Agela液相色谱技术介绍&色谱柱使用

液相色谱的结构原理和基本知识液相色谱操作规程液相色谱(HPLC)法是以高压下的液体为流动相，并采用颗粒极细的固定相的柱色谱分离技术。

液相色谱对样品的适用性广，不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，因而弥补了气相色谱法的不足。

在目前已知的有机化合物中，可用气相色谱分析的约占20%，而80%则需用液相色谱来分析。

液相色谱和气相色谱在基本理论方面没有显著不同，它们之间的重大差别在于作为流动相的液体与气体之间的性质的差别。

液相色谱分析原理(1)、液相色谱分析的流程：由泵将储液瓶中的溶剂吸入色谱系统，然后输出，经流量与压力测量之后，导入进样器。

被测物由进样器注入，并随流动相通过色谱柱，在柱上进行分离后进入检测器，检测信号由数据处理设备采集与处理，并记录色谱图。

废液流入废液瓶。

遇到复杂的混合物分离(极性范围比较宽)还可用梯度控制器作梯度洗脱。

这和气相色谱的程序升温类似，不同的是气相色谱改变温度，而HPLC改变的是流动相极性，使样品各组分在佳条件下得以分离。

(2)、液相色谱的分离过程：同其他色谱过程一样，HPLC也是溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换过程。

它借溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同而引起的排阻作用的差别使不同溶质得以分离。

开始样品加在柱头上，假设样品中含有3个组分，A、B和C，随流动相一起进入色谱柱，开始在固定相和流动相之间进行分配。

分配系数小的组分A不易被固定相阻留，较早地流出色谱柱。

分配系数大的组分C在固定相上滞留时间长，较晚流出色谱柱。

组分B的分配系数介于A，C之间，第二个流出色谱柱。

若一个含有多个组分的混合物进入系统，则混合物中各组分按其在两相间分配系数的不同先后流出色谱柱，达到分离之目的。

不同组分在色谱过程中的分离情况，首先取决于各组分在两相间的分配系数、吸附能力、亲和力等是否有差异，这是热力学平衡问题，也是分离的首要条件。

其次，当不同组分在色谱柱中运动时，谱带随柱长展宽，分离情况与两相之间的扩散系数、固定相粒度的大小、柱的填充情况以及流动相的流速等有关。

高效液相色谱法测定当归龙荟丸中栀子苷的含量
张峰;梁艳
【期刊名称】《中国中医药现代远程教育》
【年(卷),期】2011(009)011
【摘要】目的建立高效液相色谱法测定当归龙荟丸中栀子苷的含量.方法Agela Promosil C18(250 mm×4.6mm,5μm)分析柱,流动相为乙腈-水(14:86),流速为1.0mL·min-1,检测波长为240nm.结果栀子苷与其他组分分离良好.线性范围为0.101μg～1.010μg,相关系数r=0.9998,平均加样回收率为98.48％(RSD=0.65％).结论本法简便、准确可靠,可用于该药的质量控制.
【总页数】2页(P161-162)
【作者】张峰;梁艳
【作者单位】河南开封市食品药品检验所,开封475000;河南省医药学校,开封475000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.高效液相色谱法测定清开灵注射液中栀子苷含量不确定度的评定 [J], 陈佳;陈骁鹏;郭玮璐
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HPLC-ELSD法测定硫酸核糖霉素的含量和有关物质刘海玲;曹晓云【摘要】目的建立硫酸核糖霉素含量和有关物质的分析方法,为该类药提供质量控制标准.方法应用高效液相色谱-蒸发光散射检测器(HPLC-ELSD)法测定硫酸核糖霉素含量和有关物质.采用Agela Technologies Venusil ASB-C18 15nm (250mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为0.11mol/L七氟丁酸酐混合溶液[称取七氟丁酸酐45.1g,置1000mL量瓶中,加乙腈-四氧呋喃-水(8∶5∶87)混合溶液溶解并稀释至刻度,摇匀],流速为0.8mL/min,漂移管温度为110℃,雾化气体流速为3.0L/min.结果在选定色谱条件下,核糖霉素和有关物质分离良好.核糖霉素在0.34～2.68μg范围内进样量对数与峰面积对数间呈较好的线性关系(r=0.9988),最低检出量为68ng.结论方法快速、简便,结果准确可靠,重现性好,可用于含量测定和有关物质检测.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2010(035)009【总页数】4页(P684-687)【关键词】硫酸核糖霉素;高效液相色谱;蒸发光散射检测器;含量测定;有关物质【作者】刘海玲;曹晓云【作者单位】天津市药品检验所,天津,300070;天津市药品检验所,天津,300070【正文语种】中文【中图分类】R927.2硫酸核糖霉素为氨基糖苷类广谱抗生素，由于氨基糖苷类抗生素无特征紫外吸收，不能直接采用传统HPLC-UV法测定，采用衍生化方法测定试验结果影响因素多，无法明确判断检测到的杂质来源，限制了衍生化法在氨基糖苷类抗生素有关物质检测方面的应用。

蒸发光散射检测器(ELSD)为不含发色团化合物的分析提供了一种新的检测手段，其响应值与被测物质量成正比，不依赖于被测物质的光学性质[1]。

近年来陆续有文献报道用蒸发光散射检测器进行氨基糖苷类抗生素的质量分析[2-5]。

高效液相色谱法测定注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量沈庆钦;刘军;张长军;贾可;刘杰;苏芳【摘要】目的：建立注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量测定方法。

方法：采用高效液相色谱法，C18色谱柱，以辛烷磺酸钠磷酸盐缓冲溶液-甲醇（90∶10）为流动相；DAD 检测器，210nm 波长处测定。

结果：还原型谷胱甘肽与其他成分均完全分离，在考察的浓度范围内线性关系良好（r ＝0．9997），回收率符合规定。

结论：该方法专属性好，准确度高，可作为注射用法罗培南钠中还原型谷胱甘肽的含量测定方法。

%Objective :An accurate method to determine the content of reduced glutathione in faropenem sodium forinjection .Methods :A C18 column was used for the separation .The mobile phase was octane-sulfonic acid sodium - phosphate buffered solution and methanol (90 ∶ 10) .The wavelength of DAD was 210nm .Results :The linearity was good in each range of concentration (r = 0.9997) .The recoveries were all accorded with prescribe .Conclusion :The method is accurate and specific for determination of reduced glutathione in faropenem sodium for injection .【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2014(000)005【总页数】4页(P50-53)【关键词】还原型谷胱甘肽;高效液相色谱法;含量;注射用法罗培南钠【作者】沈庆钦;刘军;张长军;贾可;刘杰;苏芳【作者单位】鲁南制药集团股份有限公司，临沂 276005; 山东新时代药业有限公司，费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司，临沂 276005; 山东新时代药业有限公司，费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司，临沂 276005; 山东新时代药业有限公司，费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司，临沂 276005; 山东新时代药业有限公司，费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司，临沂 276005; 山东新时代药业有限公司，费县 273400;鲁南制药集团股份有限公司，临沂 276005;山东新时代药业有限公司，费县 273400【正文语种】中文法罗培南钠(Faropenem Sodium)是一种新型的青霉烯类抗生素，既可以制成口服制剂又可供注射用，对需氧及厌氧性菌均显示出较高的活性，可通过阻止细菌细胞壁合成而显现抗菌、杀菌作用，具有独特的药动学性质，是临床上治疗各种敏感菌所致的感染性疾病的有效药物[1-3]。

液相色谱基本知识一、液相色谱原理液相色谱是一种基于不同物质在固定相和流动相之间的分配平衡原理的分离技术。

当流动相流经固定相时，不同物质在固定相中的保留时间不同，从而实现分离。

通过选择合适的固定相和流动相，以及调整流动相的速度，可以实现对不同物质的分离和纯化。

二、液相色谱种类根据固定相的不同，液相色谱可以分为硅胶柱色谱、氧化铝柱色谱、活性炭柱色谱等多种类型。

根据流动相的不同，液相色谱可以分为正相色谱和反相色谱。

正相色谱中，固定相的极性大于流动相的极性；反相色谱中，固定相的极性小于流动相的极性。

三、液相色谱操作步骤1. 样品准备：将待分离的样品进行适当处理，以便于后续的分离和纯化。

2. 装柱：将固定相装入色谱柱中，确保固定相填充均匀。

3. 平衡：在流动相中平衡色谱柱，使固定相和流动相充分接触。

4. 进样：将待分离的样品加入色谱柱，开始分离过程。

5. 洗脱：使用流动相洗脱样品中的各组分，并收集洗脱液。

6. 检测：对收集到的洗脱液进行检测，确定各组分的含量和纯度。

四、液相色谱应用领域液相色谱在多个领域有着广泛的应用，如医药、生物、环保、食品等。

在医药领域，液相色谱可用于药物的分离和纯化；在生物领域，液相色谱可用于蛋白质、核酸等生物大分子的分离和纯化；在环保领域，液相色谱可用于污染物的分离和检测；在食品领域，液相色谱可用于食品添加剂、农药残留等的检测。

五、液相色谱优缺点1. 优点：液相色谱具有分离效果好、分离速度快、适用范围广等优点。

同时，液相色谱还可以与质谱等检测手段联用，提高检测灵敏度和准确性。

2. 缺点：液相色谱需要使用有机溶剂作为流动相，可能对环境和人体健康造成一定影响。

此外，液相色谱的设备成本较高，操作复杂度也相对较高。

六、液相色谱仪器设备液相色谱常用的仪器设备包括高效液相色谱仪、紫外可见分光光度计、质谱仪等。

其中，高效液相色谱仪是实现液相色谱分离的核心设备，它包括泵、进样器、色谱柱、检测器等部分。

反相液相色法谱测定 10 种有机酸马淑伟 郭亦如 杨定忠（Agela Technologies 天津 300457）摘要： 本文建立了一种利用高效液相色谱同时分析 10 种有机酸的方法， Venusil MP C18 (5μm 4.6 在mm x 250 mm ) 色谱柱上,0.1mol/L K2HPO4(pH2.05 )溶液和乙腈做梯度洗脱,流速为 1.0mL/min,柱温为30 ℃,紫外检测波长为 210nm 时,可以很较好地分离常见的 10 种有机酸。

关键词：反相液相色谱 有机酸1实验部分1. 1 仪器与试剂高效液相色谱系统:岛津LC-10A XMTG-8000 型柱温箱 酸度计(PHS-25) 分析纯磷酸、磷酸氢二钾(天津市化学试剂三厂)1. 2 色谱条件色谱柱: Venusil MP C18 (5μm,4.6mmi.d. ×250mm) 流 速:1.0mL/min进样量:20μL 波 柱 长:210nm 温:30 ℃流动相: 缓冲盐：13.6 克磷酸氢二甲溶解到 1000ml 水中，用磷酸调 pH=2.05，过滤； 梯度条件： 时间（min） 0 18 30 乙腈（%） 0 0 20 缓冲盐（%） 100 100 80博纳艾杰尔科技400-6068-099service@ 2 结果与讨论 2. 1 检测波长的选定用200～350nm (紫外) 光对10种有机酸的标准溶液进行扫描,结果表明10种有机酸均在210nm附近 有较大的吸收,重复性好,不受流动相中其他物质的干扰,故以下实验均采用210nm 波长进行检测。

2. 2 流动相浓度的选择将流动相分别配成0.05 、0.10 、0.15 和0.20mol/L 的K2HPO4 溶液(用H3PO4 调pH 值为2.05 ) ,对 各有机酸进行分离。

结果表明: 逐步增加流动相中磷酸盐的浓度,有机酸均能得到分离,且不影响分离效 果，但考虑到色谱柱的使用寿命，最终选定0.10 mol/L.2. 3 流动相pH 值的选择以不同pH 值(用H3PO4 调节)的0.10mol/L的K2HPO4溶液作流动相,测定各有机酸的保留时间,结果 显示流动相pH值对有机酸的分离影响很大。

Accela 高效液相色谱(HPLC)Accela U-HPLC是为粒径小于2μm的色谱柱量身定制的。

它还是一个二合以的系统－－即包含了常规HPLC的能力，又具备了在15000psi的超高压条件下工作的能力。

产品概览：由于使用者可以根据自己的需要灵活选择分析柱，而不必考虑系统压力问题。

Accela U-HPLC使分析工作变得更快、更简便、更可靠。

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§在线直接注射血浆、尿、食品和其他复杂的基质。

agilent_1200型高效液相色谱仪功能简介与操作规程工作原理色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationa ry phase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。

又称为色层法、层析法。

使用固体吸附剂,被分离组分在色谱柱上分离原理是根据固定相对组分吸附力大小不同而分离。

分离过程是一个吸附-解吸附的平衡过程。

常用的吸附剂为硅胶或氧化铝,粒度5~10μm。

适用于分离分子量200~1000的组分,大多数用于非离子型化合物,离子型化合物易产生拖尾。

常用于分离同分异构体。

高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上,引用了气相色谱的理论,在技术上,流动相改为高压输送(最高输送压力可达4.9′107Pa);色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成,从而使柱效大大高于经典液相色谱(每米塔板数可达几万或几十万);同时柱后连有高灵敏度的检测器,可对流出物进行连续检测。

应用范围主要用于有机化合物、有机污染物、蛋白质、多肽等的分离、定性鉴定和定量分析。

注意事项1 氘灯是易耗品,应最后开灯,不分析样品即关灯,不宜频繁开关灯;2 开机时,打开排气阀,95%水,泵流量5ml/min,若此时显示压力>10bar,则应更换排气阀内玻璃料。

3流动相使用前必须过滤,不要使用多日存放的蒸馏水(易长菌),一般三日一换。

4流动相使用前必须进行脱气处理,可用超声波振荡10- 15min。

5配制90%水+10%异丙醇,以每分2—3滴的速度虹吸排出,进行seal-wash,溶剂不能干涸。

6当使用缓冲溶液时,要用水冲洗手动进样器进样口,同时搬动进样阀数次,每次数毫升。

使用方法(一)1200/化学工作站开机顺序(LAN卡联接)1 打开计算机,进入Bootp;2 打开主机各模块电源(不分先后),等待机器自检完毕后(“滴”的一声),再双击“INSTRUMENT 1 ONLINE ”图标,进入化学工作站;3 调出一个分析方法,检查各参数的设置;4 旋开泵上的排气阀,将工作站中的泵流量设到5ml/min,溶剂A设到100%;5 在工作站中打开泵,排出管线中的气体数分钟;6 依此切换到B、C、D溶剂分别排气;7 将工作站中的泵流量设到1ml/min,多元泵则再设定溶剂配比,如A=80%,B=20%;8 关闭排气阀,检查柱前压力;9 待柱前压力基本稳定后,打开检测器灯,观察基线情况;(二)数据采集方法编辑1 由运行控制进入样品信息…设定操作者姓名,样品数据文件名等。

高效液相色谱快速测定水果中的３种苯并咪唑类杀菌剂摘要用高效液相色谱仪(hplc)快速测定水果中苯并咪唑类农药(多菌灵、噻菌灵和甲基硫菌灵)残留量，样品经乙腈萃取后盐析，提取液经psa和ods吸附剂加无水硫酸镁净化后，过0.45μm滤膜，直接用hplc-pda(二极管阵列检测器)分离测定，外标法定量。

采用乙腈/0.02mol/l磷酸缓冲盐(ph值7.4)=28/72体系为流动相，多菌灵、噻菌灵和甲基硫菌灵在苹果、梨、葡萄、香蕉、芒果、桔子等6种水果中杂质干扰少，分离度较好，灵敏度高，测定结果准确可靠。

最低检出限分别为：多菌灵0.045 5mg/kg，噻菌灵0.042 1mg/kg，甲基硫菌灵0.068 6mg/kg。

在添加0.2～1.0mg/kg浓度水平的回收率试验中，多菌灵、噻菌灵和甲基硫菌灵的平均添加回收率分别为82.0%～102.4%、87.6%～104.8%和79.6%～112.5%，rsd 均在10%以下，满足残留分析的要求。

关键词苯并咪唑类农药；水果；高效液相色谱仪；残留；测定中图分类号s66；s482.2 文献标识码a 文章编号1007-5739(2009)01-0114-03苯并咪唑类杀菌剂是一类高效、低毒和广谱的内吸性杀菌剂，兼具预防和治疗作用。

该类杀菌剂常用于作物生长后期或采后的病害防治，在农产品中检出率较高，蔬菜、水果中尤为突出[1，2]。

残留于果蔬中的苯并咪唑类杀菌剂对人体有一定的毒性。

因此，检测其在果蔬中残留量，对保证人体健康有重要意义。

多菌灵、噻菌灵是苯并咪唑类杀菌剂中的代表性农药，尤其是多菌灵，是苯菌灵、氰菌灵、硫菌灵及醚菌灵等多种农药的共同降解产物。

实际上，在ph值接近中性时，果实上的苯菌灵在分析过程中几乎完全转化成多菌灵，而甲基硫菌灵仅有少量转化成多菌灵，故分析苯并咪唑类杀菌剂残留时，只需测定多菌灵、噻菌灵和甲基硫菌灵即可[3]。

近年来，关于苯并咪唑类杀菌剂在不同作物中的残留测定已有报道[4-10]，但样品前处理均需经过液—液萃取或固相萃取富集、净化，比较复杂。

用高效液相色谱法测定双氯芬酸钠的杂质北方药学2011年第8卷第1期3用高效液相色谱法测定双氯芬酸钠的杂质黄红深(广州市药品检验所广州510160)摘要:目的:建立双氯芬酸钠原料有关物质检查的方法.方法:采用高效液相色谱法,选择十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇__o.12%冰醋酸溶液(6O:4O)为流动相;检测波长240nm.结果:双氯芬酸钠在1~lO~g/ml的范围内呈线性,线性方程为:Y=25803x+3632.4,r=0.9996(n=5),样品溶液在光,热,酸,碱条件下均不稳定.结论:本方法稳定,操作简单,重现性好,可以有效控制双氯芬酸钠中有关物质的量.关键词:高效液相色谱法双氯芬酸钠杂志中图分类号:R927.1文献标识码:B文章编号:1672—8351【2011)01-0003-02 Abstract:0biective:ToestabhshedanHPLCmethodtodeterminetherelatedsubstancesindic lofenacsodium.Method:Acolumn packedwithoctadecylsflanebondedsilicagelwasusedandthemobilephaseisthemixtureof methan0】—_o.12%aceticacidsolution(60:40)andthedeletionwavelengthis240nm.Result:Thelinearrangeofdiclofenaesodiumi sl~lO~g/ml,.rheregressionequa—tionfordiclofenacsodiumisY=25803x一3632.4,I=0.9996(n=5).Thetestsolutionisunstableunderthelight,heat,acidandalkaliBe circumstance.Conlusion:111emethodisstable,simpleandrepeatableandCanbeusedforqu alitycontroloftherelatedsubstancesindielofenacsodium.双氯芬酸钠为解热镇痛及非甾体抗炎镇痛药,由瑞士汽巴——嘉塞药厂创制,是该公司的主要产品之一.自1974年上市以来,德,法,英,13等国相继生产,我国于1981年开始研制成功后被广泛使用.其主要靠抑制环氧合酶减少前列腺素的合成,以及一定程度上抑制脂氧酶而减少白三烯,缓激肽等产物的生成而发挥解热镇痛及抗炎作用,口服吸收快,完全.与食物同服会降低吸收率.血药浓度空腹服药平均1~2小时达峰值,与食物同服时6小时达峰值,血浆浓度降低.药物半衰期约2小时.血浆蛋白结合率为99%.在乳汁中药浓度极低而可忽略,在关节滑液中,服药4小时,其水平高于当时血清水平并可维持12小时.大约50%在肝脏代谢,40～65%从肾排出,35%从胆汁,粪便排出,1.2～2小时排泄完.长期应用无蓄积作用.不良反应有:①胃肠反应:约见于l0%服药者,主要为胃不适,烧灼感,返酸,纳差,恶心等,停药或对症处理即可消失.其中少数可出现溃疡,出血,穿孔;②神经系统表现有头痛,眩晕,嗜睡,兴奋等;③引起浮肿,少尿,电解质紊乱等不良反应,轻者停药并相应治疗后可消失;④其他少见的有血清转氨酶一过性升高,极个别出现黄疸,皮疹,心律不齐,粒细胞减少,血小板减少等,停药后均可恢复.1仪器与试药1.1仪器:岛津LC一1OAT液相色谱仪;梅特勒MT一5;XS105电子天平;甲醇为色谱纯,水为纯化水,其余试剂为分析纯.1.2试药:双氯芬酸品(中检所颁发:~-:100334-200302).2方法与结果2.1色谱条件,色谱柱:AgelaTechnologiesVenusilMPC18(4.6mmx 250mm,5lxm)柱;流动相:甲.12%冰醋酸溶液(60:40);流速:1.0ml/min;检测波长:240nm;进样量:20.2.2供试品溶液的制备:取本品适量,精密称定,加甲醇溶解并制成每lml中含lmg的溶液作为供试品溶液(临用新制).2.3对照溶液的制备:精密量取供试品溶液适量,用甲醇稀释成每lml中含2g的溶液作为对照溶液.2.4系统适用性溶液的制备:取羟苯乙酯,羟苯丙酯与双氯芬酸钠对照品适量,加甲醇溶解并稀释制成每lml中含2.8g, 4.0lxg与2.0p~g的混合溶液,作为系统适用性试验溶液.取系统适用性试验溶液20txl,注入液相色谱仪,调节检测灵敏度, 使双氯芬酸钠峰的峰高为满量程的20%,双氯芬酸钠峰的保留时间约在2O分钟,羟苯乙酯峰与羟苯丙酯的分离度应大于5.0.色谱图见图1.图1双氯芬酸钠有关物质检查系统适用性色谱图2.5方法的专属性考察:取双氯芬酸钠对照品适量,加甲醇配成每lml中含lmg的溶液,取5ml置于试管中加热30分钟进行加热破坏试验;取5ml置试管中,加10%盐酸溶液2滴,加热30分钟后用10%氢氧化钠溶液调为中性作为酸性破坏试验;取5ml置试管中,加10%氢氧化钠溶液2滴,加热30分钟后加10%盐酸溶液调为中性作为碱性破坏试验;取5ml置试管中,加30%过氧化氢2滴,加热30分钟作为氧化破坏试验; 取5ml置石英吸收池中,在紫外灯366nm下光照1小时作为光照破坏试验.各取上述溶液201xl注人液相色谱仪,记录色谱图如下;产生的杂质峰均可有效分离,表明方法的专属性强,见图2.4北方药学2011年第8卷第1期.r—一_f～_r厂__r—jlIl【lB{I.1}li1r盥榔…一∞五∞35∞45啪f]广…一一一r厂一～一～];Dl一萎l051015∞25∞3543Mrut~{lEl社一～一{u51Ub毋.Mrt/~图2方法的专属性考察结果A.加热破坏试验B.酸性破坏试验C.碱性破坏试验D.氧化破坏试验E.光照破坏试验2.6线性试验:精密称取双氯芬酸钠对照品适量,用甲醇溶解并稀释成每lml含1.O;2.0;5.0;8.0;10.0g的溶液,依法测定,以浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线图,计算回归方程:Y=25803x+3632.4,r=O.9996(n=5).2.7精密度试验:取线性试验2溶液,进样6次,RSD=I.5%. 2.8稳定性试验:日本药局方用流动相(含醋酸)为溶剂,双氯芬酸钠易分解,改用甲醇为溶剂,溶液稳定,比较两溶剂的稳定性,以保留时间约为15分钟的降解产物的峰面积变化为指标,考查至9小时,结果见表1.表1双氯芬酸钠稳定性比较表2.9检出限试验:按上述色谱条件,以S/N为3:1计算,结果最低检测限为O.0861~g/mlo2.1O样品测定结果:在测定的6批样品中,测定结果见表2,样品色谱图见图3.表2样品测定结果图3双氯芬酸钠有关物质检查样品溶液色谱图3讨论3.1检测波长的选择:双氯芬酸钠在水,甲醇,乙醇,流动相中的最大吸收通常在276～284nm波长处,英国药典的检测波长为254nm,日本药局方的检测波长为24Ohm,经比较,虽然两药典所用的流动相不同,但双氯芬酸钠在两波长处的响应几乎相同,而且几乎都在吸收的谷中.杂质在两检测波长处的响应应是相同的.3.2供试品溶液的稳定性:Et本药局方用流动相(含醋酸)为溶剂,双氯芬酸钠易分解,改用甲醇为溶剂,比较两溶剂的稳定性,以保留时间约为15分钟的降解产物的峰面积变化为指标,考查至9小时,可见甲醇为溶剂的溶液稳定,故将溶剂改为甲醇.3.3样品测定结果:经测定6批样品,单个最大杂质峰面积均不大于对照溶液双氯芬酸钠的峰面积(0.2%),总杂质峰面积均不大于对照溶液中双氯芬酸钠峰面积的2.5倍(0.5%).。

agela technologiesc18压缩系数AGELA Technologies C18压缩系数引言：AGELA Technologies是一家专业从事化学分析和分离技术的公司。

在分析和分离方面，该公司致力于提供高效和可靠的方法和工具。

其中，AGELA Technologies公司生产的C18柱被广泛应用于液相色谱分析中，具有出色的分离性能和较高的稳定性。

C18柱是一种疏水性的柱材，在反相液相色谱中具有独特的应用价值。

本文将重点讨论C18压缩系数的概念和相关特性。

第一部分：C18柱及其应用1. C18柱简介：C18柱是一种常见的反相液相色谱柱，其固定相由18个碳原子的链状分子组成。

这种链状分子具有疏水性，能够与非极性化合物发生相互作用，并将它们从样品矩阵中分离出来。

2. C18柱的应用领域：C18柱广泛应用于生物制药、化学制剂、环境监测等领域。

它能够有效地分离和定量含有脂溶性化合物（如药物、天然产物等）的样品。

第二部分：压缩系数的概念与含义1. 压缩系数的定义：C18柱中的压缩系数是一种度量溶剂渗透强度和柱子填充性能的参数。

它是柱子在渗透剂渗透过程中的体积变化与冲击传递过程中的压力变化之间的比值。

2. 压缩系数的意义：压缩系数是评估柱体性能和流动性的重要指标，能够反映柱子在压力变化下的稳定性。

较低的压缩系数意味着柱子在高压下，填充物的体积不易受到影响，具有更好的稳定性和更高的分离效率。

第三部分：压缩系数的测定方法1. 常见测定方法：常用的测定C18柱压缩系数的方法包括静态方法和动态方法。

其中，静态方法基于溶质在静止柱中与固相相互作用的特性，动态方法则是通过渗透剂在流动过程中对柱子进行实时监测。

2. 相关影响因素：测定压缩系数时，柱子的填充度、温度、流速和液相性质等因素都会对测定结果产生一定程度的影响。

第四部分：C18压缩系数的优势及影响因素1. 优势：C18柱常具有较低的压缩系数，能够在保持分离性能的同时减少柱填充物的体积变化。

grace制备液相说明书
一、产品简介
Grace制备液相是一种高效、高纯度的液相色谱填料，具有优异的稳定性和分离性能，广泛应用于生物医药、环境监测、食品安全等领域。

本说明书将详细介绍Grace制备液相的使用方法及注意事项。

二、操作步骤
1.样品准备：将待分离的样品进行适当处理，如溶解、稀释等，确
保样品能够与Grace制备液相填料兼容。

2.装柱：将Grace制备液相填料填充到色谱柱中，确保填充均匀、
密实。

可以采用干法或湿法装柱。

3.平衡：在流动相通过色谱柱的过程中，使柱子达到平衡状态。

可
以采用适当比例的流动相进行冲洗。

4.进样：将待分离的样品加入到色谱柱中，注意控制进样量。

5.洗脱：采用适当比例的流动相进行洗脱，控制洗脱速度和流量。

在洗脱过程中，可以适时收集洗脱液，以获得所需的组分。

6.检测：采用适当的方法对洗脱液中的组分进行检测，如紫外可见
光谱法、质谱法等。

7.清洗与维护：在完成分离后，对色谱柱进行清洗和维护，以延长
使用寿命。

三、注意事项
1.在使用Grace制备液相时，应确保实验操作符合相关法律法规和
安全规范。

2.在装柱和平衡过程中，应注意避免填料进入色谱柱的其他部分，
以免影响分离效果。

3.在进样和洗脱过程中，应注意控制流速和流量，避免对色谱柱造
成过大压力。

4.在检测过程中，应注意对仪器进行校准和维护，以保证检测结果
的准确性和可靠性。

5.在清洗和维护过程中，应注意避免对色谱柱造成损坏。

气相色谱与液相色谱的原理气相色谱（Gas Chromatography，GC）和液相色谱（Liquid Chromatography，LC）是两种常用的分离技术，它们分别利用气态和液态的分离介质来实现对混合样品中组分的分离和定量。

气相色谱的原理：气相色谱是利用气体作为流动相，通过样品与固定相之间的相互作用来实现分离的一种色谱技术。

其主要原理可以分为样品的蒸汽化、分配平衡、分离和检测四个步骤。

首先，样品溶解于挥发性溶剂中，通过加热蒸发，将待测组分转化为气体态的状况。

然后，气体进入柱子，柱子内涂有一种固定相（也称为色谱填充物），其特定表面性质可以选择性地吸附或减缓待测组分的运动。

接着，在色谱柱中，在气体的驱动下，待测组分依据其与固定相的相互作用产生不同的平衡分配，从而在柱子内发生各种化学反应，如吸附、弱化学反应和解吸。

这些相互作用和反应使得待测组分在固定相上以不同的速率和时间进行迁移。

最后，在色谱柱的出口处，采用适当的检测器可以对待测组分进行定量分析。

常见的检测方法包括火焰离子化检测器（FID）、电子捕获检测器（ECD）和质谱检测器（MS）等，这些检测器可以根据待测组分的特性进行选择性的检测和定量。

液相色谱的原理：液相色谱是利用流动相通过固定相将待分离的混合物组分进行分离的一种色谱技术。

其原理可以分为样品的溶解、分配、分离和检测四个步骤。

首先，样品在压力作用下溶解于流动相中。

流动相可以是有机溶剂或水溶液等。

样品与流动相相互作用产生平衡，而流动相中的组分溶解度不同，会导致待测组分在流动相中表现出不同的溶解度。

接着，通过色谱柱，柱子内涂有固定相。

固定相可以是多种材料，如硅胶、C18等。

待测组分在固定相上依据其与固定相的相互作用性质，以不同的速率在色谱柱中进行迁移。

有时会通过改变流动相的成分和性质来调整固定相的选择性。

最后，在柱子出口处使用适当的检测器来对分离后的待测组分进行定量分析。

常见的检测器包括紫外-可见光谱检测器（UV-Vis）、荧光检测器、质谱检测器等，它们根据待测组分的特性选择不同的检测方法。

赛默飞液相色谱质谱
赛默飞液相色谱质谱（Agilent Liquid Chromatography Mass Spectrometry，简称LC-MS）是一种分析技术，它结合了液相
色谱（LC）和质谱（MS）两种仪器的特点和优势。

赛默飞液相色谱质谱主要包括以下步骤：样品预处理、样品进样、色谱分离、质谱检测和数据分析。

首先，需要对样品进行预处理，包括样品溶解、提取、洗脱等步骤，以便提取目标化合物并去除干扰物。

接着，经过样品进样，将样品注入到液相色谱柱中。

液相色谱柱通过对不同组分的亲和性差异进行分离，使得目标化合物能够逐渐从样品中分离出来。

然后，分离出的化合物进入质谱系统进行检测。

质谱可以将分离出的化合物按照其分子量、结构等特性进行精确测定，包括利用质谱的离子化技术将化合物转化为离子，并通过质谱仪器对离子进行分析，得到质谱图谱。

最后，通过对质谱图谱进行数据分析和解释，可以确定样品中的目标化合物，包括其分子结构、相对含量等信息。

赛默飞液相色谱质谱广泛应用于食品安全、环境监测、药物代谢研究等领域。

其优点包括高灵敏度、高分离能力、高选择性和较低的样品准备成本等。

因此，它成为了化学、生物、制药、环境等科学领域中常用的分析方法之一。

液相色谱知识原理液相色谱（Liquid Chromatography，LC）是一种基于溶液通过固定相进行分离的色谱技术。

液相色谱广泛应用于化学、生物、医药和环境等领域，可对复杂样品进行分离和定性、定量分析。

液相色谱的原理包括四个基本步骤：压力或重力注射进样、样品分离、组分检测和数据处理。

液相色谱的原理可分为两个方面：固定相和流动相。

固定相指的是涂覆在色谱柱内壁的固定介质，主要用于对样品进行分离。

流动相则是被推动通过色谱柱的溶剂，也称为移动相。

固定相的选择是液相色谱分离的关键。

常用的固定相是固定在色谱柱内壁上的吸附剂，如硅胶、C18硅胶等。

这些吸附剂具有不同的极性和亲水/亲油性，可用于分离样品中的不同组分。

固定相也可以是离子交换柱，用于分离带电离子。

流动相的选择取决于样品的特性和分离条件。

它可以是有机溶剂（如甲醇、乙醇等）和水的混合物，也可以是含有缓冲剂和离子对试剂的溶液。

流动相的选择应使得样品中的组分在色谱柱中得以分离并得到适当的保留时间。

液相色谱的分离原理基于物质在固定相和流动相之间的分配行为。

当样品进入色谱柱时，固定相上的吸附剂会与样品中的化学物质发生相互作用。

化学物质在固定相表面上吸附的速度会受到如温度、溶剂浓度、样品pH值等因素的影响。

在液相色谱中，样品溶解在流动相中形成一个移动流动液。

这个移动流动液会在固定相上形成一个或多个流动液前线，流动液前线能退火样品分子的吸附速率。

当样品分子到达不同程度的吸附速度时，它们会得到分离。

这种分离可以通过调整溶剂比例、固定相性质和样品分子结构等方法进行优化。

组分检测是液相色谱的另一个重要步骤。

常用的检测方法包括紫外可见光谱、荧光检测、电化学检测等。

紫外可见光谱检测是最常用和常见的检测方法，它基于化合物吸收可见光和紫外光的特性进行分析。

数据处理是液相色谱实验的最后一步。

数据处理的目的是对分离出的组分进行定量分析和定性分析。

常用的数据处理方法包括校正曲线法、内标法等。