临床检验仪器学重点考试知识总结

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临床检验仪器学第一章概论1.临床检验仪器常用性能指标(可能考问答题)(1)灵敏度(2)误差(3)噪声(4)最小检测量(5)精确度(6)可靠性(7)重复性(8)分辨率(9)测量范围和示值范围(10) 线性范围(11)响应时间(12) 频率影响范围第二章离心机1.离心现象是指物体在离心力场中表现的沉降运动现象。

2.沉降系数:颗粒在单位离心力场作用下的沉降速度,其单位为秒。

3.离心机的基本结构低速离心机的结构较简单,由电动机,离心转盘(转头)、调速器、定时器、离心套管与底座等主要部件构成。

其最大转速在10000r/min以内,相对离心力在15000xg以内。

高速(冷冻)离心机最大转速为20000~25000r/min超速(冷冻)离心机最大转速可达50000~80000r/min4.差速离心法的特点优点:操作简单,离心后用倾倒法即可将上清液与沉淀分开,并可使用容量较大的角式转子;分离时间短、重复性高;样品处理量大。

缺点:分辨率有限、分离效果差,沉淀系数在同一个数量级内的各种粒子不容易分开,不能一次得到纯颗粒;壁效应严重,特别是当颗粒很大或浓度很高时,在离心管一侧会出现沉淀,颗粒被挤压,离心力过大、离心时间过长会使颗粒变形、聚集而失活。

第三章显微镜1.光学显微镜的工作原理:光学显微镜是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质细微结构信息的光学仪器。

光学显微镜由两组会聚透镜组成光学折射系统。

把焦距较短,靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚象的透镜组称为目镜。

被观察的物体位于物镜前方,被物镜作为第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作为第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚象,位于人眼的明视距离处。

2.一只物镜从外壳从上至下有三行标记“油—100/1.25~∞/0.17,表明该物镜为油浸式高倍,放大倍数为100,NA为1.25.第四章紫外—可见分光光度计1.光的吸收定律:即郎伯—比尔定律2.紫外—可见分光光度计的性能指标(1)波长准确度和波长重复性(2)光度准确度(3)光度线性范围(4)分辨率(5)光谱带宽(6)杂散光(7)基线稳定度(8)基线平直度3. 紫外—可见分光光度计的基本分析方法(1)定性分析(2)定量分析(3)纯度鉴定第五章临床血液常规检验仪器1.血细胞分析仪的细胞计数原理(1)电阻抗型血细胞分析仪的细胞计数原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为不良导体,其电阻值比稀释值大。

当血细胞通过检测器的微孔的孔径感受区时,其内外电极的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号。

脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比。

根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比,电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度就越大。

各种大小不同的细胞产生的脉冲信号分别被送入仪器的检测通道,经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。

最后得出白细胞、红细胞、血小板等相关参数。

(2)联合检测型血细胞分析仪的细胞计数原理:以流式技术为基础再联合使用流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色等多项技术进行细胞分析,并综合分析检测数据,从而得出较为准确的“五分类”结果。

其均使用了流式细胞计数,形成流体动力聚焦的流式通道,使单细胞流在鞘液的包裹下通过流式通道,将重叠限制到最低浓度。

2.国际血液学标准委员会(ICSH)推荐的氰化高铁(HiCN)法的最大吸收峰在540nm.3.血液凝固分析仪的凝固法是通过检测血浆在凝血激活剂作用下一系列物理量(光、电、超声、机械运动等)的变化,再由计算机分析所的数据并将之换算成最终结果的方法。

4.半自动血凝仪的基本结构:主要由样本和试剂预热槽、加样器、检测系统(光学、磁场)及微机组成。

有的半自动仪器还配备了发色检测通道,使该类仪器同时具备了检测抗凝及纤维蛋白溶解系统活性的功能。

第六章临床血液流变学检验仪器1.现代医学实验室常用的血小板分析仪的检测系统主要采用光学法和电阻抗法。

第七章临床尿液检验仪器1.尿液分析仪的检测原理:(可能考大题)把试剂带浸入尿液以后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化,试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小:反之,反射率越大。

因为颜色的深浅与光的反射率成反比关系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系,所以只有测得光的反射率及可以求得尿液中各种成分的浓度。

2.尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变化3.尿液分析仪的使用注意事项第八章临床自动生化分析仪器1.分立式自动生化分析仪分立式自动生化分析仪于20世纪60年代问世,是目前国内外应用最多的一类自动生化分析仪。

工作原理是按手工操作的方式编排程序,并以有序的机械操作代替手工操作,用加样探针将样品加入各自的反应杯中,试剂探针按一定时间自动定量加入试剂,经搅拌器充分混匀后,在一定条件下反应。

反应杯同时作为比色杯进行比色测定。

各环节用传送带连接,按顺序依次操作,故称为“顺序式”分析。

除常用的反应杯转盘式或轨道式分立式自动生化分析仪外,还有一种袋式分立式自动生化分析仪,其试剂装在均匀透明的塑料夹中形成特殊的测试管,一袋一检测。

测试袋被连续传送系统送到分析区,在混合器处经机械敲击,样品和试剂充分混合反应,在比色计处经特殊装置的作用,测试袋形成光径1cm的比色杯,监测后的废测试袋被排出。

该类仪器污染少、灵活、准确,分析项目科达60项。

但测试带是一次性的。

2.目前比较常用的是集空气浴与水浴优点于一身的恒温液循环间接加温干式浴。

3.基本参数反应温度:通常设有25℃30℃37℃等温度,为了使酶的反应温度与体内温度一致,一般选用37℃。

第九章临床电化学分析仪器2.血气分析仪玻璃电极与甘汞参比电极构成电池,其电动势的大小主要取决于内部溶液的PH值,而电极导线将内部电极引出的电位值传输到放大器。

此类电极的标本用量一般不超过100微升,PH测定范围为0~10,37℃时电极的98%响应时间不超过15秒3.血气分析仪 PO2电极 PO2电极是一种Clark电极,属于气敏氧电极,也是极谱电极。

其工作原理是基于点解氧的过程中产生的电极电流,其大小与PO2成正比。

这种电极采用铂丝,直径通常为20微米,与直径0.3毫米的铂丝引出线点焊后封闭在玻璃柱中,前段暴露作为阴极;Ag/AgCl电极围绕在玻璃柱的后端。

将此玻璃柱装在一有机玻璃套内,套的一端覆盖着O2半透膜,套内空隙充满PO2缓冲液,玻璃柱的前端磨砂,使铂阴极与O2半透膜之间保持一薄层缓冲液。

膜外为测量室。

O2半透膜用约20微米的聚丙烯膜或聚四氟乙烯膜,也有用聚乙烯,聚酯做电极膜。

电极与测量室保持恒定温度(36℃—38℃)第八章临床微生物检测仪器1.目前微生物鉴定的自动化系统大致分为2类:一类是自动血培养检测和分析系统,另一类是自动微生物鉴定及药敏分析系统。

第十一章临床免疫检验仪器1.微孔板固相酶免疫测定仪器目前,微孔板式ELISA使用的载体为96孔板,采用直接对微孔板测定吸光度(A)的比色计。

2.磁微粒固相酶免疫测定仪磁微粒可用磁铁吸引与液相分离,是免疫测定中较为理想的固相载体。

3.发光免疫方法是将发光反应与免疫反应相结合,产生的一种很有前途的免疫分析方法。

4.全自动电化学发光免疫分析仪原理:将待测标本与包被抗体的顺磁性微粒和发光剂标记的抗体加在反应杯中共同温育,形成磁性微珠包被抗体—抗原—发光剂标记抗体复合物。

复合物被吸入流动室,同时用TPA缓冲液冲洗。

当磁性微粒流经电极表面时,被安装在电极下的磁铁吸引住,而游离的发光标记抗体被冲洗走。

同时在电极加电压,启动电化学发光反应,使发光试剂标记物三氯联吡啶在电极表面进行电子转移,产生电化学发光,光的强度与待测抗原的浓度成正比。

第十二章临床即时检验仪器1.即时检验:指在患者身边,由非检验专业人员(临床人员或患者)利用便携式仪器快速分析患者标本并准确获取结果的分析技术,或者说测试不在主实验室而在一个可移动的系统内进行。

2.红外和远红外分光光度技术相关的POCT仪器该仪器包括由红外光发射管构成的红外光源。

第十三章 PCR核酸扩增仪1. PCR核酸扩增仪的工作关键是温度控制,也就是由变性温度—退火温度—延伸温度等程控循环升降温度的过程。

2. 实时荧光定量PCR核酸扩增仪荧光实时定量PCR是在PCR反应体系中加入特异性的荧光染料或探针,荧光信号的变化真实地反应了体系中模板的增加,可以实时检测整个PCR反应过程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析。

3. PCR扩增仪的性能指标(一)温度控制(1)温度的准确性(2)温度的均一性(3)升降温的速度(4)不同模式下的相同温度特性(5)热盖温度(二)荧光检测(1)Ct值重复性错误(2)荧光检测范围(3)仪器的检测通道数量(三)样品基座容量和样品数4. PCR核酸扩增仪常见的故障的排除荧光强度减弱或不稳定:原因有滤光片发霉或有水气等,需工程师检修;或光源损耗,需更换光源;或需调节检测元件灵敏度,也需工程师调试。

第十四章全自动DNA测序仪和蛋白质自动测序仪1.目前DNA测序的工作原理主要利用Sanger双脱氧链末端终止法或Maxam—Gilbert化学降解法第十五章流式细胞仪1.流式细胞仪(FCM)是以激光为光源,集流体力学,电子物理技术,光电测量技术,计算机技术,细胞荧光化学技术和单克隆抗体技术为一体新型高科技仪器。

应用FCM对于处在快速直线流动状态下的生物颗粒进行快速的、多参数的定量分析和分选技术成为流式细胞术,他是在单细胞水平上,对于这些生物颗粒进行多参数、快速的定量分析和分选技术,现以成为现代医学技术最先进的分析技术之一。

生物学颗粒包括大的免疫学复合物、DNA、RNA、蛋白质、病毒颗粒,脂质体,细胞器、细菌、真菌、染色体、真核细胞、杂交细胞、聚集细胞等,所检测的生物颗粒理化性质包括细胞大小、细胞形态,包浆颗粒化程度、DNA含量、总蛋白质含量、细胞膜完整性和酶的活性等。

由于融合了单克隆抗体技术、定量细胞化学和定量荧光细胞化学。

FCM作为一项生物检测技术已经日臻完善。

2.流式细胞分析仪的分析原理:将特异荧光染料染色的单细胞悬液放入样品管,在气体压力作用下,悬浮在样品管中的单细胞经管道进入FCM流动室,沿流动室的轴心向下流动形成样品流。

3.作为FCM光学系统中的主要光学元件的滤光片,主要分为长通滤光片、短通滤光片和带通滤光片三类。

4.前向角散射:前向角散射与被测细胞的大小有关,确切的说与细胞直径的平方密切相关。

5.细胞分选器细胞分选器由水滴形成、充电和偏转三部分组成。