的方法越来越普遍。

Argauer 用该方法测定了26个样品中的24种氨基甲酸酯类农药．回收率为70％一100％。

尽管HPLC—VU及HPLC—荧光检测在分析氨基甲酸酯类农药残留中已被广泛采用，但有些化合物的确认有可能存在问题．特别是在土壤和农作物这样复杂的样品分析中，峰的分离很困难，因此将HPLC与MS联机使用无疑是一个好的解决办法。

实验五高效液相色谱法对两种氨基甲酸酯类农药的定性和定量分析1 实验目的掌握高效液相色谱法的基本原理方法；熟悉液相色谱仪基本结构及使用方法；掌握对两种氨基甲酸酯类农药的定性和定量分析的实验步骤及注意事项。

2 实验原理2.1方法原理色谱分离的基本原理是在外力作用的条件下，含有样品的流动相通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。

样品中各组分在两相之中进行不同程度的作用。

与固定相作用强的组分随流动相流出的速度慢，反之与固定相作用弱的组分随流动相流出的速度快。

高校液相色谱是以溶剂为流动相的色谱方法，具有高效、高速、高灵敏度的优点。

由于流出速度存在差异即各组分保留时间不同，使得混合组分最终形成各个单组分的“带”或“区”，对依次流出的各个单组分物质可分别进行定性、定量分析。

样品中各组分在固定相的分离机理有许多种，包括不同组分在固定相的吸附作用不同；不同组分在固定相上的溶解能力不同；不同组分在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同；不同尺寸分子在固定相上的渗透作用不同。

定性：通过保留时间对目标物进行定性分析；定量：运用公式：C / A=C' / A'；其中C为待测样目标物的浓度；A为待测样目标物的峰面积；C'为目标物混标的浓度；A'为目标物混标的峰面积。

2.2仪器原理高效液相色谱仪包含五部分结构：高压输液装置、进样系统、分离系统、检测系统和工作站软件，还配有梯度淋洗、自动进样和数据处理装置[1]。

高压输液装置：包含贮液器、脱气、高压输液泵三方面。

通过超声波脱气或真空加热脱气。

溶剂通过脱气器中的脱气膜，相对分子量小的气体透过膜从溶剂中除去。

高压输液泵是高效液相色谱仪的关键部件之一，其功能是将溶剂贮存器中的流动相以高压形式连续不断地送入液路系统，使样品在色谱柱中完成分离过程。

由于液相色谱仪所用色谱柱径较细，所填固定相粒度很小，因此，对流动相的阻力较大，为了使流动相能较快地流过色谱柱，就需要高压泵注入流动相。

Empower 2 软件现场培训教材目录一．登陆 1 二．编辑仪器方法和方法组(以2695_2998为例) 2 三．编辑仪器方法和方法组(以2695_2489为例) 8 四．进样13 1．单进样13 2．使用向导建立样品组和样品组方法14 五．建立数据处理方法21 1．2D数据处理方法21 2．建立3D数据处理方法29 六．查看结果和视图筛选40 七．预览结果并创建一个综合报告方法40 方法组的建立立43 八．方法组的建九．数据管理451. 项目的备份452．项目的还原48一．登录1．双击电脑桌面上的Empower快捷图标出现Empower登录界面，输入用户名和密码。

注：出厂设置的默认用户帐号为system，密码为manager。

建议每个系统都建立自己的用户帐号和密码。

己的用户帐号和密码2. 单击高级高级键, 选择用户类型和QuickStart界面。

高级3．选择QuickStart界面，点击“确定”,然后选择待选定的操作项目以及色谱系统（仅查看数据可选择色谱系统中的“没有系统”），单击“确定”。

4．登录Empower的QuickStart界面。

二、编辑仪器方法和方法组(以2695_2998为例) 1．监视区单击方法组编辑向导：2．选择选项3．弹出仪器方法编辑器。

4．单击2690/5，弹出2695编辑界面。

1） Alliance 系统（包括2695、2795和2695D）通用编辑页面中，可选择单次输送体积，不同的单次输送体积能选择的流速范围不同。

建议使用130微升，流速范围比较大。

2）查看脱气选项，确认设置正确。

3） 流量选项中设置泵模式泵模式泵模式、总流量总流量总流量以及流动相配比。

a. 等度模式如下图所示：b. 梯度模式如下图所示：5．单击2998，弹出2998编辑界面。

1） 3D数据采集：在通用栏中选择其用3D数据，输入检测波长的范围；2）采集2D数据，点击，可同时采集8个不同波长的通道的数据；注：PDA检测器“快速”时分辨率需设置到1.2nm；采样速率以一个色谱峰上的采个点为准。

食品中氨基甲酸酯农药残留的分析方法近年来，食品安全问题引起了公众的高度重视，尤其是食品中农药残留的安全评价，建立有效的检测分析方法已成为十分必要的事情。

氨基甲酸酯类化合物是主要的农药残留，研究其在食品中的检测分析技术已有了进展。

本文重点介绍了氨基甲酸酯农药残留的分析方法，包括抽样处理、前处理、定性分析和定量分析等步骤，明确了目前氨基甲酸酯分析的发展趋势，并提出了未来的研究方位。

一、抽样处理样品的抽取有利于保证分析的准确性，抽样处理对氨基甲酸酯残留的分析有着重要的作用。

抽样的方法有很多，其中最常用的是抽滤或重复抽取法，这两种方法均可保证氨基甲酸酯农药残留的准确性和可靠性。

二、前处理前处理是氨基甲酸酯农药残留分析的重要环节，其目的是去除多余的干扰物，以增加检测信号的活性。

常用的前处理方法包括萃取和液-液萃取，其中萃取技术已成，液-液萃取技术也得以进行，但由于存在技术差异，其准确性仍有待观察。

三、定性分析定性分析可以获得细微的化学物质信息，常用的定性分析方法有色谱、薄层色谱、芳杂质分离、相变测定和紫外分光光度法等。

色谱和薄层色谱法的常用应用是质谱测试，可以检测到氨基甲酸酯农药残留的物种信息。

芳杂质分离技术可以筛选出特定结构的农药残留物种。

相变测定技术可以快速准确检测氨基甲酸酯农药残留，而紫外分光光度法则可以测定残留氨基甲酸酯的激发态和可溶性态。

四、定量分析定量分析可以提供明确的检测结果，氨基甲酸酯农药残留的定量分析技术主要有气相色谱法、液相色谱法、总氮法、生物分析法和酶联免疫分析法。

当前，气相色谱法和液相色谱法是定量分析氨基甲酸酯农药残留中使用最广泛的技术。

气相色谱法具有检测灵敏度高、精密度高等优点，现已广泛用于氨基甲酸酯农药残留的定量分析。

液相色谱法和总氮法的优点在于快速和简便，可以在短时间内获得准确的检测结果，但其灵敏度较低。

生物分析法和酶联免疫分析法都以生物技术为基础，具有检测灵敏度高、定量精确等优点，但由于技术成熟度低，尚未被广泛应用。

用高校液相色谱法测定番茄中的涕灭威、克百威等七种氨基甲酸酯农药的含量作者：杨琳琳来源：《农业开发与装备》 2015年第3期杨琳琳（鞍山市农产品质量安全监测中心，辽宁鞍山 114000）摘要：采用Waters 1525 液相色谱仪，可变荧光波长检测器，用分析柱（5μm，4.6×250mm），以甲醇和水溶液为流动相进行梯度洗脱来测定番茄中涕灭威、涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、三羟基克百威、克百威和甲萘威的残留量。

7种氨基甲酸酯类农药均能达到基线分离并有良好的峰型。

采用外标法定量。

其添加回收率在80.5～104.2﹪之间，变异数在2.8～7.2%，此方法用于测定番茄中氨基甲酸酯类农药的残留量，检测过程简便、快速。

关键词：液相色谱；氨基甲酸酯类农药；残留量农药残留污染一直影响着人们的生活质量和食品贸易的顺利进行。

随着人们生活水平的日益提高，对食品安全意识的不断增强，蔬菜中农药残留问题也得到了更大的关注。

氨基甲酸酯类农药是一种广谱性农药，可用作杀虫剂、除草剂、杀菌剂等也用作灭蚊药、灭蟑药[1]。

此类农药选择性强，对咀嚼式害虫，例如棉红铃虫等具有特效[2]。

虽然氨基甲酸酯类农药的母体化合物毒性较高，但由于它们在温血动物与昆虫体的代谢途径不同，即在前者，能产生水解，在后者则仍保持母体化合物的毒性，故而对前者的毒性较低。

氨基甲酸酯类农药对人体的急性毒作用与有机磷农药相似，抑制体内乙酰胆碱酯酶，使他失去分解乙酰胆碱的功能，造成组织内乙酰胆碱的蓄积而中毒。

蔬菜具有生长期短，流通快等特点，要求快速、灵敏、准确地检测多种未知农药残留，本文在现有标准和文献基础上，通过对样品前处理和色谱条件进行了比较和优化，旨在建立同时测定7种氨基甲酸酯残留的高效、准确、灵敏的分析方法。

1 材料与试剂1.1 试剂乙腈、二氯甲烷、甲醇（均为色谱纯）、氯化钠（分析纯）、柱后衍生试剂0.05mol/ml NaOH溶液，Pickering（cat.NO CB130）；OPA稀释溶液，Pickering（cat.NO CB130）；邻苯二甲醛（O-Phthaladehyde，OPA），Pickering（cat.NO CB130）；巯基乙醇（Thiofluor），Pickering（cat.NO 3600-2000）。

高效液相色谱直接进样法测定水中氨基甲酸酯
程滢;陈军;薛锐
【期刊名称】《环境科学与管理》
【年(卷),期】2007(032)004
【摘要】采用高效液相色谱法测定水中氨基甲酸酯,用Waters Carbamate Analysis3.9×150mm色谱柱,以水-甲醇-乙腈为流动相,用激发波长为339nm,发射波长为445nm的荧光检测器定量测定水中氨基甲酸酯的含量,结果表明本方法的标准偏差在0.02～0.12μg/L之间,变异系数在1.07%～7.24%之间,平均回收率在89.5%～100.5%之间.
【总页数】2页(P148-149)
【作者】程滢;陈军;薛锐
【作者单位】泰州市环境监测中心站,江苏,泰州,225300;泰州市环境监测中心站,江苏,泰州,225300;泰州市环境监测中心站,江苏,泰州,225300
【正文语种】中文
【中图分类】X830.2
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5.直接进样-超高效液相色谱-串联质谱法测定水中乙草胺 [J], 黄允河;吴春玲;张立亚
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