穿心莲提取工艺研究
- 格式:docx
- 大小:28.92 KB
- 文档页数:3
穿心莲提取工艺研究穿心莲(Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees)收载于中国药典2000年版一部,为常用中药。
具有清热解毒,凉血,消肿之功效。
目前临床上以穿心莲为君药的中成药有10余种,包括片剂、注射液、滴鼻液等。
其主要有效成分为穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及脱氧穿心莲内酯等内酯成分。
由于上述内酯成分水溶性较差且遇热不稳定,不同版的药典收载的穿心莲片的提取工艺不尽相同[1,2]。
作者在研究穿心莲制剂时,发现不同提取工艺对上述内酯成分影响较大。
目前有关穿心莲提取工艺研究报道较少。
为更好地发挥穿心莲药用功效,笔者以穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯为检测指标,考察了不同提取工艺及不同醇提条件对上述内酯成分的影响,探索筛选了确保穿心莲制剂质量与疗效的最佳工艺条件。
1仪器与试药1.1仪器CS-9301薄层扫描仪(日本岛津公司);PBQ-Ⅰ型薄层自动铺板器(重庆南岸新力实验电器厂);定量毛细管(美国Drummond厂)。
1.2试药穿心莲内酯;脱水穿心莲内酯(中国药品生物制品检定所)。
穿心莲购自济南药材站(由山东省中医药研究所生药室彭广芳研究员鉴定符合药典标准)。
2方法与结果2.1不同提取工艺对穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯含量的影响2.1.1不同工艺样品的制备2.1.1.1水提工艺取穿心莲100g,加水提取2次。
第1次加10倍量水,煎煮2h,第2次加8倍量水,煎煮1h,合并提取液,滤过,滤液浓缩至每g相当于1g原药材的浓缩液,备用。
2.1.1.2碱水提工艺按《中国药典》1985年版穿心莲片工艺进行[1]。
取穿心莲100g,用碳酸钠调pH=8的碱水溶液,保持微沸状态提取3次,30min/次[1],合并提取液,加25%HCl 调pH=6,浓缩至每g相当于1g原药材的浓缩液,备用。
2.1.1.3醇提工艺按《中国药典》1995年版穿心莲工艺项下进行发[2]。
取穿心莲100g,用85%乙醇提取2次,2h/次,第1次10倍量,第2次8倍量。
穿心莲内酯的提取分离及鉴定2011级16班摘要:穿心莲为解毒消炎类临床常用药,穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分,分子式C20H30O5,白色方形或长方形结晶,味极苦,难溶于水易溶于乙醇、甲醇等。
利用乙醇提取方法、超声、回流、旋转蒸发浓缩方法对穿心莲内酯进行提取分离以及纯化,使用TLC法对其鉴别,可得到纯度较高的穿心莲内酯。
关键词:穿心莲、穿心莲内酯、超声提取法、乙醇提取法、TLC鉴别Isolation & Identification of AndrographolideABSTRACT:Clinical commonly used medicines, creat for detoxification counter Andrographolide is the main effective component, Traditional Chinese medicine (TCM) andrographis formula C20H30O5, white square or rectangle crystal, taste bitter, soluble in water, soluble in ethanol,methanol, ing the ethanol extract method, ultrasound, reflux, rotary evaporation enrichment method to extraction separation and purification of Andrographolide, using TLC method for the identification, can get high purity Andrographolide.KEY WORDS:Andrographis paniculata;Ultrasonic extraction;Andrographolide;alcohol extraction;Thin layer chromatography (TLC)穿心莲为常用中药,来源于爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata(Burm. f.)Nees.的干燥地上部分。
穿心莲内酯提取工艺1 设备与仪器I.I 设备多功能提取罐1.2 仪器:Agilent-1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司); Hypersil ODS 色谱柱250×4.6mm,5 7 m ;TV-1221型紫外-可见分光光度计,北京普析制造;Sartorius BS210S电子天平(德国塞多利斯股份公司);ZF-2型三用紫外仪(上海安亭电子仪器厂);超声波清洗器 (上海科导超声仪器有限公司)2 提取工艺2.1 工艺:① 粉碎:取穿心莲叶,粉碎机上安装孔径为8ram的筛网粉碎成粗粉。
②提取:穿心莲粗粉用4倍量95 乙醇回流提取两次,第 -次2小时,第二次1.5小时。
合并回流液,滤过,回收乙醇浓缩至每 lml含2g药材.冷却10℃-20℃,静止12小时析出结晶,滤取结晶物。
③ 重结晶:结晶物加入lO-15倍量的95%乙醇(以结晶物重量计),搅拌溶解,加0.5 活性炭(以结晶物重量计)加热回流3O分钟,过滤,滤液回收乙醇,静止l2小时以上,滤取结晶物。
④ 干燥:结晶物在50-70℃ 减压干燥6-8小时。
⑤ 粉碎:干燥物经100目筛粉成细粉。
⑥ 检测水份,含量合格后包装入库。
2.2 工艺研究:根据穿心莲内酯L2]的化学性质,在沸乙醇中溶解,在甲醇、乙醇中略溶,在水或乙醚中不溶。
我们选择用不同浓度的乙醇做溶媒回流提取穿心莲内酯考察对回流提取时间、提取次数对产品收率的影响。
2.2.1 提取次数的考察:穿心莲粗粉(检测含量)。
称取六份,每份 lkg,分成三组,分别加入4倍量(以药材重量计)95 乙醇,第-组回流提取-次,第二组回流提取两次,第三组回流提取三次。
每次提取时间 2小时,分别合并提取液,回收乙醇,浓缩至500ml,测定体积做为储备液。
① 出膏率的测定精密吸取储备液10ml于恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,于105℃干燥至恒重,移置干燥器中冷却0.5小时,称重,计算即得。
② 含量测定将上述储备液冷却至l0-20℃ ,静止12小时以上,有结晶析出,滤取结晶物于6O-7O℃ 减压干燥6-8小时,干燥物称重,按照WS-10001-(HD-0971)-2002穿心莲内酯含量测定项下的方法测定含量,并计算药材中穿心莲内酯的转移率。
穿心莲提取浓缩:加85%乙醇热浸(70~80°)提取两次,每次4小时,第一次10倍,第二次8倍量,收集热浸液。
将热浸液经管道流入浓缩罐回收乙醇,浓缩(75~80°)成浸膏。
穿心莲180501和180502批同时领料:药材编号Z-18041001 Z-18050901。
按上述工艺进行提取浓缩,180501批收膏353kg,180502批收膏443.3kg.两次浸膏无上清液,皆为混悬状。
180501干燥:预热起温度36度,6月4日21点10分到6月4日21点50分。
发泡温度55度,发泡真空-53kpa至-95kpa;
干燥时间段:6月4日21点55分到6月6日9点。
收干膏:198.4kg
180502干燥:第一次:预热起温度36度,6月6日21点20分到6月6日22点10分。
发泡温度56度,发泡真空-55kpa至-95kpa;
干燥时间段:6月6日22点55分到6月8日05点.
收干膏:140.6kg
第二次:预热起温度36度,6月12日19点19分到6月12日20点10分。
发泡温度55度,发泡真空-50kpa至-95kpa;
干燥时间段:6月12日20点30分到6月14日05点30.
收干膏:137kg。
穿心莲水提取物对大肠杆菌临床分离株的体外抑制试验
穿心莲(Centella asiatica)是一种常见的中药植物,被广泛应用于中医药领域。
研究发现,穿心莲具有多种药理活性,如抗氧化、抗炎、抗肿瘤等,以及对多种细菌具有抑
制作用。
本实验旨在研究穿心莲水提取物对大肠杆菌临床分离株的体外抑制作用。
我们从医院获得了10株大肠杆菌临床分离株。
这些菌株经过分离纯化后,存储在琼脂培养基中。
穿心莲水提取物的制备方法如下:将穿心莲干燥草药粉末加入乙醇中浸泡制备
提取液,用水蒸气蒸馏法浓缩提取物,最后用无菌蒸馏水稀释至所需浓度。
然后,我们对穿心莲水提取物进行了抗菌试验。
我们准备了Muller-Hinton琼脂平板,并用细菌涂布棒将菌液均匀涂布在琼脂平板上。
然后,我们在每个琼脂平板上制作了4个孔,每个孔都注入了不同浓度的穿心莲水提取物。
接下来,我们将平板孵育在37℃的恒温箱中,孵育24小时后观察菌落生长情况。
浓度最高并且能起到抑制菌落生长作用的穿心莲水提取物浓度将被确定为最低抑菌浓度(MIC)。
实验结果显示,穿心莲水提取物对大肠杆菌临床分离株具有抑制作用。
在不同浓度的
穿心莲水提取物作用下,菌落生长出现明显的抑制效果。
通过观察菌落的直径和菌落的数量,我们确定了不同浓度的穿心莲水提取物的最低抑菌浓度。
对于不同的大肠杆菌临床分
离株,最低抑菌浓度范围在100-500μg/mL之间。
实验:穿心莲提取总黄酮1.实验目的:通过提取实验,熟悉基本实验操作技巧,了解相关实验室仪器使用方法,并且学会运用标准曲线计算含量。
国内外对穿心莲的黄酮类物质的研究还相当的缺乏。
黄酮类有效成分在治疗冠心病、老痴呆、脑血栓、神经系统疾病和消除自由基、抑菌、抗癌等方面有显著效果, 无副作用, 并以此开发出多种药品和保健食品。
近年来, 超声技术应用于提取植物中的生物碱、苷类、生物活性物质、动物组织浆的毒质等研究已有报道, 表明具有能耗低、效率高、不破坏有效成分的特点。
研究表明, 利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等, 可加速植物材料中的有效成分进入溶剂,从而增加有效成分的提取率, 缩短提取时间, 同时还可避免高温对提取成分的影响。
2.实验原理:(1).总黄酮可以溶于乙醇之中,利用减压蒸馏将乙醇沸点降低,而后得到总黄酮提取物质。
(2).利用超声技术可将总黄酮更加高效的提取出来,不仅节约了时间成本,而且还避免了高温对提取成分的影响。
3.实验仪器:布氏漏斗,KQ-300DE型数控超声波清洗器,紫外分光光度仪,旋转蒸发仪,分析天平(万分之一),5%乙醇,60%乙醇,5%亚硝酸钠溶液,10%硝酸铝溶液,4%氢氧化钠溶液,穿心莲粉末。
4.实验步骤:(1)取穿心莲粉末,精密称量3g,放于锥形瓶中。
(2)配置95%乙醇:量取100ml无水乙醇导入250ml烧杯中,再想烧杯中加入蒸馏水5ml。
量取配制乙醇95ml倒入100ml的容量瓶中,并且加水定容至100ml。
(3)量取40ml95%乙醇倒入装有样品的锥形瓶中。
(4)将锥形瓶放于超声清洗器中,并且用铁架台固定好,控制功率在70W,温度15摄氏度,提取30min。
(5)用布氏漏斗抽滤,收集滤液。
(6)将滤渣转移到锥形瓶中,加入40ml 95%乙醇,摇匀后放入超声清洗器中提取30min 后再次用布氏漏斗抽滤。
(7)合并两次滤液,将滤液转移至100ml 圆底烧瓶中,与旋转蒸发仪连接安装。
一、实验目的1. 了解穿心莲胶囊的药效成分;2. 探讨穿心莲胶囊对金黄色葡萄球菌的抑制作用;3. 评估穿心莲胶囊的毒副作用。
二、实验材料1. 穿心莲胶囊(由某制药厂提供);2. 金黄色葡萄球菌(实验室菌株);3. 营养琼脂;4. pH值测试纸;5. 离心机;6. 电子天平;7. 紫外可见分光光度计;8. 其他实验试剂和仪器。
三、实验方法1. 穿心莲胶囊的提取将穿心莲胶囊内容物置于100mL锥形瓶中,加入50mL 70%乙醇溶液,超声提取30分钟。
过滤,滤液于40℃下蒸发至近干,用适量蒸馏水溶解,定容至50mL,备用。
2. 穿心莲胶囊对金黄色葡萄球菌的抑制作用将金黄色葡萄球菌接种于营养琼脂平板上,待菌落生长后,用无菌镊子将菌落挑取适量,加入100μL的穿心莲胶囊提取物,于37℃恒温培养箱中培养24小时。
观察并记录菌落生长情况。
3. 穿心莲胶囊的毒副作用评估将穿心莲胶囊提取物按照0.5、1.0、2.0mg/mL的浓度分别加入细胞培养液中,将小鼠细胞接种于96孔板中,于37℃、5%CO2条件下培养24小时。
每组设6个复孔,加入不同浓度的穿心莲胶囊提取物,培养48小时后,加入MTT溶液,继续培养4小时。
用酶标仪测定各孔吸光度值,计算细胞抑制率。
四、实验结果1. 穿心莲胶囊的提取穿心莲胶囊提取物在70%乙醇溶液中提取率较高,可达80%以上。
2. 穿心莲胶囊对金黄色葡萄球菌的抑制作用穿心莲胶囊提取物对金黄色葡萄球菌具有明显的抑制作用,随着浓度的增加,抑制作用逐渐增强。
3. 穿心莲胶囊的毒副作用评估穿心莲胶囊提取物在不同浓度下对小鼠细胞具有抑制作用,但未观察到明显的毒副作用。
五、实验讨论1. 穿心莲胶囊具有明显的抗金黄色葡萄球菌作用,其作用机制可能与以下因素有关:(1)穿心莲胶囊中的有效成分对金黄色葡萄球菌细胞壁具有破坏作用;(2)穿心莲胶囊中的有效成分可以干扰金黄色葡萄球菌的代谢途径;(3)穿心莲胶囊中的有效成分可以抑制金黄色葡萄球菌的生长和繁殖。
穿心莲内酯的提取及其衍生物的制备工艺李玉山【摘要】目的:提取纯化穿心莲内酯及制备其衍生物.方法:通过对川产穿心莲提取工艺的比较研究,以乙醇浓度、提取温度、料液比为影响因素,采用球面对称设计优化了提取工艺,根据穿心莲内酯理化性质,设计出最优纯化工艺路线,得到穿心莲内酯精品;莲必治的制备主要考察了物料比和反应液酸碱度的影响;喜炎平的制备主要对纯化工艺进行了优化;穿琥宁的制备以原料配比、溶剂用量、反应温度和时间为影响因素,采用L9(34)正交设计优化了最佳合成工艺;炎琥宁的制备以穿琥宁为原料,以溶液酸碱度、反应温度和时间为影响因素,采用均匀设计优化了合成工艺.结果:穿心莲最佳提取工艺为:90%的乙醇以4倍(mL·g-1)的料液比,在65℃下提取,在此工艺下穿心莲内酯的得率为21.5%,含量为17.8%;莲必治的制备中,穿心莲内酯与亚硫酸氢钠质量比为1∶1.8为宜,反应液pH值控制在8反应很完全;喜炎平的制备反应中应控制好浓硫酸的加入速度,磺化反应后以无水乙醇除盐;最佳工艺条件下穿琥宁得率为130.6%,含量为99.2%;炎琥宁在最佳工艺条件下得率为98.2%,含量为98.6%.结论:在提取纯化穿心莲内酯的基础上,制备了穿心莲内酯的内酯系列衍生物,工艺稳定可行,为综合利用穿心莲提供依据.【期刊名称】《世界科学技术-中医药现代化》【年(卷),期】2016(018)001【总页数】7页(P94-100)【关键词】穿心莲内酯;提取纯化;莲必治;喜炎平;穿琥宁;炎琥宁【作者】李玉山【作者单位】西安佳德生物工程有限公司西安710075【正文语种】中文【中图分类】TQ351.0穿心莲为爵床科植物穿心莲Andjrographis panicalata (Burmf) Ness的草或叶。
穿心莲中含有多种二萜类化合物,主要包括穿心莲内酯(穿心莲乙素)、脱水穿心莲内酯(穿心莲丁素)、脱氧穿心莲内酯(穿心莲甲素)、新穿心莲内酯(穿心莲丙素)、高穿心莲内酯等多种苦味素成分,其中,抗菌消炎的主要成分为穿心莲内酯和新穿心莲内酯,穿心莲全草可入药,具有清热解毒、消炎凉血止肿的功效[1],被广泛应用于肠胃炎、肺炎、中耳炎、支气管炎、痢疾、咽喉炎、外伤感染、水火烫伤、蛇毒咬伤、尿路感染、风热感冒、扁桃体炎、阴囊湿症、痛疖疱疡等的治疗[2],被誉为“天然广谱抗生素药物”,临床应用广泛。
穿心莲活性成分提取工艺及其在动物养殖中的应用研究
徐兰程;包雨明;韦信求;牙英红;谭海敏;周芳芳;卢成淑;辛桂瑜
【期刊名称】《饲料研究》
【年(卷),期】2024(47)5
【摘要】穿心莲是一种常见中草药,常用于治疗感冒发热、喉咙肿痛、口舌生疮等。
穿心莲具有多种化学成分,包括酯类、黄酮类和生物碱等,具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、抗病毒等多种生物活性。
穿心莲作为饲料添加剂能够提高动物免疫力,促进生长发育,改善畜产品品质,预防和治疗动物疾病。
文章介绍了穿心莲的主要活性成分提取
方法、生物活性功能及其在动物生产中的应用研究进展,以期为穿心莲在动物生产
中的应用研究提供参考。
【总页数】6页(P155-160)
【作者】徐兰程;包雨明;韦信求;牙英红;谭海敏;周芳芳;卢成淑;辛桂瑜
【作者单位】玉林师范学院生物与制药学院;广西高校亚热带生物资源保护与利用
重点实验室
【正文语种】中文
【中图分类】S816.7
【相关文献】
1.穿心莲与了哥王主要活性成分的合并提取工艺研究
2.辣木活性成分、提取工艺及应用研究进展
3.穿心莲有效成分的提取工艺研究
4.杜仲叶的化学成分提取工艺及
其在动物养殖中的应用5.穿心莲化学成分与提取工艺研究进展
因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
穿心莲内酯提取工艺穿心莲内酯是一种具有广泛药用价值的天然产物,其提取工艺对于保证产品质量和提高产率至关重要。
本文将详细介绍穿心莲内酯的提取工艺,旨在为相关领域的研究者和生产工作者提供参考和指导。
一、穿心莲内酯概述穿心莲内酯是一种重要的生物碱类化合物,广泛存在于穿心莲科植物中,具有抗癌、抗炎、抗菌等多种药理作用。
因其独特的化学结构和药理活性,穿心莲内酯成为了医药领域的研究热点之一。
穿心莲内酯的提取工艺主要基于其在穿心莲植物中的存在形式。
穿心莲内酯主要以游离形式存在于穿心莲植物的根、茎和叶中。
提取工艺的基本原理是利用适当的溶剂将穿心莲植物中的穿心莲内酯溶解出来,通过蒸发和浓缩等步骤得到纯净的穿心莲内酯。
三、穿心莲内酯的提取工艺步骤(一)原料的选择和准备选择新鲜、健康的穿心莲植物作为提取原料,并进行清洗和研磨处理,以提高提取效果。
(二)溶剂的选择常用的提取溶剂包括乙醇、丙酮、甲醇等。
根据溶剂的溶解度、安全性和成本等因素选择适合的溶剂。
(三)提取过程将处理后的穿心莲植物与溶剂进行浸提,可以采用不同的提取方法,如浸泡法、回流法、超声波辅助提取法等。
提取时间和温度需要根据实际情况进行调整,使穿心莲内酯尽可能地溶解到溶剂中。
(四)过滤和浓缩将提取液进行过滤,去除杂质和固体颗粒。
然后通过蒸发、浓缩等手段,使溶剂逐渐蒸发,浓缩提取液,得到含有穿心莲内酯的浓缩物。
(五)纯化和结晶通过进一步的纯化步骤,如萃取、结晶等,可以得到纯度更高的穿心莲内酯。
四、穿心莲内酯提取工艺的优化为了提高穿心莲内酯的提取效果和产量,可以通过以下几个方面进行优化:(一)原料的预处理:选择适宜的原料,进行适当的预处理,如研磨、干燥等,以提高穿心莲内酯的释放率。
(二)溶剂的优化:选择合适的溶剂组合和浓度,以提高溶解度和提取效果。
(三)提取条件的优化:通过调整提取时间、温度和pH值等参数,优化提取条件,提高穿心莲内酯的提取率。
(四)工艺的集成和改进:将不同的提取工艺步骤进行集成,减少工艺流程,提高工艺效率和产量。
毕业设计(论文)2012 届题目穿心莲内酯的提取工艺研究专业制药工程学生姓名方梅芬学号08092312指导教师尹莉论文字数10319字完成日期2012年5月湖州师范学院教务处印制穿心莲内酯的提取工艺研究08092312方梅芬(湖州师范学院生命科学学院,湖州313000)摘要:在单因素试验的基础上,采用正交试验法优选穿心莲内酯超声波提取法最佳提取条件。
以穿心莲茎干粉末为原料,改变超声振荡功率、时间、料液比、不同溶剂、反应温度等单因素变量,提取液经配制后测量吸光度值,选定三水平后进行正交试验。
以穿心莲内酯对照品制备标准液,计算回归方程为:Y=13.7828x-0.0074,R2=0.9692。
结果表明,超声波提取的最佳工艺条件为:在60℃下,以乙酸乙酯为溶剂,料液比为1:30,功率为140w,超声提取60min,测得穿心莲提取液的吸光度为0.951。
关键词:穿心莲内酯; 超声波; 提取Extraction Process of Andrographolide08092312FANG Meifen(School of Life Science,Huzhou Teachers College,Huzhou 313000 )Abstract: On the basis of one-factor experiment, orthogonal experiment method was employed for the optimization of ultrasonic extraction of Andrographis paniculta lactone. To stem powder andrographis as raw materials, change the single factor variables of ultrasonic oscillator power, the oscillator time, the solid-liquid ratio, the different solvent and the reaction temperature, extrat after configuration measuring absorbance, and then selected three levels before orthogonal experiment. With andrographis paniculta lactone reference substance preparation standard fluid, calculate a regression equation for: Y = 13.78281 x -0.0074 R2 = 0.9692. The optimum conditions of ultrasonic extraction of Andrographis paniculta lactone as follows: in 60 ℃, use ethyl acetate, the solid-liquid ratio is 1: 30, ultrasonic oscillator power is 140 w, and ultrasonic extraction 60 min. measuring absorbance Andrographis paniculta extrat is 0.951.Key words: andrographis paniculta lactone; Ultrasonic; Extracted; absorbance目录1 引言 (1)1.1穿心莲简介 (1)1.1.1穿心莲1.1.2穿心莲内酯的药理活性1.2超声提取概述 (1)2 实验材料与仪器 (2)2.1实验材料 (2)2.2实验试剂 (2)2.3实验器材与仪器 (3)2.4试剂的配制 (3)3 实验方法 (4)3.1实验原理 (4)3.1.1单因素试验设计3.1.2正交试验设计3.1.3紫外-可见吸收光谱3.1.4活性炭脱色3.2实验步骤 (5)3.2.1含量测定方法3.2.2 标准曲线的绘制3.2.3单因素试验3.2.4正交试验3.2.5验证实验3.2.6穿心莲内酯的鉴别4 结果与讨论 (8)4.1实验结果 (8)4.1.1标准曲线绘制4.1.2以超声振荡时间为单因素变量的实验结果4.1.3以超声功率为单因素变量的实验结果4.1.4以料液比为单因素变量的实验结果4.1.5以不同溶剂为单因素变量的实验结果4.1.6以反应温度为单因素变量的实验结果4.1.7正交试验结果4.1.8验证实验结果4.2实验结果讨论 (13)4.2.1单因素试验结果讨论4.2.2正交试验结果讨论5 总结与展望 (14)5.1总结 (14)5.2展望 (14)参考文献 (15)致谢 (17)1. 引言1.1穿心莲简介1.1.1穿心莲穿心莲Andrograph is paniculata (B urm. f.) Nees为穿心莲属植物,别名一见喜、斩蛇草、苦草、四方草、印度草[1],主要产于广东、福建等地。
穿心莲内酯提取纯化工艺研究进展生命科学与技术学院刘曼丽(2010001320)摘要:穿心莲内酯是中药穿心莲的主要有效成分, 其提取方法除醇提法与水提取法外,超声、微波、酶解等方法的应用, 既提高了收率, 又降低了成本。
穿心莲内酯的纯化方法主要有打孔树脂吸附法、超临界二氧化碳梯度结晶法等。
关键词:穿心莲内醋;提取;纯化;研究进展The Extraetion and Purifieation of Andrographolide Abstract:Andrographolide is the main active ingredients of Andrographis, the extraction methods except ethanol extraction and water extraction, the application of ultrasonic, microwave, hydrolysis and other methods, both improving the yield and reducing costs. The purification methods of andrographolide are macroporous resin adsorption and supercritical carbon dioxide gradient crystallization method.Key words: Andrographolide; Extraction; Purification; Research穿心莲内酯(Andrographolide)为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata (Burm.f.)Ness的主要活性成分,现代药理研究表明其具有消炎、抗病毒、抗肿瘤、提高免疫力、保肝利胆、抗生育等药理作用。
穿心莲内酯为酯类结构,在水溶液中易水解、开环、异构化,故影响药物稳定性。
第 6 卷 第 6 期2020 年 12 月生物化工Biological Chemical EngineeringVol.6 No.6Dec. 2020穿心莲有效成分的提取工艺研究郭佳佳,曹智威,杜鸿章,冯亚莉*(郑州工业应用技术学院 药学与化学工程学院,河南新郑 451100)摘 要:目的:探究穿心莲的最佳提取方法。
方法:以脱水穿心莲内酯为检测指标,考察水提、水提醇沉、醇提、不同浓度的碳酸钠碱水提取、碱提酸沉法、超声提取等不同方法对脱水穿心莲内酯提取含量的影响。
结果:脱水穿心莲内酯提取含量以超声法所得最高为0.853%;碱提酸沉法中以0.01%碳酸钠碱水提取较高为0.213%。
结论:穿心莲的提取方法以超声法和0.01%碳酸钠碱水回流提取为最佳。
关键词:穿心莲;脱水穿心莲内酯;提取工艺;含量测定中图分类号:R284.2 文献标识码:AStudy on the Extraction of Effective Ingredients from Andrographis PaniculataGUO Jiajia, CAO Zhiwei, DU Hongzhang, FENG Yali*(School of Pharmacy and Chemical Engineering, Zhengzhou University of Industrial Technology, Henan Xinzheng451100)Abstract: Objective: to explore the best extraction method for Andrographis paniculata. Methods: Dehydrating andrographolide was used as the detection index to investigate the effects of different extraction methods such as water extraction, water extraction and alcohol precipitation, alcohol extraction, sodium carbonate alkaline water (alkali extraction and acid precipitation) and ultrasound on the content of dehydroandrographolide. Results: The content of dehydroandrographolide was the highest by ultrasonic method, which was 0.853%. The alkali extraction and acid precipitation method was the best extraction with 0.01% sodium carbonate alkali water, and the content was 0.213%. Conclusion: The extraction method of Andrographis paniculata was optimized by ultrasonic method and 0.01% sodium carbonate aqueous reflux.Keywords: andrographis paniculata; dehydroandrographolide; extraction process; content determination穿心莲一般指爵床科植物穿心莲[Andrographis paniculate(Birm. f.)Ness]的干燥地上部分[1],药用叶或全草,秋初茎叶茂盛时采割,晒干。
穿心莲内酯的提取分离和鉴定一、目的要求学习中药中内酯类成分的提取分离及检识,通过实验要求:1.掌握从穿心莲中提取、分离穿心莲内酯的操作方法。
2.熟悉穿心莲内酯类成分的性质和检识方法。
3.了解去除叶绿素的方法。
二、实验原理穿心莲中的内酯类化合物易溶于甲醇、乙醇、丙酮等溶剂,故利用性质选用乙醇提取之;穿心莲中含有大量叶绿素,可用活性炭脱色除去叶绿素类杂质;利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯在乙酸乙酯中溶解度不同,初步讲两者分离;利用穿心莲内酯与脱氧穿心莲内酯结构上的差异,用氧化铝柱分离二者。
三、实验仪器与试剂仪器:圆底烧瓶、旋转蒸发仪、冷凝管、烧杯、天平、胶头滴管、试管、量筒、薄层板等试剂:穿心莲粗品、穿心莲对照品、乙醇、乙酸乙酯、活性炭、碳酸钠、水等四、实验过程(一)提取分离流程图穿心莲粗粉20克0.01%、8倍量的碳酸钠煎煮2次,每次2 h合并提取液提取液用25%HCl调节PH至6-710%活性炭脱色,蒸发(1/4-1/5)中性氧化铝柱色谱乙醇洗脱95%乙醇溶解精制穿心莲内酯五、注意事项1、穿心莲内酯类化合物为二萜类内酯,性质极不稳定,易氧化、聚合而树脂化。
因此所提取的穿心莲应是当年产的新药材,并且要未受潮变质的茎叶部分,否则内酯含量明显下降至极低,难以提取得到。
2、水提取一般可将多糖等多种水溶性杂质提取出来,水提取出膏率较高,但穿心莲内酯水溶性较低,不适合穿心莲的提取。
3、穿心莲内酯的析晶宜在含乙醇量稍高的情况下进行,此时晶形与结晶的纯度都较好。
当溶液的含水量较高,或粘稠度太大时,往往不易析出结晶。
4、加入的活性炭不能过多,否则会吸附穿心莲内酯,使产率降低。
六、思考题1、为什么要对提取工艺进行实验研究?答:通过对药材穿心莲提取溶媒、回流提取时间、提取次数及产品收率等方面的实验考察改进了穿心莲内酯的提取工艺,保证了该产品质量.。
穿心莲提取工艺研究
【摘要】目的对穿心莲的水提和醇提工艺进行对比研究,对穿心莲的叶、茎两个有效部位进行提取研究,尝试摸索出使用合格药材就能达到提取效果的提取工艺,并对药材的含量限度
进行研究。
结果加水16倍,短时间加热回流水提含量损失最少,随温度升高,减少率呈现
增加的趋势。
结论穿心莲药材45%乙醇提取工艺下,对药材限度要求低,提取率较高,可以
尝试应用到生产中。
【关键词】穿心莲;水提;醇提;提取工艺
【中图分类号】R284.2【文献标识码】A【文章编号】2096-0867(2016)-07-434-03
本品为爵床科植物穿心莲Andrographis paniculata(Burm.f.)Nees的干燥地上部分。
秋初茎
叶茂盛时采割,晒干。
本实验采用水加热回流提取法[3]对穿心莲的不同药用部位进行提取[4],并对其提取工艺进行优化[1]。
1.仪器与试药
SatiousCPA224电子天平(赛多利斯);回流提取装置五套,电加热套(上海精密科学仪器
有限公司)。
穿心莲产自安徽,亳州市永刚饮片厂有限公司,批号为20160102,经鉴定为爵
床科植物穿心莲的干燥地上部分。
2.水提方法与结果
2.1穿心莲水提取液热稳定性研究
用大锅煎煮穿心莲药材适量,煎煮两次,每次10分钟,合并煎液,冷却后留用做热稳定性
试验。
取1000ml穿心莲提取液置于1000ml三角瓶中,用橡胶塞打孔插入温度计封口,放入
水浴中,分别在60℃、65℃、70℃、80℃、90℃进行穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量变化
的检测,见图表1。
根据图表1中数据比较可知,穿心莲内酯含量、脱水穿心莲内酯含量和其总量随着温度的升高,其减少率也在逐渐增加,由于90℃只进行了2小时的测量,所以减少率要低于部分进行
了5个小时监测的温度条件。
(预测在受热初期,穿心莲内酯存在分解和转化两个过程,一
部分分解掉,另一部分转化为脱水穿心莲内酯,故在受热初期,脱水穿心莲内酯的含量减少
不明显,而后面随着穿心莲内酯的含量减少量,脱水穿心莲的转化量下降,显示的减少量就
增加了。
)
由于高温下穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量减少率随着温度增高而变大,那么在浓缩过
程中只需要根据最高温度,通过计算最大减少量来计算最低药材含量限度。
2.2水浸泡提取研究
根据热稳定性试验结果发现,在受热时穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含量减少损失较大,故
尝试采用浸泡的方法替代加热回流的方法,使在损失较小的情况下尽可能的提取出有效成分。
取各部位药材适量,按照药材质量倍数进行加水,加水后保证水能完全没过药材,开始进行
浸泡提取。
提取的温度为常温下,40℃和80℃的水浴锅中,间隔取样时间和记录情况如下表2。
根据图表2的三组数据可知,常温和40℃时浸泡提取4H后含量不再增加,而80℃含量在浸泡提取3H时最大,4H时反而开始下降。
记录提取的最大量。
40℃下茎提取的试验,是早期试验,药材与常温与80℃的药材不同,含叶量的不同致使结
果无可比性,但是脱水穿心莲内酯提取量仍然较低,试验结果发现,在80℃下,虽然会有受
热损失,但是提取量仍然大于没有受热损失的常温浸泡提取。
但是浸泡提取的脱水穿心莲含
量较低,即使全用叶子提取也不能达到限度要求。
2.3水提提取时间研究
根据浸泡提取试验可以发现,温度仍然对穿心莲提取的效率影响较大,高温可以破坏药材内
部结构,提取更多的有效成分,但是高温也能破坏有效成分,故尝试寻找加热过程中的含量
峰值,来确定加热时间。
实验结果见图表3。
根据趋势发现,当加热回流提取穿心莲,时间大于0.5H时,穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯
的含量随着提取时间增长而减少,所以提取量的最大值应出现在0.5H以内。
根据图表4、图表5、图表6所示,穿心莲的叶提取量要大于茎的提取量,叶的提取量变化
更为显著,茎的提取量在前30min的变化不显著,叶的提取量在100℃后10min达到最大值,故穿心莲提取应采用短时加热回流来保存提取出来的有效成分。
2.4水提加水量研究
早时间研究实验发现,穿心莲水提加热回流提取的最佳时间是在到达100℃后提取10min,
按照这个提取时间,进行两次提取,最终确定总加水量。
根据之前的提取经验,加水20倍之后提取总量不再增加,所以进行了8倍到20倍水的单次
提取试验,根据试验结果所示,提取添加20倍水时,提取量最大,故第一次提取为了尽可
能多的提取出穿心莲中有效成分,防止已提取出的成分受到损失,采用20倍的一半进行加水,即10倍水提取。
根据图表7可知,在加水量为10+6倍水时,提取量已经达到最大,再次进行试验,结果有
重复性,故确定+加水倍数为10+6倍。
3.醇提方法和结果
3.1 由于穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯在水中溶解度有限,水的提取能力也有限,造成提取
效率较低,所以在穿心莲的提取方法选择上,大部分采用的是醇提[5],所以我们对穿心莲的
醇提工艺进行了研究。
在醇提时由于醇溶液的沸点低,首先降低了穿心莲的有效成分损失,
其次是醇的提取能力强于水[6],我们选取了30%、45%、85%的乙醇浓度进行试验[7],由于30%乙醇的沸点是最高的,醇含量最低,所以我们用30%的乙醇进行提取时间试验,可以保
证在相同提取时间内,45%和85%的乙醇提取过程中有效成分损失少于35%乙醇提取。
根据图表8所示,30%乙醇在提取过程中的含量在10分钟时达到顶峰,并在20分钟内无显
著变化,30分钟时开始降低,所以提取时间定在10分钟。
根据图表9所示,醇提回流提取试验中提取量最大的是85%乙醇,但是根据提取试验和实际
情况所知,在醇浓度较高的情况下,大量色素会被提取出来,而糖类成分却难以提取,提取
液呈绿色且较清澈,含固量较低,清膏量较低,故应选用45%的乙醇进行提取,其提取量与85%乙醇相差10%,但提取液中色素较少,糖类成分较多。
提取过程中二次提取相较于一次提取增长量不大,且增加了提取液体积,延长了浓缩时间,
但是根据计算,减掉增加的损失量,二次提取的增加量仍有约10%,所以确定进行二次提取。
讨论
综上,我们对水浸泡、水提取和醇提取进行了详细的提取试验,并记录其提取量。
根据测量
出的药材含量,我们对各种方法的提取率进行了分析,并计算出了所需要的药材限度。
根据图表10的数据分析,当提取药材在80Kg时(约为2批药材),提取液量约为药材量
13倍,即1040L提取液,提取车间双效浓缩器的浓缩效率约为1000L/H,故暂定浓缩时间约
为1H,在浓缩最高温度90℃下,穿心莲内酯与脱水穿心莲内酯受热不稳定,穿心莲内酯损
失量为12.87%/H,脱水穿心莲内酯损失量为8.64%/H,计算损失后提取量,应大于标准限度
的120%(标准限度为穿心莲内酯0.10%药材;脱水穿心莲内酯0.08%药材),根据该条件得
到药材的限度如下图表11:根据文献研究显示,在不同产地、不同生长阶段的穿心莲药材穿
心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量有较大差异,如果生产上使用水提工艺进行提取,需要对
药材的脱水穿心莲内酯含量进行严格控制。
但是实际在生产中,制剂工艺过程中的干燥状态下的穿心莲内酯转化为脱水穿心莲内酯的比
例尚不知晓,可以进一步进行研究确认。
参考文献:
[1]赵玉江,李勇,吴修红,等.不同提取方法对穿心莲内醋含量的影响[J].黑龙江医药,2006,19(3):181-182
[2]曾令杰,梁晖,谢晓萍.穿心莲药材干燥前后穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯的含量变化研
究[J].中成药,2009,31(9):1399-1400
[3]杨凤琼,柯晓虹.穿心莲有效成分提取的影响因素研究[J].中医药导报,2010,16(3):103-104
[4]邓乔华,梁惠瑜,徐友阳,等.广东等五省穿心莲药材中穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯含
量比较[J].现代中药研究与实践,2014,28(1):9-11
[5]曾惠芳,黄晓丹,苏子仁,等.试析穿心莲片中穿心莲内酯及脱水穿心莲内酯的变异因素[J].中药新药与临床药理,2006,17(1):299-302
[6]卓菊,汪小根.正交设计研究穿心莲中脱水穿心莲内酯提取工艺[J].中南药学,2005,3(3):155-157
[7]王奇志,黄辉球,黄志刚,等.正交试验优选穿心莲的提取工艺研究[J].中草药,2009,40:167-169
作者简介:朱金会(1984—),女,主要从事药品生产及检验工作;
李雨辰(1989—),男,主要从事药品研发及注册工作;
第一作者:朱金会,单位:青岛华仁太医药业有限公司;
第二作者:李雨辰,单位:青岛华仁太医药业有限公司。