【报告】实验4:某些因素对离体家兔肠肌的影响
- 格式:docx
- 大小:34.87 KB
- 文档页数:2
实验4:某些因素对离体家兔肠肌的影响(浙江中医药大学第一临床医学院)关键词:离体家兔肠肌因素一、实验目的学习麦氏浴槽的使用方法及离体肠肌的实验方法。
观察酸、碱、低温、肾上腺素、乙酰胆碱对离体肠肌的影响,并分析作用机制。
二、实验材料(1)动物:家兔(2)器械:动物手术器材(手术刀、手术剪、止血钳、弹簧夹、丝线、皿、注射器、手术缝针)供氧器、麦氏浴槽、张力换能器、RM6240微机生物信号采集处理系统。
(3)药品和试剂:HCl、NaOH、(25度)台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱溶液三、实验方法(1)实验装置准备和仪器参数设置:麦氏浴槽中加固定量(10~15ml)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37.5度。
通气管接空气管道。
用螺丝夹调节气体管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
换能器输出线接微机生物信号采集处理系统:打开RM6240系统,“实验”-“药理学专用试验”-“离体家兔肠肌运动”(2)离体家兔肠肌标本制备:取家兔一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培养皿中,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将回肠剪成数段(约1~1.5cm),换以新鲜的台氏液备用。
取小段肠管置于盛有台氏液的培养皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线并打结。
(3)实验观察:1)加入乙酰胆碱溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
2)加入肾上腺素溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
3)滴加NaOH后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
4)滴加HCl后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
5)用25度台氏液灌流肠肌,观察其收缩幅度。
四、实验结果:某些因素对家兔离体肠肌的影响实验结论(1)加入乙酰胆碱溶液使家兔肠肌兴奋,张力增大,曲线幅度增大。
(2)加入肾上腺素溶液使家兔肠肌抑制,张力减小,曲线幅度变小。
不同因素对家兔离体肠肌运动的影响:in vitro intestinal muscle; Taiwan's fluid; Ach, E; NaOH; HCl1、材料和方法1.1实验动物:家兔1.2实验药品:台式液、乙酰胆碱、肾上腺素、氢氧化钠溶液、盐酸溶液。
1.3实验仪器:恒温浴槽、木槌、麦氏浴槽、棉线若干、手术剪、氧气泵、微机生物信号采集处理系统、张力传感器、缝针、培养皿。
1.4离体家兔肠肌制备:取家兔一只,将其倒提,用木锤猛击后脑勺,使之昏迷,将其仰卧位固定,用手术剪从剑突下沿腹白线向耻骨联合方向剪开皮肤约5cm长,打开腹壁,暴露腹腔,顺着胃找到与胃相连的十二指肠,沿十二指肠向空肠的方向取出小肠段约30cm,放入一小手术盘中,用注射器抽氧饱和的4℃取预冷台氏液冲洗肠内容物,直至冲洗干净为止。
将干净的小肠切割成小段,每小段肠约2cm 长,并在小段肠的两端、距断端约1mm处各穿约30cm长的线。
1.5标本固定:1.5.1 取出固定架,将肠段的下端的线头尽量靠近固定架的小钩,并牢固地绑紧在小钩上,将固定架放回内槽,小钩尽量靠近槽底,重新用张力微调器固定固定架,将空气泵重新连接至固定架,并通过固定架将空气输入内槽的台氏液中。
1.5.2将肠段的上端的线头与张力换能器的应变梁连接, 用张力微调器缓慢升降拉线,保持线有一定紧张度,肠段、线应与地平面垂直,同时,肠段及上端的线头不得碰及槽壁和固定架。
1.5.3换液:打开灌流槽的内槽排水阀门,排去原来的台氏液,用注射器从恒温水泵的小烧杯中抽取被加温的台氏液放入灌流槽的内槽中,其每次用量以淹过肠段的量为准。
调节位于固定架尾部的空气流量调节旋钮,使气泡即细小、均匀,又不影响肠段的运动。
1.6. 实验观察:1.6.1肠活动恢复后,向台氏液中加入乙酰胆碱2滴,观察小肠收缩活动的改变,待反应稳定后冲洗1遍。
1.6.2肠活动恢复后,向台氏液中加入肾上腺素2滴,观察小肠活动的改变,待反应稳定后冲洗1遍1.6.3记录一段小肠平滑肌收缩活动曲线,向台氏液中加入NaOH 2滴,观察小肠收缩活动的改变,反应稳定后冲洗1遍。
一、实验目的1. 观察家兔小肠平滑肌的生理特性,了解其在消化过程中的作用。
2. 探讨pH、AD、Ach等因素对离体家兔肠肌运动的影响。
3. 分析不同药物对家兔小肠平滑肌的激动和阻断作用。
二、实验原理家兔小肠平滑肌具有自动节律性运动的特性,其产生机理源于肌肉细胞本身的自发缓慢放电,并受中枢神经系统及体液因素的调节。
本研究通过观察离体家兔小肠平滑肌在不同理化刺激下的收缩幅度变化,分析探讨各种理化刺激引起循环、呼吸、泌尿等功能的适应性改变。
三、实验材料与仪器1. 实验动物:健康家兔1只2. 实验器材:解剖盘、手术刀、手术剪、镊子、注射器、微机生物信号采集处理系统、试管、试管架、pH试纸、肾上腺素、乙酰胆碱等。
3. 实验试剂:生理盐水、HCl、NaOH、肾上腺素、乙酰胆碱等。
四、实验方法1. 家兔处死:采用空气栓塞法处死家兔,使其心脏停止跳动。
2. 小肠平滑肌制备:迅速取出家兔小肠,置于生理盐水中洗净,剪成1-2cm长的肠段,放入浴槽中。
3. pH值测定:用pH试纸测定浴槽中生理盐水的pH值,确保pH值在7.2-7.4之间。
4. 理化刺激:分别向浴槽中加入不同pH值的溶液(HCl、NaOH)、肾上腺素和乙酰胆碱,观察小肠平滑肌的收缩幅度变化。
5. 数据记录:使用微机生物信号采集处理系统,记录各项处理前后的收缩幅度变化。
五、实验结果1. pH值对小肠平滑肌的影响:当pH值低于7.2时,小肠平滑肌收缩幅度降低;当pH值高于7.4时,小肠平滑肌收缩幅度升高。
2. 肾上腺素对小肠平滑肌的影响:肾上腺素对小肠平滑肌有阻断作用,使小肠平滑肌收缩幅度降低。
3. 乙酰胆碱对小肠平滑肌的影响:乙酰胆碱对小肠平滑肌有激动作用,使小肠平滑肌收缩幅度升高。
六、实验讨论1. pH值对小肠平滑肌的影响:pH值是调节消化系统功能的重要因素。
在本实验中,pH值的变化对小肠平滑肌的收缩幅度产生了明显的影响,说明pH值对小肠平滑肌的生理功能具有重要调控作用。
《医学机能实验学》学院:专业:针灸推拿学班级:学号:姓名:******大学2013/11/9某些因素对家兔离体肠肌影响姓名(******大学**级针灸推拿专业1班6组,**学号)摘要目的:观察不同因素(HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱)对家兔离体十二指肠活动的影响。
方法:采用常规小肠平滑肌标本离体灌流的实验方法,观察不同剂量、浓度的HCl、NaOH、室温台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱的对小肠平滑肌自发收缩活动的影响及其变化规律。
结果:HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强效应,其收缩幅度与对照组比较差异有统计学意义,NaOH、肾上腺素对小肠平滑肌自发收缩活动有抑制效应,其幅度变化与对照组比较差异有统计学意义。
结沦:HCl、18℃台氏液、乙酰胆碱对大鼠十二指肠平滑肌自发收缩活动有增强作用,NaOH、肾上腺素则有减弱作用。
【1】。
关键词家兔离体肠肌肠道平滑肌有壁内神经丛,因此有自动节律性收缩的特性,其特性起源于肌肉自身并受中枢神经系统和体液因素的调节。
离体肠段虽然失去外来神经的支配,但肠壁神经丛仍存在,在适宜的条件下,仍能保持平滑肌收缩的特性及肠壁神经丛的作用。
本实验加入药物HCl NaOH 乙酰胆碱台氏液肾上腺素观察记录其对小肠收缩情况的影响,为探讨某些体液因素对小肠平滑肌的收缩活动的影响,提供理论依据。
【2】1.材料实验动物:选用体重为2~3kg的健康家兔1只,雌雄不限。
主要试剂与仪器:麦氏浴槽、超级恒温器、张力换能器、HCL、NaOH、乙酰胆碱、台氏液、肾上腺素、RM6240系统生物机能实验系统等。
2.方法2.1标本制备:击昏家兔,剖腹取长约2 cm十二指肠肠管;将肠管放入室温的台氏液中轻轻漂洗。
肠内容物洗净后,肠段两端各系一条线,一端固定在标本钩上,另一端缚线连接张力传感器,整个肠管置于37 ℃台氏液中,台氏液内持续供95%O2与5%CO2混合气体,其间更换台氏液1次,待收缩活动平稳后用RM6420生物机能实验系统记录平滑肌收缩活动曲线。
一、实验目的1. 观察并分析不同生理因素对家兔离体小肠平滑肌的影响。
2. 探讨乙酰胆碱和肾上腺素等药物对离体小肠平滑肌的生理作用及其机制。
3. 学习并掌握生理实验的操作技能和数据分析方法。
二、实验原理消化道平滑肌具有兴奋性、传导性和收缩性等肌肉组织特性,但与骨骼肌和心肌相比,其兴奋性较低,收缩速度较慢,具有伸展性和紧张性。
乙酰胆碱(Ach)是一种重要的神经递质,能激动M受体,导致平滑肌收缩;肾上腺素则能激动α和β受体,导致平滑肌舒张。
三、实验材料1. 实验动物:家兔2. 实验器械:离体小肠灌流装置、张力换能器、BL-410生物记录系统、注射器、培养皿、烧杯、螺丝夹、台氏液、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、1mol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液3. 实验试剂:生理盐水、蒸馏水、0.01%肾上腺素、1mol/L葡萄糖溶液、1mol/L氯化钾溶液四、实验方法1. 准备离体小肠标本:将家兔处死后,迅速取出小肠,置于盛有生理盐水的培养皿中,去除脂肪和结缔组织,用剪刀剪成2-3cm长的肠段。
2. 灌流实验:将离体小肠固定在灌流装置中,连接张力换能器和BL-410生物记录系统,用台氏液灌流小肠,调节灌流速度和温度,使小肠平滑肌保持稳定状态。
3. 给药实验:分别给予离体小肠生理盐水、0.01%去甲肾上腺素、0.01%乙酰胆碱、1mol/L NaOH溶液、1mol/L HCl溶液、2%CaCl2溶液等药物,观察并记录小肠平滑肌的收缩活动变化。
五、实验结果1. 生理盐水组:小肠平滑肌张力曲线无明显变化。
2. 0.01%去甲肾上腺素组:小肠平滑肌张力曲线明显下降,收缩幅度减小。
3. 0.01%乙酰胆碱组:小肠平滑肌张力曲线明显上升,收缩幅度增大,频率加快。
4. 1mol/L NaOH溶液组:小肠平滑肌张力曲线无明显变化。
5. 1mol/L HCl溶液组:小肠平滑肌张力曲线明显下降,收缩幅度减小。
某些因素对家兔离体肠肌运动的影响一摘要目的:观察乙酰胆碱、肾上腺素、NaoH、HCL溶液及25℃台氏液对离体家兔肠肌的影响方法:取家兔离体肠肌一段,放入盛有37·5℃台氏液的麦氏浴槽中,依次加入各种药品,应用生物信号采集处理系统进行数据收集,运用统计学方法进行数据统计,得出结论结果:乙酰胆碱、25℃台氏液、NaoH使家兔张力增强,肾上腺素和HCL则起到抑制作用结论:消化管运动受神经和激素的调节。
副交感神经兴奋时,其节后纤维释放乙酰胆碱,与平滑肌膜上M受体结合,产生兴奋效应,使胃肠运动增强;而交感神经兴奋时则产生抑制作用。
消化道平滑肌的活动易受温度、PH值及其它化学因素、药物因素的影响。
关键词:平滑肌胃肠运动乙酰胆碱M受体肾上腺素二材料与方法1、材料:家兔生物信号采集处理系统张力换能器麦氏浴槽台氏溶液肾上腺素乙酰胆碱1N HCL溶液1N NaoH溶液2、方法:(1)实验装置准备和仪器参数设置(2)离体家兔肠肌标本制备:取家兔一只,击头致昏,立即打开腹腔,剪取10cm左右一段空回肠,立即置入盛有氧饱和台氏液的培养皿中,剪去肠系膜,清洗肠内容物,将肠管剪成 2 ~3cm 的小段,两端各穿一线并打结备用。
(3)连接实验装置:在麦氏浴槽中,加入台氏液15ml,置水浴锅中,水浴锅中维持水温38°C ±0.5°C 。
连好加氧泵及通气玻钩并供氧,每秒钟1 ~ 2 个气泡。
取备好的肠管一段,一端固定于通气钩;另一端连结张力换能器,置37℃麦氏浴槽中。
3、实验观察:(1)待离体肠肌稳定后,先记录一段正常张力曲线(2)先加入乙酰胆碱2滴,待张力曲线稳定后用台氏液冲洗麦氏浴槽到张力恢复用药前水平,观察并记录张力曲线(3)用上述方法依次加入肾上腺素、NaoH、HCL溶液及25℃台氏液,记录张力曲线三实验结果四实验讨论1、实验结果图可以看出正常情况下,我们观察到离体家兔小肠平滑肌在台氏液中可以自动地、缓慢地收缩,但其节律性很不规则。
一、实验目的1. 了解离体肠肌运动的生理特性;2. 掌握离体肠肌实验装置的使用方法;3. 观察不同因素对离体肠肌运动的影响;4. 分析实验结果,探讨相关生理机制。
二、实验原理离体肠肌是指从动物体内取出的一小段肠管,经过一定的处理,使其在体外保持一定生理功能。
离体肠肌运动实验可以模拟体内肠肌的生理活动,为研究肠肌生理特性及药物作用提供有力手段。
三、实验材料1. 家兔;2. 恒温浴槽;3. 木槌;4. 麦氏浴槽;5. 棉线若干;6. 手术剪;7. 氧气泵;8. 微机生物信号采集处理系统;9. 张力传感器;10. 缝针;11. 培养皿;12. 乙酰胆碱;13. 肾上腺素;14. 氢氧化钠溶液;15. 盐酸溶液;16. 台式液。
四、实验方法1. 家兔处死,取出一段小肠,置于麦氏浴槽中;2. 用棉线将小肠两端固定,连接张力传感器;3. 将麦氏浴槽置于恒温浴槽中,保持水温在37℃;4. 通入氧气,维持肠道通气;5. 连接微机生物信号采集处理系统,记录肠肌运动;6. 分别给予以下刺激:(1)滴加乙酰胆碱溶液;(2)滴加肾上腺素溶液;(3)滴加氢氧化钠溶液;(4)滴加盐酸溶液;(5)降低温度;7. 观察并记录肠肌运动的变化;8. 用37℃台式液冲洗肠肌标本,重复上述步骤。
五、实验结果1. 滴加乙酰胆碱溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;2. 滴加肾上腺素溶液后,肠肌运动张力和频率迅速降低;3. 滴加氢氧化钠溶液后,肠肌运动张力和频率都增大;4. 滴加盐酸溶液后,肠肌运动张力和频率迅速降低;5. 降低温度后,肠肌运动张力和频率逐渐降低。
六、分析与讨论1. 乙酰胆碱为神经递质,可激活肠肌细胞膜上的乙酰胆碱受体,导致肠肌收缩。
实验结果显示,滴加乙酰胆碱溶液后,肠肌运动张力和频率都增大,说明乙酰胆碱具有增强肠肌运动的作用。
2. 肾上腺素为儿茶酚胺类物质,可激活肠肌细胞膜上的β受体,导致肠肌舒张。
实验结果显示,滴加肾上腺素溶液后,肠肌运动张力和频率迅速降低,说明肾上腺素具有抑制肠肌运动的作用。
理化因素和药物对家兔离体肠肌的作用引言:离体器官实验是一种常见的研究方法,它可以帮助我们更好地了解不同理化因素和药物对离体器官(如肠肌)的作用。
离体肠肌实验通常用于研究肠道平滑肌的收缩和松弛机制,以及肠肌对不同药物的反应。
本文将探讨理化因素(如温度、pH值和浓度)和药物对家兔离体肠肌的作用。
1.温度对离体肠肌的影响温度是一个重要的理化因素,它可以直接影响肌肉的收缩和松弛。
实验显示,提高温度可以增加肠肌的收缩能力,而降低温度则会降低肠肌的收缩力。
这是因为温度的变化可以直接改变平滑肌细胞内的钙离子浓度,从而影响肌肉的收缩反应。
此外,温度的改变还可以影响神经传导和神经-肌肉接头的功能,进而影响肠肌的收缩能力。
2.pH值对离体肠肌的影响pH值是一个反映酸碱性的指标,它也可以对离体肠肌的功能产生影响。
实验表明,酸性环境(低pH值)可以引起肠肌的收缩,而碱性环境(高pH值)则会导致肠肌的松弛。
这是因为pH值的改变可以影响细胞内的酶活性和代谢过程,对钙离子浓度和肌肉收缩机制产生影响。
3.浓度对离体肠肌的影响药物浓度是影响药物作用的重要因素之一、在离体肠肌实验中,通过改变药物浓度可以研究药物在不同浓度下对肠肌的作用机制。
实验表明,药物的浓度变化可以直接影响肠肌的收缩能力和松弛程度。
通常情况下,药物浓度越高,药作用越强。
但是,对于一些药物来说,浓度超过一定阈值后,其作用可能会饱和或逆转。
离体肠肌实验可以用于研究不同药物对肠肌的作用机制。
根据药物类型的不同,其作用机制也有所差异。
例如,去甲肾上腺素是一种常用的药物,它可以通过与肠道平滑肌细胞上的α-肾上腺素受体结合,引起肌肉收缩。
而酚妥拉明是一种抗胆碱能药物,它可以抑制胆碱能神经传导,从而引起肌肉的松弛。
通过研究不同药物的作用机制,可以更好地理解肠肌的生理功能和病理改变。
结论:理化因素和药物可以直接或间接地影响离体肠肌的收缩和松弛能力。
温度、pH值和浓度的改变可以改变调节平滑肌细胞功能的方式,从而影响肌肉的收缩和松弛反应。
实验4:某些因素对离体家兔肠肌的影响
(浙江中医药大学第一临床医学院)
关键词:离体家兔肠肌因素
一、实验目的
学习麦氏浴槽的使用方法及离体肠肌的实验方法。
观察酸、碱、低温、肾上腺素、乙酰胆碱对离体肠肌的影响,并分析作用机制。
二、实验材料
(1)动物:家兔
(2)器械:动物手术器材(手术刀、手术剪、止血钳、弹簧夹、丝线、皿、注射器、手术缝针)供氧器、麦氏浴槽、张力换能器、RM6240微机生物信号采集处理系统。
(3)药品和试剂:HCl、NaOH、(25度)台氏液、肾上腺素、乙酰胆碱溶液
三、实验方法
(1)实验装置准备和仪器参数设置:麦氏浴槽中加固定量(10~15ml)的台氏液,调节超级恒温器的温度,使麦氏浴槽内温度稳定在37.5度。
通气管接空气管道。
用螺丝夹调节气体
管道的气体流量,调节至浴槽中气泡一个个逸出为止。
换能器输出线接微机生物信号采
集处理系统:打开RM6240系统,“实验”-“药理学专用试验”-“离体家兔肠肌运动”
(2)离体家兔肠肌标本制备:取家兔一只,用木槌击其头部致昏,立即剖开腹腔,找到回盲部,然后,在回盲部1cm处剪断,取出回肠约10cm左右一段,置于氧饱和的台氏液培
养皿中,沿肠壁除去肠系膜,用5ml注射器吸取台氏液将肠内容物冲洗干净,然后将回
肠剪成数段(约1~1.5cm),换以新鲜的台氏液备用。
取小段肠管置于盛有台氏液的培养
皿中,在其两端对角壁处,分别用缝针穿线并打结。
(3)实验观察:
1)加入乙酰胆碱溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
2)加入肾上腺素溶液2~5滴左右,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
3)滴加NaOH后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
4)滴加HCl后,观察其收缩幅度,反应稳定后换液冲洗。
5)用25度台氏液灌流肠肌,观察其收缩幅度。
四、实验结果:
某些因素对家兔离体肠肌的影响
实验结论
(1)加入乙酰胆碱溶液使家兔肠肌兴奋,张力增大,曲线幅度增大。
(2)加入肾上腺素溶液使家兔肠肌抑制,张力减小,曲线幅度变小。
(3)滴加NaOH使家兔肠肌兴奋,张力增大,曲线幅度增大。
(4)滴加H C l 使家兔肠肌抑制,张力减小,曲线幅度变小。
(5)用25度台氏液灌流肠肌肠肌使家兔肠肌运动减缓,到最后停止运动。
五、讨论:
(1)加入乙酰胆碱溶液使家兔肠肌兴奋,张力增大,曲线幅度增大。
其主要作用机理是:1)乙酰胆碱与肠道上的平滑肌细胞上的特殊位点结合,促进钙离子在
肌浆网上中的传递,从而增强平滑肌的收缩。
2)乙酰胆碱可以使中间神经元或兴奋性运动神经元末梢释放的递质来
调节肠段的运动,加快加剧肠段的收缩。
(2)加入肾上腺素溶液使家兔肠肌抑制,张力减小,曲线幅度变小。
其主要作用机理是:肠段的活动还受到体液因素的影响,肾上腺素就是动物体内固有的一种
体液,与胰高血糖素、促胰液素等的作用一样,都是对肠段活动进行抑制。
(3)滴加NaOH使家兔肠肌兴奋,张力增大,曲线幅度增大。
其主要作用机制是:NaOH为碱性成分,使小肠液的PH值升高,甚至偏碱性,有利于小肠内
各种酶发挥作用。
(4)滴加H C l 使家兔肠肌抑制,张力减小,曲线幅度变小。
其主要作用机理是:加入HCl后,在开始阶段,对小肠的收缩活动有增强效应,由此可见,
酸性环境有助于小肠平滑肌的运动;但一段时间后,活动减弱,收缩频率
和幅毒都下降,这主要是因为H+浓度上升,抑制了钙通道的激活,Ca2+
内流减少,H+能干扰肌肉的代谢和肌丝滑行的生化过程、能与Ca2+竞争
钙调蛋白结合的位点、使肌凝蛋白A TP酶活性下降,肌质网释放Ca2+的量减少。
(5)用25度台氏液灌流肠肌肠肌使家兔肠肌运动减缓,到最后停止运动。
其主要作用机理是:在低温环境下,大多数酶类都失去活性,生命活动减缓,肌肉运动减慢。
六、实验结论
消化道平滑肌与骨骼肌、心肌一样,具有肌肉组织共有的特性,如兴奋性、传导性和收缩性等。
但消化道
平滑肌兴奋性较低,收缩缓慢,富有伸展性,具有紧张性、自动节律性,对化学、温度和机械牵张刺激较
敏感等特点
七、参考文献
吴清和,林蕊,曾晓会;高良姜超临界萃取物对兔离体肠管解痉作用机机的研究;中药药理与临床;2004年04期。