沙棘的研究进展

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沙棘的研究进展

标签: 沙棘;提取;药理作用

沙棘(Hippophae rhamnoides L.)又名醋柳、酸刺、黑刺,为胡颓子科(Elaeagnaceae)酸刺属的灌木或小乔木。自20世纪80年代中期以来,我国开始重视沙棘的综合开发和加工利用,有关沙棘的研究资料、论著等日益增多。本文就近年来沙棘的化学成分、提取工艺、药理作用的研究进展进行综述,为沙棘的深入研究和应用提供依据。

1化学成分

沙棘的化学成分主要有黄酮类、萜类及甾体类、挥发油类、有机酸、酚类、糖类等,在医药、保健、食品及饲料等领域具有广阔的发展前景。

1.1黄酮成分

沙棘的果实、叶子和果渣中均有数量相当可观的黄酮类化合物,大多数与糖结合成苷元及其苷类化合物。利用硅胶柱和葡聚糖凝胶柱层析,阮栋梁等[1]从沙棘叶子中分离并鉴定出4’,5,7-三羟基黄酮(芹菜素)和3,4’,5,7-四羟基黄酮(山奈酚)。此外,沙棘叶中还含有4,4’-二羟基-2-甲氧基查耳酮,异鼠李素-7-O-鼠李糖-3-O-葡萄糖苷、异鼠李素、3’,4’,3,5,7-五羟基黄酮(槲皮素)[2-4]。杨亮等[5]分离出的山萘素-3-β-D-(6’’-对羟基桂皮酰基)葡萄糖苷为首次从该属植物中得到的化合物。

1.2三萜、甾体化合物

采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析进行分离,通过理化常数测定和波谱技术进行结构鉴定,路平等[6]从中国沙棘果皮中分离并鉴定了齐墩果酸及熊果酸,这两个化合物为首次从该植物中得到。此外,沙棘中还含有2α-羟基乌苏酸、胡萝卜苷、△5-麦角甾烯醇、△7-豆甾烯醇、β-谷甾醇和豆甾醇[3,7,8]。

1.3有机酸、酚类

4-羟基苯甲酸、γ-N-(2-呋喃基-甲基-)丁胺酸、3,4-二羟基苯甲酸、2α-OH-熊果酸[8,9]。

1.4挥发油

杜然等[10]采用超临界CO2萃取法从沙棘中提取挥发油,气相色谱-质谱联用技术对其化学成分进行分析,并用归一化法确定各化学成分的相对百分含量。结果从沙棘挥发油中共提取、鉴定出14种化合物,含量最高的组分为亚油酸(23.91%),其次为油酸(24.09%),再次为棕榈酸(21.26%)、三十二烷(8.97%)和硬

脂酸(6.18%)。相对含量较高的还有棕榈油酸(2.89%)、十八碳烯酸甲酯(1.92%)和亚麻酸(1.35%)。

2提取

2.1黄酮成分

沙棘叶中富含黄酮类化合物,总黄酮的提取方法主要有水浸提法、碱水浸提法以及溶剂回流提取法。

2.1.1溶剂法沙棘总黄酮的提取方法通常有水提和乙醇提取两种方法,未见其他溶剂提取的报道,因此,有必要对沙棘叶总黄酮的提取方法进行系统研究,为沙棘叶总黄酮的工业化生产提供理论依据。

以浸膏得率和总黄酮含量为评价指标,利用正交试验L9(34)优选沙棘叶总黄酮提取工艺,在优选水提取工艺条件时,对浸膏得率、总黄酮含量两个评价指标分别赋予不同的权重,考虑到总黄酮含量的重要性和生产成本,将浸膏得率的权重定为0.4,总黄酮含量的权重定为0.6,用综合评分优选最佳工艺为8倍量水提取2 h,共提取2次;在优选醇沉工艺条件时,以浸膏得率×总黄酮含量计算综合评分,用综合评分优选最佳工艺为提取药液浓缩至相当于原生药1.0 g/ml,缓慢加入6倍量80%乙醇溶液。通过此工艺得到的平均浸膏得率为14.84%,平均总黄酮含量为6.54%(n=3),优选的沙棘总黄酮提取工艺可为新药研究和工业化制剂生产提供参考[11]。

以甘肃漳县沙棘叶总黄酮含量为指标,采用正交试验对总黄酮的提取工艺进行研究。得到的最佳工艺参数为:乙醇浓度70%,提取温度80℃,料液比1∶14,提取时间为2 h,该工艺条件可使黄酮提取率达97%以上[12]。

2.1.2微波提取微波因能促进反应的高效性和强选择性,具有操作方便、省时、节能等特点,近年来微波辅助萃取技术开始应用于天然产物的萃取,并备受关注[13]。

以体积分数70%的乙醇为萃取液,用单因素分析与正交试验相结合的方法确定了微波萃取黄酮的优化条件:微波功率560 W,萃取时间6 min和料液比(g/ml)1∶20,70%的乙醇溶液为萃取液。测得样品沙棘叶中黄酮类化合物的含量为3.068 mg/g,回收率为99.7%[14]。

以水为介质,对沙棘叶进行微波处理提取黄酮,通过正交试验确定微波提取的最佳工艺条件为:微波功率360 W,提取时间3 min,料液比1∶30,此时提取率为1.21%。其提取效果与常规水浸提法比较表明,微波提取效率大大提高。微波能够提高水浸提黄酮的效率,而且水提法在溶剂成本上比乙醇提取法低,且水安全可靠、不污染[15]。

2.1.3超声循环提取超声波技术在天然产物提取中已显示出巨大的优势,其

原理是利用超声波产生的强烈振动、空化效应、搅拌作用等可以加速植物有效成分进入溶剂,提高提取效率,缩短提取时间,简化操作步骤。而超声循环技术是在料液循环流动的过程中施加超声波,是一种提取天然产物的新技术。

将超声循环提取法与普通超声提取法、索氏提取法相比较[16],结果见表1。

表1 超声提取与索氏提取的对比

由表1可见,利用超声循环提取法,提高了沙棘叶中总黄酮的提取效率,用75%的乙醇进行沙棘叶中总黄酮的提取,超声提取10 min即与索氏提取6 h的提取效果相当,同时远高于普通超声的提取效率。

2.2糖类

赵二劳等[17]对微波辅助萃取沙棘叶多糖的工艺进行了研究,实验条件下微波功率为540 W时,浸提温度在90℃左右,而萃取时间与料液比对提取率的影响不显著。利用微波辅助萃取可以有效地提高沙棘叶多糖的提取率,为合理开发、深度利用沙棘资源提供理论依据。

2.3沙棘油

沙棘油在食品、保健品、化妆品等领域已有广泛应用。现代药理研究认为,沙棘籽油的主要药理作用除对心脏、肝脏有较好的生物活性作用外,还有抗溃疡、降血脂和抗肿瘤等作用,具有广泛的药用前景。

范少敏等[18]采用正交试验法,优选了沙棘籽油的提取工艺,用6倍量的溶媒,在55℃提取3次,总时间为6 h,得油率为8.9%,为工业生产提供了一个模拟生产工艺。陈金娥等[19]以油产率为评价指标,通过正交试验得出优化工艺条件为:乙酸乙酯为提取溶剂,55℃,150 s,500 W所得产率为9.45%。与传统的索氏提取法相比,微波法提取具有时间短、效率高、原料利用率高等优点。

3药理作用

3.1对免疫系统的作用[20]

沙棘提取物中的总黄酮等生物活性成分具有清除人体内自由基的作用,对体液免疫和细胞免疫具有明显的调节作用。实验发现,沙棘能促进小鼠的脾淋巴细胞增殖和转化作用,提高小鼠的抗体生成细胞数、血清溶血素水平及NK细胞活性,促进小鼠单核-巨噬细胞的碳廓清和单核-腹腔巨噬细胞的吞噬能力,促进小鼠的迟发型变态反应。

3.2调脂、抗血栓作用

沙棘总黄酮可显著降低实验性高脂血症小鼠血清中的胆固醇(TC)和甘油三

酯(TG),高密度脂蛋白(HDL-C)明显升高。并且实验动物经用药后血脂水平基本恢复正常,其值与正常对照组比较无显著差异[21]。沙棘总黄酮对血栓素A2(TXA2)的分泌尽管只表现出抑制的趋势而无统计学意义,但它可以通过非常显著地增加前列腺素I2(PGI2)的分泌来改善PGI2和TXA2这一对作用相反的生理活性物质在机体内的平衡,这为进一步探讨沙棘总黄酮是否具有防止血栓形成的基础打下了基础[22]。

3.3对微循环的影响[23]

沙棘油可使小鼠耳廓毛细血管及大鼠肠系膜毛细血管开放量及微动脉、微静脉管径明显增加,因此,沙棘油能改善小鼠耳廓微循环和大鼠肠系膜微循环。

3.4对血糖的影响[24]

沙棘对正常小鼠和葡萄糖所致高血糖小鼠有升高血糖的作用,但差异没有统计学意义,对肾上腺素所引起的高血糖小鼠和优降糖所致低血糖小鼠具有明显升高血糖的作用。

3.5抗衰老作用[25]

因为体内脂质过氧化物(LPO)含量能直接反映机体过氧化损伤的程度,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)是机体抗氧化作用防御酶的主要成分。于晓莉等[25]通过实验发现,灌胃沙棘提取物的实验组老龄鼠血清LPO含量明显低于对照组,说明沙棘提取物可显著降低老龄鼠体内的脂质过氧化作用,实验组老龄鼠血清SOD、GSH-Px活力均显著提高。其机制可能为:①沙棘含有丰富的维生素C,维生素C可以捕捉超氧阴离子自由基,并促进硒在肠道中的吸收,因而对SOD及GSH-Px起补充作用;②沙棘本身是含有SOD、GSH-Px活性较高的植物,当其被摄入机体后,起到了外源补充内源的作用;③因SOD、GSH-Px活性分别与Cu、Zn、Mn和Se等微量元素有关,沙棘提高两者活性的机制可能是使这些微量元素保持正常的价态。

4小结

我国沙棘的开发和利用前景极为广阔,今后应加大沙棘产品的开发研究投入,在制药、保健食品及化妆品等方面进行系列开发和产品研制,使其形成支柱产业。但总体来看,沙棘的基础性研究开展的不够,特别是与沙棘医药保健应用密切相关的现代医药学基础研究没有展开,沙棘果、籽、叶、茎、皮和根中的活性物质还没有被完全掌握,沙棘中的许多活性物质的化学、药学和药理的研究亟待深入,这些都严重地妨碍了沙棘的应用研究的开展。

[参考文献]

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[3]郑瑞霞,杨峻山.中国沙棘果实化学成分的研究[J].中草药,2006,37(8):1154-1155.

[4]阮栋梁,王晖,李和.沙棘叶槲皮素的分离鉴定[J].沙棘,2003,16(1):26-28.

[5]杨亮,叶蓁,李教社,等.中国沙棘叶化学成分的研究(Ⅲ) [J].沙棘,2004,17(4):28-29.

[6]路平,宋玉乔,方翠芬,等.中国沙棘果皮化学成分的研究(Ⅰ)[J].沙棘,2002,15(4):25-26.

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