细胞培养基种类及用途
- 格式:docx
- 大小:37.08 KB
- 文档页数:2
基础细胞培养基通常指基础合成培养基,主要成分为氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、辅助物质(核酸降解物、氧化还原剂等)。
据不同细胞和研究目的,选用合适培养基,•还可补加新成分。
•如杂交瘤中常用DMEM加丙酮酸钠、2-巯基乙醇(相当于胎牛血清可透析组分的作用)。
合成培养基使用时加5-30%血清。
1. 199细胞培养基及其改良品种1950年Morgan等设计,除BSS外,含有53种成分,为全面培养基,广用于各类细胞培养,广泛用于病毒学、疫苗生产。
2. BME细胞培养基基础Eagle培养基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle设计,BSS+12种氨基酸+谷氨酰胺+8种维生素。
简单、便于添加,适于各种传代细胞系和特殊研究用,在此基础上改良的细胞培养基品种有MEM、DMEM、IMEM等。
3. MEM细胞培养基低限量Eagle培养基(Minimal Essential Medium),1959年修改,删去赖氨酸、生物素,氨基酸浓度增加,适合多种细胞单层生长,有可高压灭菌品种,是一种最基本、试用范围最广的培养基,但因其营养成分所限,针对生产之特定细胞培养与表达时,并不一定是使用效果最佳或者最经济的培养基。
4. DMEM细胞培养基及其改良品种DMEM由Dulbecco改良的Eagle培养基,各成份量加倍,分低糖(1000mg/L)、高糖(4500mg/L)。
生长快,附着稍差肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好,常用杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。
例如CHO细胞表达生产乙肝疫苗、CHO细胞表达EPO。
5. IMEM细胞培养基IMEM由Iscove's改良的Eagle培养基,增加了几种氨基酸和胱氨酸量。
6. RPMI-1640细胞培养基Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,针对淋巴细胞培养设计,BSS+21种氨基酸+维生素11种等,广泛适于许多种正常细胞和肿瘤细胞,也用做悬浮细胞培养7.Fischer’s细胞培养基用于白血病微粒细胞培养。
dmem培养基的种类
摘要:
1.DMEM 培养基的定义和作用
2.DMEM 培养基的种类及区别
3.不同种类的DMEM 培养基的特点与应用
4.选择合适的DMEM 培养基的注意事项
正文:
DMEM 培养基是一种富含营养物质的细胞培养基,用于支持细胞生长和繁殖。
它主要包括以下几种类型:
1.DMEM 低糖培养基:含有较低的葡萄糖浓度,适用于生长较慢、附着较困难的肿瘤细胞等。
2.DMEM 高糖培养基:含有较高的葡萄糖浓度,有利于细胞停泊于一个位置生长,适用于生长较快、附着较困难的肿瘤细胞等。
3.DMEM 含血清培养基:添加了血清成分,提供了更多的生长因子和营养物质,适用于各种细胞类型。
4.DMEM 无血清培养基:不添加血清成分,适用于对血清敏感的细胞类型。
在选择合适的DMEM 培养基时,需要注意以下几点:
1.确认细胞类型:不同类型的细胞对营养物质和生长环境的需求不同,需要选择适合该细胞类型的DMEM 培养基。
2.考虑生长速率:根据细胞的生长速率选择合适的高糖或低糖DMEM 培
养基。
3.血清添加:如果细胞对血清敏感,需要选择含血清的DMEM 培养基;如果对血清不敏感,可以选择无血清的DMEM 培养基。
4.品质保证:选择信誉良好的供应商,确保培养基的品质和稳定性。
总之,DMEM 培养基的种类繁多,需要根据细胞类型、生长速率、血清添加等因素选择合适的培养基。
细胞培养基种类及用途按照细胞培养基的发展历史,细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。
1.1 平衡盐溶液(balanced salt solution,BSS)BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH稳定及提供简单的营养。
其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。
D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+,因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。
因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份,参与细胞粘附等功能,使用不含Ca2+、Mg2+的BSS 可避免细胞结团。
此外,Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液,前者缓冲能力较弱,适合于密闭培养;后者缓冲能力较强,适合于5% CO2的培养条件。
1.2 天然细胞培养基天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基,如血浆、血清、淋巴液、鸡胚浸出液等。
其优点是营养成分丰富,培养效果良好,但缺点是成分复杂,来源受限且制作过程复杂、批间差异大。
目前广泛使用的天然培养基是血清,另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。
水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物,含丰富的多肽、氨基酸和碳水化合物。
一般配制成0.5 %溶液(采用平衡盐溶液溶解)与合成培养基(如MEM细胞培养基)以1:1的比例混合使用。
目前用于细胞培养的血清主要是牛血清,培养某些特殊细胞也用人血清、马血清等。
牛血清对绝大多数哺乳动物细胞都是适合的,但并不排除在培养某种细胞时使用其他动物血清更合适。
血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。
此外,血清含一些对细胞产生毒性的物质,如多胺氧化酶,能与来自高度繁殖细胞的多胺反应(如精胺、亚精胺)形成有细胞毒性作用的聚精胺。
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。
一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。
最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。
而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。
MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。
Dulbecco`s改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM 含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。
选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。
例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。
F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。
在所有这些培养基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度,这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。
对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(若培养基中这两种物质缺乏时)。
MEM与F12均要用5%的CO2来平衡,DMEM含更高浓度的NaCO3,要用10%的CO2来平衡,当然也可以在较低CO2浓度下使用。
这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的,但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。
原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。
实际操作中并非如此简单。
显然,溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。
基础培养基种类
基础培养基是生物实验室中保持细胞或微生物生长、生活活动所必
需的培养基质。
常见的基础培养基主要有以下几种类型:
1. LB培养基
LB(Luria Broth)培养基是一种用于细菌培养的营养丰富的液态培养基。
其成分包括蛋白胨、酵母粉和氯化钠等,能够提供细菌所需的碳源、氮源和矿物质等。
LB培养基适用于大多数细菌的培养,是细菌学
研究中最基础的培养基。
2. YPD培养基
YPD培养基是一种适用于酵母细胞的培养基。
其成分包括葡萄糖、酵
母粉和氯化钠等,能够提供酵母细胞所需的能量和营养物质。
YPD培
养基适用于酵母菌的培养、繁殖和转化。
3. DMEM培养基
DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium)培养基是一种适用于哺乳
动物细胞的培养基。
其成分包括葡萄糖、氨基酸、维生素和矿物质等,能够提供细胞所需的营养和生长因子。
DMEM培养基适用于多种哺乳
动物细胞的培养、繁殖和传代。
4. M9培养基
M9培养基是一种用于细菌培养的最小培养基。
其成分包括氨基酸、糖
类和矿物质等,能够提供细菌所需的最基本营养。
M9培养基适用于对
细菌基本营养需求进行研究和筛选特定基因的细菌。
5. SD培养基
SD(Synthetic Defined)培养基是一种适用于酵母细胞的最小培养基。
其成分包括氨基酸、糖和矿物质等,能够提供酵母细胞所需的最基本营养。
SD培养基适用于研究酵母细胞的基本生理过程和筛选突变株。
DMEM、RIPA1640、F12、L15等细胞培养基的基本知识培养细胞的完全培养基由基础培养基(如MEM)和添加剂(如血清或无血清培养用的某些确定的激素及生长因子)组成,培养基的配方一直在改进,其中包括抗生素和抗有丝分裂剂等等。
一、基础培养基绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。
最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。
而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如核苷酸)。
MEM/F12 这两种培养基各取1/2,形成神经生物学最通用的培养基。
Dulbecco`s 改良培养基——DMEM,现应用于快速生长的细胞,同MEM含有相同的营养成分,但浓度高出2~4倍。
选择某种培养基,应仔细了解成分表,应知道大多数情形下培养基都有不足。
例如,有些培养基在氨基酸中包括有谷氨酸,而这种培养基虽广泛用于神经生物学领域,但它对某些对谷氨酸敏感的可能有细胞外毒性损伤的神经元而言,则并非最佳选择,特别是如果神经元生长在缺乏胶质的环境中时。
F12中含有硫酸亚铁,据报道也有神经毒效应。
在所有这些培养基中,谷氨酸比其他氨基酸有更高的浓度,这是因为它具有不稳定性以及在许多细胞培养中它常用作碳源。
对于神经元的培养常常在基础培养基中增加葡萄糖的含量到0.6%或者加入丙酮酸(若培养基中这两种物质缺乏时)。
MEM与F12均要用5%的CO2来平衡,DMEM含更高浓度的NaCO3,要用10%的CO2来平衡,当然也可以在较低CO2浓度下使用。
这些基础培养基的组成成分是建立在对不同细胞系生长的研究之上的,但通常在原代培养中使用也能有比较令人满意的结果。
原则上,HEPES作为缓冲剂可用来代替碳酸氢盐,以解除需要高浓度CO2培养环境的限制。
实际操作中并非如此简单。
显然,溶解的CO2与碳酸氢盐对良好的细胞生长是重要的。
细胞培养基⼤全⼀、细胞培养基的概念和原理细胞培养基是⼈⼯模拟细胞在体内⽣长的营养环境,是提供细胞营养和促进细胞⽣长增殖的物质基础。
培养液或培养基的含义⼏乎相同,英⽂都是medium。
当它是粉剂时,倾向性地称为培养基,⽽将粉剂配成液体后,多称为培养液。
培养液中常常补加⾎清、抗⽣素等成分。
培养基主要包括天然细胞培养基、合成细胞培养基和⽆⾎清细胞培养基等。
天然细胞培养基是⼈们早期采⽤的细胞培养基,直接取⾃于动物组织提取液或体液,如⾎浆凝块、⾎清、淋巴液、胚胎浸出液等。
营养价值⾼,但成分复杂,差异⼤、不稳定,来源也受到限制。
⽔解乳蛋⽩和胶原是两种较好的天然培养基,富含氨基酸。
⾎清是天然培养基中最有效和最常⽤的培养基,但其组成成分复杂,其中⼀些成分与功能不明确。
⾎清的来源有胎⽜⾎清、⼩⽜或成⽜⾎清、马⾎清、鸡⾎清、⽺⾎清及⼈⾎清,最⼴泛应⽤的为胎⽜⾎清和⼩⽜⾎清。
合成细胞培养基是⽤化学成分明确的试剂配制的培养基,组分稳定,主要包括糖类、必需氨基酸、维⽣素、⽆机盐类等。
⾃1950 年199 细胞培养基问世以来,合成细胞培养基发展⾄今已有⼏⼗种,除了沿⽤半个世纪的基础合成细胞培养基之外,近年来还出现了营养成分更加丰富的低⾎清细胞培养基。
由于细胞种类和培养条件不同,适宜的合成细胞培养基也不同,在动物细胞培养中最常⽤基础细胞培养基有6~7 种,如BME、MEM、DMEM、HAM F12、PRMI1640、199 等。
由于天然培养基的⼀些营养成分不能被合成细胞培养基完全代替,因此⼀般需在合成细胞培养基中添加5%~10%的⼩⽜⾎清。
⼩⽜⾎清的加⼊对细胞培养⾮常有效,但⼩⽜⾎清的成分复杂,这对培养产物的分离纯化和检测会带来⼀定的不便,为减少⼩⽜⾎清的影响,开发了营养成分更加丰富的低⾎清细胞培养基,可以将⼩⽜⾎清的使⽤量降低到1~3%。
⽆⾎清细胞培养基(serum free medium, SFM)是指在使⽤中⽆需添加⾎清的细胞培养基,且其组成成分不含有任何动物组分。
各种细胞培养基的区别及应用细胞培养基是用于体外培养细胞的一种重要介质,它可以为细胞提供生长所需的营养物质、生长因子、激素等。
根据不同的需求和应用领域,细胞培养基有很多种类和特点。
本文将对细胞培养基的区别及应用进行详细介绍,以帮助大家更好地了解和选择合适的细胞培养基。
一、细胞培养基的概述细胞培养基的发展历程可以追溯到上世纪50年代,随着生物科学研究的不断深入,细胞培养技术得到了广泛应用。
细胞培养基的研究和应用不仅为生物学基础研究提供了有力支持,还为医学、农业、工业等领域创造了巨大价值。
二、细胞培养基的区别1.基础培养基与专用培养基基础培养基:含有细胞生长所需的基本营养物质,如糖、氨基酸、维生素等,适用于大多数细胞的培养。
常见的基础培养基有DMEM、RPMI-1640、MEM等。
专用培养基:针对特定类型的细胞设计,具有较高的特定成分和较窄的营养成分范围,可以满足某些细胞对特定营养物质的需求。
如HEK293细胞培养基、MCF-7细胞培养基等。
2.天然培养基与合成培养基天然培养基:来源于动物血清、血浆等天然物质,含有丰富多样的生长因子、激素等,具有较高的生物活性。
常见的天然培养基有FBS(胎牛血清)、ABC(人血清)等。
合成培养基:通过化学合成或重组技术制备,成分明确、可定制。
可以根据细胞需求添加不同的生长因子、激素等,具有较高的可控性。
如MED64培养基、Synthemax培养基等。
3.液体培养基与固体培养基液体培养基:含水量较高,细胞在其中可以自由悬浮和生长。
常见的液体培养基有DMEM/F12、RPMI-1640等。
固体培养基:在液体培养基中添加固体成分,如琼脂、纤维素等,使细胞可以在固体表面附着生长。
常见的固体培养基有agarose、matrigel等。
4.不同种类的细胞对培养基的需求不同种类的细胞对培养基的需求不同,例如:- 淋巴细胞培养:需要较高浓度的氨基酸、维生素和血清;- 神经细胞培养:需要添加神经营养因子、生长因子等;- 肿瘤细胞培养:需要较高浓度的糖和血清。
细胞培养基种类及用途
1. DMEM(Dulbecco's Modified Eagle Medium):DMEM 是最常用的
无血清培养基之一,是以鹰的鸟胚为基础改进而来的,含有大量氨基酸、
糖类、维生素和一些重要的生长因子。
适用于大多数哺乳动物细胞的培养,具有优良的细胞增殖和生长效果。
2.RPMI1640:RPMI1640是一种由罗斯韦尔公立医院制备的细胞培养基,主要用于淋巴细胞、淋巴瘤和骨髓细胞的培养。
它具有高浓度的氨基
酸和维生素,适合长期的培养以及体外细胞繁殖实验。
3. MEM(Minimum Essential Medium):MEM 是一种最简单的细胞培
养基,含有大量的必需氨基酸、维生素和果糖。
它广泛用于原代细胞和肿
瘤细胞的培养,具有适应性强、成本低的优势。
4. FBS(Fetal Bovine Serum):FBS 不是一种细胞培养基,而是培
养基中添加的血清。
FBS 富含细胞生长因子、激素和营养物质,可提供所
需的细胞补体和血浆蛋白。
它被广泛用于细胞培养中,可以促进细胞的增
殖和生长。
5. StemPro MSC SFM:StemPro MSC SFM 是一种专门设计用于人类间
充质干细胞(MSC)培养的无血清培养基。
它富含生长因子和维生素,可
以维持 MSC 的干性状态,有利于其增殖和多向分化。
6. Neurobasal medium:Neurobasal 是一种特殊的神经元细胞培养基,用于神经元细胞的培养。
它含有许多神经营养因子和激素,能够促进
神经细胞的生长和分化。
7.DMEM/F12:DMEM/F12是一种混合型细胞培养基,是DMEM和HAMF12培养基的混合产物。
它具有增强细胞的生存能力和增殖速度的优势,适用于许多类型的肿瘤细胞和原代细胞的培养。
细胞培养基的选择要根据具体实验目的和细胞类型来确定。
不同种类的细胞培养基在细胞生长、增殖和分化方面有不同的影响,因此合理的选择细胞培养基可以提高实验效果和数据可靠性。
此外,细胞培养基的保存和质量控制也是非常重要的,需要注意培养基的配方、存储温度和周期,以确保其稳定性和适用性。