质粒与载体
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基因工程的载体载体的特征:在寄主细胞中能够自主复制;有一种或多种限制酶的单一切割位点,并在此位点插入外源基因片段;在基因组中有遗传标记,为寄主细胞提供易于检测的表型特征;载体分子较小,以便体外基因操作;对于表达型载体还应具有与宿主细胞相适应的启动子、增强子、加尾信号等基因表达元件;载体的类型⏹质粒⏹噬菌体⏹其他载体(如:酵母人工染色体、细菌人工染色体、植物Ti质粒、动物病毒)质粒(plasmid): 多数情况下,质粒是存在于细菌染色体外的小的双链闭合环状DNA分子,能自主复制,并在细胞分裂时遗传给子代细胞⏹并不是所有的质粒都是环状分子, 在多种细菌中都发现有线性质粒⏹质粒广泛存在于原核生物中, 其大小从相对分子量小于1X106 到大于200X106质粒的形态1) cccDNA—双链闭合环状DNA2) ocDNA—开环DNA3) cDNA—线形DNA(L型)在DNA促旋酶(gyrase)作用下成负超螺旋构型, 在拓扑异构酶I的作用下解旋。
溴化乙锭(ethidium bromide,EtBr)也有解旋作用溴化乙锭插入DNA超螺旋的作用随着插入的溴化乙锭数目增加,双螺旋解旋,导致超螺旋减少直至产生环状分子的开放形式. 进一步的插入在双螺旋中引入了过多的螺旋,导致反义的超螺旋(注意B和D处的螺旋方向). 为了清楚起见,只表示了双螺旋的一条单链质粒DNA的复制类型⏹严紧型质粒这些质粒的复制是在寄主细胞严格控制之下的,与寄主细胞的复制偶联同步。
所以,往往在一个细胞中只有一份或几份拷贝⏹松弛型质粒这些质粒的复制是在寄主细胞的松弛控制之下的,每个细胞中含有10-200份拷贝,如果用一定的药物处理抑制寄主蛋白质的合成才会使质粒拷贝数增至几千份。
如较早的质粒pBR322即属于严紧型质粒,要经过氯霉素处理才能达到更高拷贝数穿梭载体(shuttle vector) 可以在两种生物体内复制的载体分子质粒的命名规则⏹小写字母p表示质粒(plasmid)⏹p后面的两个大写字母表示发现或者构建该质粒的作者或者实验室名称⏹数字表示编号⏹例:pBR322、pET21、pGEM-T质粒的宿主范围⏹质粒只编码少数几个其自身复制所需要的蛋白质,甚至在许多情况下只编码其中一个蛋白质⏹所有其他复制所需的蛋白,包括DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶等都是由宿主细胞提供的⏹质粒所编码的复制蛋白质定位在ori 附近,因此只有ori 周围的一小部分区域是复制所必需的⏹因此,把质粒的其他部分删除掉,把外源序列加到质粒上,复制仍然可以继续进行⏹质粒的宿主范围是由它的ori 决定的质粒的不相容性⏹在没有选择压力的情况下,两种质粒不能共存于同一个宿主细胞内⏹如果质粒拥有相同的复制调控机制,它们就不相容显性质粒和隐蔽质粒⏹显性质粒(表达型质粒)----除了携带与本身复制和转移有关的基因外, 还携带一些其他的基因, 宿主细胞由于含有这样的质粒而呈现出新的性状, 这样的质粒称为显性质粒⏹隐蔽质粒----无异常性状表现出来克隆载体例:pBR322、pUC18、pUC19、pGEM-T表达载体例:pET-21、pGEX⏹质粒DNA的制备碱裂解法、煮沸法、层析柱过滤法碱裂解法原理:在高pH的碱性条件下,染色体DNA和蛋白质变性,质粒DNA由于其超螺旋共价闭合环状结构,尽管其DNA的大部分氢键也断裂,但是双链DNA仍然不会分离,当恢复到中性时,染色体DNA复性,并聚集形成不可溶的网架。
质粒的分⼦⽣物学与质粒载体第三章质粒的分⼦⽣物学与质粒载体⼀、填空题1.基因⼯程中有3种主要类型的载体:——-------、------------⼀、-----------.2.由于不同构型的DNA插⼊EB的量不同,它们在琼脂糖凝胶电泳中的迁移率也不同,SC DNA的泳动速度—----------—,OC DNA泳动速度—---------—,L DNA居中,通过凝胶电泳和EB染⾊的⽅法可将不同构型的DNA分别开来。
3.质粒的复制像染⾊体的复制⼀样,是从特定的起始点区开始的。
然⽽,质粒的复制可以是—---—向的、或是—----—向的。
在杂种质粒中,每个复制⼦的起点都可以有效地加以使⽤。
但是在正常条件下只有⼀个起点可能居⽀配地位。
并认为:当某些具有低拷贝数的严紧型质粒与松弛性质粒融合后,在正常情况下—------—的复制起点可能被苯闭。
4.就克隆⼀个基因(DNA⽚段)来说,最简单的质粒载体也必需包括三个部分:—-----—、—---------—、—----------------—。
另外,⼀个理想的质粒载体必须具有低分⼦量。
5.如果两个质粒不能稳定地共存于同⼀个寄主细胞中,则属于—---------—群,这是因为它们的——————————所致。
6.质粒拷贝数是指细胞中—------------------------—。
7.复制⼦由三部分组成:(1)—-----------------—---(2)——-----------————(3)—--------------—。
8.酵母的2µm质粒有------------,可以配对形成哑铃结构。
9.⼀个带有质粒的细菌在有EB的培养液中培养⼀段时间后,⼀部分细胞中已测不出质粒,这种现象叫----------------。
10.pBR322是⼀种改造型的质粒,它的复制⼦来源于----——,它的四环素抗性基因来⾃于—-----------—,它的氨苄青霉素抗性基因来⾃于—---------—。
基因工程载体的分类及其特性田文晓 1343001125按照来源和性质分类1、质粒载体①复制:通常情况下一个质粒含有一个与相应的顺式作用控制要素结合在一起的复制起始区。
在不同的质粒中,复制起始区的组成方式不同,有的可决定复制的方式,例如滚环复制和θ复制;在大肠杆菌中使用的大多数载体都带有一个来源于 pMB1 质粒或 ColE1 质粒的复制起始位点。
②拷贝数:质粒拷贝数分为严谨型与松驰型。
严谨型质粒每个细胞中拷贝数大约为1 ~几个;松驰型质粒拷贝数较多,可达几百。
③不相容性:两个质粒在同一宿主中不能共存的现象称质粒的不相容性,它是指在第二个质粒导入后,在不涉及DNA 限制系统时出现的现象。
不相容的质粒一般都利用同一复制系统,从而导致不能共存于同一宿主中。
两个不相容性质粒在同一个细胞中复制时,在分配到子细胞的过程中会竞争,随机挑选,微小的差异最终被放大,从而导致在子细胞中只含有其中一种质粒。
④转移性:指在自然条件下,很多质粒可以通过称为细菌接合的作用转移到新宿主内。
它需要移动基因 mob ,转移基因 tra ,顺式因子 bom 及其内部的转移缺口位点 nic。
2、噬菌体载体(包括λ噬菌体、M13噬菌体载体)1)λ噬菌体载体:大的外援插入片段在质粒中不稳定,转导是比转化效率更高的过程,避免出现无插入片段的空载体。
2)M13噬菌体载体:可以对任意克隆基因进行DNA进行诱变,测序方便,可以制备单链测序模板;含有噬菌体DNA的噬菌体颗粒从转化细胞中分泌出来后,可以在生长平板上收集。
①超感染免疫性:溶原性细菌在被噬菌体感染并溶原化后,不会被同种噬菌体再次感染。
②经过若干世代后,溶原性细菌会开始进入溶菌周期,即溶原性细菌的诱发。
此时,原噬菌体从宿主基因组上切离下来进行增殖。
3、粘粒载体(柯斯质粒)①具有λ噬菌体的特性。
柯斯质粒载体在克隆了合适长度的外源DNA,并在体外被包装成噬菌体颗粒之后,可以高效地转导对λ噬菌体敏感的大肠杆菌寄主细胞。
质粒和载体的关系
质粒是指在细胞质内具有自主复制能力的一类DNA分子,通常被用作基因克隆和基因表达等生物学实验中的载体。
载体是指能够携带外源DNA并进行转移、复制和表达的一类生物分子,其中质粒是最常用的一种载体。
质粒和载体的关系可以通过以下几点来说明:
1. 质粒是载体的一种形式。
质粒作为一种能够独立复制的DNA 分子,可以携带外源DNA序列,并被用作基因工程和遗传学实验中的载体。
在细胞内,质粒可以复制自身,同时也可以复制携带的外源DNA序列,从而实现基因表达等功能。
2. 载体可以是多种类型的分子。
除了质粒以外,还有病毒、贝壳蛋白、脂质体等分子可以作为载体。
不同类型的载体具有不同的特点和应用范围,但质粒作为一种常用的载体,因其构建简单、易于操作等特点,被广泛应用于生物学实验。
3. 质粒和载体的选择取决于实验需求。
在进行基因克隆和基因表达等实验中,研究人员需要根据实验所需的外源DNA序列大小、表达强度、转染效率等因素,选择适用的质粒载体。
同时,还需要考虑质粒在目标细胞中的稳定性、毒性等因素,以确保实验结果的准确性和可重复性。
综上所述,质粒是载体的一种形式,作为常用的载体之一,广泛应用于生物学实验中。
质粒和载体的选择应根据实验需求进行,以确保实验结果的准确性和可重复性。
质粒载体介绍(质粒基本特性和种类及标记基因)2010-01-25 13:25:29 来源:易生物实验浏览次数:6084 网友评论 0 条一、质粒的基本特性二、标记基因三、质粒载体的种类关键词:质粒载体质粒载体标记基因一、质粒的基本特性1.质粒的复制通常一个质粒含有一个与相应的顺式作用控制要素结合在一起的复制起始区(整个遗传单位定义为复制子)。
在不同的质粒中,复制起始区的组成方式是不同的,有的可决定复制的方式,如滚环复制和θ复制。
在大肠杆菌中使用的大多数载体都带有一个来源于 pMB1 质粒或 ColE1 质粒的复制起始位点。
图3-1 是其复制其始示意图。
在复制时,首先合成前 RNAⅡ,即前引物,并与 DNA 形成杂交体;而后RNase H 切割前 RNAⅡ,使之成为成熟的 RNAⅡ,并形成三叶草二级结构,该引物引导质粒的复制。
形成的 RNAⅠ可控制 RNAⅡ形成二级结构,同时Rop 增强 RNAⅠ的作用,从而控制质粒的拷贝数。
削弱 RNAⅠ和 RNAⅡ之间相互作用的突变,将增加带有 pMB1 或(ColE1)复制子的拷贝数。
图 3-1 带 pMB1(或 ColE1)复制起点的质粒在复制起始阶段所产生的转录的方向及其粗略大小。
2.质粒的拷贝数质粒拷贝数分为严谨型与松驰型。
严谨型质粒每个细胞中拷贝数有限,大约1 ~几个;松驰型质粒拷贝数较多,可达几百。
表 5-1 就是不同类的质粒与复制子及拷贝数的大致关系。
表 3-1 :质粒载体及其拷贝数质粒 复制子 拷贝数pBR322 及其衍生质粒 pMB1 15~20pUC 系列质粒及其衍生质突变的 pMB1 500~700粒pACYC 及其衍生质粒 p15A 10~212pSC101 及其衍生质粒 pSC101 ~5ColE1 ColE1 15~20pUC 系列质粒的复制单位来自质粒 pMB1 ,但其拷贝数较高。
pMB1 质粒的复制并不需要质粒编码的功能蛋白,而是完全依靠宿主提供的半衰期较长的酶(DNA 聚合酶Ⅰ,DNA 聚合酶Ⅲ),依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶,以及宿主基因dnaB 、 dnaC 、 dnaD 和danZ 的产物。
质粒载体种类1. 背景介绍质粒是细菌或酵母等微生物细胞内存在的一种环状双链DNA分子,可以在细菌或酵母等微生物细胞中独立复制和传递。
质粒载体是一种用于携带、复制和传递外源DNA片段的DNA分子,常用于基因工程研究和生物技术应用中。
质粒载体种类繁多,每种质粒载体都有其特定的优点和应用范围。
2. 常见质粒载体种类2.1. pUC系列质粒载体pUC系列质粒载体是最早应用于基因工程的质粒载体之一,具有小分子量、高复制数和便于操作的特点。
pUC系列质粒载体通常包含选择标记基因,如抗生素抗性基因,用于筛选具有该质粒的细菌。
此外,pUC系列质粒载体还包含多个限制酶切位点,方便插入外源DNA片段。
2.2. pBR322质粒载体pBR322是一种广泛应用的质粒载体,具有多个限制酶切位点和选择标记基因。
pBR322质粒载体可用于大片段DNA的克隆和表达,适用于分子克隆和基因工程研究。
2.3. pGEM系列质粒载体pGEM系列质粒载体是一类常用于克隆和表达基因的质粒载体。
这些质粒载体包含选择标记基因和多个限制酶切位点,可用于插入外源DNA片段,并在宿主细胞中高效表达。
2.4. pET系列质粒载体pET系列质粒载体是一类专门用于大规模表达蛋白质的质粒载体。
这些质粒载体包含强启动子和选择标记基因,能够在宿主细胞中高效表达外源蛋白质,并具有易于纯化的特点。
2.5. Yeast系列质粒载体Yeast系列质粒载体是一类用于酵母表达系统的质粒载体。
这些质粒载体可以被酵母细胞高效复制和传递,用于酵母基因工程研究和蛋白质表达。
2.6. Gateway质粒载体Gateway质粒载体是一类基于Gateway技术的质粒载体。
Gateway技术是一种高效的DNA片段克隆技术,可以快速、准确地将外源DNA片段插入到Gateway质粒载体中。
Gateway质粒载体适用于高通量基因克隆和表达研究。
3. 质粒载体的应用质粒载体在基因工程和生物技术研究中具有广泛的应用。
载体主要有病毒和非病毒两大类,其中质粒DNA是一种新的非病毒转基因载体。
一、一个合格质粒的组成要素a复制起始位点Ori 即控制复制起始的位点。
原核生物DNA分子中只有一个复制起始点。
而真核生物DNA分子有多个复制起始位点。
b 抗生素抗性基因可以便于加以检测,如Amp+ ,Kan+c 多克隆位点MCS 克隆携带外源基因片段d P/E 启动子/增强子e Terms 终止信号f 加poly(A)信号可以起到稳定mRNA作用二、如何阅读质粒图谱第一步:首先看Ori的位置,了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒)第二步:再看筛选标记,如抗性,决定使用什么筛选标记。
(1)Ampr 水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。
(2)tetr 可以阻止四环素进入细胞。
(3)camr 生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性。
(4)neor(kanr)氨基糖苷磷酸转移酶使G418(长那霉素衍生物)失活(5)hygr 使潮霉素β失活。
第三步:看多克隆位点(MCS)。
它具有多个限制酶的单一切点。
便于外源基因的插入。
如果在这些位点外有外源基因的插入,会导致某种标志基因的失活,而便于筛选。
决定能不能放目的基因以及如何放置目的基因。
第四步:再看外源DNA插入片段大小。
质粒一般只能容纳小于10Kb的外源DNA片段。
一般来说,外源DNA片段越长,越难插入,越不稳定,转化效率越低。
第五步:是否含有表达系统元件,即启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号。
这是用来区别克隆载体与表达载体。
克隆载体中加入一些与表达调控有关的元件即成为表达载体。
选用那种载体,还是要以实验目的为准绳。
启动子-核糖体结合位点-克隆位点-转录终止信号a 启动子-促进DNA转录的DNA顺序,这个DNA区域常在基因或操纵子编码顺序的上游,是DNA分子上可以与RNApol特异性结合并使之开始转录的部位,但启动子本身不被转录。
b增强子/沉默子-为真核基因组(包括真核病毒基因组)中的一种具有增强邻近基因转录过程的调控顺序。
质 质粒 粒与 与载 载体体 中央研究院 植物研究所 杜 镇 研究员一、质粒绝大多数的生物都是以 DNA 的形式来储藏其遗传信息。
遗传物质要能生生不息地传给后代 的首要条件就是它至少要具有一个复制原(ori, origin of replication ,或译为复制起点),使整 个基因体得以复制。
含有复制原的遗传物质称为 replicon ,我们姑且把它译为为复制体吧!。
原核性复制体分为原核染色体、质粒(plasmids)和噬菌体基因体(phage genome)等三类。
其中 质粒的基因体和原核染色体类似,是由双绞炼 DNA 构成,并以超卷曲的形式存在。
它们的 基因体约由 2,000 至 150,000 个碱基对组成,绝大多数呈环状,但也有极少数是线状构造(如 Borrelia burgdorfferi)。
事实上你可以把它们视为比较小的原核染色体。
在自然环境中它们相 当普遍地生存在原核生物细胞内,并和其宿主的许多特殊功能有关,诸如:赤贺氏杆菌 (Shigella)的抗药、根瘤菌(Rhizobium)的固氮、农杆菌(Agrobacterium)的引瘤及假单胞杆菌 (Pseudomonas)对环状有机物的分解等等。
以下我们谈的以细菌性质粒为主,尤其是革兰氏阴 性菌的质粒。
二、质粒的类型当我们谈到质粒的类型时,就要看你从哪个角度来看它们,譬如说抗药性、结合生殖能力、 宿主范围及 DNA 复制方式等等。
这些分型标准之间并无横向关联。
你无法说能结合生殖的 质粒一定抗药或不抗药,也无法确定宿主范围和质粒套数的调控有何关联。
我们用到这些名 词时,只是对特定质粒的性状做一些描述而已。
质粒的真正系统分类标准并非靠些性状,而 是依据它们的不共容性(incompatibility)。
有的质粒带有显著特征可供我们侦测它们的存在,无已知特征的质粒称为隐性质粒(cryptic plasmids);有特征者称为显性质粒(acryptic plasmids);带有抗药基因的天然质粒称为 R质 粒(Rplasmids)。
有些质粒能在多种不同菌属细胞中生存,我们称它们为泛宿主性质粒 (broadhostrange plasmids);有一些质粒只能在少数相关宿主中生存,我们称它们为狭宿主 性质粒(narrowhostrange plasmids)。
具有结合生殖(conjugation)能力的质粒为结合质粒 (conjugative plasmids);没有这种能力的质粒便是非结合质粒(nonconjugative plasmids)。
其 它如侵袭性质粒(virulence plasmid)、 共生质粒(symbiotic plasmids)及巨型质粒(megaplasmids) 等等有关质粒性状叙述的名词不一而足。
三、质粒的复制环状质粒的复制形式主要分 theta (θ)及 rolling circle 两种。
基因体的复制都是由复制原开始。
原核性复制原约由 250 个碱基对组成,一般质粒的复制原常称为 oriV (origin of vegetative replication);有时 R质粒的复制原称为 oriR ;大肠杆菌的复制原称为 oriC 。
Theta 形式的质 粒复制与细菌基因体复制一样,以 RNA 聚合脢(RNA polymerase)在复制原制造 RNA 引子 (RNA primer),然后由 DNA 聚合脢(DNA polymerase)接手由此向两个方向分别复制 DNA , 直到整个基因体复制完成。
在复制过程中当然还有许多其它酵素的参与,这些酵素多由宿主 提供。
有的质粒自己携带一些与复制有关的基因,这些基因多被命名为 rep ,如 repA 、repB等等。
Rolling circle 形式的质粒复制与部分噬菌体基因体的复制相似。
环状双绞链中的一股 在复制原附近被酵素切开,然后环状股与线状股被分别复制完成。
至于线状质粒的复制则是 靠特殊的 RNA引子或该质粒所具有的 telomerelike sequence。
四、质粒的套数与套数调控(copy number control)在一个宿主细胞中某一特定质粒出现的个数称为套数(copy number)。
在大肠杆菌中,质粒的 套数由 F质粒(fertility plasmid)的一个到 pUCs 的数百个不等。
质粒套数的控制与该质粒复 制的调控机制有关,几乎每一种质粒都有它独特之处。
有关质粒套数的控制我们仅以两种代 表型机制来说明。
1. 反意 RNA(antisense RNA):ColE1 质粒的复制是由 RNA 聚合脢由其复制原(oriV)前方 555 个碱基对以前的启动子 (promoter)读出一段称为 RNA II的产物。
这个称为前引子(preprimer)的 RNA II 会利用碱基 配对而自我折迭成可被 RNAase H(一种特殊的 RNA 水解脢)裁剪的立体结构。
RNA II经适当 的裁剪后就形成正确的复制引子,复制于焉开始。
在 ColE1 质粒复制原前方 445个碱基对的它与 RNA II 后方另有一个反向的启动子。
RNA聚合脢由此处转录出一条称为 RNA I的产物,反向,刚好形成配对,这种 RNA称为反意 RNA(antisense RNA)。
当 RNA I和 RNA II形成 RNARNA 杂合体(RNARNA hybrid)时,RNA II 无法形成可被 RNAase H剪裁的结构,复 制引子无法产生, 复制也不会有效地开始。
当然, 实际上还有许多辅助蛋白和酵素会控制 RNA I 和 RNA II之间的亲合力和 RNA I的水解速度。
RNA I和 RNA II 的相对数量的增减决定了 ColE1 质粒的复制速度,也决定了该质粒的套数。
2. Iterons 与 repA:质粒 pSC101的复制除了需要宿主供应的酵素外尚需要 RepA蛋白。
RepA是 pSC101的基因 产物,在功能上他扮演了复制的活化因子(activator)与自我抑制因子(autorepressor)。
RepA 基因位于 pSC101 复制原的前方,其转录方向和 pSC101 复制方向正好相反。
在 RepA 基因 的启动子和 pSC101复制原中有好几个顺向和反向的重复 DNA 短段,长约 18~22 个碱基对, 称为 iteron(s)。
RepA会粘黏在 iteron 上。
质粒在低浓度(低套数)时,产生低浓度的 RepA促 进了质粒的复制;质粒在高浓度(高套数)时,产生大量的 RepA 粘黏在复制原和 RepA 基因 的启动子上抑制质粒的复制。
于是,RepA和 iterons 的相互作用决定了 pSC101的套数。
五、质粒的不共容性(incompatibility)有时我们会想知道一个细菌细胞中会同时出现多少种质粒呢(种类非个数,个数是指套数)? 这个问题倒没有一个确切的答案。
由自然环境分离的细菌细胞中含有一至三种质粒是常见的, 有时多至七、八种也不令人意外。
质粒的种类虽多,但并非所有的质粒都能同时在同一个宿 主细胞中生存。
有一些质粒在同一个宿主细胞中会发生相互排斥的现象,我们称这种现象为 质粒的不共容性(incompatibility)。
质粒的不共容与他们的复制机制与套数调控有关。
当两种 复制与套数调控机制毫不相干的质粒在同一个细胞中生存时,它们各自复制再各自分配到不 同的子细胞中,不会发生干扰。
当两种复制机制与套数调控相关或甚至相同的质粒在同一个 细胞中生存时,复制与套数调控机制就会把它们看做同一种质粒而将他们的套数控制在一定 的数目内。
因为细胞分裂时质粒在子细胞中分配不均匀的缘故,经过几十次的细胞分裂后你 只可能在特定的子细胞中找到其中一种质粒。
根据这种不共容性,质粒被分为许多不共容群(incompatibility group,简称为 inc),譬如 RP4 属于 incP;RSF1010 属于 incQ 而 pSa属于 incW 等。
如果你在实验中发现有一种质粒竟然属于两个不同的不共容群或有不共容不完全 的现象。
别惊慌!那是有可能发生的。
在革兰氏阴性菌中,大肠杆菌与假单胞杆菌的质粒分 类是做的比较清楚的。
六、质粒的宿主范围(host range)质粒间的宿主范围有很大的差异。
能在多种不同菌属的细胞中生存的质粒称为泛宿主性质粒, 如 RP4 和 RSF1010;只能在单一或极为相近的宿主中生存的质粒称为狭宿主性质粒,如 F 质粒和 ColE1。
质粒的宿主范围与其复制所需要的条件和质粒本身所携带的基因有关。
如果 一个质粒携有与本身复制有关的基因,而这些基因的启动子又是最容易启动的,那它对宿主 的需求自然很少,它的宿主范围当然很广。
如RP4 在几乎所有的革兰氏阴性菌中都能生存。
相反的,一个对宿主需求很多的质粒,对宿主的依赖自然很强,它的宿主范围当然很窄。
如 F质粒只能在大肠杆菌中生存。
七、质粒的结合生殖(conjugation)有的质粒具有在细菌细胞间进行结合生殖的能力,这些质粒称为结合质粒(conjugative plasmids)或自动转移质粒(selftransmissible plasmids)。
质粒的结合生殖过程包含了细菌细胞 间的结合与质粒的 DNA 复制。
与质粒结合生殖有关的基因很多,其中包括主持其事的基因 和许多调控结合生殖的基因。
这些基因在不同的质粒系统中各有其名,但多数被命名为 tra(Transfer)或 mob(mobility),如 traA、tra、mobA、mobB 等等。
一个结合质粒至少要具 有下列三个基本条件:1.产生性线毛(sex pili)的能力、2.具有转移原 oriT(origin of transfer) 及 3.能辨认 oriT 的特殊 DNA内切脢(DNA endonuclease)。
结合质粒有产生线毛蛋白(pilin)的基因,线毛蛋白产生后组成性线毛。
虽然性线毛因来源质 粒不同而有 F线毛(来自 F质粒)、R线毛(来自 R质粒)等之分,但在功能上它们的作用都是 用来刺激细菌细胞使之结合。
含有结合质粒能产生性线毛的细菌细胞称为雄型(male type)或 正型(+ type);不含结合质粒无性线毛的细菌细胞称为雌型(female type)或负型( type)。
结合 生殖时正型称为授株(donor);负型称为受株(recipient)。