下载文档原格式
平皿沉降法：采样时将普通琼脂培养基或血琼脂培养基5个，分别置于室内同一平面五个不同的点（室内四个角及中央），打开皿盖，让平皿暴露15～30min后盖好平皿盖，置于37℃温箱中培养，次日观察平皿菌落，计数五个平皿生长菌落数，根据5min内100cm2培养基中降落细菌数相当于10L空气中所含细菌数而计算1m3空气中的细菌数。
计算公式为：细菌数（CFU）/ m3＝N×100/A×5/T×1000/10＝50000N/AT
注：A：平板面积（cm2）；
T：平板暴露时间（min）；
N：平板平均菌落数（CFU）；
摘于医学检验专业2003年版《微生物检验学》
1，培养基的配制
称取10g蛋白胨、3g牛肉浸膏、5g氯化钠、20g琼脂，充分混合后，加入到1000毫升蒸馏水中，用盐酸和氢氧化钠调节溶液的ph值为7.4-7.6，过滤除去沉淀后，分装在5个250毫升三角烧瓶中，放入高压蒸汽灭菌锅中，在121摄氏度下灭菌15分钟。
取出后置于暗处备用。
2.制作平皿
加热使测定所用的培养基融化，待冷至50-60摄氏度时，倾入培养皿，每皿注入15-20毫升，一共制作5块。
盖上皿盖
3细菌含量的测定
（1）利用微生物在空气中能随尘粒下沉的原理，将盛有培养基的平皿平放，移去平皿盖，在空气中暴露五分钟，培养皿距离地面1米，距离墙壁最近不可小于30cm,
室中中央及周角各放一平皿。
（2）培养：放入37摄氏度恒温箱中培养24小时。
空气环境微生物检测报告引言空气中的微生物是指一种微小的生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
它们存在于我们周围的空气中，并且常常对人类的健康产生重要的影响。
因此，对空气环境中的微生物进行检测和监测是非常重要的。
本报告旨在通过空气环境微生物的检测结果，为建筑物、办公室和其他公共场所的环境卫生提供科学依据和参考。
本报告将介绍所采用的检测方法、检测结果和相应的解读。
检测方法在本次空气环境微生物检测中，我们采用了常用的空气采样和实验室检测方法。
具体步骤如下：1.空气采样：采用空气采样仪器，在被检测的场所中进行空气采样。
采样仪器能够捕集空气中的微生物颗粒，并将其固定在采样器中。
2.样品处理：将采集到的空气样品送往实验室进行处理。
处理过程包括样品的过滤、培养基的准备等步骤。
3.培养和鉴定：将处理后的空气样品接种在适当的培养基上，并在适当的温度和湿度条件下培养。
培养一段时间后，观察培养基上是否有微生物生长。
4.结果记录：对培养基上生长的微生物进行鉴定和计数，并记录相关信息。
检测结果菌落总数菌落总数是指在特定培养条件下，培养基上形成的微生物菌落的总数。
菌落总数是评估空气环境微生物污染程度的重要指标。
根据本次检测结果，空气中的菌落总数为XXX CFU/m³。
根据卫生标准，空气中的菌落总数应该控制在合理的范围内，超过规定的限值可能对人体健康产生潜在风险。
病原微生物病原微生物是指能够引起疾病的微生物。
在空气环境中存在的病原微生物有很多种类，包括细菌、真菌和病毒等。
根据本次检测结果，我们未检测到空气中存在的病原微生物。
这说明被检测场所的空气环境相对较为安全，对人体的健康风险较低。
常见微生物类型除了菌落总数和病原微生物外，还存在许多其他常见的微生物类型。
这些微生物在空气环境中广泛存在，并且对人体的健康也有一定的影响。
根据本次检测结果，我们检测到了以下常见的微生物类型：1.细菌：XXX (例：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌等)2.真菌：XXX (例：霉菌、酵母菌等)3.病毒：XXX (例：流感病毒、冠状病毒等)结论与建议根据本次空气环境微生物检测结果，空气中的菌落总数控制在合理的范围内，未检测到病原微生物，并且检测到了常见的微生物类型。
公共场所空气微生物检验方法细菌总数测定公共场所的空气质量对人们的健康和舒适度有着重要影响。
其中，微生物的存在是一个重要的指标，尤其是细菌的总数测定。
本文将介绍公共场所空气微生物检验的方法，重点关注细菌总数的测定。
公共场所的空气中存在大量的微生物，包括细菌、真菌和病毒等。
这些微生物可以通过空气传播，并对人们的健康造成潜在威胁。
因此，对公共场所的空气质量进行监测和检验是非常重要的。
细菌是一类常见的微生物，广泛存在于自然界和人类生活环境中。
测定公共场所空气中细菌总数的方法有多种，下面将介绍其中两种常用的方法。
一种常用的方法是采用空气采样器进行采样，然后将采样得到的样品进行培养和计数。
空气采样器可以根据不同的需求选择不同的类型，如空气质量检测仪、空气质量监测仪等。
采样时应注意避免污染和交叉污染，选择合适的采样时间和采样位置。
采样得到的样品需要进行培养和计数。
培养方法可以选择常规的液体培养基或固体培养基，也可以选择特定的培养基，如选择含有某种抗生素的培养基来筛选特定的细菌。
培养时间和培养温度也是影响结果的重要因素，一般情况下，培养24-48小时后进行计数。
另一种常用的方法是采用表面采样法进行采样，然后将采样得到的样品进行培养和计数。
表面采样法可以使用不同的方法，如擦拭法、刮取法、涂抹法等。
采样时应注意选择合适的采样器具和采样面积，避免污染和交叉污染。
采样得到的样品需要进行培养和计数。
培养方法和计数方法与空气采样相似，可以选择常规的液体培养基或固体培养基，也可以选择特定的培养基来筛选特定的细菌。
培养时间和培养温度也是影响结果的重要因素，一般情况下，培养24-48小时后进行计数。
细菌总数的测定结果可以通过计算得到，一般以CFU/m3（每立方米的菌落形成单位）为单位。
根据不同的场所和要求，对细菌总数的限制标准也有所不同，一般情况下，室内空气的细菌总数应控制在一定范围内，以保证公共场所的空气质量。
公共场所的空气微生物检验方法中，细菌总数的测定是一个重要的指标。
空气微生物的检测和卫生标准
首先，空气微生物的检测方法包括空气采样和培养方法。
空气采样可以通过空气采样器或生物气溶胶采样器进行，然后将采样得到的空气中微生物在培养基上培养，以便观察和计数。
另一种方法是使用现代分子生物学技术，如聚合酶链反应（PCR）或测序技术，来检测和鉴定空气中微生物的种类和数量。
其次，卫生标准针对不同场所和环境可能有所不同。
例如，在医疗保健环境中，空气中的微生物水平需要符合卫生部门或相关行业标准，以确保医院或诊所的空气质量符合卫生要求。
食品加工和制药行业也有严格的卫生标准，以确保生产过程中空气中的微生物不会对产品质量造成影响。
此外，空气微生物的卫生标准还与室内空气质量相关。
一般来说，室内空气中的微生物水平应该低于一定的标准，以确保居住或工作环境的空气质量符合健康要求。
这需要定期对室内空气进行检测，并采取必要的控制措施，如通风、空气过滤等，以维持空气质量。
综上所述，空气微生物的检测和卫生标准涉及到多个方面，包
括检测方法、行业标准以及室内空气质量要求。
通过科学的检测方法和严格的卫生标准，可以有效控制空气中微生物的水平，保障人体健康和生产环境的卫生安全。
实验三细菌的分布与消毒灭菌【目的】①了解细菌广泛分布于自然界及正常人体，树立“有菌观念”，从而认识无菌操作对于微生物学及医学实践的重要性。
②了解正常人体中寄居着种类繁多的细菌，正常情况下不引起人类疾病，称为正常菌群。
③熟悉外界因素对细菌的影响，学习常用的消毒灭菌方法。
④了解不同细菌对外界因素具有不同的抵抗力。
一、细菌的分布检查（一）空气中的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。
【方法】①取普通琼脂平板一只开启皿盖，培养基面向上放于实验桌上，暴露5～30min后盖好。
②置37℃培养18～24小时后观察结果。
【结果】（填表10-1）平板培养基表面或多或少有菌落生长。
（二）地面水中的细菌检查【材料】地面水(河水、井水或池水)、高层琼脂培养基、1ml无菌吸管、灭菌培养皿。
【方法】①以无菌吸管吸取1ml地面水，加入灭菌平皿中。
②将已溶化且冷至45℃左右的高层琼脂倾注人上述平皿中，加盖后轻轻摇动，使水与琼脂充分混匀，静凝。
③37℃ 24小时后取出观察，计数菌落。
【结果】（填表10-1）（三）衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查【材料】普通琼脂平板培养基。
【方法】取普通平板一个，用蜡笔在平板背面玻璃上划成四等分，并贴上标签(图10-1)。
然后以无菌操作法，用衣袖角、票证、头发及手指或指甲内污物，在平板培养基表面相应部位轻轻涂抹，置37℃培养24【结果】填表培养基表面涂抹处有菌落生长。
衣服、票证、头发、手指皮肤上的细菌检查（四）正常人体咽喉部的细菌检查【材料】血液琼脂平板培养基、灭菌棉拭、接种环、酒精灯。
【方法】取灭菌棉拭一支，在被检查者咽喉部轻轻涂擦后，再涂于血液琼脂培养基—侧，然后改用灭菌接种环作分离划线接种。
盖上皿盖，37℃孵育24小时（或者采用咳喋法）。
【结果】（填表10-1）琼脂平板表面有菌落生长。
其中占优势的是一种细小菌落，其周围有草绿色的不完全溶血环。
此为咽喉部的正常菌群—甲型链球菌。
（五）实验结果观察(填表)二、消毒灭菌试验（一）煮沸与高压灭菌法【原理】高温对细菌有明显的致死作用，主要机制是凝固菌体蛋白质，也可能与细菌DNA单螺旋断裂、细菌细胞膜功能受损及菌体内电解质浓缩有关。
室内空气中细菌总数检测实施细则一、范围适用于室内空气细菌总数测定。
二、引用标准GB/T18883-2002 室内空气中细菌总数检验方法三、原理撞击法：采用撞击式空气微生物采样器采样通过抽气动力作用，使空气通过狭缝或小孔而产生高速气流，从而使悬浮在空气中的带菌粒子撞击到营养琼脂平板上，经37℃、48h培养后，计算每立方米空气中所含的细菌菌落数的采样测定方法。
四、仪器和设备1．高压蒸汽灭菌器。
2．干热灭菌器。
3．恒温培养箱。
4．冰箱。
5．平皿。
（直径9㎝）6．制备培养基用一般设备：量筒，三角烧瓶，pH计或精密pH试纸等。
7．撞击式空气微生物采样器（FSC-IV便携式浮游生物采样器）。
五、培养基1．营养琼脂培养基1．成分：蛋白胨20g牛肉浸膏3g氯化钠5g琼脂15g～20g蒸馏水1000ml2．制法：将上述各成分混合，加热溶解，校正pH至7.4，过滤分装，121℃20min 高压灭菌。
营养琼脂平板的制备参照采样器使用说明。
六、选点要求1．采样点的数量根据监测室内面积大小和现场情况而确定，以期能正确反映室内空气污染物的水平。
原则上小于50㎡的房间应设（1～3）个点；50㎡～100㎡设（3～5）个点；100㎡以上至少设5个点。
在对角线上或梅花式均匀分布。
2．采样点应避开通风口，离墙壁距离应大于0.5m。
3．采样点的高度：原则上与人的呼吸带高度相一致。
相对高度0.5m～1.5m之间。
七、采样将采样器消毒，按仪器使用说明进行采样。
一般情况下采样量为30L～150L，应根据所使用仪器性能和室内空气微生物污染程度，酌情增加或减少空气采样量。
八、样品培养样品采完后，将带菌营养琼脂平板置36℃±1℃恒温箱中，培养48h，计数菌落数，并根据采样器的流量和采样时间，换算成每立方米空气中的菌落数。
以每立方米菌落数（cfu/m3）报告结果。
空气中微生物的测定实验报告本实验旨在测定空气中微生物的数量及种类，探究影响空气质量的因素，并采取相应的预防措施，保证工作场所和生活环境的卫生安全。
一、实验方法1.1 采样器准备准备采样器，将采样器杆插入采样器中心孔内，调整均衡压力，将收集微生物的借腔安装于采样器杆顶部，并使其紧密固定。
1.2 环境样本采集每个采样点进行三次采样，取样位置应保持固定，并在同一时间段进行采集。
1.3 样本处理将收集到的样本传送到实验室，放置在恒温箱内，保持25℃恒温72小时。
每24小时将培养基旋转45度以均匀涂布，并保持培养箱湿度适中。
1.4 微生物分类鉴定与计数于72小时后将培养基取出，用称量器进行称量，计算出微生物的数量，并进行分类鉴定。
二、结果与分析在实验中，对于不同环境样本采集了三次，并将结果取平均值。
结果表明，空气中微生物的数量与环境因素密切相关。
在工厂产生的空气中，微生物数量较高，尤其是在生产车间、食品加工车间和卫生间等空间中，微生物数量更为显著。
而在更干燥、通风良好的办公室和教学楼内，微生物数量较低。
根据鉴定，空气中微生物主要包括真菌、细菌和病毒等。
细菌是空气中最常见的微生物，包括葡萄球菌、耳塞子菌、链球菌等。
此外，还能够检测到黄曲霉、毛霉以及酵母等真菌。
三、结论与建议通过实验结果可得知，维护空气干净的重要性，特别是在工业和生产领域。
对于空气中的微生物，建议加强通风措施，增加房间内过滤空气的方式，定期清洗空调过滤器和通风系统，并且尽可能地避免有机质的堆积。
对于员工应进行健康教育，增强自我卫生防护意识，勤洗手，保持房间干净，预防各种疾病的发生。
此外，空气中微生物数量的变化还与季节、气候条件密切相关，因此，建议每季度进行一次空气微生物测量，及时发现问题并采取相应的防护和治理措施。
这样，才能确保我们的工作和生活场所都能成为一个安全健康的环境。
培养基的制备与空气中微生物的检测
一、实验目的与要求
1、了解并掌握微生物所需的营养成分以及培养基的类型。
2、学习并掌握牛肉膏蛋白胨培养基的配制原理，配制方法以及熟悉实验步骤。
3、掌握高压蒸汽灭菌器的原理以及了解其操作步骤。
4、空气中微生物的检测。
二、实验原理
培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。
由于微生物具有不同的营养类型，对营养物质的要求也各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。
另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。
任何一种培养基一经制成就应及时彻底灭菌，以备纯培养用。
一般培养基的灭菌采用高压蒸汽灭菌。
高压灭菌的原理是：在密闭的蒸锅内，其中的蒸汽不能外溢，压力不断上升，使水的沸点不断提高，从而锅内温度也随之增加。
在0.1MPa的压力下，锅内温度达121℃。
在此蒸汽温度下，可以彻底高效杀死各种细菌及其高度耐热的原理。
空气是人类赖以生存的必须环境，也是微生物借以扩散的媒介。
空气中存在着细菌、真菌、病毒、放线菌等多种微生物粒子，这些微生物粒子是空气污染物的重要组成部分。
空气微生物主要来自于地面及实施、人和动物的蹑手呼吸道、皮肤和毛发等，它附着在空气气溶胶细小颗粒物表面，可较长时间停留在空气中。
某些微生物还可以随着空气中细小颗粒穿过人体肺癌存留在肺的深处，给身体健康带来严重危害，也可以随着空气中细小颗粒物被输送到较远地区，给人体带来许多传染性的疾病和上呼吸道疾病。
因此，空气微生物含量多少可以反映所在区域的空气质量，是空气环境污染的一个重要参数评价空气的清洁程度，需要测定空气中的微生物数量和空气污染微生物。
三、实验内容
1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备。
2、高压灭菌。
3、空气中微生物的检测。
四、实验步骤
1、查配方
牛肉膏蛋白胨培养基的配方：牛肉膏 1g；蛋白胨 2g；NaCl 1g；琼脂粉 4g；蒸馏水 200mL；pH 7.0—7.2。
2、称量
3、配制
先将牛肉膏、蛋白胨溶入烧杯中搅拌至完全溶解，再加入其他成分一次溶解，倒入500mL的锥形瓶中，加水至200mL，加入琼脂粉，拿报纸封口。
4、高压灭菌
5、分装，凝固
6、暴露取样：在指定的地点：一楼、三楼、五楼、七楼各放2皿，将平板皿盖打开，在空气中暴露10min ，时间一到，立即合上皿盖。
7、培养观察：把培养皿置于生化培养箱培养，于48h 后记录所生长的菌落数。
8、计算1平方米空气中的微生物的数目。
奥梅染斯基曾建议：如面积为100㎝2的平板培养基，暴露在空气中10分钟，置于37℃培养24小时后所生长的菌落数，相当于10L 空气中的细菌数。
2100
100r N X π⨯⨯= X 每m3空气中的细菌数
N 平板暴露5分钟，置37℃培养24小时后生长的菌落数
r 平皿底半径5㎝
五、实验数据记录及处理
测得各个楼层的菌落数如下表所示： 1楼：X （外1）=764（个） X （外2）=1401（个） X （外平均）=1083（个） X （内1）=382（个） X （内2）=2038（个） X （内平均）=1210（个） 3楼：X （外）=637（个） X （内）=764（个）
5楼：X （外）=637（个） X （内）=1656（个）
7楼：X （外）=255（个） X （内）=382（个）
由计算得出的数据可知，空气中微生物的分布具有不定向性以及不均匀。
六、实验体会
1、微生物需要的营养物质
营养物质应满足微生物的生长、繁殖和完成各种生理活动的需要。
它们的作用可概括为形成结构（参与细胞组成）、提供能量和调节作用（构成酶的活性和物质运输系统）。
微生物的营养物质有六大类要素，即水、碳源、氮源、无机盐、生长因子和能源。
① 水：水是微生物的重要组成部分，在代谢中占有重要地位。
水在细胞中有两种存在形式：结合水和游离水。
结合水与溶质或其他分子结合在一起，很难加以利用。
游离水（或称为非结合水）则可以被微生物利用。
② 碳源：碳在细胞的干物质中约占50%，所以微生物对碳的需求最大。
凡是作为微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的营养物质，称为碳源。
作为微生物营养的碳源物质种类很多，从简单的无机物（CO2、碳酸盐）到复杂的有机含碳化合物（糖、糖的衍生物、脂类、醇类、有机酸、芳香化合物及各种含碳化合物等）。
但不同微生物利用碳源的能力不同，假单孢菌属可利用90种以上的碳源，甲烷氧 1楼 1楼 3楼 5楼 7楼 外 6 11 5 5 2
内 3 16 6 13 3
化菌仅利用两种有机物：甲烷和甲醇，某些纤维素分解菌只能利用纤维素。
大多数微生物是异养型，以有机化合物为碳源。
能够利用的碳源种类很多，其中糖类是最好的碳源。
异养微生物将碳源在体内经一系列复杂的化学反应，最终用于构成细胞物质，或为机体提供生理活动所需的能量。
所以，碳源往往也是能源物质。
自养菌以CO2、碳酸盐为唯一或主要的碳源。
CO2是被彻底氧化的物质，其转化成细胞成分是一个还原过程。
因此，这类微生物同时需要从光或其他无机物氧化获得能量。
这类微生物的碳源和能源分别属于不同物质。
③ 氮源：凡是构成微生物细胞的物质或代谢产物中氮元素来源的营养物质，称为氮源。
细胞干物质中氮的含量仅次于碳和氧。
氮是组成核酸和蛋白质的重要元素，氮对微生物的生长发育有着重要作用。
从分子态的N2到复杂的含氮化合物都能够被不同微生物所利用，而不同类型的微生物能够利用的氮源差异较大。
固氮微生物能利用分子态N2合成自己需要的氨基酸和蛋白质，也能利用无机氮和有机氮化物，但在这种情况下，它们便失去了固氮能力。
此外，有些光合细菌、蓝藻和真菌也有固氮作用。
许多腐生细菌和动植物的病原菌不能固氮，一般利用铵盐或其他含氮盐作氮源。
硝酸盐必须先还原为NH+4后，才能用于生物合成。
以无机氮化物为唯一氮源的微生物都能利用铵盐，但它们并不都能利用硝酸盐。
有机氮源有蛋白胨、牛肉膏、酵母膏、玉米浆等，工业上能够用黄豆饼粉、花生饼粉和鱼粉等作为氮源。
有机氮源中的氮往往是蛋白质或其降解产物。
氮源一般只提供合成细胞质和细胞中其他结构的原料，不作为能源。
只有少数细菌，如硝化细菌利用铵盐、硝酸盐作氮源和能源。
④ 无机盐：无机盐也是微生物生长所不可缺少的营养物质。
其主要功能是：（1）构成细胞的组成成分；（2)作为酶的组成成分；（3)维持酶的活性；（4）调节细胞的渗透压、氢离子浓度和氧化还原电位；(5)作为某些自氧菌的能源。
⑤ 生长因子：一些异养型微生物在一般碳源、氮源和无机盐的培养基中培养不能生长或生长较差。
当在培养基中加入某些组织（或细胞）提取液时，这些微生物就生长良好，说明这些组织或细胞中含有这些微生物生长所必须的营养因子，这些因子称为生长因子。
生长因子可定义为：某些微生物本身不能从普通的碳源、氮源合成，需要额外少量加入才能满足需要的有机物质，包括氨基酸、维生素、嘌呤、嘧啶及其衍生物，有时也包括一些脂肪酸及其他膜成分。
2、消毒与灭菌
消毒是指清除和杀灭环境和物体中的致病微生物或使微生物灭活的过程，分物理消毒和化学消毒两种。
物理消毒主要指阳光和紫外线照射等。
化学消毒指用化学药品清除、杀灭和灭活致病微生物的过程。
消毒剂分类及常用消毒剂
1）按消毒剂作用水平分类
高效消毒剂：指可杀灭所有微生物，包括各种细菌繁殖体、细菌芽孢、真菌、结核杆菌、囊膜和非囊膜病毒等，也称灭菌剂，如过氧乙酸、甲醛、戊二醛等及有机汞类；
中效杀毒剂：除不能杀死细菌芽孢外，可杀死细菌繁殖体、真菌和病毒等其他微生物，如乙醇、酚剂类；
低效杀毒剂：可杀死部分细菌繁殖体、真菌和囊膜病毒，不能杀灭结核菌、细菌芽孢和非囊膜病毒，如季胺盐类等阳离子表面活性剂——新洁尔灭、洗必太等。
2）按消毒剂用途分类
环境消毒剂；带畜(禽)体表消毒剂(包括饮水、器械等）。
按物品性状：固体、液体、气体。
3）按化学性质分类
过氧化物类消毒剂：指能产生具有杀菌能力的活性氧的消毒剂，如过氧乙酸、过氧化氢、过氧戊二酸、臭氧、二氧化氯等，如杜邦公司Antec的“Virkon”过一硫酸氢钾复合盐消毒剂等。
缺陷及危害：过氧乙酸、过氧化氢、过氧戊二酸不稳定、刺激性强，长期使用对人和动物眼睛、呼吸道黏膜、环境有强力的破坏。
