类风湿因子(RF)测试：原理,步骤,解释和临床意义

1、类风湿因子（RF）类风湿因子（RF）是由于细菌、病毒等感染因子，引起体内产生的以变性IgG（一种抗体）为抗原的一种自身抗体。

因为这种炕体首先发现于类风湿关节炎病人，并在类风湿关节炎病人血清中滴度较高，且持续时间较长，所以被命名为类风湿因子。

其实，凡是存在变性IgG，并能产生抗变性IgG自身抗体的人，在其血清或病变中均能测出类风湿因子，说明类风湿因子并不是类风湿关节炎的特异性自身抗体。

正常值阴性(＜20kU／L) 阴性 (乳胶凝集试验)临床意义阳性：类风湿性关节炎，Ｓｊｏｇｒｅｎ综合征，Ｗａｌｄｅｎｓｔｒθ－ｍ综合征，结节病，ＳＬＥ等。

偶尔见于传染性单核细胞增多症，急性感染性疾病和老年人（低滴度的ＲＦ）。

2、血沉[ESR]红细胞沉降率：是指红细胞在一定条件下沉降的速度而言，简称血沉。

在健康人血沉数值波动于一个较狭窄范围内。

在许多病理情况下血沉明显增快。

红细胞沉降是多种因素互相作用的结果。

参考值魏氏（Westergren）法：成年男性0-15mm/h 成年女性0-20mm/h。

潘氏法：成年男性0-10mm/h 成年女性0-12mm/h。

临床意义贫血或血液被稀释血沉增快，是红细胞下降逆阻力减低，并不是红细胞聚集增强而增快。

通过红细胞比积的血沉方程Ｋ值，可排除贫血或血液稀释对血沉的影响。

Ｋ值高反映红细胞聚集性增强。

若血沉快，Ｋ值大，血沉一定是快；血沉快，Ｋ值正常，是由于红细胞比积低而引起血沉增快。

3、抗链球菌溶血素“O”抗链球菌溶血素“O”，简称抗“O”或ASO。

正常参考值：成人< 500U，儿童< 250U。

正常值因年龄、季节、气候、链球菌流行情况，尤其地区而有所差别。

类风湿时部分病人ASO升高在400单位以上。

Fichy等将类风湿的ASO分为四种血清类型：（1）抗链球菌溶血素型：ASO升高、RF阴性时，见于风湿病，（2）凝集型：ASO正常、RF阳性时，表示预后不良；（3）混合型：ASO升高，RF阳性，见于类风湿；（4）正常型：ASO阴性、RF阴性，可排除类风湿。

一文科普“类风湿因子”临床意义定义类风湿因子(rheumatoid factor,RF)可分为IgM、IgA、IgG、IgD、IgE五型（注：在临床内科学中描述为四型，没有IgD型；但在实验室诊断学中描述为5型），是类风湿关节炎血清中针对IgG FC片段上抗原表位的一类自身抗体，其中IgM-RF是RF主要类型，也是临床上常规开展检测的RF。

类风湿因子阳性类风湿性关节炎（RA）患者较多伴有关节外表现，如皮下结节及血管炎等。

IgM型RF阳性率为60%-78%。

检测方法RF是在RA病人血清中发现，是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体，主要存在于RA患者的血清和关节液中，它是一种抗变性IgG的抗体，属IgM型。

可与IgGFc段结合。

RA病人和约50%的健康人体内都存在有产生RF的B细胞克隆，在变性IgG（或与抗原结合的IgG）或EB病毒直接作用下，可大量合成RF。

健康人产生RF的细胞克隆较少，且单核细胞分泌的可溶性因子可抑制RF的产生，故一般不易测出。

测定IgG、IgA、IgM类RF通常用ELISA间接法，即用热凝集兔IgG 包被反应板微孔，加入检样后，再分别加抗人IgG、IgA、IgM酶标记抗体，使反应后再与底物呈色。

目前许多实验室已开展应用比浊度法或ELISA法定量检测IgM-RF，前者的正常值范围约为>IgM-RF的常用检测方法是半定量的乳胶凝集试验，一般认为RF滴度<20 IU/ml。

类风湿因子临床意义（1）RF是诊断类风湿关节炎的分类标准之一，不是唯一标准，并非RA特有；作为血清阴性脊柱关节病区分标准；正常人2%阳性，老年人可达5%阳性，而且随年龄的增长RF阳性率可增高；RF与其他蛋白、半抗原有交叉反应；病后半年才产生，有关节外表现者如肺间质病变，RF滴度高。

持续高滴度RF提示RA疾病严重，预后差。

（2）RF与多种疾病相关，可概括为“CHRONIC”（见下）：CH (Chronic diseases) 慢性疾病，尤其是肝脏和肺的疾病如肝硬化、慢性活动性肝炎、弥漫性肺间质纤维化、结节病、巨球蛋白血症等；R (Rheumatoid arthritis) RA；O (Other rheumatic diseases) 其它风湿性疾病，如SLE，硬皮病（SSc），混合性结缔组织病（MCTD、干燥综合症（SS），多肌炎/皮肌炎（PM/DM）等；N (Neoplasms) 肿瘤；I (Infections) 感染，如AIDS，单核细胞增多症，寄生虫感染，慢性病毒感染，慢性细菌感染（结核、亚急性细菌性心内膜炎，其它）；C (Cryoglobulinemia) 冷球蛋白血症。

检验科生化类风湿因子测定的标准操作规程【目的】体外检测血清类风湿因子(RF)含量。

【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP，室负责人监督落实。

2.本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。

【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理类风湿因子试剂是大小均一的聚苯乙烯乳胶颗粒悬液，颗粒表面包被有抗人γ球蛋白，样本中类风湿因子与之结合后，发生凝聚反应，并产生浊度改变。

该浊度与样本中类风湿因子浓度成正比。

通过测定600nm处吸光度值的变化，即可测得样本中类风湿因子的浓度。

二、试剂1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司RF试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：试剂1（R1）叠氮化钠 0.1%磷酸盐缓冲液 13 mmol/L试剂2（R2）叠氮化钠 0.1%抗人γ球蛋白致敏胶乳颗粒抗原2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准。

2.2校准间隔2.2.1试剂批号变更时，使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准后再对临床病人样本进行测定。

2.2.2室内质量控制出现问题时使用与试剂配套使用的复星长征校准品对测定进行校准并确认问题得到解决后方可对临床病人样本进行测定。

风湿五项（抗“0”、RF、CRP、血沉、血尿酸）的检验学相关知识及临床应用价值博爱生殖医学医院郑丽萍一、抗“O”：本试验是证明病人有无溶血性链球菌感染的一种免疫学检查，常用于急性风湿病的诊断。

是溶血性链球菌感染的指标，如风湿热、急性肾小球肾炎、扁桃体炎等1、原理：链球菌溶血素“O”简称ASO或抗“O”，是A簇溶血性链球菌的代谢产物之一，它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞，如果病人血清中含抗链球菌溶血素“O”抗体，则可使得ASO失去溶血能力。

2、临床意义：（1）、由于A簇溶血性链球菌的感染较常见，故在正常人群血清中也含一定量的ASO抗体，通常为126~166单位，有时高达250单位以上，因此不能单凭一次检查结果作为诊断的依据。

成人一般500单位以上为明确阳性，250~330单位为可疑。

对于可疑患者，要在发病后进行多次检查，如单位上升两倍以上则有意义。

活动性风湿病人不但抗“O”效价高，并有血沉快、CRP阳性及白细胞增多的特点。

急性肾小球肾炎的抗“O”也高。

（2）、确为溶血性链球菌感染，但抗“O”效价不高者见于下列情况：①、病人在发病早期已使用过大量抗菌素或肾上腺皮质激素。

②、部分病人对A簇溶血性链球菌有耐受性，或被“O”抗原性低的菌株感染时，血清中ASO即不高。

这种情况可通过血清中IgM的增高（感染初期）及IgG增高（感染后期）来协助诊断。

（3）非特异性ASO增高：可见于某些肝炎，肾病综合征，结核性胸膜炎，多发性骨髓瘤，原发性良性单株峰性高球蛋白血症等。

二、类风湿因子（RF）测定--（胶乳凝集法）：本度验用于类风湿因子相关疾病的的诊断。

类风湿性关节炎阳性率较高，约80~90﹪，RF阳性支持早期类风湿性关节炎的倾向性诊断，但RF也如ANA（抗核抗体）一样，并不是类风湿性关节炎独有的特异性抗体。

其他疾病如结缔组织病、病毒性肝炎等及60岁以上老年人也有不同程度的阳性率。

1、原理：以胶乳微粒为载体，使其吸附上人类变性Y—球蛋白而作为抗原。

A SO和R F的检验及临床意义董良菊(江苏省睢宁县李集中心卫生院，江苏睢宁221221)应用科技喃要】A SO(抗链球菌溶血素‘’了，)是A群溶血性链球菌的代谢产物。

它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞；并具有抗原性，可刺激机体产生相应的抗体，称为A S O R．F(类风湿因子)是—种抗变性IgG的自身抗体。

本文介绍了这两种试剂的使用方法及临床意义。

窗体顶端窗体底端。

拱键溯A SO；t L FA S O(抗链球菌溶血素“0”)是A群溶血性链球菌的代谢产物，它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞：并具有抗原性，可刺激机体产生相应的抗体，称为A Soo抗链球菌溶血紊“O”论SO)的测定可用于链球菌感染的诊断。

R F(类风湿因子)是一种抗变性I gG的自身抗体．主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中，是一种抗人或动物I gG分子Fc片断的抗体。

它最易与人及动物的变性球蛋白或免疫复合物中的IgG结合，也可与自身I gG或异体IgG分子反应，并与其他抗原如核蛋白发生交叉反应，与天然IgG 结合的能力较差。

临床上常用于自身免疫性疾病的诊断。

A SO，RF的检验常用方法为胶乳凝集试验(Ia t e×a ggl ut i nat i ont e st，山m，是一种间接凝集试验，所用载体颗粒为聚苯乙烯胶乳，是～种直径为O．8um 大小的圆形颗粒，带有负电荷，可物理性吸附蛋白质分子，但这种结合牢固性差。

1试剂及方法1．1斌荆：扳链球茵溶血素‘‘o'’测定试剂盒类风湿因子测定试剂盒1．2原理A S O试剂是由溶血素“0”和羧化聚丙乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳A SO灵敏度调整到2001U／m I，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。

R F试剂是由纯化的人I gG和羧化聚丙乙：唏胶乳共价交联而成的抗原胶乳。

R F灵敏度调整到201U／m I，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。

类风湿因子RF测定1检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2原理RF是针对自身的变性IgG分子结晶片段的一种自身抗体。

本试剂将人微球蛋白胶合于胶乳微粒，与待测样本中的RF 发生免疫反应，引起微粒的凝集，导致反应体系浊度增加，该浊度的高低在一定量抗体存在时与抗原的含量成正比。

与通过同样处理的标准液比较，即可计算出样本中的RF。

3标本要求3.1使用新鲜血清,不使用血浆.3.2在采集血液后2h分离血清.3.38h内不能及时测定血清可存放于2-80C冰箱保存,3天后测定的血清置-150C―-200C 冰冻保存,但冰冻血清只能复融一次.3.4严重溶血或脂血的标本不能作测定.4试剂4.1试剂：本科使用浙江伊利康生物技术限公司的试剂盒. （浙食药监械（准）字2014第2400384号YZB/浙2314-40-2014）4.1.1试剂盒组成如下:R1三羟甲基氨基缓冲液：20mmol/L叠氮钠：0.95g/LR2：类风湿因子致敏胶乳液：适量叠氮钠：0.95g/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用和毒性，请勿直接接触皮肤及眼睛。

一旦接触，即用大量清水冲洗。

请勿吞服。

4.2 校准品：使用浙江伊利康生物技术限公司提供的RF校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。

ASO（抗链球菌溶血素“O”）是A群溶血性链球菌的代谢产物，它是一种具有溶血活性的蛋白质，能溶解人类和一些动物的红细胞；并具有抗原性，可刺激机体产生相应的抗体，称为ASO。

抗链球菌溶血素“O”(ASO）的测定可用于链球菌感染的诊断。

RF（类风湿因子）是一种抗变性IgG的自身抗体.主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中，是一种抗人或动物IgG分子Fc片断的抗体。

它最易与人及动物的变性球蛋白或免疫复合物中的IgG结合，也可与自身IgG或异体IgG分子反应，并与其他抗原如核蛋白发生交叉反应，与天然IgG 结合的能力较差。

临床上常用于自身免疫性疾病的诊断。

ASO，RF的检验常用方法为胶乳凝集试验（latexagglutinationtest，LAT），是一种间接凝集试验，所用载体颗粒为聚苯乙烯胶乳，是一种直径为0.8um 大小的圆形颗粒，带有负电荷，可物理性吸附蛋白质分子，但这种结合牢固性差。

1试剂及方法1.1试剂：抗链球菌溶血素“O”测定试剂盒类风湿因子测定试剂盒1.2原理ASO试剂是由溶血素“O”和羧化聚丙乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳ASO灵敏度调整到200IU/ml，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。

RF试剂是由纯化的人IgG和羧化聚丙乙烯胶乳共价交联而成的抗原胶乳。

RF灵敏度调整到20IU/ml，超过上述滴度即出现肉眼可见的凝集颗粒。

1.3标本采集抽取病人静脉血，经离心获得新鲜血清标本。

1.4方法、定性试验1）试剂使用前，预置达室温2）轻轻混匀胶乳试剂3）核对阴性和阳性对照4）在反应板中分别加一滴未稀释血清（50ml），同时做阴性和阳性对照5）分别在标本血清及阴性阳性对照中加一滴胶乳试剂6）轻轻摇动使其充分混匀，二分钟观察结果2结果判定1）ASO：出现凝集大颗粒的为阳性，ASO>200IU/ml.无凝集出现保持均匀乳状为阴性，ASO<200IU/ml。

半定量试验:血清以生理盐水（0.9克/100ml蒸馏水）倍比稀释。