有关色谱保留的基本术语及参数

下面列出了本书中所有的符号的意义及单位（除非无量纲）。

如收中已有定义式，方程序号则在说明后的括号中标出。

<<常用术语>>A：吸收度（式3.1,3.2）；也作面积CAN：乙腈（acetonitrile）B（%B）：二元流动相中的强溶剂（% v/v）C8，C18：烷基键合相的键长度（八烷基或十八烷基）CD：环糊精（cyclodextrin）CV：变异系数（通常以%表示）；式15.3dC：色谱柱内径（cm）dP：颗粒直径(μm)DAD：二极管阵列检测器EC：电化学(检测器)F：流速(ml/min)FL：荧光(检测器)GS：梯度斜度参数(式8.2a)；k*=20/GSh'：峰高HP：惠普公司(Hewlett-Peckard)HPLC：高效液相色谱ID：内径，dCIEC：离子交换色谱（ion-exchange chromatography）IPC：离子对色谱 (ion-paire chromatography)k：保留因子（式2.4）k*：梯度洗脱中,k的有效值或平均值(式8.1)ka，kZ：色谱图中，首峰（a）和末峰（z）的k值L：色谱柱长度（cm）LC-MS：液相色谱-质谱M：分子量MC：二氯甲烷（methylene chloride）MeOH：甲醇(methanol)MS：质谱MTBE：甲基-叔-丁醚（methyl-t-butyl ether）N：色谱柱塔板数(式2.82.8b)N'：噪音(式3.3,图3.3)NARP：非水反相HPLCNPC：正相色谱P：色谱柱压力降(通常以psi表示)(式2.9)pKa：酸或供质子碱的酸性常数PAH：多环芳烃(polyaromatic hydrocarbon)RS：分离度(式2.1)RI：折光指数RPC：反相色谱S：信号;式3.3;图3.3;以及由式6.1定义的参数tD：延迟或滞留时间(min,用于梯度洗脱中);等于VD/FtG：梯度时间(min)tR：保留时间(min)(图2.2);等于tO(1+k)tRa,tRz：色谱图中首峰（a）与末峰（z）的保留时间，tR（min）（图8.6a）tO：色谱柱死时间(min)(式2.5)t1,t2：相邻谱峰1与谱峰2的保留时间(min)TEA：三乙胺(triethylamine)TEA：四氢呋喃(tetrahydrofuran)UV：紫外光谱VD：延迟或滞留体积(mL);为梯度混合器与色谱柱人口之间的体积(包括混合器的体积) Vm：色谱柱死体积(mL)(式2.6);Vm为色谱柱内部的流动相体积,不包括附于固定相上的溶剂Vmax：最大样品体积(mL)(式13.1)Va：样品体积(mL)w：重量(mg);也作半峰高处的峰宽(min)wmax：不超载色谱柱的最大进样量(mg)(式2.17)wS：色谱柱的饱和容量(mg)(式13.4)W：峰底宽(min)(图2.2)Wth：大进样量对峰底宽的贡献(min)(式13.2)WO：小进样量的峰底宽(min)W1/2：半峰高处的峰宽(min)(图1.1)a：分离因子,等于k2/k1,其中k2与k1分别为相邻谱峰2和谱峰1的k值△tR：tRz-tR(min)△%B：梯度洗脱期间,%B的变化ε：摩尔吸收系数εo：正相HPLC 中溶剂或溶剂混合液的强度η：粘度(CP)。

6、色谱图上的有关术语：
它的纵坐标一般是表示检测的信号强弱，与色谱柱流出组分的浓度成正比。

横坐标表示从进样开始至峰最高处的分析时间（时间乘载气流速等于体积，横坐标也可以体积单位表示）。

基线：在操作条件下，未进样品只有载气通过系统时，信号随时间变化的曲线。

正常稳定的情况下，基线是一条直线。

峰高：峰的最高点距基线的垂直距离。

图1－1中AB线段，以h表示。

峰高可以作为定量指标，它与操作条件、样品浓度和进样量以及检测器的灵敏度有关。

峰宽：色谱计算中常用半峰宽来表征色谱过程峰展宽的程度，以W1/2h表示，即图1－1中的aa’线段。

高斯峰的W h＝2.354δ。

另一个常用来表征峰展宽的指
标是峰底宽，又称基线宽度，以W b表示，高斯峰的W b=4δ（高斯峰的宽度是用它的标准偏差δ来表示，它的值是0.607h处峰宽的一半。

2.1、死时间、保留时间、调整保留时间和相对保留时间。

死时间：以t M表示，它的定义是不被固定相溶解或吸附的化合物，从进样开始至流出峰最高点的时间。

当色谱系统（包括柱、柱温及仪器）给定。

t M只受载气流速的影响。

就好比上面的比拟中A船的时间。

在色谱分析中特别是毛细管柱色谱分析中，测定t M值是必要的。

用热导检测器时，常用空气来测定t M值；用氢焰离子化检测器时可用甲烷测定t M值。

因空气或甲烷在大多数固定液上近似不被保留。

如果已知同系物中三个组分的保留时间也可以计算相应条件下的t M值。

保留时间：被保留化合物（溶质）从进样开始至流出峰最高点的时间，称保留时间，用t R表示。

从各种色谱仪（包括毛细管电泳仪）上得到的色谱图横坐标均为与流动相有关的信息，一般为流动相流动时间或流动相流出体积；纵坐标均为与流动相中被分离组分含量有关的信息，一般为检测器的响应值。

因此，从每一张色谱图上可以得到每个色谱峰的流出时间（或出峰时流动相流出体积）和该色谱峰在检测器上的响应强度这两个基本信息（数据）。

根据这两个基本信息，结合其他一些方法，就可以对这一色谱峰进行定性和定量的分析。

为了规范色谱图中出现的一些术语，国家标准局制定了有关色谱图的一些术语，现介绍如下：1.色谱图（chromatogram）：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图（见图）。

2.（色谱）峰［（chromatographic）peak］：色谱柱流出组分通过检测器系统时产生的响应信号的微分曲线。

3.峰底（peak base）：从峰的起点与终点之间的连接直线（见图中的CD）。

4.峰高（ h）（peak height）：从峰高最大值到峰底的距离（见图中的BE）。

5.峰宽（W）（peak height）：在峰两侧拐点（见图中的F,G）处所作切线与峰底相交两点间的距离（见图中的KL）。

6.半高峰宽（Wh/2）（peak width at half height：通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点间的距离（见图中的HJ）。

7.峰面积（A）（peak area）：峰与峰底之间的面积（见图中的CHEJDC）。

8.拖尾峰（tailing peak）：后沿较前沿平缓的不对称峰。

9.前伸峰（leading peak）：前沿较后沿平缓的不对称峰。

10.假峰（ghost peak）：并非由试样所产生的峰。

11.畸峰（distorted peak）：形状不对称的峰，如拖尾峰、前伸峰。

12.基线（haseline）：在正常操作条件下仅有流动相通过检测器系统时产生的响应信号的曲线。

13.基线漂移（baseline drift）：基线随时间定向的缓慢变化。

药物色谱分析课件第2节有关色谱保留的基本术语及参数药物色谱分析课件第2节：色谱保留的基本术语及参数一、色谱保留的基本术语1.保留时间（Retention Time，tR）：被分离组分从进样开始到柱后出现该组分浓度极大值所需的时间，通常以分钟（min）为单位。

2.死时间（Dead Time，t0）：不保留组分的保留时间，即流动相通过色谱柱所需的时间。

死时间可以通过测定不保留组分的保留时间得到。

3.调整保留时间（Adjusted Retention Time，t'R）：保留时间减去死时间后的值，即t'R = tR - t0。

调整保留时间反映了组分在固定相上的实际保留时间。

4.容量因子（Capacity Factor，k）：又称分配系数，是指在一定温度和压力下，组分在固定相和流动相之间的分配平衡常数。

容量因子可以通过以下公式计算：k = (t'R / t0) - 1。

5.保留因子（Retention Factor，Rf）：组分在固定相和流动相之间的分配比，即在固定相上的浓度与在流动相上的浓度之比。

保留因子可以通过以下公式计算：Rf = k / (k + 1)。

6.相对保留值（Relative Retention，α）：两组分的容量因子或保留因子之比。

相对保留值可以用来定性和定量分析药物混合物中的不同组分。

二、色谱保留的基本参数1.色谱柱（Column）：色谱柱是色谱分离的核心部件，由固定相和流动相构成。

固定相是色谱柱中用来分离组分的物质，流动相则是推动组分通过色谱柱的物质。

2.固定相（Stationary Phase）：固定相是色谱柱中用来分离组分的物质，通常是固体或液体。

固定相的性质决定了色谱柱的选择性和分离效果。

3.流动相（Mobile Phase）：流动相是推动组分通过色谱柱的物质，通常是液体。

流动相的性质决定了色谱柱的分离速度和分辨率。

4.流速（Flow Rate）：流速是指单位时间内通过色谱柱的流动相的体积，通常以毫升每分钟（mL/min）为单位。

1色谱基本参数§1 保留值(1) 保留时间tr保留时间t r 和死时间t 0示意图(2) 保留体积V R(ml) = t r(min) * F c(ml/min)V R= V m+KV sK--平衡分配系数, Vs--固定相体积, Vm=流动相所占体积溶质在固定相中的浓度(n s/Vs) n s VmK=----------------------------------= ----* ----溶质在流动相中的浓度(n m/Vm) n m Vsn s, n m 溶质在固定相和流动相中的量23(4) 容量因子(k’)固定相中容质的量(n s)k´=------------------------流动相中容质的量(n m)K = k´(Vm/ Vs)V R = Vm +KVs = Vm + k´(Vm/ Vs) Vs = Vm + k´Vm= Vm (1+ k´)tr = to (1+ k´) k´= t r / to -1k´与固定相,流动相性质及柱温有关;与流速,柱尺寸无关.(3) 调整保留时间t r ´= t r -t oV = V R -V m(5) 死体积(V m) 和死时间(t o)1) 采用比流动相溶剂少一个-CH2-基团的同系物（己烷—戊烷）2）甲醇/水------甲醇3）正相--------四氯乙烯，反相---苯甲酸或硝酸4）计算法空柱管体积（Vc) * 总孔隙度（εT)t o=流动相体积流速（F c)= π/4 *d²c*L * εT/F c4计算孔隙度§2 选择性指标(α´)和相对保留值(α)α´= t r(2)/ t r(1) =(1+ k´(2)/(1+ k´(1))α= t r '(2)/ tr' (1)= k´(2)/ k´(1)α´作为选择性指标比α直观与柱温固定相种类流动相组成有关5§3 -1 流动相线速（u)流动相线速u: 通常指平均线速度u = L / t。

1. 典型的色谱图在用热导检测器时，往色谱仪中注入带有少量空气的单一样品时，得到图1-3-4的典型气相色谱图。

在图1-3-4中当没有样品进入色谱仪检测器时0t是噪声随时间变化的曲线，般是一条直线，叫作“基线” 。

h是峰高，其他符号将在后边解释。

图1一3一4典型的气相色谱图2. 区域宽度区域宽度是色谱流出曲线中很重要的参数，它的大小反映色谱柱或所选色谱条件的好坏。

区域宽度有以下三种表示方法：(1)半高峰宽 (peak width at half height ) ( Wh/2) 是在峰高一半处的色谱峰的宽度，即图1-3--2 中的CD，单位可用时间或距离表示。

(2)峰宽(peak width) ( W)是在流出曲线拐点处作切线，在图1-3-2中于基线上相交于E, F处，此两点间的距离叫峰宽，有些色谱书上叫做“基线宽度”。

(3)标准偏差 (b ) 在图1-3-2中AB距离的一半叫标准偏差。

在这三种表示方法中以前两者使用较多，三者的关系是：\\ 二4(7 (1—W h/2 = 27211)2^7 =2354820(7 (1 -3. 保留值(retention value ) 保留值是总称，具体参数的名称有以下一些：(1) 死时间(dead time ) (tM) 一些不被固定相吸收或吸附的气体通过色谱柱的时间，如用热导池作检测器时，从注射空气样品到空气峰顶出现时的时间，以s或min为单位表示。

(2) 死体积 (dead volume ) (Vm )指色谱柱中不被固定相占据的空间及进样系统管道和检(7) 调整保留体积 (adjusted retention volume )保留体积减去死体积即为调整保留体积(Vr-Vm )。

净保留体积 (net retention volume )( Vn ) 经压力修正的调整保留体积,(1 — 3 — 5a )式中Pj —色谱柱进口压力；Po—色谱柱出口压力。

(8) 比保留体积 (specificrete ntion volume )(Vg) 把净保留体积进一步校正到单位质量固定液和 273K 时的保留体积，如下式：(1 -3-6测系统的总体积, 等于死时间乘以载气的流速。

高压液相色谱(HPLC)基本概念和理论/?k1035835一、基本概念和术语1.色谱图和峰参数色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器，所得到的信号-时间曲线，又称色谱流出曲线(elution profile)。

基线(base line)--经流动相冲洗，柱与流动相达到平衡后，检测器测出一段时间的流出曲线。

一般应平行于时间轴。

噪音(noise)--基线信号的波动。

通常因电源接触不良或瞬时过载、检测器不稳定、流动相含有气泡或色谱柱被污染所致。

漂移(drift)--基线随时间的缓缓变化。

主要由于操作条件如电压、温度、流动相及流量的不稳定所引起，柱内的污染物或固定相不断被洗脱下来也会产生漂移。

色谱峰(peak)--组分流经检测器时响应的连续信号产生的曲线。

流出曲线上的突起部分。

正常色谱峰近似于对称形正态分布曲线（高斯Gauss曲线）。

不对称色谱峰有两种：前延峰(leading peak)和拖尾峰(tailing peak)。

前者少见。

拖尾因子(tailing factor，T)，用以衡量色谱峰的对称性。

也称为对称因子(symmetry factor)或不对称因子(asymmetry factor)。

《中国药典》规定T应为0.95~1.05。

T＜0.95为前延峰，T＞1.05为拖尾峰。

峰底-基线上峰的起点至终点的距离。

峰高(peak height，h)-峰的最高点至峰底的距离。

峰宽（peak width，W)-峰两侧拐点处所作两条切线与基线的两个交点间的距离。

W＝4σ半峰宽（peak width at half-height，Wh/2)-峰高一半处的峰宽。

Wh/2＝2.355σ标准偏差（standard deviation，σ)-正态分布曲线x ＝±1时（拐点）的峰宽之半。

正常峰的拐点在峰高的0.607倍处。

标准偏差的大小说明组分在流出色谱柱过程中的分散程度。

σ小，分散程度小、极点浓度高、峰形瘦、柱效高；反之，σ大，峰形胖、柱效低。

色谱术语大全色谱术语在分析化学领域具有重要的意义。

它们用于描述色谱技术中所涉及的过程、参数和方法。

本文将为您介绍一些常见的色谱术语，以帮助您更好地理解和应用色谱技术。

一、色谱基本概念1. 色谱法（Chromatography）：一种将化学混合物分离为其组成部分的物理方法，基于物质在移动相（流动相）和固定相（静止相）之间的分配行为。

2. 色谱柱（Column）：色谱仪中用来分离混合物成分的部分，通常由填料填充或涂覆固定相而成。

3. 流动相（Mobile Phase）：在色谱柱中通过的移动液体，负责将样品分离物质携带到检测器。

4. 静止相（Stationary Phase）：在色谱柱中的固定填料或涂覆物，用于与分离物质相互作用，实现其分离。

5. 保留时间（Retention Time）：某化合物从进样口注入到达检测器所需的时间，用来表征化合物在色谱柱中的保留情况。

二、气相色谱术语1. 气相色谱（Gas Chromatography, GC）：将气体作为流动相用于分离物质的色谱技术。

2. 气相色谱柱（Gas Chromatography Column）：用于气相色谱分离的柱子，通常由带有固定相的管子构成。

3. 信号峰（Peak）：在色谱图中呈现的峰状信号，用来表示各组分在不同保留时间下的峰值。

4. 分辨力（Resolution）：色谱柱对两相邻峰的识别和分离能力。

5. 峰宽度（Peak Width）：色谱图中峰的宽度，常用于评估色谱分离的效果。

三、高效液相色谱术语1. 高效液相色谱（High Performance Liquid Chromatography, HPLC）：将液体作为流动相用于分离物质的色谱技术。

2. 高效液相色谱柱（High Performance Liquid Chromatography Column）：在HPLC中用于分离物质的柱子，通常由填料或涂覆有固定相材料制成。

3. 保留因子（Retention Factor）：衡量某化合物在流动相和静止相之间分配行为的指标，通常由某组分的保留时间与流动相通过时间之比计算得出。